1.標(biāo)準(zhǔn)品配制

(1)單標(biāo)儲(chǔ)備液1000 ug/mL，準(zhǔn)確稱取妥布霉素，用水配制成1000 ug/mL的儲(chǔ)備液。

(2)中間液10.0 ug/mL，吸取適量單標(biāo)儲(chǔ)備液1000 ug/mL，用水配制成10 ug/mL的中間液。

2.提取

(1) 稱取樣品（魚肉）5.0g（極ng確至0.05g），置于50mL離心管中。加入20 mL三水（25 g/L）和2 mL二氯甲烷，渦旋分散，振蕩5 min，8000 r/min離心2min，收集上清液；

(2) 在上清液中加入5mL乙腈混勻，8000 r/min離心2min，待凈化（離心為了去除乙腈水溶解時(shí)產(chǎn)生的氣泡）。

3.凈化

ProElut PXC 60mg/3mL（Cat.#68203）

同方法制備基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液。

UPLC 條件：

色譜柱：Platisil CN，150×4.6 mm，5 μm? (Cat#：99506)

流? 速：0.5 mL/min??? 進(jìn)樣量：5 μL?? 柱? 溫：35 ℃

流動(dòng)相： A：3%甲酸水? ??B：3%甲酸乙腈 ???A：B=9:1

質(zhì)譜條件：

電離模式：ESI??????????? 掃描方式：正離子掃描

檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)???? 電噴霧電壓：5500 V

霧化氣壓力：60 psi ???????輔助氣壓力：60 psi

氣簾氣壓力：25 psi ???????離子源溫度：550 ℃

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目前有關(guān)妥布霉素檢測(cè)的文獻(xiàn)和標(biāo)準(zhǔn)較少，主要參考標(biāo)準(zhǔn)《GB/T 21323-2007 動(dòng)物組織中氨基糖苷類藥物殘留量的測(cè)定 GX液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜法》；GX液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC-MS/MS)具有高靈敏度和高特異性，適用于基質(zhì)復(fù)雜、樣品組分含量很低的獸藥殘留的確證分析。