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樣品提取
取1.0 g奶粉于25 mL離心管中,加入20 mL水混勻,振搖5 min,8000 rpm下離心2 min;
SPE柱凈化
ProElut PXA 150 mg/6 mL(Cat.#:68304)
(1)活 化:依次向柱中加入6 mL甲醇和6 ml 水,流出液棄去;
(2)上 樣:取“3”中提取液10 ml加入柱中,流出液棄去;
(3)淋 洗:用6 mL 20%甲醇水淋洗,流出液棄去;
(4)洗 脫:向柱中加入6 mL 5%乙酸甲醇溶液,收集流出液;
(5) 重新溶解:將流出液在45 ℃下減壓蒸至完全干燥,用50%乙腈水定容至1 mL后上UPLC分析。
色譜柱:Endeavorsil C18,100×2.1 mm,1.8 μm (Cat#:87003)
流速:0.3 mL/min
檢測器:紫外檢測器,280 nm
柱 溫:35 ℃
進樣量:2 μL
流動相:乙腈:0.02 mol/L醋酸銨溶液(用醋酸調(diào)pH=3.5)=8:92(V/V)
本方案適用于奶粉中香蘭素、甲基香蘭素和乙基香蘭素的檢測。
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