一、樣品提取 

準(zhǔn)確稱取均質(zhì)后的魚肉 5.0 g 于 50 mL 離心管中，加入三 氯甲烷 15 mL、甲醇 14 mL、6 mL 0.1 mol/L 硫酸，渦旋 2  min，4000 r/min 離心 3 min，取上清液加入 250 mL 的分液 漏斗中，繼續(xù)加甲醇 14 mL，4000 r/min 離心 3 min，取上 清液合并加入 250 mL 的分液漏斗中；分液漏斗中加入 2 mL 2 mol/L 氫氧化鉀，加入 30 mL 二氯甲烷，振搖分層，取下 層液，繼續(xù)加入 30 mL 二氯甲烷，振搖分層，取下層液合并， 于 40℃旋蒸至近干，加 6 mL 5% 乙酸水溶液溶解，待凈化。 

二、SPE 柱凈化（Copure? MCX，60 mg/3 mL） 

活化：MCX 固相萃取柱使用前用 5 mL 甲醇、5 mL 5% 乙酸水溶 液活化。 

上樣和洗脫：往固相萃取柱中加入待凈化液，棄去流出液， 加 5 mL 5%乙酸水溶液、5 mL甲醇淋洗，棄去淋洗液，抽干小柱； 加 15 mL 5% 氨化甲醇洗脫，收集流出液（上樣、洗脫過程保 持流速 1 mL/min）。 

重新溶解：洗脫液 40℃下氮吹至近干，用 1 mL 甲醇溶解， 經(jīng) 0.22 μm 濾膜過濾，供 HPLC 測(cè)試。 

三、儀器條件 

設(shè)備：Waters Alliance 2695 色譜柱：XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm) 檢測(cè)器：Waters 2996 DAD 檢測(cè)器  檢測(cè)波長(zhǎng)：280 nm 流動(dòng)相：A：甲醇   B：0.5% 高氯酸水溶液 洗脫方式：等度洗脫，A: B=30: 70 流速：1.0 mL/min  進(jìn)樣體積：20 μL 

四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果 

表 1 2.0 m/kg 魚肉中甲氧芐啶的添加回收結(jié)果