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5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒
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本文由 上??道噬锟萍加邢薰?/a> 整理匯編
2016-08-01 00:00 341閱讀次數(shù)
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5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒
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5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒
- 5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒[詳細]
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2016-08-01 00:00
操作手冊
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小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒說明書
- 小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒說明書本試劑盒僅供研究使用檢測范圍:0.4ng/L-18ng/L使用目的:本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)水平。用純化的小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA),再與HRP標記的5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)濃度。小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(32ng/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。16ng/L5號標準品150l的原倍標準品加入150l標準品稀釋液8ng/L4號標準品150l的5號標準品加入150l標準品稀釋液4ng/L3號標準品150l的4號標準品加入150l標準品稀釋液2.0ng/L2號標準品150l的3號標準品加入150l標準品稀釋液1.0ng/L1號標準品150l的2號標準品加入150l標準品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié):計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-11-23 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒使用說明書
- 人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。實驗原理人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)水平。用純化的人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA),再與HRP標記的5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)濃度。人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(40ng/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。20ng/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液10ng/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液5ng/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液2.5ng/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液1.25ng/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2024-09-30 11:46
產(chǎn)品樣冊
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5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA) ELISA Kit使用說明書
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer45-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISAKit使用說明書(德國IBL:RE59131)1、應(yīng)用范圍此ELISA試劑盒可用于人尿液中5-HIAA的體外定量檢測。2、前言原發(fā)性類癌瘤通常都源自中腸的腸嗜鉻細胞,并且大多情況都位于回腸末端中。類癌瘤通常都會分泌各種各樣的吲哚,此類腫瘤的一般都明顯的表現(xiàn)為尿液5-HIAA(五羥色胺的Z終代謝產(chǎn)物)的分泌量升高。5-HIAA傳統(tǒng)的檢測方法是通過亞硝基萘酚的重氮化作用產(chǎn)生紫色。然而,人們已證明很多存在于尿液中的其它物質(zhì)會干擾此反應(yīng)而出現(xiàn)假陽性結(jié)果。人們也嘗試著通過將離子交換層析和熒光分析相結(jié)合的方法來克服此問題。但這些方法靈敏度低并且耗費時間。Z近,有人也介紹使用下列方法來檢測5-HIAA:紫外區(qū)域5-HIAA的GX液相層析與熒光分析(或電化學(xué)分析)相結(jié)合的方法。因為尿液中存在著各種各樣的干擾復(fù)合物,所以這兩種方法都要求進行溶劑提取。而5-HIAA的酶聯(lián)免疫檢測是用于尿液中類腫瘤綜合征標記物定量檢測的一種全新的、簡單的方法。3、實驗原理此ELISA試劑盒利用的是競爭法原理,生物素標記抗原和未用生物素標記抗原競爭結(jié)合一定量的抗體結(jié)合位點。結(jié)合到抗體上生物素標記抗原的量與樣品中被分析物的濃度成反比。反應(yīng)系統(tǒng)達到平衡后,未結(jié)合的生物素標記的抗原用洗滌液洗去。結(jié)合了生物素標記抗原的抗體的量的測定是以抗生物素堿性磷酸酶作為標記物,以PNPP(對硝基苯酚磷酸鹽)作為底物液。將未知物的酶反應(yīng)活性和已知標準品的反應(yīng)曲線相比較,可以得到未知物的量。4、試劑盒成分數(shù)量標志成分1×12×8MTP包被板,可拆,微孔中包被了抗兔IgG(羊,單克?。?×5mlANTISERUM5-HIAA抗血清藍色,即用,內(nèi)含:抗血清(兔),磷酸緩沖液,穩(wěn)定劑。1×5mlBIOTIN5-HIAA生物素即用,藍色,內(nèi)含:磷酸緩沖液,穩(wěn)定劑。1×0.2mLENZCONJCONC酶聯(lián)物濃縮型(100×)內(nèi)含:堿性磷酸酶標記的抗生物素抗體(羊),Tris緩沖液,穩(wěn)定劑1×7×0.5mlCALA-G標準品A-G0;0.4;1.0;2.75;7.5;20;55mg/L0;2.1;5.25;14.4;39.4;105;288μmol/L即用,內(nèi)含:5-HIAA(甲基化),穩(wěn)定劑。1×2×0.5mlCONTROL1+2LYO質(zhì)控品1+2,凍干粉,內(nèi)含:人尿液(正常與非正常人的尿液),具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標簽.1×2mlMETHYLRAGE甲基化試劑,黃色,即用,內(nèi)含二氯甲烷1x1mLHCLHCl,即用,0.1M的HCl1x50mlASSAUBUFCONC檢測緩沖液,濃縮(10x)內(nèi)含:磷酸緩沖液,BSA,穩(wěn)定劑1x4mlDILREAG稀釋液,即用,內(nèi)含:N,N-二甲基甲酰氨1x50mlWAHSBUFCONC洗滌液,濃縮(20x)內(nèi)含:磷酸緩沖液,吐溫,穩(wěn)定劑1×9PNPPSUBSPNPP底物片,內(nèi)含:對硝基苯磷酸(PNPP)1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液,即用,內(nèi)含:二乙醇胺,水,1×15mlPNPPSTOPPNPP終止液,即用,內(nèi)含:1M的NaOH,0.25M的EDTA3×FOIL粘性金屬板5、實驗所需器材(但試劑盒不提供)1)移液器(20;25;50;100;1000μL)2)玻璃檢測用試管(12×75mm)3)旋渦混合器4)帶儲器的8通道移液器5)洗滌瓶,自動或半自動包被板清洗系統(tǒng)6)酶標儀7)雙蒸水或去離子水8)通風(fēng)櫥9)吸水紙,取樣吸頭,計時器6、實驗前的準備說明供手動操作和自動操作用:注意此96人份的檢測試劑可分成3次獨立的實驗進行。下列體積為用四條包被板(32人份)進行一次檢測所需要的試劑的量。如果客戶想將標準品的量由7個減為6個,您可去掉標準品G。則實驗結(jié)果的報告范圍相應(yīng)的減少到3000μg/L6.1凍干粉或濃縮成分的制備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性15ml檢測緩沖液150ml雙蒸水1;10充分混合2-8℃2周炙控品0.5ml0.1M的HCl靜置15min,混合時避免氣泡≤-20℃8周15ml洗滌液300ml雙蒸水1:20加熱至37℃以溶解所有的晶體(如果有必要),充分溶解。2-8℃4周60μL酶聯(lián)物60ml檢測緩沖液(已稀釋好)1:101臨時配置,僅能使用一次,混合時避免氣泡產(chǎn)生18-25℃30min3PNPP底物片8mlPNPP底物液緩沖液臨時配置,僅能使用一次,混合時必免氣泡產(chǎn)生18-25℃10min6.2樣品的稀釋樣品中5-HIAA膿渡高于Z高標準品的應(yīng)在甲基化后用檢測緩沖液進行進一步的稀釋。7、**天7.1質(zhì)控品和病人樣品的稀釋(除標準外)樣品的準備將導(dǎo)致255倍的稀釋。但這已將此考慮到標準品濃渡中。注意不要甲基化標準品,它已經(jīng)被甲基化了。1)將質(zhì)控品和樣品分別20μL加入到相應(yīng)的玻璃試管中。2)完成次操作步驟后,請在通風(fēng)櫥內(nèi)繼續(xù)操作。3)在每一支試管中加入50μL稀釋液。旋渦混合器上混合。4)在每一試管中加入25μL甲基化試劑。加入試劑后立即混合試管內(nèi)溶液。注意:反應(yīng)混合物的黃顏色應(yīng)當持續(xù)穩(wěn)定,如果顏色迅速消失說明樣品中酸的量過大。在這種情況下在向試管中加20μL甲基化試劑。5)蓋好試管,室溫(18-25℃)下溫育20min6)在每一試管中加入5ml已稀釋好的檢測緩沖液。用塞子蓋好是試管并旋轉(zhuǎn)幾次。手動或用混合器上下混合Z少五次,以便液體能充分混合。7)完成此步驟后就可以不要才通風(fēng)櫥下操作了。8)吸取50μL上清液,立即進行ELISA實驗。上清液室溫下可穩(wěn)定存放1h。8.2ELISA操作1)將標準品、甲基化質(zhì)控品和甲基化病人樣品分別50μL加入到相應(yīng)的微孔。2)在每一微孔中加入50μL5-HIAA生物素。3)在每一微孔中加入50μL5-HIAA抗血清。4)蓋板,小心振動包被板。2-8℃下溫育一夜(16-20h)。8、第二天1)移去金屬板,棄取孔內(nèi)反應(yīng)液,用250μL洗滌液洗板3次,吸水紙上拍干。2)每孔加入150μL臨時配置好的酶聯(lián)物3)用一新的粘性金屬蓋板。室溫環(huán)境(18-25℃)下,在軌道搖床(500rpm)上溫育120min.4)在溫育結(jié)屬前大約10min的樣子時,向微孔中加入酶聯(lián)物。5)移去金屬板,棄去孔內(nèi)反應(yīng)液,用250μL已稀釋好的洗滌液洗板3次,吸水紙上拍干。6)在加入底物液和終止液時,如果有條件的話,可使用8道移液器進行加液。加底物液和終止液必須按相同的時間間隔進行,避免氣泡產(chǎn)生。7)在每一微孔中加入200μL臨時配置好的PNPP底物液。8)室溫(18-25℃)環(huán)境下,在軌道搖床上溫育60min。9)在每一微孔中加入50μLPNPP終止液以終止反應(yīng)。輕輕搖動包被板以混合各種成分。10)加入終止液后60min之內(nèi)在405nm處測OD值(參考波長:600-650nm)。9、參考值實驗結(jié)果不能當作進行YL診斷的**因素,YL診斷還與其它臨床觀察和其它診斷測試相關(guān)。以下為明顯健康人群5-HIAA的正常值:(97.5%)我們建議每個實驗室都設(shè)定自己的正常值范圍。尿液mg/24hμmol/天5-HIAA6~1031.5~52.5本譯文僅供參考,詳情請以原文為準。ZGdu家總代理:深圳市科潤達生物工程有限公司辦公地址:深圳市蛇口工業(yè)區(qū)太子路18號海景廣場11C研發(fā)基地:深圳市蛇口沿山路10號6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費電話:800-8306296傳真:0755-26814431[詳細]
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2018-11-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒
- 人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-30 13:00
應(yīng)用文章
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54-16-0,5-羥基吲哚乙酸技術(shù)說明
- 54-16-0,5-羥基吲哚乙酸技術(shù)說明英文名稱:5-HIAA;5-Hydroxyindole-3-aceticacid;5-Hydroxyindoleaceticacid其他名稱:5-羥吲哚乙酸;5-羥基吲哚-3-乙酸CAS號:54-16-0C10H9NO3=191.1854-16-0,5-羥基吲哚乙酸技術(shù)說明級別:BR含量:≥98.0%(HPLC)熔點:161~164℃54-16-0,5-羥基吲哚乙酸技術(shù)說明性狀:類白色或紫紅色或淺黃色結(jié)晶。對光和空氣敏感。溶于水、乙醇和乙酸乙酯,微溶于。熔點160~166℃。Zda吸收波長(甲醇中)277、300nm(ε5200、7200)。用途:生化研究。保存:-20℃,避光[詳細]
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2018-11-05 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人5羥吲哚乙酸(5-HIAA)檢測試劑盒
- 人5羥吲哚乙酸(5-HIAA)檢測試劑盒[詳細]
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2014-09-29 00:00
其它
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植物吲哚乙酸(IAA)ELISA試劑盒說明書
- 植物吲哚乙酸(IAA)ELISA試劑盒說明書[詳細]
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2015-04-30 00:00
報價單
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特價植物3-吲哚乙酸(IBA)ELISA試劑盒
- 特價植物3-吲哚乙酸(IBA)ELISA試劑盒[詳細]
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2015-03-02 00:00
應(yīng)用文章
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人羥基雌ELISA試劑盒
- 人16α羥基雌酮酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書使用目的本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中16α羥基雌酮1(16-αOHE-1)含量。實驗原理人羥基雌ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人16α羥基雌酮1(16-αOHE-1)水平。用純化的人16α羥基雌酮1(16-αOHE-1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入16α羥基雌酮1(16-αOHE-1),再與HRP標記的16α羥基雌酮1(16-αOHE-1)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的16α羥基雌酮1(16-αOHE-1)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人16α羥基雌酮1(16-αOHE-1)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(2400ng/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。1200ng/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液600ng/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液300ng/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液150ng/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液75ng/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項人羥基雌ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-09-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人5-羥色胺受體elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T20ng/L-500ng/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中5-羥色胺受體(5-HTR)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人5-羥色胺受體(5-HTR)水平。用純化的人5-羥色胺受體(5-HTR)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入5-羥色胺受體(5-HTR),再與HRP標記的5-羥色胺受體(5-HTR)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的5-羥色胺受體(5-HTR)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人5-羥色胺受體(5-HTR)濃度。[詳細]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊
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8羥基脫氧鳥苷Elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T1.2ng/L-45ng/L使用目的:本試劑盒用于測定大腸桿菌樣本中8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)水平。用純化的8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG),再與HRP標記的8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)濃度。[詳細]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊
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DOPAC,小鼠3,4二羥基ELISA試劑盒
- DOPAC,小鼠3,4二羥基ELISA試劑盒l(wèi)本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中小鼠3,4二羥基(DOPAC)的含量。l有效期:6個月l保存條件:2-8℃l本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷實驗原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被小鼠3,4二羥基(DOPAC)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠3,4二羥基(DOPAC)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。樣本處理及要求1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2-8°C1000g離心20分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.組織勻漿:用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶YZ劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復(fù)凍融。Z后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。4.細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。注:標本溶血會影響Z后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。標本處理1.本公司只對試劑盒本身負責(zé),不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責(zé),請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本。2.實驗前應(yīng)預(yù)測標本含量,如果標本濃度過高,應(yīng)對標本進行稀釋,使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。標本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。3.若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進行預(yù)實驗驗證其有效性,并注意留存樣本。4.使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實驗結(jié)果偏差。5.若樣本為細胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細胞狀態(tài)、細胞數(shù)量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。6.某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。7.建議使用新鮮樣本,保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實驗結(jié)果偏差。需要而未提供的試劑和器材酶標儀(450nm)高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱蒸餾水或去離子水試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標板8孔×12條8孔×6條無標準品0.3mL*6管0.3mL*6管無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無備注:1.標準品濃度依次為:80、40、20、10、5、0ng/mL2.經(jīng)過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過Zda標準品濃度時,可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。注意事項嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。洗板不正確可以導(dǎo)致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。在儲存和溫育時避免強光直接照射。平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。不能使用過期產(chǎn)品。如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。試劑準備試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。操作步驟1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。實驗結(jié)果計算以所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關(guān)軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。試劑盒性能1.檢測范圍:2.5ng/mL80ng/mL。2.靈敏度:Zdi檢測濃度小于0.1ng/mL。3.特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。4.重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10%,板間變異系數(shù)小于15%。說明1.由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析,本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險。2.Z終的實驗結(jié)果與試劑的有效性、實驗者的相關(guān)操作以及當時的實驗環(huán)境密切相關(guān),請務(wù)必準備充足的標本備份。3.不同批次的同一產(chǎn)品可能會有少許差別,如:檢測限、靈敏度以及顯色時間等,請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進行實驗操作,網(wǎng)站電子版說明書僅作參考。4.只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到**的檢測結(jié)果。問題解答若實驗效果不好,請及時對顯色結(jié)果拍照,保留所用板條及未使用試劑,并妥善保存,然后聯(lián)系我公司技術(shù)支持為您解決問題。同時您也可以參考以下資料:問題可能原因解決方案標準曲線差吸取及洗滌不充分充分的吸取及洗滌移液不極ng確檢查和校正移液器精密度低洗滌不充分按說明書要求充分洗滌和浸泡混勻不充分和吸取試劑不足充分混勻和吸取試劑重復(fù)利用吸頭、容器和覆膜使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的容器和覆膜加樣不極ng確檢查和校正移液器O.D值低每孔加的試劑量不極ng確校正移液器,極ng確加入試劑溫育時間不正確保證充足的溫育時間溫育溫度不正確試劑要平衡至室溫并保證準確的溫育溫度酶標記物或底物失效通過混合酶標記物和底物,顏色應(yīng)迅速顯現(xiàn)來檢查沒有加入終止液按照說明書實驗操作步驟加入終止液超出讀數(shù)時間讀數(shù)在說明書推薦的讀數(shù)時間內(nèi)讀數(shù)樣本值不正確的樣本儲存方式正確儲存樣本,使用新鮮樣本進行實驗不正確的樣本收集和處理方法采取正確的樣本收集和處理方法待測物質(zhì)在樣本中含量低使用新鮮樣本,重復(fù)實驗[詳細]
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2018-11-15 10:03
產(chǎn)品樣冊
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3-吲哚乙酸
- 3-吲哚乙酸[詳細]
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2014-09-30 00:00
標準
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大鼠5-羥色胺受體2C(HTR2C)ELISA試劑盒
- 大鼠5-羥色胺受體2C(HTR2C)ELISA試劑盒[詳細]
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2016-08-01 00:00
產(chǎn)品樣冊
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小鼠5-羥色胺(5-HT)ELISA檢測試劑盒說明書
- 小鼠5-羥色胺(5-HT)ELISA檢測試劑盒說明書[詳細]
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2015-05-20 00:00
其它
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大鼠5-核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠5-核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠5-NT單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的5-NT與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠5-NT,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,5-NT濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中5-NT濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清可能需要稀釋,請先做預(yù)實驗,以確定稀釋倍數(shù)。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設(shè)標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)5-NT含量,再乘上稀釋倍數(shù)。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的5-NT檢測濃度小于16pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠5-NT。不與大鼠其它細胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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小鼠5-羥色胺轉(zhuǎn)運體蛋白(SERT)ELISA試劑盒
- 小鼠5-羥色胺轉(zhuǎn)運體蛋白(SERT)ELISA試劑盒檢測范圍:96T3.5ng/L-160ng/L使用目的:本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中5-羥色胺轉(zhuǎn)運體蛋白(SERT)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中小鼠5-羥色胺轉(zhuǎn)運體蛋白(SERT)水平。用純化的小鼠5-羥色胺轉(zhuǎn)運體蛋白(SERT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入5-羥色胺轉(zhuǎn)運體蛋白(SERT),再與HRP標記的5-羥色胺轉(zhuǎn)運體蛋白(SERT)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的5-羥色胺轉(zhuǎn)運體蛋白(SERT)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠5-羥色胺轉(zhuǎn)運體蛋白(SERT)濃度。標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-12-06 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人5-羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T11pg/ml-400pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中5-羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白(5-HTT)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人5-羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白(5-HTT)水平。用純化的人5-羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白(5-HTT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入5-羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白(5-HTT),再與HRP標記的5-羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白(5-HTT)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的5-羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白(5-HTT)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人5-羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白(5-HTT)濃度。[詳細]
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2018-12-30 10:00
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河蟹5-羥色胺(5-HT)elisa檢測試劑盒說明書
- 實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中河蟹5-羥色胺(5-HT)水平。用純化的河蟹5-羥色胺(5-HT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入5-羥色胺(5-HT),再與HRP標記的5-羥色胺(5-HT)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的5-羥色胺(5-HT)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中河蟹5-羥色胺(5-HT)濃度。河蟹5-羥色胺(5-HT)elisa檢測試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(640pg/ml)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。河蟹5-羥色胺(5-HT)elisa檢測試劑盒操作步驟標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。320pg/ml5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液160pg/ml4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液80pg/ml3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液40pg/ml2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液20pg/ml1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié):計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。河蟹5-羥色胺(5-HT)elisa檢測試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線,**做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2024-09-29 06:43
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