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2024-09-30 13:00 257閱讀次數(shù)

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• 人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒

  人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-30 13:00

  應(yīng)用文章

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• 5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒

  5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2016-08-01 00:00

  操作手冊(cè)

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• 人5-羥基吲哚乙酸（5-HIAA）ELISA試劑盒使用說明書

  人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。實(shí)驗(yàn)原理人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)水平。用純化的人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)，再與HRP標(biāo)記的5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)濃度。人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品（40ng/L）0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。20ng/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10ng/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5ng/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.5ng/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.25ng/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請(qǐng)避光保存。7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒保存條件及有效期1．試劑盒保存：2-8℃。2．有效期：6個(gè)月[詳細(xì)]

  2024-09-30 11:46

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 人5羥吲哚乙酸(5-HIAA)檢測(cè)試劑盒

  人5羥吲哚乙酸(5-HIAA)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]

  2014-09-29 00:00

  其它

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• 小鼠5-羥基吲哚乙酸（5-HIAA）ELISA試劑盒說明書

  小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒說明書本試劑盒僅供研究使用檢測(cè)范圍：0.4ng/L-18ng/L使用目的：本試劑盒用于測(cè)定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)水平。用純化的小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)，再與HRP標(biāo)記的5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)濃度。小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品（32ng/L）0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。16ng/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液8ng/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液4ng/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.0ng/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.0ng/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50l，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40l，然后再加待測(cè)樣品10l（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50l，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50l，再加入顯色劑B50l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.10.終止：每孔加終止液50l，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié)：計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請(qǐng)避光保存。7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個(gè)月[詳細(xì)]

  2018-11-23 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 5-羥基吲哚乙酸（5-HIAA） ELISA Kit使用說明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer45-羥基吲哚乙酸（5-HIAA）ELISAKit使用說明書（德國(guó)IBL：RE59131）1、應(yīng)用范圍此ELISA試劑盒可用于人尿液中5-HIAA的體外定量檢測(cè)。2、前言原發(fā)性類癌瘤通常都源自中腸的腸嗜鉻細(xì)胞，并且大多情況都位于回腸末端中。類癌瘤通常都會(huì)分泌各種各樣的吲哚，此類腫瘤的一般都明顯的表現(xiàn)為尿液5-HIAA（五羥色胺的Z終代謝產(chǎn)物）的分泌量升高。5-HIAA傳統(tǒng)的檢測(cè)方法是通過亞硝基萘酚的重氮化作用產(chǎn)生紫色。然而，人們已證明很多存在于尿液中的其它物質(zhì)會(huì)干擾此反應(yīng)而出現(xiàn)假陽性結(jié)果。人們也嘗試著通過將離子交換層析和熒光分析相結(jié)合的方法來克服此問題。但這些方法靈敏度低并且耗費(fèi)時(shí)間。Z近，有人也介紹使用下列方法來檢測(cè)5-HIAA：紫外區(qū)域5-HIAA的GX液相層析與熒光分析（或電化學(xué)分析）相結(jié)合的方法。因?yàn)槟蛞褐写嬖谥鞣N各樣的干擾復(fù)合物，所以這兩種方法都要求進(jìn)行溶劑提取。而5-HIAA的酶聯(lián)免疫檢測(cè)是用于尿液中類腫瘤綜合征標(biāo)記物定量檢測(cè)的一種全新的、簡(jiǎn)單的方法。3、實(shí)驗(yàn)原理此ELISA試劑盒利用的是競(jìng)爭(zhēng)法原理，生物素標(biāo)記抗原和未用生物素標(biāo)記抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合一定量的抗體結(jié)合位點(diǎn)。結(jié)合到抗體上生物素標(biāo)記抗原的量與樣品中被分析物的濃度成反比。反應(yīng)系統(tǒng)達(dá)到平衡后，未結(jié)合的生物素標(biāo)記的抗原用洗滌液洗去。結(jié)合了生物素標(biāo)記抗原的抗體的量的測(cè)定是以抗生物素堿性磷酸酶作為標(biāo)記物，以PNPP（對(duì)硝基苯酚磷酸鹽）作為底物液。將未知物的酶反應(yīng)活性和已知標(biāo)準(zhǔn)品的反應(yīng)曲線相比較，可以得到未知物的量。4、試劑盒成分?jǐn)?shù)量標(biāo)志成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，單克隆）。1×5mlANTISERUM5-HIAA抗血清藍(lán)色，即用，內(nèi)含：抗血清（兔），磷酸緩沖液，穩(wěn)定劑。1×5mlBIOTIN5-HIAA生物素即用，藍(lán)色，內(nèi)含：磷酸緩沖液，穩(wěn)定劑。1×0.2mLENZCONJCONC酶聯(lián)物濃縮型（100×）內(nèi)含：堿性磷酸酶標(biāo)記的抗生物素抗體（羊），Tris緩沖液，穩(wěn)定劑1×7×0.5mlCALA-G標(biāo)準(zhǔn)品A-G0;0.4;1.0;2.75;7.5;20;55mg/L0;2.1;5.25;14.4;39.4;105;288μmol/L即用,內(nèi)含:5-HIAA（甲基化）,穩(wěn)定劑。1×2×0.5mlCONTROL1+2LYO質(zhì)控品1+2，凍干粉，內(nèi)含：人尿液（正常與非正常人的尿液），具體濃度及可允許范圍請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽.1×2mlMETHYLRAGE甲基化試劑，黃色，即用，內(nèi)含二氯甲烷1x1mLHCLHCl，即用，0.1M的HCl1x50mlASSAUBUFCONC檢測(cè)緩沖液，濃縮（10x）內(nèi)含：磷酸緩沖液，BSA，穩(wěn)定劑1x4mlDILREAG稀釋液，即用，內(nèi)含：N,N-二甲基甲酰氨1x50mlWAHSBUFCONC洗滌液，濃縮（20x）內(nèi)含：磷酸緩沖液，吐溫，穩(wěn)定劑1×9PNPPSUBSPNPP底物片，內(nèi)含：對(duì)硝基苯磷酸（PNPP）1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液，即用，內(nèi)含：二乙醇胺，水，1×15mlPNPPSTOPPNPP終止液，即用，內(nèi)含：1M的NaOH，0.25M的EDTA3×FOIL粘性金屬板5、實(shí)驗(yàn)所需器材（但試劑盒不提供）1）移液器（20；25；50；100；1000μL）2）玻璃檢測(cè)用試管（12×75mm）3）旋渦混合器4）帶儲(chǔ)器的8通道移液器5）洗滌瓶，自動(dòng)或半自動(dòng)包被板清洗系統(tǒng)6）酶標(biāo)儀7）雙蒸水或去離子水8）通風(fēng)櫥9）吸水紙，取樣吸頭，計(jì)時(shí)器6、實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備說明供手動(dòng)操作和自動(dòng)操作用：注意此96人份的檢測(cè)試劑可分成3次獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行。下列體積為用四條包被板（32人份）進(jìn)行一次檢測(cè)所需要的試劑的量。如果客戶想將標(biāo)準(zhǔn)品的量由7個(gè)減為6個(gè)，您可去掉標(biāo)準(zhǔn)品G。則實(shí)驗(yàn)結(jié)果的報(bào)告范圍相應(yīng)的減少到3000μg/L6.1凍干粉或濃縮成分的制備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性15ml檢測(cè)緩沖液150ml雙蒸水1；10充分混合2-8℃2周炙控品0.5ml0.1M的HCl靜置15min，混合時(shí)避免氣泡≤-20℃8周15ml洗滌液300ml雙蒸水1：20加熱至37℃以溶解所有的晶體（如果有必要），充分溶解。2-8℃4周60μL酶聯(lián)物60ml檢測(cè)緩沖液（已稀釋好）1：101臨時(shí)配置，僅能使用一次，混合時(shí)避免氣泡產(chǎn)生18-25℃30min3PNPP底物片8mlPNPP底物液緩沖液臨時(shí)配置，僅能使用一次,混合時(shí)必免氣泡產(chǎn)生18-25℃10min6.2樣品的稀釋樣品中5-HIAA膿渡高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的應(yīng)在甲基化后用檢測(cè)緩沖液進(jìn)行進(jìn)一步的稀釋。7、**天7.1質(zhì)控品和病人樣品的稀釋（除標(biāo)準(zhǔn)外）樣品的準(zhǔn)備將導(dǎo)致255倍的稀釋。但這已將此考慮到標(biāo)準(zhǔn)品濃渡中。注意不要甲基化標(biāo)準(zhǔn)品，它已經(jīng)被甲基化了。1）將質(zhì)控品和樣品分別20μL加入到相應(yīng)的玻璃試管中。2）完成次操作步驟后，請(qǐng)?jiān)谕L(fēng)櫥內(nèi)繼續(xù)操作。3）在每一支試管中加入50μL稀釋液。旋渦混合器上混合。4）在每一試管中加入25μL甲基化試劑。加入試劑后立即混合試管內(nèi)溶液。注意：反應(yīng)混合物的黃顏色應(yīng)當(dāng)持續(xù)穩(wěn)定，如果顏色迅速消失說明樣品中酸的量過大。在這種情況下在向試管中加20μL甲基化試劑。5）蓋好試管，室溫（18-25℃）下溫育20min6）在每一試管中加入5ml已稀釋好的檢測(cè)緩沖液。用塞子蓋好是試管并旋轉(zhuǎn)幾次。手動(dòng)或用混合器上下混合Z少五次，以便液體能充分混合。7）完成此步驟后就可以不要才通風(fēng)櫥下操作了。8）吸取50μL上清液，立即進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)。上清液室溫下可穩(wěn)定存放1h。8.2ELISA操作1）將標(biāo)準(zhǔn)品、甲基化質(zhì)控品和甲基化病人樣品分別50μL加入到相應(yīng)的微孔。2）在每一微孔中加入50μL5-HIAA生物素。3）在每一微孔中加入50μL5-HIAA抗血清。4）蓋板，小心振動(dòng)包被板。2-8℃下溫育一夜（16-20h）。8、第二天1）移去金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，用250μL洗滌液洗板3次，吸水紙上拍干。2）每孔加入150μL臨時(shí)配置好的酶聯(lián)物3）用一新的粘性金屬蓋板。室溫環(huán)境（18-25℃）下，在軌道搖床（500rpm）上溫育120min.4）在溫育結(jié)屬前大約10min的樣子時(shí)，向微孔中加入酶聯(lián)物。5）移去金屬板，棄去孔內(nèi)反應(yīng)液，用250μL已稀釋好的洗滌液洗板3次，吸水紙上拍干。6）在加入底物液和終止液時(shí)，如果有條件的話，可使用8道移液器進(jìn)行加液。加底物液和終止液必須按相同的時(shí)間間隔進(jìn)行，避免氣泡產(chǎn)生。7）在每一微孔中加入200μL臨時(shí)配置好的PNPP底物液。8）室溫（18-25℃）環(huán)境下，在軌道搖床上溫育60min。9）在每一微孔中加入50μLPNPP終止液以終止反應(yīng)。輕輕搖動(dòng)包被板以混合各種成分。10）加入終止液后60min之內(nèi)在405nm處測(cè)OD值（參考波長(zhǎng)：600-650nm）。9、參考值實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能當(dāng)作進(jìn)行YL診斷的**因素，YL診斷還與其它臨床觀察和其它診斷測(cè)試相關(guān)。以下為明顯健康人群5-HIAA的正常值：（97.5%）我們建議每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都設(shè)定自己的正常值范圍。尿液mg/24hμmol/天5-HIAA6～1031.5～52.5本譯文僅供參考，詳情請(qǐng)以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理：深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口工業(yè)區(qū)太子路18號(hào)海景廣場(chǎng)11C研發(fā)基地：深圳市蛇口沿山路10號(hào)6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費(fèi)電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細(xì)]

  2018-11-14 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 人羥基雌ELISA試劑盒

  人16α羥基雌酮酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書使用目的本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中16α羥基雌酮1(16-αOHE-1)含量。實(shí)驗(yàn)原理人羥基雌ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人16α羥基雌酮1(16-αOHE-1)水平。用純化的人16α羥基雌酮1(16-αOHE-1)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入16α羥基雌酮1(16-αOHE-1)，再與HRP標(biāo)記的16α羥基雌酮1(16-αOHE-1)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的16α羥基雌酮1(16-αOHE-1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人16α羥基雌酮1(16-αOHE-1)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品（2400ng/L）0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。1200ng/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液600ng/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液300ng/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液150ng/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液75ng/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)人羥基雌ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請(qǐng)避光保存。7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個(gè)月[詳細(xì)]

  2018-09-14 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 54-16-0,5-羥基吲哚乙酸技術(shù)說明

  54-16-0,5-羥基吲哚乙酸技術(shù)說明英文名稱：5-HIAA；5-Hydroxyindole-3-aceticacid；5-Hydroxyindoleaceticacid其他名稱：5-羥吲哚乙酸；5-羥基吲哚-3-乙酸CAS號(hào)：54-16-0C10H9NO3=191.1854-16-0,5-羥基吲哚乙酸技術(shù)說明級(jí)別：BR含量：≥98.0%(HPLC)熔點(diǎn)：161～164℃54-16-0,5-羥基吲哚乙酸技術(shù)說明性狀：類白色或紫紅色或淺黃色結(jié)晶。對(duì)光和空氣敏感。溶于水、乙醇和乙酸乙酯,微溶于。熔點(diǎn)160～166℃。Zda吸收波長(zhǎng)(甲醇中)277、300nm(ε5200、7200)。用途：生化研究。保存：-20℃，避光[詳細(xì)]

  2018-11-05 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 人5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒

  人5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-06 00:00

  操作手冊(cè)

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• 人白介素-5(IL-5)ELISA試劑盒

  人白介素-5(IL-5)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-05 00:00

  專利

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• 人5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒

  人5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-29 11:41

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• 植物吲哚乙酸（IAA）ELISA試劑盒說明書

  植物吲哚乙酸（IAA）ELISA試劑盒說明書[詳細(xì)]

  2015-04-30 00:00

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• 人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒

  人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2016-03-15 00:00

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• 人白介素-5（IL-5）ELISA試劑盒說明書

  人白介素-5（IL-5）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人IL-5單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的IL-5與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人IL-5，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液，在450nm處測(cè)OD值，IL-5濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中IL-5濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：20ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成20ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測(cè)程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)IL-5含量。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的IL-5檢測(cè)濃度小于15pg/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人IL-5。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10.2％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:01

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• 特價(jià)植物3-吲哚乙酸（IBA）ELISA試劑盒

  特價(jià)植物3-吲哚乙酸（IBA）ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2015-03-02 00:00

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• 人β羥基丁酸酯（PHB）ELISA試劑盒說明書

  上海研盟生物科技有限公司人β羥基丁酸酯(PHB)ELISA試劑盒說明書現(xiàn)貨促銷，歡迎來電咨詢或者添加客服QQ索取產(chǎn)品說明書>>>>...?！贰贰｜c(diǎn)擊此處查看聯(lián)系方式聯(lián)系我們吧>>>>詳細(xì)說明書請(qǐng)下載資料查閱吧檢測(cè)范圍：6.0pg/ml-200pg/ml使用目的：本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中β-羥基丁酸酯(PHB)含量。人β羥基丁酸酯(PHB)ELISA試劑盒說明書實(shí)驗(yàn)原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人β-羥基丁酸酯(PHB)水平。用純化的人β-羥基丁酸酯(PHB)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入β-羥基丁酸酯(PHB)，再與HRP標(biāo)記的β-羥基丁酸酯(PHB)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的β-羥基丁酸酯(PHB)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人β-羥基丁酸酯(PHB)濃度。人β羥基丁酸酯(PHB)ELISA試劑盒說明書[詳細(xì)]

  2018-11-28 10:00

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• 人水通道蛋白5(AQP5)ELISA試劑盒

  人水通道蛋白5(AQP5)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2015-03-18 00:00

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• 人周期素依賴性激酶5（CDK5）ELISA試劑盒

  人周期素依賴性激酶5（CDK5）ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2015-04-16 00:00

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• 人防御素-5（HD-5）ELISA試劑盒說明書

  人防御素-5（HD-5）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人HD-5單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的HD-5與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人HD-5，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液，在450nm處測(cè)OD值，HD-5濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中HD-5濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：2ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。血清、血漿作1：100稀釋（取10ul，加標(biāo)本稀釋液990ul,稀釋100倍），尿液2倍稀釋（取100ul，加標(biāo)本稀釋液100ul,稀釋2倍）后檢測(cè)。細(xì)胞培養(yǎng)上清可以不做稀釋直接檢測(cè)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成4000pg/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，每管加入標(biāo)本稀釋液300ul。在**管中加入4000pg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測(cè)程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)HD-5含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的HD-5檢測(cè)濃度小于15pg/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人HD-5。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:01

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• 人趨化因子受體5（CCR5）ELISA試劑盒說明書

  人趨化因子受體5（CCR5）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和尿液生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人CCR5單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的CCR5與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人CCR5，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液，在450nm處測(cè)OD值，CCR5濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中CCR5濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：20ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。血清、血漿作1：10稀釋（取20ul，加標(biāo)本稀釋液180ul,稀釋10倍）。細(xì)胞培養(yǎng)上清可以不做稀釋直接檢測(cè)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成20ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測(cè)程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)CCR5含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的CCR5檢測(cè)濃度小于15pg/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人CCR5。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:01

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