【概述】本方案參照國標(biāo)GB 5009.282-2020，采用Copure?MCX小柱，以百香果汁及蜂蜜為基質(zhì)樣品，建立了不同基質(zhì)中4-甲基咪唑的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定法，低、中、高三水平的加標(biāo)都能獲得滿意結(jié)果。

【實(shí)驗(yàn)/設(shè)備條件】

1）色譜條件

儀器：UPLC-MS/MS

(Thermo Fisher TSQ Endura)

色譜柱：GOWON HILIC

(2.1 mm×100 mm，2.7 μm)

流動相：A：5 mmol/L乙酸銨   B：乙腈

洗脫方式：梯度洗脫，見表1

流速：0.6 mL/min

柱溫：35℃

進(jìn)樣量：5 μL

2）質(zhì)譜條件

離子源：HESI

電噴霧電壓：3500 V

鞘氣壓力：35 arb

輔氣壓力：5 arb      

離子傳輸管：380 ℃

輔氣溫度：350 ℃

【樣品提取】

準(zhǔn)確稱取均勻的樣品2.0 g（精確至0.001 g）于50 mL離心管中，加入2 %甲酸水溶液至20 mL，混勻，10000 r/min離心5 min，上清液待凈化。

【實(shí)驗(yàn)/操作方法】

活化：依次用5 mL甲醇，5 mL水活化固相萃取小柱。

上樣：取待凈化樣品10 mL過柱，棄掉流出的液體。

淋洗和洗脫：分別加入2 mL 2 %甲酸水、5 mL水、5 mL甲醇淋洗固相萃取小柱，棄去流出的液體；加入8 mL 5 %氨水甲醇洗脫固相萃取小柱，收集洗脫液。

重新溶解：45 ℃下氮吹至近干，加入乙腈-5 mmol/L乙酸銨（9+1）溶液1 mL復(fù)溶，渦旋30s，過0.22μm有機(jī)系濾膜，上機(jī)測試。

【實(shí)驗(yàn)結(jié)果/結(jié)論】

【儀器/耗材清單】