本文由 深圳市科潤達生物工程有限公司 整理匯編

2018-11-14 10:00 1473閱讀次數(shù)

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• 5-羥基吲哚乙酸（5-HIAA） ELISA Kit使用說明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer45-羥基吲哚乙酸（5-HIAA）ELISAKit使用說明書（德國IBL：RE59131）1、應用范圍此ELISA試劑盒可用于人尿液中5-HIAA的體外定量檢測。2、前言原發(fā)性類癌瘤通常都源自中腸的腸嗜鉻細胞，并且大多情況都位于回腸末端中。類癌瘤通常都會分泌各種各樣的吲哚，此類腫瘤的一般都明顯的表現(xiàn)為尿液5-HIAA（五羥色胺的Z終代謝產(chǎn)物）的分泌量升高。5-HIAA傳統(tǒng)的檢測方法是通過亞硝基萘酚的重氮化作用產(chǎn)生紫色。然而，人們已證明很多存在于尿液中的其它物質(zhì)會干擾此反應而出現(xiàn)假陽性結(jié)果。人們也嘗試著通過將離子交換層析和熒光分析相結(jié)合的方法來克服此問題。但這些方法靈敏度低并且耗費時間。Z近，有人也介紹使用下列方法來檢測5-HIAA：紫外區(qū)域5-HIAA的GX液相層析與熒光分析（或電化學分析）相結(jié)合的方法。因為尿液中存在著各種各樣的干擾復合物，所以這兩種方法都要求進行溶劑提取。而5-HIAA的酶聯(lián)免疫檢測是用于尿液中類腫瘤綜合征標記物定量檢測的一種全新的、簡單的方法。3、實驗原理此ELISA試劑盒利用的是競爭法原理，生物素標記抗原和未用生物素標記抗原競爭結(jié)合一定量的抗體結(jié)合位點。結(jié)合到抗體上生物素標記抗原的量與樣品中被分析物的濃度成反比。反應系統(tǒng)達到平衡后，未結(jié)合的生物素標記的抗原用洗滌液洗去。結(jié)合了生物素標記抗原的抗體的量的測定是以抗生物素堿性磷酸酶作為標記物，以PNPP（對硝基苯酚磷酸鹽）作為底物液。將未知物的酶反應活性和已知標準品的反應曲線相比較，可以得到未知物的量。4、試劑盒成分數(shù)量標志成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，單克?。?。1×5mlANTISERUM5-HIAA抗血清藍色，即用，內(nèi)含：抗血清（兔），磷酸緩沖液，穩(wěn)定劑。1×5mlBIOTIN5-HIAA生物素即用，藍色，內(nèi)含：磷酸緩沖液，穩(wěn)定劑。1×0.2mLENZCONJCONC酶聯(lián)物濃縮型（100×）內(nèi)含：堿性磷酸酶標記的抗生物素抗體（羊），Tris緩沖液，穩(wěn)定劑1×7×0.5mlCALA-G標準品A-G0;0.4;1.0;2.75;7.5;20;55mg/L0;2.1;5.25;14.4;39.4;105;288μmol/L即用,內(nèi)含:5-HIAA（甲基化）,穩(wěn)定劑。1×2×0.5mlCONTROL1+2LYO質(zhì)控品1+2，凍干粉，內(nèi)含：人尿液（正常與非正常人的尿液），具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標簽.1×2mlMETHYLRAGE甲基化試劑，黃色，即用，內(nèi)含二氯甲烷1x1mLHCLHCl，即用，0.1M的HCl1x50mlASSAUBUFCONC檢測緩沖液，濃縮（10x）內(nèi)含：磷酸緩沖液，BSA，穩(wěn)定劑1x4mlDILREAG稀釋液，即用，內(nèi)含：N,N-二甲基甲酰氨1x50mlWAHSBUFCONC洗滌液，濃縮（20x）內(nèi)含：磷酸緩沖液，吐溫，穩(wěn)定劑1×9PNPPSUBSPNPP底物片，內(nèi)含：對硝基苯磷酸（PNPP）1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液，即用，內(nèi)含：二乙醇胺，水，1×15mlPNPPSTOPPNPP終止液，即用，內(nèi)含：1M的NaOH，0.25M的EDTA3×FOIL粘性金屬板5、實驗所需器材（但試劑盒不提供）1）移液器（20；25；50；100；1000μL）2）玻璃檢測用試管（12×75mm）3）旋渦混合器4）帶儲器的8通道移液器5）洗滌瓶，自動或半自動包被板清洗系統(tǒng)6）酶標儀7）雙蒸水或去離子水8）通風櫥9）吸水紙，取樣吸頭，計時器6、實驗前的準備說明供手動操作和自動操作用：注意此96人份的檢測試劑可分成3次獨立的實驗進行。下列體積為用四條包被板（32人份）進行一次檢測所需要的試劑的量。如果客戶想將標準品的量由7個減為6個，您可去掉標準品G。則實驗結(jié)果的報告范圍相應的減少到3000μg/L6.1凍干粉或濃縮成分的制備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性15ml檢測緩沖液150ml雙蒸水1；10充分混合2-8℃2周炙控品0.5ml0.1M的HCl靜置15min，混合時避免氣泡≤-20℃8周15ml洗滌液300ml雙蒸水1：20加熱至37℃以溶解所有的晶體（如果有必要），充分溶解。2-8℃4周60μL酶聯(lián)物60ml檢測緩沖液（已稀釋好）1：101臨時配置，僅能使用一次，混合時避免氣泡產(chǎn)生18-25℃30min3PNPP底物片8mlPNPP底物液緩沖液臨時配置，僅能使用一次,混合時必免氣泡產(chǎn)生18-25℃10min6.2樣品的稀釋樣品中5-HIAA膿渡高于Z高標準品的應在甲基化后用檢測緩沖液進行進一步的稀釋。7、**天7.1質(zhì)控品和病人樣品的稀釋（除標準外）樣品的準備將導致255倍的稀釋。但這已將此考慮到標準品濃渡中。注意不要甲基化標準品，它已經(jīng)被甲基化了。1）將質(zhì)控品和樣品分別20μL加入到相應的玻璃試管中。2）完成次操作步驟后，請在通風櫥內(nèi)繼續(xù)操作。3）在每一支試管中加入50μL稀釋液。旋渦混合器上混合。4）在每一試管中加入25μL甲基化試劑。加入試劑后立即混合試管內(nèi)溶液。注意：反應混合物的黃顏色應當持續(xù)穩(wěn)定，如果顏色迅速消失說明樣品中酸的量過大。在這種情況下在向試管中加20μL甲基化試劑。5）蓋好試管，室溫（18-25℃）下溫育20min6）在每一試管中加入5ml已稀釋好的檢測緩沖液。用塞子蓋好是試管并旋轉(zhuǎn)幾次。手動或用混合器上下混合Z少五次，以便液體能充分混合。7）完成此步驟后就可以不要才通風櫥下操作了。8）吸取50μL上清液，立即進行ELISA實驗。上清液室溫下可穩(wěn)定存放1h。8.2ELISA操作1）將標準品、甲基化質(zhì)控品和甲基化病人樣品分別50μL加入到相應的微孔。2）在每一微孔中加入50μL5-HIAA生物素。3）在每一微孔中加入50μL5-HIAA抗血清。4）蓋板，小心振動包被板。2-8℃下溫育一夜（16-20h）。8、第二天1）移去金屬板，棄取孔內(nèi)反應液，用250μL洗滌液洗板3次，吸水紙上拍干。2）每孔加入150μL臨時配置好的酶聯(lián)物3）用一新的粘性金屬蓋板。室溫環(huán)境（18-25℃）下，在軌道搖床（500rpm）上溫育120min.4）在溫育結(jié)屬前大約10min的樣子時，向微孔中加入酶聯(lián)物。5）移去金屬板，棄去孔內(nèi)反應液，用250μL已稀釋好的洗滌液洗板3次，吸水紙上拍干。6）在加入底物液和終止液時，如果有條件的話，可使用8道移液器進行加液。加底物液和終止液必須按相同的時間間隔進行，避免氣泡產(chǎn)生。7）在每一微孔中加入200μL臨時配置好的PNPP底物液。8）室溫（18-25℃）環(huán)境下，在軌道搖床上溫育60min。9）在每一微孔中加入50μLPNPP終止液以終止反應。輕輕搖動包被板以混合各種成分。10）加入終止液后60min之內(nèi)在405nm處測OD值（參考波長：600-650nm）。9、參考值實驗結(jié)果不能當作進行YL診斷的**因素，YL診斷還與其它臨床觀察和其它診斷測試相關。以下為明顯健康人群5-HIAA的正常值：（97.5%）我們建議每個實驗室都設定自己的正常值范圍。尿液mg/24hμmol/天5-HIAA6～1031.5～52.5本譯文僅供參考，詳情請以原文為準。ZGdu家總代理：深圳市科潤達生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口工業(yè)區(qū)太子路18號海景廣場11C研發(fā)基地：深圳市蛇口沿山路10號6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細]

  2018-11-14 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒

  5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒[詳細]

  2016-08-01 00:00

  操作手冊

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• 人5-羥基吲哚乙酸（5-HIAA）ELISA試劑盒使用說明書

  人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。實驗原理人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)水平。用純化的人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)，再與HRP標記的5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)濃度。人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品（40ng/L）0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒操作步驟1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。20ng/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液10ng/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液5ng/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液2.5ng/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液1.25ng/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。計算以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。人5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒保存條件及有效期1．試劑盒保存：2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2024-09-30 11:46

  產(chǎn)品樣冊

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• 小鼠5-羥基吲哚乙酸（5-HIAA）ELISA試劑盒說明書

  小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒說明書本試劑盒僅供研究使用檢測范圍：0.4ng/L-18ng/L使用目的：本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)水平。用純化的小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)，再與HRP標記的5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)濃度。小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品（32ng/L）0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒操作步驟1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。16ng/L5號標準品150l的原倍標準品加入150l標準品稀釋液8ng/L4號標準品150l的5號標準品加入150l標準品稀釋液4ng/L3號標準品150l的4號標準品加入150l標準品稀釋液2.0ng/L2號標準品150l的3號標準品加入150l標準品稀釋液1.0ng/L1號標準品150l的2號標準品加入150l標準品稀釋液2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l，然后再加待測樣品10l（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50l，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50l，再加入顯色劑B50l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.10.終止：每孔加終止液50l，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié)：計算以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。小鼠5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-11-23 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒

  人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒[詳細]

  2024-09-30 13:00

  應用文章

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• 54-16-0,5-羥基吲哚乙酸技術(shù)說明

  54-16-0,5-羥基吲哚乙酸技術(shù)說明英文名稱：5-HIAA；5-Hydroxyindole-3-aceticacid；5-Hydroxyindoleaceticacid其他名稱：5-羥吲哚乙酸；5-羥基吲哚-3-乙酸CAS號：54-16-0C10H9NO3=191.1854-16-0,5-羥基吲哚乙酸技術(shù)說明級別：BR含量：≥98.0%(HPLC)熔點：161～164℃54-16-0,5-羥基吲哚乙酸技術(shù)說明性狀：類白色或紫紅色或淺黃色結(jié)晶。對光和空氣敏感。溶于水、乙醇和乙酸乙酯,微溶于。熔點160～166℃。Zda吸收波長(甲醇中)277、300nm(ε5200、7200)。用途：生化研究。保存：-20℃，避光[詳細]

  2018-11-05 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 5-羥色胺ELISA Kit使用說明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer45-羥色胺ELISAKit使用說明書（德國IBL:RE59121）1、應用范圍此試劑盒可用于人血清、血漿、血小板和尿液中五羥色胺的體外定量檢測。進一步的研究表明：此試劑盒還可用于組織勻漿和細胞培養(yǎng)上清液的研究。2、前言說明五羥色胺是色氨酸代謝的中間產(chǎn)物，它主要存在于腸嗜鉻細胞、血清素激活的神經(jīng)元和血小板中，它已被確定為是神經(jīng)系統(tǒng)的一種神經(jīng)遞質(zhì)。循環(huán)血液中的五羥色胺幾乎都集中于血小板內(nèi)。循環(huán)五羥色胺濃度的變化可反映出人體的一些病理變化，這些病理變化包括：慢性肌緊張性頭痛、精神分裂癥、高血壓、舞蹈癥、杜氏肌肉萎縮癥和早期急性闌尾炎。血清五羥色胺的檢測對類癌綜合征的檢測具有重要臨床意義。人們預計：在不久的將來，人們對血小板內(nèi)五羥色胺的研究興趣（包括五羥胺的吸收及釋放動力學研究）應該會不斷增長。3、實驗原理樣品準備（將五羥色胺轉(zhuǎn)變?yōu)镹-乙酰五羥色胺）是樣品的稀釋的一部分，將每一份樣品分別于酰化試劑一起溫育就可以得到?；奈辶u色胺。此實驗采用的是競爭性ELISA的原理，生物素標記的和非生物素標記的抗原競爭性結(jié)合到一定數(shù)量的抗體結(jié)合位點上。Z后，結(jié)合到抗體上的生物素標記抗原的量于樣品中被分析物的濃度成反比。當反應系統(tǒng)達到平衡后，洗板除去未結(jié)合的生物素標記抗原，用抗生物素堿性磷酸酶做標記、對硝基苯磷酸做底物來檢測結(jié)合到抗體上的生物素標記抗原的量。用已知標準品做一條標準曲線，將未知樣品的酶活性在標準曲線上進行定標就可以得到未知樣品中五羥色胺的濃度。4、貯存與穩(wěn)定性試劑盒和運輸環(huán)境和儲存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑的準備將在相關章節(jié)中闡述。打開了的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定，前提是要將試劑盒用袋子密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下。5、樣品的采集與儲存注意有些食物會含有一定量的五羥色胺，另外，有些藥物也會刺激五羥色胺的釋放，從而導致五羥色胺的濃度升高。病人應當禁食富含五羥色胺的食物，如：阿司匹林、促腎上腺皮質(zhì)激素、MAOYZ劑、phenazetin、兒茶酚氨、利血平和煙堿。血清注意靜脈穿刺采集全血的常規(guī)注意事項。從采集到血液樣品的那一刻起到檢測時都應保持血液樣品的化學整體性。不要使用明顯溶血、黃疸血和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁，則在實驗前應當離心以除去所有的微粒物質(zhì)。貯存18-25℃2-8℃≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性2小時6小時3個月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。收集病人24h內(nèi)的所有尿液，之后將其加入到10-15ml6N的HCl防腐劑中。確定用于結(jié)果結(jié)算的總體積。使用前請將所有樣品混合并離心。貯存≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復凍融。穩(wěn)定性6個月血漿、血小板98%以上的循環(huán)五羥色胺都位于血小板內(nèi)，在血液凝集時就可以釋放出來。用靜脈穿刺的方法將全血收集到含EDTA或檸檬酸的塑料試管中（如10mlMonovetteNC試管中加入1ml檸檬酸溶液）。室溫下，將全血樣品以200×g的速率離心10分鐘得到富含血小板的血漿（PRP）。將PRP-上清轉(zhuǎn)移到另一試管中。為了獲得血小板乳糜微粒，我們將200ulPRP（350000～500000個血小板/ul）加入到800ul生理鹽水中，之后4℃下以4500×g的速率離心10分鐘（或4℃下10000×g的速率離心2分鐘）。離心后棄取上清。在血小板乳糜微粒中加入200ul雙蒸水，之后樣品就可以在-20℃以下的環(huán)境下凍存數(shù)周了。將凍融的樣品在室溫下以1000×g的速率離心2分鐘。整個實驗需要使用20ul上清液（見?；?。如果您想測無血小板血漿（PFP）中五羥色胺的濃度，我們可以將PRP在4℃以4500×g的速率離心10分鐘（或4℃下10000×g的速率離心2分鐘）就可以獲得無血小板血漿（PFP）。游離五羥色胺的ELISA實驗要使用50ul上清液（見?；?。注意：PRP中五羥色胺的直接檢測實驗表明：大約10%的PRP樣品可以檢測到不可預知的高濃度五羥色胺（結(jié)果用GX液相層析和流氏細胞術(shù)獲得）。為了避免這種差異性，我們建議您即檢測血小板中五羥色胺，也檢測無血小板血漿中的五羥色胺。無血小板血漿血小板微粒（從血漿中分離得到）避免熱源或太陽直射，避免反復凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。儲存≤-20℃≤-20℃≤-80℃穩(wěn)定性2周4周1年組織勻漿和細胞培養(yǎng)上清使用組織勻漿和細胞培養(yǎng)上清作樣品，一般無特殊注意事項注意：細胞培養(yǎng)基可能含有一定量的五羥色胺！儲存≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復凍融。穩(wěn)定性6個月6、試劑盒成分注意試劑盒有足夠做96份單孔檢測或48份雙孔檢測所需的試劑成分。數(shù)量標記成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了羊抗兔抗血清。1×5mlANTISERUM組胺抗血清，藍色，即用，內(nèi)含：兔抗血清、Tris緩沖液和0.01%的NaN3。1×5mlBIOTIN五羥色胺生物素，黃色，即用，內(nèi)含0.1%的NaN3。1×0.2mlENZCONJCONC酶聯(lián)物，10倍濃縮，內(nèi)含堿性磷酸酶標記的抗生物素抗體、Tris緩沖液、HCl和0.01%的NaN3。1×7×0.5mlCALA-G標準品A-G，0;0.08;0.24;0.73;2.2;6.6;19.8ng/ml,0;0.45;1.4;4.1;12.5;37.4;112.3nmol/l,即用，內(nèi)含酰化的五羥色胺、磷酸鹽緩沖液和0.1%的NaN3。1×2×0.5mlCONTROL1+2LYO質(zhì)控品1+2，凍干，內(nèi)含人血清和0.02%的NaN3。具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標簽。1×3mlACYLREAG?；噭﹥?nèi)含乙酸酐和丙酮，即用1×50mlASSAYBUFCONC檢測緩沖液，10倍濃縮，內(nèi)含磷酸緩沖液、BSA和1%的NaN3。1×50mlWASHBUFCONC洗滌液，20倍濃縮，內(nèi)含磷酸緩沖液、吐溫和0.1%的硫柳汞。1×9×PNPPSUBSPNPP底物片，密封于鋁鉑金屬袋內(nèi)，內(nèi)含對硝基苯酚磷酸鹽。1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液，即用，內(nèi)含二乙醇胺、水和0.05%的NaN3。1×15mlPNPPSTOPPNPP終止液，即用，內(nèi)含1M的NaOH和0.25M的EDTA。3×FOIL粘性金屬板7、實驗所需器材但試劑盒不提供1）移液器，體積：20;25;50;100;1000ul2）玻璃試管（12×75mm）3）試管架4）振蕩器（500rpm）5）旋渦混合器6）水浴箱，37℃7）帶儲器的8道移液器8）洗滌瓶，自動或半自動洗板機9）離心機：≥1500×g10）可在405nm處讀數(shù)的酶標儀（參考波長：600-650nm）11）雙蒸水或去離子水12）吸水紙、取樣吸頭和計時器8、實驗前的準備說明供手動和自動操作參考用注意用于96孔檢測的試劑成分可分成3次用。下述體積是使用4條（32孔）時所需要的體積。如果客戶想將標準品從7支減為6支的話，我們可以省掉標準品G。則檢測范圍相應的減少到155ug/l（血漿）或706ug/l（血清，尿液，組織勻漿和細胞培養(yǎng)上清）。血清、尿液、組織勻漿和細胞培養(yǎng)上清樣品可以選擇簡短操作步驟進行，只需溫育3.5個小時（但血漿樣品不能采用簡短操作步驟進行），以上樣品也可以選擇可選操作步驟進行檢測（將樣品溫育一整夜），血漿樣品必須按照溫育一整夜進行檢測。8.1凍干或濃縮成分的準備稀釋/溶解成分加入稀釋劑比例備注儲存穩(wěn)定性15ml檢測緩沖液150ml雙蒸水1：10出現(xiàn)黃褐色并不會影響實驗結(jié)果2-8℃2周15ml洗滌液300ml雙蒸水1：202-8℃4周質(zhì)控品0.5ml雙蒸水靜置15min,混合時無泡沫≤-20℃有效期內(nèi)穩(wěn)定60ul酶聯(lián)物6ml稀釋的檢測緩沖液1:101臨時配置,只能使用一次18-25℃2小時3PNPP底物片8mlPNPP底物緩沖液臨時配置，只能使用一次18-25℃5小時8.2樣品的稀釋樣品五羥色胺濃度高于Z高標準品的必須用檢測緩沖液進行進一步的稀釋。8.3樣品和質(zhì)控品的?；瘶悠稟：血清，尿液，血小板提取物，組織勻漿和質(zhì)控品樣品B：無血小板血漿注意請不要?；瘶藴势?，標準品已經(jīng)?；?。樣品準備可使血清、尿液、血小板乳糜微粒、組織勻漿和細胞培養(yǎng)上清被稀釋107倍，而血漿樣品則被稀釋23.5倍。結(jié)果計算時必須將此稀釋因子考慮進去。8.3.1樣品A：血清、尿液、血小板提取物、組織勻漿和質(zhì)控品1將質(zhì)控品和樣品A分別20ul加入到玻璃試管中。2在每一試管中加入100ul稀釋好的檢測緩沖液，旋渦混合。3在每一試管中加入25ul?；噭?（3%），加入后立即旋渦混合。4將試管蓋好，將試管放到37℃水浴箱內(nèi)溫育15分鐘。5在每一試管中加入2ml已稀釋好的檢測緩沖液，旋渦混合61500×g下離心10分鐘注意準備好的樣品必須立即檢測。其上清可在18-25℃下穩(wěn)定存放1小時。8.3.2樣品B：無血小板血漿1將50ul樣品B加入到玻璃試管中。2在每一試管中加入100ul稀釋好的檢測緩沖液，旋渦混合。3在每一試管中加入25ul?；噭尤牒罅⒓葱郎u混合。4將試管蓋好，將試管放到37℃水浴箱內(nèi)溫育15分鐘。5在每一試管中加入1ml已稀釋好的檢測緩沖液，旋渦混合61500×g下離心10分鐘注意準備好的樣品必須立即檢測。其上清可在18-25℃下穩(wěn)定存放1小時。9、實驗步驟9.1簡短操作步驟（僅供樣品A使用，不能應用于血漿）1將標準品、酰化好的質(zhì)控品和?；玫臉悠犯?0ul加入到相應的微孔中。2在每一微孔中加入50ul五羥色胺生物素。3在每一微孔中加入50ul五羥色胺抗血清。4蓋板，室溫（18-25℃）下振蕩（500rpm）溫育90min。5移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應液，每孔用250ul稀釋好的洗滌液洗板3次,吸水紙上拍干以除去殘余液體。6在每一微孔中加入150ul臨時準備好的酶聯(lián)物。7蓋板，室溫（18-25℃）下振蕩（500rpm）溫育60min。8移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應液，每孔用250ul稀釋好的洗滌液洗板3次,吸水紙上拍干以除去殘余液體。9如果有條件的話，可以用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液時，每孔間的時間間隔應當相同。使用主動置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。10在每一微孔中加入200ul臨時配置好的PNPP底物液。11室溫（18-25℃）下振蕩（500rpm）溫育60min。12在每一微孔中加入50ulPNPP終止液以終止底物反應，輕輕振板以使溶液混合均勻。13加終止液后60min內(nèi)405nm處讀取OD值。9.2可選操作步驟（溫育一整夜，樣品A和樣品B均適用）9.2.1**天1將標準品、酰化好的質(zhì)控品和樣品分別50ul加入到相應的微孔中。2在每一微孔中加入50ul五羥色胺生物素。3在每一微孔中加入50ul五羥色胺抗血清。4蓋板，輕輕振板，2-8℃下溫育16-20小時（一整夜）。9.2.2第二天1移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應液，每孔用250ul稀釋好的洗滌液洗板3次，吸水紙上拍干以除去參與液體。2在每一微孔中加入150ul臨時配置好的酶聯(lián)物。3蓋板，室溫振蕩器上（500rpm）溫育60分鐘。4移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應液，每孔用250ul稀釋好的洗滌液洗板3次，吸水紙上拍干以除去殘余液體。5如果有條件的話，可以用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液時，每孔間的時間間隔應當相同。使用主動置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。6在每一微孔中加入200ul臨時配置好的PNPP底物液。7室溫振蕩器上（500rpm）溫育30分鐘。8在每一微孔中加入50ulPNPP終止液，振板以混合孔內(nèi)成分。9加終止液后60min內(nèi)405nm處讀取OD值。（參考波長：600-650nm）10、結(jié)果計算將所有標準品、質(zhì)控品和樣品的OD值減去空白孔的OD值。在半對數(shù)坐標紙上，以標準品的OD值（Y軸，線性）對其濃度（X軸，對數(shù)）繪制出一條標準曲線，或采用自動計算的方法繪制出一條標準曲線。用Cubicspline、4參數(shù)或雙對數(shù)可以得到較好的曲線圖。在計算標準曲線時，應當應用到每一個標準品數(shù)值（兩個數(shù)值中，明顯逸出的數(shù)值應當被忽略掉，采用更加合理的一個數(shù)值用）。樣品的濃度可以從標準曲線上定量得到。由于樣品被稀釋了，所以Z終樣品結(jié)果必須乘以相應的稀釋因子，單位為ng/ml。血清、尿液、血小板、組織勻漿、細胞培養(yǎng)上清、質(zhì)控品：×107無血小板血漿：×23.5進行了進一步稀釋的樣品結(jié)果應當乘以相應的稀釋因子。實驗必須滿足如下標準才符合要求：50%OD/Odmax（）：0.60-1.00ng/ml（平均0.8ng/ml）△OD標準品A-標準品G≥0.80OD轉(zhuǎn)換系數(shù)：五羥色胺（ng/ml）×5.67=nmol/l如果樣品中五羥色胺濃度高于Z高標準品，則此樣品必須按照實驗前準備說明進行稀釋并重新檢測。11、期望值實驗結(jié)果不能當作任何ZL結(jié)果的**原因，疾病的判斷還應當與其它臨床觀察和診斷檢測相結(jié)合。以下結(jié)果為正常人群的正常值（97.5%）：樣品數(shù)量單位平均值建議每個實驗室讀確定自己的正常值范圍范圍血清99ng/ml88.630-200無血小板血漿35ng/ml3.71.8-7.5血小板35ng/109血小板490217-86124小時尿液49μg/d83.1≤200本譯文僅供參考，詳情請以原文為準。ZGdu家總代理：深圳市科潤達生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口太子路18號海景廣場11C研發(fā)ZX：深圳市蛇口沿山路10號6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細]

  2018-11-14 10:00

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• 人5羥吲哚乙酸(5-HIAA)檢測試劑盒

  人5羥吲哚乙酸(5-HIAA)檢測試劑盒[詳細]

  2014-09-29 00:00

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  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4組胺ELISAKit使用說明書（德國IBL：RE59221）1、應用范圍此試劑盒可用于人血漿和尿液中組胺的體外定量檢測。深化此實驗可用于細胞培養(yǎng)上清液的研究。2、前言說明組胺（β-咪唑乙胺）是人體中Z重要的介質(zhì)，它主要存在于過敏反應的起始階段（速發(fā)型過敏）。組胺是由組胺酸經(jīng)脫氨基作用產(chǎn)生的。組胺幾乎存在于機體的所有組織中，主要儲存于柱狀細胞和嗜堿性粒細胞的異染性顆粒中。組胺通常都是以無活性的復合體性存在，只有當需要的時候才會釋放。像其它的介質(zhì)一樣，組胺不僅能調(diào)節(jié)過敏反應的各種臨床癥狀，也可以調(diào)節(jié)終止過敏反應的一系列效應。組胺在組織中的生物活性是通過三種受體來完成的，它們分別是H1，H2和H3受體。臨床檢測組胺的方法有：定量檢測各種速發(fā)型過敏反應中嗜堿性白細胞釋放組胺的量，也可以檢測過敏藥物ZL后各種體液（血漿，尿液，細胞培養(yǎng)上清）中組胺的量。3、實驗原理此ELISA試劑盒利用的是競爭法的原理。樣品中未知量的抗原和一定量的酶標抗原競爭性結(jié)合到包被在微孔中的抗體結(jié)合位點上。溫育后洗板以終止競爭反應。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強度與樣品中抗原的量成反比。樣品的實驗結(jié)果可以從標準曲線上直接獲取。4、儲存與穩(wěn)定性試劑盒必須在2-8℃的環(huán)境下運輸和儲存，避免太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑準備將在相關章節(jié)中闡述。如果將包被板密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下時，試劑在有效期內(nèi)穩(wěn)定。5、樣品的采集與儲存血漿（EDTA，肝素）按照靜脈穿刺的常規(guī)注意事項采集樣品，血液樣品自采集到實驗時都必須保證其化學完整性。不要使用明顯溶血、黃疸和脂血樣品。混濁的樣品應當在實驗開始前離心以除去所有的顆粒性物質(zhì)。儲存2-8℃≤-20℃≤-70℃避免太陽直射，避免反復凍融。穩(wěn)定性5小時3個月2年尿液實驗必須使用自然產(chǎn)生的尿液，也可使用24小時內(nèi)產(chǎn)生的尿液。收集病人24小時內(nèi)產(chǎn)生的尿液，并混合于含10-15ml6NHCl防腐劑的容器中。為了計算結(jié)果，請確定尿液的總體積。實驗開始前請先將樣品離心。自然的尿液酸化尿液避免太陽直射，避免反復凍融。儲存2-8℃2-8℃≤-20℃穩(wěn)定性8小時3天6個月細胞培養(yǎng)上清使用細胞培養(yǎng)上清作樣品，一般沒特殊注意事項細胞培養(yǎng)基內(nèi)的組胺濃度可能稍微要高些。全血全血中組胺釋放量的檢測必須用肝素化全血，具體信息請見相應的說明書（RE95000）6、試劑盒成分注意：試劑盒有足夠做96份單孔檢測或48份雙孔檢測所需的試劑成分數(shù)量標記成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了羊抗兔抗血清。1×5mlANTISERUM組胺抗血清，藍色，即用，內(nèi)含：兔抗血清、Tris緩沖液和0.01%的硫柳汞1×75ulENZCONJCONC酶聯(lián)物，200倍濃縮，內(nèi)含辣根過氧酶標記的組胺。7×0.4mlCALPA-GLYO血漿標準品A-G，凍干，用于血漿樣品的定標。內(nèi)含：組胺、人血漿。具體濃度請見試劑瓶標簽或質(zhì)控單。2×0.4mlCONTROLP1+2LYO血漿質(zhì)控1+2，凍干，內(nèi)含：組胺、人血清。具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標簽。1×2.0ml5×0.25mlCALU/CA-F尿液/細胞培養(yǎng)標準品A-F，0;2.7;8.1;24.3;73;219ng/ml,即用，用于尿液和細胞培養(yǎng)樣品的定標。內(nèi)含：組胺和0.1M的HCl。2×0.25mlCONTROLU/C1+2尿液質(zhì)控1+2，即用，內(nèi)含：組胺、人尿液（酸化的）。具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標簽。1×2.25mlACYLREAG酰化試劑，即用，內(nèi)含：DMF1×60mlASSAYBUFCONC檢測緩沖液，5倍濃縮，內(nèi)含Tris緩沖液、吐溫、BSA和0.05%的硫柳汞。1×50mlWASHBUFCONC洗滌液，20倍濃縮，內(nèi)含磷酸緩沖液、吐溫和0.1%的硫柳汞。1×10mlINDICATORBUF指示緩沖液，紫色，即用，內(nèi)含：Tris緩沖液、苯酚（pH＜7.5時顏色會發(fā)生改變＝和0.1%的硫柳汞。1×12mlTMBSUBSTMB底物液，即用，內(nèi)含TMB、緩沖液和穩(wěn)定劑。1×12mlTMBSTOPTMB終止液，即用，1M的H2SO4。3×FOIL粘性金屬板7、實驗所需器材但試劑盒不提供1）移液器，體積：10;20;50;100;1000ul2）試管（12×75mm）3）試管架4）振蕩器5）旋渦混合器（500rpm）6）帶儲器的8道移液器7）洗滌瓶，自動或半自動洗板機8）酶標儀（參考波長：600-650nm）9）蒸餾水或去離子水10）吸水紙、取樣吸頭和計時器8、實驗前的準備說明注意96人份的試劑盒可分成三份分別進行檢測，下述體積為檢測32人份時所需要的體積。8.1凍干或濃縮成分的準備稀釋/溶解成分稀釋劑比例備注儲存穩(wěn)定性20ml檢測緩沖液100ml蒸餾水1：52-8℃2周15ml洗滌液300ml蒸餾水1：2018-25℃將晶體溶解掉2-8℃4周血漿標準品0.4ml蒸餾水靜置15min,混合時無泡沫-20℃1個月血漿質(zhì)控品0.4ml蒸餾水靜置15min,混合時無泡沫-20℃1個月10ul（*）酶聯(lián)物2ml檢測緩沖液1:200臨時配置,只能使用一次18-25℃30分鐘（*）在稀釋前,確保塞子內(nèi)無殘留液體.8.2樣品的稀釋樣品中組胺濃度高于Z高標準品的樣品,應當在?；坝孟鄳南♂屢合♂?尿液樣品用0.1M的HCl,血漿樣品用樣品稀釋液（Cat.no.KEHP711）,試劑盒內(nèi)未提供。8.3樣品的?；迷嚬軠蕚錁悠纷⒁獠荒苎獫{標準曲線確定?；蛞夯蚣毎囵B(yǎng)樣品中組胺的濃度,也不能用U/C標準曲線確定?；獫{樣品中組胺的濃度.8.3.1血漿1將血漿標準品、血漿質(zhì)控品和病人樣品分別100ul加入到相應的試管中。2在每一試管中加入100ul指示緩沖液，旋渦混合。3在每一試管中加入20ul酰化試劑，加入?；噭┖罅⒓葱郎u混合。4將試管蓋好，室溫（18-25℃）溫育30分鐘。5在每一試管中加入750ul已稀釋好的檢測緩沖液，旋渦混合。8.3.2尿液，細胞培養(yǎng)上清1將U/C標準品、尿液質(zhì)控品和病人尿液或細胞培養(yǎng)上清分別50ul加入到相應的試管中。2在每一試管中加入50ul指示緩沖液，旋渦混合。如果指示劑變成無色，說明溶液的pH值很低，樣品中含有很多酸性物質(zhì)。在這種情況下，再向試管中加入50ul指示緩沖液直至溶液略帶微紅。3在每一試管中加入10ul?；噭尤膈；噭┖罅⒓葱郎u混合。4將試管蓋好，室溫（18-25℃）溫育30分鐘。5在每一試管中加入2000ul已稀釋好的檢測緩沖液，旋渦混合。注意：?；幚砗玫臉悠房稍?-8℃下存放一晚，-20℃環(huán)境下可存放2天。9、實驗步驟1將?；幚磉^的標準品、質(zhì)控品和病人樣品分別50ul加入到相應的微孔中。2在每一微孔中加入50ul臨時配置好的酶聯(lián)物。3在每一微孔中加入50ul組胺抗血清。4蓋板，振蕩器（500rpm）上室溫溫育3小時。5移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應物，每孔用250ul稀釋好的洗滌液洗板4次，吸水紙上拍干以除去殘余液體。6如果有條件的話，可以用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液時，每孔的時間間隔應當相同。使用主動置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。7在每一微孔中加入100ulTMB底物液。8血漿：振蕩器（500rpm）上室溫溫育40min。尿液/細胞培養(yǎng)上清：振蕩器（500rpm）上室溫溫育20min。9在每一微孔中加入100ulTMB終止液以終止底物反應。輕輕振板使溶液混合均勻。10加終止液后15min內(nèi)450nm處讀取OD值。（參考波長：600-650nm）10、期望值實驗結(jié)果不能當作任何ZL結(jié)果的**原因，疾病的判斷還應當與其它臨床觀察和診斷檢測相結(jié)合。以下結(jié)果為正常人群的正常值（5%-95%），建議每個實驗室讀確定自己的正常值范圍：血漿尿液24小時尿液自然產(chǎn)生的尿液ng/mlug/dug/g肌酐酸0.2-1.05-568-53本譯文僅供參考，詳情請以原文為準。ZGdu家總代理：深圳市科潤達生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口太子路18號海景廣場11C研發(fā)ZX：深圳市蛇口沿山路10號6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細]

  2018-11-14 10:00

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  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4腎上腺素ELISAKit使用說明書（德國IBL：RE59251）1、應用范圍此試劑盒可用于人血清和尿液中腎上腺素的體外定量檢測。2、臨床意義兒茶酚胺類激素腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺主要由腎上腺髓質(zhì)、交感神經(jīng)系統(tǒng)和大腦產(chǎn)生。它們幾乎影響所有的組織，并與其它激素和神經(jīng)系統(tǒng)一起參與各種生理過程的調(diào)節(jié)。在許多疾病中，兒茶酚胺激素及其代謝產(chǎn)物變腎上腺素和去甲變腎上腺素的分泌量都會增加，因而這些激素可用于疾病的診斷。所以，這些激素的檢測對于疾病的診斷及神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤疾病的具有重要意義。它主要用于嗜鉻細胞瘤的診斷，當然也用于成神經(jīng)細胞瘤和神經(jīng)節(jié)細胞瘤的診斷。因為在實驗一開始時有提取步驟，用戶可使用各種動物材料進行實驗。所有動物的兒茶酚胺的化學結(jié)構(gòu)相同，因此此試劑盒可用于測大鼠、小鼠或其它動物。3、實驗原理此固相ELISA試劑盒利用的夾心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗體。之后加入的液態(tài)抗體可以結(jié)合到抗原分子的一個抗原決定簇上，而抗原分子可在溫育期內(nèi)結(jié)合到固相抗體上。樣品中的抗原與酶標二抗一起在微孔內(nèi)溫育，此酶標二抗可結(jié)合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結(jié)果可直接從標準曲線上讀取。4、貯存與穩(wěn)定性試劑盒和運輸環(huán)境和儲存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑的準備將在相關章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定，前提是要將試劑盒用袋子密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下。5、樣品的采集與儲存注意人體內(nèi)的兒茶酚氨和間甲腎上腺素的釋放會受到一些食品和藥物的影響。因此在樣品采集前72小時內(nèi)病人應禁止服用下列食物和藥品：維生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMTYZ劑，還有降血壓類藥物。血漿（EDTA）注意血液采集后兩小時內(nèi)，將血液樣品冷藏于2-8℃的環(huán)境下直致離心獲取血漿。注意靜脈穿刺采集全血的常規(guī)注意事項。從采集到血液樣品的那一刻起到檢測時都應保持血液樣品的化學整體性。不要使用明顯溶血、黃疸的和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁，則在實驗前應當離心以除去所有的微粒物質(zhì)。貯存2-8℃≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性6h1個月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。將病人24h內(nèi)的所有尿液都收集到，并混合于含10-15ml6N的HCl防腐劑的試劑瓶中。貯存≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性6個月6、試劑盒成分注意：試劑盒有足夠做96份單孔檢測或48份雙孔檢測所需的試劑成分數(shù)量標志成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，單克?。?×6×2.5mlCALA-F標準品A-F，即用腎上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml（0;8;27;82;273;819nmol/L）去甲腎上素:0;5;15;50;150;500ng/mL（0;30;89;296;887;2955nmol/L）多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL（0;78;228;750;2938;14688nmol/L）內(nèi)含[-]腎上腺素，[-]去甲腎上腺素，[-]多巴胺（有生物活性）,0.1M的HCl1×2×2.5mlCONTROL1+2質(zhì)控品1+2即用,內(nèi)含[-]腎上腺素，[-]去甲腎上腺素，[-]多巴胺（具有生物活性）,0.1M的HCl,具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標簽.1×250μLENZCONJCONC酶聯(lián)物濃縮型（100×）內(nèi)含：堿性磷酸酶標記的抗體，Tris緩沖液，HCl，0.01%的NaN32×EXTRPLATE提取板（微孔板）每板24孔，包被了硼酸親和凝膠。1×60mlEXTRBUF提取緩沖液粉紅色，即用，內(nèi)含：0.016%的NaN3。2×1.25mlCOMTLYOCOMT凍干粉內(nèi)含：兒茶酚-氧位-甲基轉(zhuǎn)移酶（豬肝），NaN31×2mlCOMTADDCOMT添加劑內(nèi)含：人血漿，穩(wěn)定劑，0.01%硫柳汞。1×7mlANTISERUMDO腎上腺素抗血清紫羅蘭色，即用，內(nèi)含：抗腎上腺素抗體（兔），緩沖液，穩(wěn)定劑。2×1.25mlCOENZ酶聯(lián)復合物即用，內(nèi)含：S-腺苷-L-蛋白酸，穩(wěn)定劑。1×3mlENZBUF酶緩沖液即用，內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，穩(wěn)定劑。1×17mlRELEASEBUFRelease緩沖液黃色，即用，內(nèi)含：0.1M的HCl，指示劑。1×3mlACYLREAG?；噭┘从茫瑑?nèi)含：二甲基甲酰胺，乙醇。注意：有毒，高可燃性。1×50mlWASHBURCONC洗滌液濃縮型（10×）內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，吐溫，0.2%的NaN31×9×PNPPSUBSPNPP底物片內(nèi)含：對硝基苯磷酸（PNPP）1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液即用，內(nèi)含：二乙醇胺，水，0.05%的NaN31×15mlPNPPSTOPPNPP終止液即用，內(nèi)含：1M的NaOH，0.25M的EDTA3×FOIL粘性金屬板7、實驗所需器材（但試劑盒不提供）1）移液器（10；10-100；100-1000μL）2）軌道搖床（200-900rpm）3）旋渦混合器4）帶儲器的8通道移液器5）洗滌瓶，自動或半自動包被板清洗系統(tǒng)6）酶標儀7）雙蒸水或去離子水8）吸水紙，取樣吸頭，計時器8、實驗前說明注意用于96人份檢測色試劑盒成分可分成兩次進行。，下列所述體積為做48人份時所需要的量。8.1樣品的稀釋如果樣品中腎上腺素濃度高于Z高標準品的應按照下列所述進行稀釋：樣品待稀釋稀釋液備注血漿腎上腺素濃度高于Z高標準品中腎上腺素的濃度雙蒸水提取步驟前尿液腎上腺素濃度高于Z高標準品中腎上腺素的濃度0.1N的HCl提取步驟前8.2樣品、標準品和質(zhì)控品的提?。ㄌ崛“澹?）將標準品、已稀釋好的質(zhì)控品、已稀釋好的尿液樣品各20μL和500μL血漿樣品加入到提取板相應的微孔中。除血漿樣品孔外，在所有的微孔中加入500μL雙蒸水以消除體積差別。2）在每一微孔中加入1000μL提取緩沖液3）蓋板。在軌道搖床（600-900rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取30min。在提取過程中，液體的表面應該會浸濕粘性金屬板，但液體的量不能超過微孔的2/3。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。4）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應液，在吸水紙上拍干。5）每孔加入2ml雙蒸水6）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。7）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應液，在吸水紙上拍干。8）每孔加入150μL提取緩沖液，再向每孔中加入50μL?；噭?，立即混合均勻。9）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取20min。（無需蓋板）10）快速棄取孔內(nèi)反應液，在吸水紙上拍干。11）每孔加入2ml雙蒸水。12）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。13）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應液，在吸水紙上拍干。14）每孔加入300μLRelease緩沖液。15）在軌道搖床（400-500rpm）上18-25℃的環(huán)境下振蕩30min。（無需蓋板）已準備好的樣品應當在當天就進行檢測。如果不行的話，您可將提取板用粘性金屬板蓋好，在2-8℃的環(huán)境下可存放一夜。9、實驗步驟9.1COMT酶溶液的準備注意：COMT酶溶液應在使用前直接臨時配置。在COMT凍干粉中加入1.25ml雙蒸水，充分混和。再加入1.25ml酶聯(lián)溶液，然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加劑以充分混合溶解的COMT試劑*，COMT酶溶液Z后的體積為每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋渦混合器混合，但要避免氣泡產(chǎn)生，配置好的COMT溶液可在室溫下穩(wěn)定存放1小時。*如果只需要一定量的COMT溶液，則剩余的COMT溶液應立即凍存于-20℃的環(huán)境下。COMT溶液可在此環(huán)境下穩(wěn)定存放1-2個月。9.2樣品、標準品和質(zhì)控品的酶分化注意如果要檢測腎上腺素和去甲腎上腺素，我們建議您先檢測腎上腺素。如果使用自動置換型衣液器加樣，請將取樣吸頭內(nèi)的殘余液體加入到提取板的相應微孔內(nèi)，否則剩余的提取液不夠去甲腎上腺素檢測用。將提取板放到有一定坡度的位置上。實驗開始前，確定好腎上腺素和去甲腎上腺素的檢測孔并標記好。9.3尿液與血漿中的甲腎上腺素1在每一微孔內(nèi)加入25ul臨時配制的COMT酶溶液，輕輕振板以使溶液混合均勻。2將提取好的標準品、質(zhì)控品和樣品分別25ul加入到相應的微孔內(nèi)。在此步驟中，我們可以將取樣吸頭直接深入到COMT溶液里。加樣后，溶液顏色變成粉色，輕輕振板以使溶液混合均勻。3向每一微孔中加入50ul甲腎上腺素抗血清（綠色）。4蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育120min。8.4凍干粉或濃縮成分的準備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性20ml洗滌液180ml雙蒸水1：10充分混合2-8℃4W60μL酶聯(lián)物6ml洗滌緩沖液（已稀釋好）1：101臨時配置，僅能使用一次，混合時避免氣泡產(chǎn)生18-25℃30min4PNPP底物片10.7mlPNPP底物緩沖液臨時配置，僅能使用一次18-25℃10min9.5ELISA實驗步驟1）移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應液，每孔用250-300ul稀釋好的洗滌液洗板4次。Z后在吸水紙上拍干以除去殘余液體。2）在每一微孔中加入100ul臨時配置好的酶聯(lián)物。3）蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育60min。4）移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應液，每孔用250-300ul稀釋好的洗滌液洗板4次。Z后在吸水紙上拍干一除去殘余液體。5）如果可以的話，使用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時間間隔應當相同，使用自動置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。6）在每一微孔中加入200ul底物液。7）不要蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育60min。8）在每一微孔內(nèi)加入50ulPNPP終止液以終止酶反應。輕輕振板以使溶液混合均勻。9）加終止液后60min內(nèi)405nm處讀取OD值。10、期望值實驗結(jié)果不能當作判斷任何ZL結(jié)果的**因素，疾病的判斷還應當與其它臨床觀察和診斷檢測相結(jié)合。以下結(jié)果為正常人群的正常值（5%-95%），建議每個實驗室讀確定自己的正常值范圍：尿液血漿μg/dnmol/dpg/mLnmol/L去甲腎上腺素＜20＜110＜125＜0.68本譯文僅供參考，詳情請以原文為準。ZGdu家總代理：深圳市科潤達生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口工業(yè)區(qū)太子路18號海景廣場11C研發(fā)基地：深圳市蛇口沿山路10號6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細]

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• 去甲腎上腺素ELISA Kit使用說明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4去甲腎上腺素ELISAKit使用說明書（德國IBL：RE59261）1、應用范圍此試劑盒可用于人血清和尿液中去甲腎上腺素的體外定量檢測。2、臨床意義兒茶酚胺類激素腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺主要由腎上腺髓質(zhì)、交感神經(jīng)系統(tǒng)和大腦產(chǎn)生。它們幾乎影響所有的組織，并與其它激素和神經(jīng)系統(tǒng)一起參與各種生理過程的調(diào)節(jié)。在許多疾病中，兒茶酚胺激素及其代謝產(chǎn)物變腎上腺素和去甲變腎上腺素的分泌量都會增加，因而這些激素可用于疾病的診斷。所以，這些激素的檢測對于疾病的診斷及神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤疾病的具有重要意義。它主要用于嗜鉻細胞瘤的診斷，當然也用于成神經(jīng)細胞瘤和神經(jīng)節(jié)細胞瘤的診斷。因為在實驗一開始時有提取步驟，用戶可使用各種動物材料進行實驗。所有動物的兒茶酚胺的化學結(jié)構(gòu)相同，因此此試劑盒可用于測大鼠、小鼠或其它動物。3、實驗原理此固相ELISA試劑盒利用的夾心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗體。之后加入的液態(tài)抗體可以結(jié)合到抗原分子的一個抗原決定簇上，而抗原分子可在溫育期內(nèi)結(jié)合到固相抗體上。樣品中的抗原與酶標二抗一起在微孔內(nèi)溫育，此酶標二抗可結(jié)合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結(jié)果可直接從標準曲線上讀取。4、貯存與穩(wěn)定性試劑盒和運輸環(huán)境和儲存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑的準備將在相關章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定，前提是將試劑盒用袋子密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下。5、樣品的采集與儲存注意人體內(nèi)的兒茶酚氨和間甲腎上腺素的釋放會受到一些食品和藥物的影響。因此在樣品采集前72小時內(nèi)病人應禁止服用下列食物和藥品：維生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMTYZ劑，還有降血壓類藥物。血漿（EDTA）注意血液采集后兩小時內(nèi)，將血液樣品冷藏于2-8℃的環(huán)境下直致離心獲取血漿。注意靜脈穿刺采集全血的常規(guī)注意事項。從采集到血液樣品的那一刻起到檢測時都應保持血液樣品的化學整體性。不要使用明顯溶血、黃疸的和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁，則在實驗前應當離心以除去所有的微粒物質(zhì)。貯存2-8℃≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性6h1個月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。將病人24h內(nèi)的所有尿液都收集到，并混合于含10-15ml6N的HCl防腐劑的試劑瓶中。貯存≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性6個月6、試劑盒成分注意：試劑盒有足夠做96份單孔檢測或48份雙孔檢測所需的試劑成分數(shù)量標志成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，單克隆）。1×6×2.5mlCALA-F標準品A-F，即用腎上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml（0;8;27;82;273;819nmol/L）去甲腎上素:0;5;15;50;150;500ng/mL（0;30;89;296;887;2955nmol/L）多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL（0;78;228;750;2938;14688nmol/L）內(nèi)含[-]腎上腺素，[-]去甲腎上腺素，[-]多巴胺（有生物活性）,0.1M的HCl1×2×2.5mlCONTROL1+2質(zhì)控品1+2即用,含:[-]腎上腺素，[-]去甲腎上腺素，[-]多巴胺（具有生物活性）,0.1M的HCl,具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標簽.1×250μLENZCONJCONC酶聯(lián)物濃縮型（100×）內(nèi)含：堿性磷酸酶標記的抗體，Tris緩沖液，HCl，0.01%的NaN32×EXTRPLATE提取板（微孔板）每板24孔，包被了硼酸親和凝膠。1×60mlEXTRBUF提取緩沖液粉紅色，即用，內(nèi)含：0.016%的NaN32×1.25mlCOMTLYOCOMT凍干粉內(nèi)含：兒茶酚-氧位-甲基轉(zhuǎn)移酶（豬肝），NaN31×2mlCOMTADDCOMT添加劑內(nèi)含：人血漿，穩(wěn)定劑，0.01%硫柳汞。1×7mlANTISERUMDO去甲腎上腺素抗血清紫羅蘭色，即用，內(nèi)含：抗去甲腎上腺素抗體（兔），緩沖液，穩(wěn)定劑。2×1.25mlCOENZ酶聯(lián)復合物即用，內(nèi)含：S-腺苷-L-蛋白酸，穩(wěn)定劑。1×3mlENZBUF酶緩沖液即用，內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，穩(wěn)定劑。1×17mlRELEASEBUFRelease緩沖液黃色，即用，內(nèi)含：0.1M的HCl，指示劑。1×3mlACYLREAG?；噭┘从?，內(nèi)含：二甲基甲酰胺，乙醇。注意：有毒，高可燃性。1×50mlWASHBURCONC洗滌液濃縮型（10×）內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，吐溫，0.2%的NaN31×9×PNPPSUBSPNPP底物片內(nèi)含：對硝基苯磷酸（PNPP）1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液即用，內(nèi)含：二乙醇胺，水，0.05%的NaN31×15mlPNPPSTOPPNPP終止液即用，內(nèi)含：1M的NaOH，0.25M的EDTA3×FOIL粘性金屬板7、實驗所需器材（但試劑盒不提供）1）移液器（10；10-100；100-1000μL）2）軌道搖床（200-900rpm）3）旋渦混合器4）帶儲器的8通道移液器5）洗滌瓶，自動或半自動包被板清洗系統(tǒng)6）酶標儀7）雙蒸水或去離子水8）吸水紙，取樣吸頭，計時器8、實驗前說明注意用于96人份檢測色試劑盒成分可分成兩次進行。，下列所述體積為做48人份時所需要的量。8.1樣品的稀釋如果樣品中去甲腎上腺素濃度高于Z高標準品的應按照下列所述進行稀釋：樣品待稀釋稀釋液備注血漿去甲腎上腺素濃度高于Z高標準品中去甲腎上腺素的濃度雙蒸水提取步驟前尿液去甲腎上腺素濃度高于Z高標準品中去甲腎上腺素的濃度0.1N的HCl提取步驟前8.2樣品、標準品和質(zhì)控品的提?。ㄌ崛“澹謩硬僮靼妫?）將標準品、已稀釋好的質(zhì)控品、已稀釋好的尿液樣品各20μL和500μL血漿樣品加入到提取板相應的微孔中。除血漿樣品孔外，在所有的微孔中加入500μL雙蒸水以消除體積差別。2）在每一微孔中加入1000μL提取緩沖液3）蓋板。在軌道搖床（600-900rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取30min。在提取過程中，液體的表面應該會浸濕粘性金屬板，但液體的量不能超過微孔的2/3。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。4）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應液，在吸水紙上拍干。5）每孔加入2ml雙蒸水6）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。7）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應液，在吸水紙上拍干。8）每孔加入150μL提取緩沖液，再向每孔中加入50μL酰化試劑，立即混合均勻。9）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取20min。（無需蓋板）10）快速棄取孔內(nèi)反應液，在吸水紙上拍干。11）每孔加入2ml雙蒸水。12）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。13）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應液，在吸水紙上拍干。14）每孔加入300μLRelease緩沖液。15）在軌道搖床（400-500rpm）上18-25℃的環(huán)境下振蕩30min。（無需蓋板）已準備好的樣品應當在當天就進行檢測。如果不行的話，您可將提取板用粘性金屬板蓋好，在2-8℃的環(huán)境下可存放一夜。9、實驗步驟9.1COMT酶溶液的準備注意：COMT酶溶液應在使用前直接臨時配置。在COMT凍干粉中加入1.25ml雙蒸水，充分混和。再加入1.25ml酶聯(lián)溶液，然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加劑以充分混合溶解的COMT試劑*，COMT酶溶液Z后的體積為每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋渦混合器混合，但要避免氣泡產(chǎn)生，配置好的COMT溶液可在室溫下穩(wěn)定存放1小時。*如果只需要一定量的COMT溶液，則剩余的COMT溶液應立即凍存于-20℃的環(huán)境下。COMT溶液可在此環(huán)境下穩(wěn)定存放1-2個月。9.2樣品、標準品和質(zhì)控品的酶分化注意如果要檢測腎上腺素和去甲腎上腺素，我們建議您先檢測腎上腺素。如果使用自動置換型衣液器加樣，請將取樣吸頭內(nèi)的殘余液體加入到提取板的相應微孔內(nèi)，否則剩余的提取液不夠去甲腎上腺素檢測用。將提取板放到有一定坡度的位置上。實驗開始前，確定好腎上腺素和去甲腎上腺素的檢測孔并標記好。9.3尿液與血漿中的去甲腎上腺素1在每一微孔內(nèi)加入25ul臨時配制的COMT酶溶液，輕輕振板以使溶液混合均勻。2將提取好的標準品、質(zhì)控品和樣品分別25ul加入到相應的微孔內(nèi)。在此步驟中，我們可以將取樣吸頭直接深入到COMT溶液里。加樣后，溶液顏色變成粉色，輕輕振板以使溶液混合均勻。3向每一微孔中加入50ul去甲腎上腺素抗血清（藍色）。4蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育120min。8.4凍干粉或濃縮成分的準備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性20ml洗滌液180ml雙蒸水1：10充分混合2-8℃4W60μL酶聯(lián)物6ml洗滌緩沖液（已稀釋好）1：101臨時配置，僅能使用一次，混合時避免氣泡產(chǎn)生18-25℃30min4PNPP底物片10.7mlPNPP底物緩沖液臨時配置，僅能使用一次18-25℃10min9.5ELISA實驗步驟1）移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應液，每孔用250-300ul稀釋好的洗滌液洗板4次。Z后在吸水紙上拍干以除去殘余液體。2）在每一微孔中加入100ul臨時配置好的酶聯(lián)物。3）蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育60min。4）移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應液，每孔用250-300ul稀釋好的洗滌液洗板4次。Z后在吸水紙上拍干一除去殘余液體。5）如果可以的話，使用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時間間隔應當相同，使用自動置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。6）在每一微孔中加入200ul底物液。7）不要蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育60min。8）在每一微孔內(nèi)加入50ulPNPP終止液以終止酶反應。輕輕振板以使溶液混合均勻。9）加終止液后60min內(nèi)405nm處讀取OD值。10、期望值實驗結(jié)果不能當作判斷任何ZL結(jié)果的**因素，疾病的判斷還應當與其它臨床觀察和診斷檢測相結(jié)合。以下結(jié)果為正常人群的正常值（5%-95%），建議每個實驗室讀確定自己的正常值范圍：尿液血漿μg/dnmol/dpg/mLnmol/L去甲腎上腺素＜90＜535＜600＜3.55本譯文僅供參考，詳情請以原文為準。ZGdu家總代理：深圳市科潤達生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口工業(yè)區(qū)太子路18號海景廣場11C研發(fā)基地：深圳市蛇口沿山路10號6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細]

  2018-11-14 10:00

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• 多巴胺ELISA Kit使用說明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4多巴胺ELISAKit使用說明書（德國IBL：RE59161）1、應用范圍此試劑盒可用于人血漿和尿液中多巴胺的體外定量檢測，可手動操作，也可自動操作。進一步的研究表明：此試劑盒還可用于組織勻漿和細胞培養(yǎng)上清液的研究。2、前言說明兒茶酚氨類激素腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺主要由腎上腺髓質(zhì)、交感神經(jīng)系統(tǒng)和大腦產(chǎn)生。它們幾乎影響所有的組織，并與其它激素和神經(jīng)系統(tǒng)一起參與各種生理過程的調(diào)節(jié)。在許多疾病中，兒茶酚氨激素及其代謝產(chǎn)物間甲腎上腺素和去甲變腎上腺素的分泌量都會增加，因而這些激素可用于疾病的診斷。所以，這些激素的檢測對于疾病的診斷及神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤疾病的具有重要意義。它主要用于嗜鉻細胞瘤的診斷，當然也用于成神經(jīng)細胞瘤和神經(jīng)節(jié)細胞瘤的診斷。因為在實驗一開始時有提取步驟，所以用戶可使用各種各樣的動物材料進行實驗。如果用此試劑盒測大鼠、小鼠或其它動物，則兒茶酚氨的化學結(jié)構(gòu)與動物的相同。3、實驗原理此固相酶聯(lián)免疫吸附實驗利用的是ELISA的夾心法。微孔中包被了羊抗兔抗體。在溫育時間之內(nèi)，加入的溶液抗在體可直接與抗原分子上的一個表位結(jié)合。樣品中的抗原與酶標二抗（可與抗原分子上的不同表位結(jié)合）在包被孔中溫育。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結(jié)果可直接用標準曲線確定。4、貯存與穩(wěn)定性試劑盒和運輸環(huán)境和儲存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑的準備將在相關章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定，前提是要將試劑盒用袋子密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下。5、樣品的采集與儲存注意人體內(nèi)的兒茶酚氨和間甲腎上腺素的釋放會受到一些食品和藥物的影響。因此在樣品采集前72小時內(nèi)病人應禁止服用下列食物和藥品：維生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMTYZ劑，還有降血壓類藥物。血漿（EDTA）注意血液采集后兩小時內(nèi)，將血液樣品冷藏于2-8℃的環(huán)境下直致離心獲取血漿。注意靜脈穿刺采集全血的常規(guī)注意事項。從采集到血液樣品的那一刻起到檢測時都應保持血液樣品的化學整體性。不要使用明顯溶血、黃疸血和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁，則在實驗前應當離心以除去所有的微粒物質(zhì)。貯存2-8℃≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性6h1個月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。收集病人24h內(nèi)的所有尿液，之后將其加入到10-15ml6N的HCl防腐劑中。貯存≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性6個月6、試劑盒成分注意試劑盒所提供的試劑足夠做96孔單孔檢測或48孔雙份檢測。注意此包被板也可用于檢測腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺。數(shù)量標志成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，單克?。?。1×6×2.5mlCALA-F標準品A-F腎上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml（0;8;27;82;273;819nmol/L）去甲腎上素:0;5.0;15;50;150;500ng/mL（0;30;89;296;887;2955nmol/L）多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL（0;78;228;750;2938;14688nmol/L）即用,內(nèi)含:腎上腺素-去甲腎上腺素-多巴胺（具有生物活性）,0.1M的HCl1×2×2.5mlCONTROL1+2質(zhì)控品1+2即用,含:腎上腺素-去甲腎上腺素-多巴胺（具有生物活性）,0.1M的HCl,具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標簽.1×250μLENZCONJCONC酶聯(lián)物濃縮型（100×）內(nèi)含：堿性磷酸酶標記的抗體，Tris緩沖液，HCl，0.01%的NaN34×EXTRPLATE提取板（微孔板）每板24孔，包被了硼酸親和凝膠。2×60mlEXTRBUF提取緩沖液粉紅色，即用，內(nèi)含：0.016%的NaN31×1.25mlCOMTLYOCOMT凍干粉內(nèi)含：兒茶酚-氧位-甲基轉(zhuǎn)移酶（豬肝），NaN31×2mlCOMTADDCOMT添加劑內(nèi)含：人血漿，穩(wěn)定劑，0.01%硫柳汞。1×7mlANTISERUMDO多巴胺抗血清紫羅蘭色，即用，內(nèi)含：抗多巴胺抗體（兔），緩沖液，穩(wěn)定劑。2×1.25mlCOENZ酶聯(lián)復合物即用，內(nèi)含：S-腺苷-L-蛋白酸，穩(wěn)定劑。1×3mlENZBUF酶緩沖液即用，內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，穩(wěn)定劑。4×13mlRELEASEBUFRelease緩沖液黃色，即用，內(nèi)含：0.1M的HCl，指示劑。2×3mlACYLREAG酰化試劑即用，內(nèi)含：二甲基甲酰胺，乙醇。注意：有毒，高可燃性。2×50mlWASHBURCONC洗滌液濃縮型（10×）內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，吐溫，0.2%的NaN31×9×PNPPSUBSPNPP底物片內(nèi)含：對硝基苯磷酸（PNPP）1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液即用，內(nèi)含：二乙醇胺，水，0.05%的NaN31×15mlPNPPSTOPPNPP終止液即用，內(nèi)含：1M的NaOH，0.25M的EDTA1×20mlHClHCl即用，內(nèi)含：0.1M的HCl3×FOIL粘性金屬板7、實驗所需器材（但試劑盒不提供）1）移液器（10；10-100；100-1000μL）2）軌道搖床（200-900rpm）3）旋渦混合器4）帶儲器的8通道移液器5）洗滌瓶，自動或半自動包被板清洗系統(tǒng)6）酶標儀7）雙蒸水或去離子水8）吸水紙，取樣吸頭，計時器9）樣品稀釋用試管。8、手動操作8.1實驗前說明注意用于96人份檢測色試劑盒成分可分成兩次進行。下列所述體積為做48人份時所需要的量。注意試劑盒中的質(zhì)控品和所有尿液樣品在使用前都必須在試管中用0.1M的HCl按1：5的比例進行稀釋（例如：20μL尿液+80μL0.1M的HCl）。標準品無需稀釋。8.2樣品的稀釋如果樣品中多巴胺濃度高于Z高標準品的應按照下列所述進行稀釋：樣品待稀釋稀釋液備注血漿多巴胺濃度高于Z高標準品中多巴胺的濃度雙蒸水提取步驟前尿液多巴胺濃度高于Z高標準品中多巴胺的濃度0.1N的HCl提取步驟前8.3樣品、標準品和質(zhì)控品的提取（提取板）1）將標準品、已稀釋好的質(zhì)控品、已稀釋好的尿液樣品各20μL和500μL血漿樣品加入到提取板相應的微孔中。除血漿樣品孔外，在所有的微孔中加入500μL雙蒸水以消除體積差別。2）在每一微孔中加入1000μL提取緩沖液3）蓋板。在軌道搖床（600-900rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取30min。在提取過程中，液體的表面應該會浸濕粘性金屬板，但液體的量不能超過微孔的2/3。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。4）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應液，在吸水紙上拍干。5）每孔加入2ml雙蒸水6）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。7）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應液，在吸水紙上拍干。8）每孔加入150μL提取緩沖液，再向每孔中加入50μL?；噭⒓椿旌暇鶆?。9）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取20min。（無需蓋板）10）快速棄取孔內(nèi)反應液，在吸水紙上拍干。11）每孔加入2ml雙蒸水。12）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。13）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應液，在吸水紙上拍干。14）每孔加入300μLRelease緩沖液。15）在軌道搖床（400-500rpm）上18-25℃的環(huán)境下振蕩30min。（無需蓋板）已準備好的樣品應當在當天就進行檢測。如果不行的話，您可將提取板用粘性金屬板蓋好，在2-8℃的環(huán)境下可存放一夜。8.4凍干粉或濃縮成分的準備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性25ml洗滌液225ml雙蒸水1：10充分混合2-8℃4W60μL酶聯(lián)物6ml洗滌緩沖液（已稀釋好）1：101臨時配置，僅能使用一次，混合時避免氣泡產(chǎn)生18-25℃5h4PNPP底物片10.7mlPNPP底物液臨時配置，僅能使用一次18-25℃5h9、實驗步驟（手動操作）9.1COMT酶溶液的準備注意：COMT酶溶液應在使用前直接臨時配置在COMT凍干粉中加入1.25ml雙蒸水，充分混和。再加入1.25ml酶聯(lián)溶液，然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加劑以充分混合溶解的COMT試劑*，COMT酶溶液Z后的體積為每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋渦混合器混合，但要避免氣泡產(chǎn)生，配置好的COMT溶液可在室溫下穩(wěn)定存放1小時。*如果只需要一定量的COMT溶液，則剩余的COMT溶液應立即凍存于-20℃的環(huán)境下。COMT溶液可在此環(huán)境下穩(wěn)定存放1-2個月。9.2樣品、標準品和質(zhì)控品的酶化注意如果使用自動置換型移液器，請將取樣吸頭內(nèi)的殘余液體加回到提取板相應的微孔內(nèi)。將提取板置于一斜坡位置比較適當?？蒲杏媒M織勻漿和細胞培養(yǎng)上清可按如下建議處理：細胞培養(yǎng)上清必須根據(jù)其培養(yǎng)基及其相應濃度進行處理：根據(jù)尿液樣品的操作說明（至少提取20ul上清液），未稀釋樣品的靈敏度大概為1.0ng/ml。如果基質(zhì)內(nèi)添加了血清（FCS），血漿（至少提取500ul上清）操作的靈敏度可以是5pg/ml。無高氯酸的組織勻漿可用做勻漿樣品，具體信息請咨詢IBL漢堡公司。9.3檢測尿液和血漿中的多巴氨1在包被板的每一微孔中加入75μL剛配置好的COMT酶溶液，輕輕振蕩。2在尿液樣品、標準品和質(zhì)控品的微孔中加入90μLRelease緩沖液（血漿樣品孔除外）。將已提取好的標準品、質(zhì)控品和尿液樣品分別10μL加入到相應的微孔中。將100ul提取好的血漿樣品加入到相應的微孔中。在此加樣步驟中，可直接將取樣吸頭伸入到COMT溶液中。溶液顏色變成粉色，輕輕振蕩。3在每一微孔中加入50ul多巴胺抗血清（紫色）。4蓋板，在振蕩器（400-600rpm）上室溫（18-25℃）溫育120min5移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應液，每孔用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。吸水紙上拍干以除去殘余液體。6在每一微孔中加入100ul臨時配置好的酶聯(lián)物。7蓋板，在振蕩器（400-600rpm）上室溫（18-25℃）溫育60min8移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應液，每孔用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。吸水紙上拍干以除去殘余液體。9如果可以的話，使用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時間間隔應當相同，使用自動置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。10在每一微孔中加入200ul底物液。11在振蕩器（400-600rpm）上室溫（18-25℃）溫育40min12在每一微孔中加入50ulPNPP終止液，輕輕振板以使溶液混合均勻。13加終止液后60min內(nèi)405nm處讀取OD值。（參考波長：620-650nm）10、自動操作步驟10.1實驗前說明注意用于96人份檢測色試劑盒成分可分成兩次進行。下列所述體積為做48人份時所需要的量。注意試劑盒中的質(zhì)控品和所有尿液樣品在使用前都必須在試管中用0.1M的HCl按1：5的比例進行稀釋（例如：20μL尿液+80μL0.1M的HCl）。標準品無需稀釋。10.2樣品的稀釋如果樣品中多巴胺濃度高于Z高標準品的應按照下列所述進行稀釋：樣品待稀釋稀釋液備注血漿多巴胺濃度高于Z高標準品中多巴胺的濃度雙蒸水提取步驟前尿液多巴胺濃度高于Z高標準品中多巴胺的濃度0.1N的HCl提取步驟前10.3樣品、標準品和質(zhì)控品的提?。ㄌ崛“澹?）將標準品、已稀釋好的質(zhì)控品、已稀釋好的尿液樣品各30μL和750μL血漿樣品加入到提取板相應的微孔中。除血漿樣品孔外，在所有的微孔中加入750μL雙蒸水以消除體積差別。2）在每一微孔中加入1000μL提取緩沖液3）蓋板。在軌道搖床（600-900rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取30min。在提取過程中，液體的表面應該會浸濕粘性金屬板，但液體的量不能超過微孔的2/3。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。4）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應液，在吸水紙上拍干。5）每孔加入2ml雙蒸水6）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。7）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應液，在吸水紙上拍干。8）每孔加入150μL提取緩沖液，再向每孔中加入50μL酰化試劑，立即混合均勻。9）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取20min。（無需蓋板）10）快速棄取孔內(nèi)反應液，在吸水紙上拍干。11）每孔加入2ml雙蒸水。12）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結(jié)果。13）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應液，在吸水紙上拍干。14）每孔加入450μLRelease緩沖液。15）在軌道搖床（400-500rpm）上18-25℃的環(huán)境下振蕩30min。（無需蓋板）已準備好的樣品應當在當天就進行檢測。如果不行的話，您可將提取板用粘性金屬板蓋好，在2-8℃的環(huán)境下可存放一夜。10.4凍干粉或濃縮成分的準備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性25ml洗滌液450ml雙蒸水1：10充分混合2-8℃4W150μL酶聯(lián)物15ml洗滌緩沖液（已稀釋好）1：101臨時配置，僅能使用一次，混合時避免氣泡產(chǎn)生18-25℃5h4PNPP底物片10.7mlPNPP底物液臨時配置，僅能使用一次18-25℃5h11、實驗步驟（自動操作）11.1COMT酶溶液的準備注意：COMT酶溶液應在使用前直接臨時配置在COMT凍干粉中加入1.25ml雙蒸水，充分混和。再加入1.25ml酶聯(lián)溶液，然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加劑以充分混合溶解的COMT試劑*，COMT酶溶液Z后的體積為每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋渦混合器混合，但要避免氣泡產(chǎn)生，配置好的COMT溶液可在室溫下穩(wěn)定存放1小時。*如果只需要一定量的COMT溶液，則剩余的COMT溶液應立即凍存于-20℃的環(huán)境下。COMT溶液可在此環(huán)境下穩(wěn)定存放1-2個月。11.2實驗步驟在使用自動方法做實驗時，我們建議按1：10的比例預先稀釋提取好的標準品、質(zhì)控品和尿液樣品（如果是手動操作則用Release緩沖液進行稀釋）。如果稀釋了，第二個步驟可簡化為：將已提取好的血漿樣品、已提取好的標準品（按1：10的比例預先稀釋）、質(zhì)控品和尿液樣品各100μL加入到微孔中。在進行預稀釋時，應當考慮到自動操作的死容積。1）在包被板的每一微孔中加入75μL剛配置好的COMT酶溶液，輕輕振蕩。2）在尿液樣品、標準品和質(zhì)控品的微孔中加入90μLRelease緩沖液（血漿樣品孔除外）。將已提取好的標準品、質(zhì)控品和尿液樣品分別10μL加入到相應的微孔中。在此加樣步驟中，可直接將取樣吸頭伸入到COMT溶液中。溶液顏色變成粉色，輕輕振蕩。3）每孔中加入50μL多巴胺抗血清。4）蓋板。在振蕩器（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下溫育120min5）棄取孔內(nèi)反應液，每孔用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。6）每孔加入100μL酶聯(lián)物7）蓋板。在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下溫育60min8）棄取孔內(nèi)反應液，用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。9）加底物液和終止液時，其時間間隔應相同10）每孔加入200μL底物液11）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下溫育40min。如果自動操作時的溫度超過25℃時，則應相應的將溫育時間縮短至30min。12）每孔加入50μLPNPP終止液以終止底物反應，輕輕振蕩包被板以充分混合試劑成分。13）加終止液后60min之內(nèi)405nm處讀取OD值。（參考波長：620-650nm）12、期望值實驗結(jié)果不能當作判斷任何ZL結(jié)果的**因素，疾病的判斷還應當與其它臨床觀察和診斷檢測相結(jié)合。以下結(jié)果為正常人群的正常值（5%-95%），建議每個實驗室讀確定自己的正常值范圍：尿液血漿μg/dnmol/dpg/mLnmol/L多巴胺＜600＜3917＜100＜0.65本譯文僅供參考，詳情請以原文為準。ZGdu家總代理：深圳市科潤達生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口工業(yè)區(qū)太子路18號海景廣場11C研發(fā)基地：深圳市蛇口沿山路10號6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細]

  2018-11-14 10:00

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  2015-03-23 00:00

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• 褪黑激素ELISA Kit使用說明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4褪黑激素ELISAELISAKit使用說明書（德國IBL：RE54021）1、應用范圍此試劑盒可用于人血清和血漿中褪黑激素的體外定量檢測。2、前言說明松果體因其在光周期現(xiàn)象中的重要作用，已經(jīng)被人們認為是神經(jīng)內(nèi)分泌的傳感器。松果體主要分泌的激素是：N-乙酰-5-甲氧色胺和褪黑激素，褪黑激素一般是由色氨酸合成而來的。血漿褪黑激素的濃度可在夜間達到Z高。褪黑激素特有的波動變化可以反映出一些關于時間變化的信息，如夜晚的長短。褪黑激素的分泌會受到神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。交感神經(jīng)系統(tǒng)在調(diào)節(jié)褪黑激素分泌方面發(fā)揮有重要作用，它主要是通過釋放去甲腎上腺素來調(diào)節(jié)的。據(jù)報道，褪黑激素分泌方式和水平的變化與人的一些生理狀態(tài)一致，如：失眠、時差感、情緒低落、壓力大、精神分裂癥、丘腦下部性閉經(jīng)、妊娠、神經(jīng)想食欲缺乏、某些癌癥、免疫系統(tǒng)紊亂和青春期性成熟的影響。大多數(shù)循環(huán)褪黑激素都可在肝內(nèi)代謝成6-羥基褪黑激素，之后變成6-硫酸褪黑激素而隨尿液排除。尿液中6-羥基褪黑激素硫酸鹽的濃度與血液中褪黑激素的總水平有很好的相關性。3、實驗原理此ELISA試劑盒利用的是競爭法的原理。生物素和非生物素標記的抗原競爭性結(jié)合包被板上有限的抗體結(jié)合位點。生物素抗原結(jié)合到抗體上的量與樣品中抗原的量成反比。系統(tǒng)達到平衡后，洗板除去游離的生物素抗原，結(jié)合到抗體上的生物素抗原可以用抗生物素堿性磷酸酶標記物和對硝基苯磷酸底物檢測出來。用已知的標準品數(shù)據(jù)做一條標準曲線，將未知樣品的酶活性與標準曲線進行比較就可以定量出未知樣品的量。4、儲存與穩(wěn)定性試劑盒必須在2-8℃的環(huán)境下運輸和儲存，避免太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑準備將在相關章節(jié)中闡述,如果將包被板密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下時,試劑在有效期內(nèi)穩(wěn)定。用甲醇洗提后的提取柱可用于其它樣品的提取或儲存于2-8℃的環(huán)境下。提取柱可重復使用4次。5、樣品的采集與儲存血清，血漿（EDTA，肝素）按照靜脈穿刺的常規(guī)注意事項采集樣品，血液樣品自采集到實驗時都必須保證其化學完整性。不要使用明顯溶血、黃疸和脂血樣品?；鞚岬臉悠窇斣趯嶒為_始前離心以除去所有的顆粒性物質(zhì)。儲存2-8℃≤-20℃≤-70℃避免太陽直射，避免反復凍融。穩(wěn)定性24小時3個月1年6、試劑盒成分數(shù)量標記成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，多克隆）。3×2mlBIOTINLYO褪黑激素生物素，凍干，內(nèi)含穩(wěn)定劑。3×2mlANTISERUMLYO褪黑激素硫酸鹽抗血清，凍干粉，內(nèi)含抗血清（兔，多克?。┖头€(wěn)定劑。1×250ulENZCONJCONC酶聯(lián)物，80倍濃縮，內(nèi)含堿性磷酸酶標記的抗生物素抗體（羊）、Tris緩沖液和穩(wěn)定劑。1×6×2mlCALA-FLYO標準品A-F，凍干粉，內(nèi)含穩(wěn)定劑，提取濃度請見試劑瓶標簽或QC質(zhì)控品。1×2×2mlCONTROL1+2LYO質(zhì)控品1+2，凍干粉，內(nèi)含穩(wěn)定劑，濃度/可接受范圍請見試劑瓶標簽。1×50mlASSAYBUFCONC檢測緩沖液，10倍濃縮，內(nèi)含磷酸緩沖液、吐溫和穩(wěn)定劑。1×9×PNPPSUBSPNPP底物片，密封于鋁鉑金屬袋中，內(nèi)含對硝基苯硫酸鹽。1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液，即用，內(nèi)含二乙醇氨和水。1×15mlPNPPSTOPPNPP終止液，即用，內(nèi)含1M的NaOH和0.25M的EDTA。2×10EXTRCOL提取柱，即用，C18RP，1m3/100mg。另需提取柱可從IBL定夠（編號：KEME761）3×FOIL粘性金屬板7、實驗所需器材但試劑盒不提供1）移液器，體積：50;500ul2）試管（12×75mm）3）軌道振蕩器（400-600rpm）4）旋渦混合器5）帶儲器的8道移液器6）洗滌瓶，自動或半自動洗板機7）離心機（冷凍離心機更適宜）：200-500×g，也可選用多頭抽真空裝置（例如：Mallinekrodt-Baker或Waters）。8）甲醇（HPLC級）9）蒸發(fā)離心機10）可在405nm處讀數(shù)的酶標儀（參考波長600-650nm）11）蒸餾水或去離子水12）吸水紙、取樣吸頭和計時器8、實驗前的準備說明注意用于96人份檢測色試劑盒成分可分成3次進行。下列所述體積為檢測32人份時所需要的量。8.1凍干或濃縮成分的準備稀釋/溶解成分稀釋劑比例備注儲存穩(wěn)定性15ml檢測緩沖液150ml雙蒸水1：102-8℃4周標準品和質(zhì)控品2.0ml雙蒸水靜置15min，混合時避免氣泡≤-20℃直至有效期褪黑激素生物素2.0ml蒸餾水靜置15min，混合時避免氣泡臨時配置,只能使用一次褪黑激素抗血清2.0ml蒸餾水靜置15min，混合時避免氣泡70ul酶聯(lián)物5.6ml已稀釋的檢測緩沖液1:813PNPP底物片8mlPNPP底物緩沖液10ml未稀釋甲醇100ml蒸餾水10%（v/v）如果溶液的需要量比較大,應該將試管內(nèi)的溶液混合.避免反復凍融。8.2樣品的稀釋如果懷疑樣品中的褪黑激素濃度比Z高標準品的高，必須將樣品在提取步驟前用檢測緩沖液進行進一步的稀釋。8.3樣品、標準品和質(zhì)控品的提?。ㄌ崛≈┌凑沾瞬襟E進行提取，提取量大約為90-1**%。為了避免柱子堵塞，提取樣品前將樣品過濾或離心一下。注意每份樣品、標準品和質(zhì)控品都必須提取，提取必須提前進行。干燥的提取物（甲醇蒸發(fā)后）可在2-8℃或-20℃下儲存24個小時。用甲醇洗提后，提取柱就可以用于下一份樣品的提取或是存放到2-8℃的環(huán)境下。提取柱可以反復使用4次。如果是重復使用，在再次從A.1開始（柱的調(diào)制）。A、標準版本：離心與蒸發(fā)離心步驟1.柱的調(diào)制1將提取柱放到聚苯乙烯或玻璃試管中（12×75mm）。2在提取柱中加入2×1ml的甲醇（未稀釋的），200g離心1min使溶劑通過提取柱，棄取洗出液。3向提取柱中加入2×1ml的蒸餾水，200g離心1min使溶劑通過提取柱，棄取洗出液。4為了避免柱子變干，請立即提取樣品。2.樣品提取5將提取柱放到相應的標記聚苯乙烯或玻璃試管中（12×75mm）。6向提取柱中加入0.5ml標準品、質(zhì)控品和樣品，200g離心1min使溶劑通過提取柱，棄取洗出液。3、洗滌7向提取柱中加入2×1ml的10%甲醇（蒸餾水稀釋），500g離心1min使溶劑通過提取柱，棄取洗出液。4、提取物的洗脫8將提取柱放到新的標記聚苯乙烯或玻璃試管中（12×75mm）9向提取柱中加入1ml未稀釋的甲醇，200g離心1min使溶劑通過提取柱。10將提取柱從試管中移出，避免液滴還停留在柱子中。將柱子用于下一份樣品的提取或存放于2-8℃的環(huán)境下。提取柱可重復使用四次。5.提取物的蒸發(fā)和重新配置11用蒸發(fā)離心機將甲醇蒸發(fā)掉。12用0.15ml的蒸餾水重新稀釋配置樣品13旋渦混和1分鐘，并立即檢測樣品。B、選擇性版本：用多頭抽真空裝置代替離心機提取步驟仍然按照A1-5進行，柱子不變。用真空和≤5ml/min的流速使溶劑通過柱子。樣品和提取物用≤2ml/min的流速。用蒸發(fā)離心機或氮氣蒸發(fā)干燥溶劑。9、實驗步驟1將提取好的標準品、質(zhì)控品和樣品分別50ul加入到相應的微孔中。2在每一微孔中加入50ul褪黑激素生物素。3在每一微孔內(nèi)加入50ul褪黑激素抗血清。4蓋板，輕輕震板，2-8℃下溫育14-20小時。5移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應液，每孔用250ul稀釋好的檢測緩沖液洗板3次，吸水紙上拍干以除出殘余液體。6在每一微孔中加入150ul臨時配置好的酶聯(lián)物。7蓋板，室溫（18-25℃）軌道振蕩器上（500rpm）溫育120min。8大約在溫育結(jié)束10分鐘前準備好PNPP底物液。9移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應液，每孔用250ul稀釋好的檢測緩沖液洗板3次，吸水紙上拍干以除出殘余液體。10如果有8道移液器，請用8道移液器加底物液和終止液，加底物液和終止液的時間間隔應當相同。使用主動置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。11在每一微孔中加入200ul臨時配置好的PNPP底物液。12室溫（18-25℃）軌道振蕩器上（500rpm）溫育20-40min。13在每一微孔中加入50ulPNPP終止液，輕輕震板以使溶液混合均勻。14加終止液后60min內(nèi)在405nm處讀取OD值。（參考波長：600-650nm）10、結(jié)果計算在半對數(shù)坐標紙上或自動計算的方法，以標準品的OD值（Y軸，線性）對其濃度（X軸，對數(shù)）做一條標準曲線。使用三次回歸、四參數(shù)或雙對數(shù)曲線方程可以得到更好的標準曲線。在推算標準曲線時，應當充分利用好每一個標準品數(shù)值（明顯逸出的數(shù)值應當被忽略，再使用更加合理的數(shù)值代替它）。樣品的濃度可以從標準曲線上直接讀取。從坐標紙上讀取結(jié)果時應當把起始的稀釋倍數(shù)考慮進去。將稀釋了的樣品結(jié)果乘以稀釋因子即可得到其相應的結(jié)果。樣品中抗體濃度高于Z高標準品的樣品，應當按實驗前準備說明所述的方法進行稀釋，并重新檢測。轉(zhuǎn)換系數(shù)：褪黑激素（pg/ml）×4.30=pmol/l典型標準曲線（例子：不能用來定量）標準品褪黑激素（pg/ml）平均OD值OD/ODmax（%）A0.01.517100B3.01.38391.1C101.21480.1D300.86757.1E1000.43428.6F3000.26017.111、期望值實驗結(jié)果不能當作確定ZL結(jié)果的**因素，疾病的判斷還應當與其它臨床觀察和診斷檢測相結(jié)合。對明顯健康的一組人群進行研究發(fā)現(xiàn)，人體內(nèi)的褪黑激素水平有著明顯的生理周期變化，褪黑激素白天的水平很低，而晚上的水平則很高，而且個體之間的差異也很大。此外，褪黑激素的水平也與年齡有關系，其Z高濃度是在嬰兒（3歲）樣品中發(fā)現(xiàn)的。對6個明顯健康獻血者的褪黑激素生理周期進行研究。褪黑激素大概在白天下午四點Zdi，其平均值是4.6pg/ml；早晨4點達到**，平均值為77.5pg/ml。健康個體之間的褪黑激素Z高值差異很大，建議每個實驗室都確定自己實驗室的正常值范圍。本譯文僅供參考，詳情請以原文為準。ZGdu家總代理：深圳市科潤達生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口太子路18號海景廣場11C研發(fā)ZX：深圳市蛇口沿山路10號6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細]

  2018-11-14 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 大鼠24S-羥基膽固醇ELISA試劑盒使用說明書

  檢測范圍：96T1pg/ml-60pg/ml使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中24S-羥基膽固醇含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠24S-羥基膽固醇水平。用純化的大鼠24S-羥基膽固醇抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入24S-羥基膽固醇，再與HRP標記的24S-羥基膽固醇抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的24S-羥基膽固醇呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠24S-羥基膽固醇濃度。[詳細]

  2018-09-19 10:01

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• 價格人β干擾素（IFN-β）ELISA Kit使用說明書

  價格人β干擾素（IFN-β）ELISA Kit使用說明書[詳細]

  2015-03-20 00:00

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• 褪黑激素硫酸鹽ELISA Kit使用說明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4褪黑激素硫酸鹽ELISAKit使用說明書（德國IBL：RE54031）1、應用范圍此試劑盒可用于人尿液中褪黑激素硫酸鹽（又叫6-羥基褪黑激素硫酸鹽和6-硫酸褪黑激素）的體外定量檢測。2、前言說明松果體因其在光周期現(xiàn)象中的重要作用，已經(jīng)被人們認為是神經(jīng)內(nèi)分泌的傳感器。松果體主要分泌的激素是：N-乙酰-5-甲氧色胺和褪黑激素，褪黑激素一般是由色氨酸合成而來的。血漿褪黑激素的濃度可在夜間達到**。褪黑激素特有的波動變化可以反映出一些關于時間變化的信息，如夜晚的長短。褪黑激素的分泌會受到神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。交感神經(jīng)系統(tǒng)在調(diào)節(jié)褪黑激素分泌方面發(fā)揮有重要作用，它主要是通過釋放去甲腎上腺素來調(diào)節(jié)的。據(jù)報道，褪黑激素分泌方式和水平的變化與人的一些生理狀態(tài)一致，如：失眠、時差感、情緒低落、壓力大、精神分裂癥、丘腦下部性閉經(jīng)、妊娠、神經(jīng)想食欲缺乏、某些癌癥、免疫系統(tǒng)紊亂和青春期性成熟的影響。大多數(shù)循環(huán)褪黑激素都可在肝內(nèi)代謝成6-羥基褪黑激素，之后變成6-硫酸褪黑激素而隨尿液排除。尿液中6-羥基褪黑激素硫酸鹽的濃度與血液中褪黑激素的總水平有很好的相關性。3、實驗原理此ELISA試劑盒利用的是競爭法的原理。樣品中未知量的抗原和一定量的酶標抗原競爭性結(jié)合到包被在微孔中的抗體結(jié)合位點上。溫育后洗板以終止競爭反應。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強度與樣品中抗原的量成反比。樣品的實驗結(jié)果可以從標準曲線上直接獲取。4、儲存與穩(wěn)定性試劑盒必須在2-8℃的環(huán)境下運輸和儲存，避免太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑準備將在相關章節(jié)中闡述。如果將包被板密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下時，試劑在有效期內(nèi)穩(wěn)定。5、樣品的采集與儲存尿液實驗必須使用自然產(chǎn)生的尿液，也可使用24小時內(nèi)產(chǎn)生的尿液。收集病人24小時內(nèi)產(chǎn)生的尿液，將它加入到含10-15ml6NHCl防腐劑的容器中。為了計算結(jié)果，請確定尿液的總體積。實驗開始前請先將樣品離心。儲存2-8℃2-8℃避免太陽直射，避免反復凍融穩(wěn)定性4天15年6、試劑盒成分數(shù)量標記成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，多克?。?。1×5mlANTISERUM褪黑激素硫酸鹽抗血清，即用，內(nèi)含：兔抗血清、Tris緩沖液和0.01%的硫柳汞1×0.2mlENZCONJCONC酶聯(lián)物，40倍濃縮，內(nèi)含過氧酶標記的褪黑激素硫酸鹽、Tris緩沖液和1%的硫柳汞。1×7×0.1mlCALA-G標準品A-G，0;1.7;5.2;15.6;46.7;140;420ng/mL0;5.2;15.9;47.6;142;427;1281nmol/L。即用，內(nèi)含褪黑激素硫酸鹽、Tris緩沖液和0.01%的硫柳汞。1×2×0.1mlCONTROL1+2質(zhì)控品1+2，即用，內(nèi)含0.02%的；硫柳汞。具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標簽。1×60mlASSAYBUFCONC檢測緩沖液，紅色，即用，內(nèi)含Tris緩沖液、BSA和0.01%的硫柳汞。1×50mlWASHBUFCONC洗滌液，20倍濃縮，內(nèi)含磷酸緩沖液、吐溫和0.1%的硫柳汞。1×0.9mlTMBSUBSCONCTMB底物液，31倍濃縮，內(nèi)含TMB、緩沖液和穩(wěn)定劑。1×27mlTMB緩沖液TMB底物緩沖液，儲存時避免太陽直射，即用，內(nèi)含H2O2、檸檬酸鹽緩沖液和穩(wěn)定劑。1×12mlTMBSTOPTMB終止液，即用，1M的H2SO4。3×FOIL粘性金屬板7、實驗所需器材但試劑盒不提供1）移液器，體積：10;50;100;1000ul2）試管（12×75mm）3）試管架4）振蕩器（500rpm）5）旋渦混合器（500rpm）6）帶儲器的8道移液器7）洗滌瓶，自動或半自動洗板機8）酶標儀（參考波長：600-650nm）9）蒸餾水或去離子水10）吸水紙、取樣吸頭和計時器8、實驗前的準備說明8.1凍干或濃縮成分的準備稀釋/溶解成分稀釋劑比例備注儲存穩(wěn)定性15ml洗滌液300ml雙蒸水1：2018-25℃將晶體溶解掉2-8℃4周50ul酶聯(lián)物2ml檢測緩沖液1:41臨時配置,只能使用一次18-25℃30min300ulTMB底物液9mlTMB底物緩沖液1：31臨時配置,只能使用一次18-25℃10min8.2標準品、質(zhì)控品和病人尿液樣品的稀釋1將標準品、質(zhì)控品和病人尿液樣品分別10ul加入到聚苯乙烯或聚丙烯或玻璃試管中，避免太陽直射。2在每一試管中加入500ul檢測緩沖液，旋渦混合。褪黑激素硫酸鹽濃度高于Z高標準品濃度的樣品必須用檢測緩沖液進行進一步的稀釋。9、實驗步驟1將已稀釋好的標準品、質(zhì)控品和病人樣品分別50ul加入到相應的微孔中。2在每一微孔中加入50ul臨時配置好的酶聯(lián)物。3在每一微孔內(nèi)加入50ul褪黑激素硫酸鹽抗血清。4蓋板，室溫（18-25℃）包被板振蕩器（500rpm）溫育2小時。5在溫育快要結(jié)束的10分鐘前，請將TMB底物液準備好。6移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應液，每孔用250ul稀釋好的洗滌液洗板4次，吸水紙上拍干以除出殘余液體。7如果可以的話，請用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時間間隔應當相同，使用8在每一微孔中加入200ulTMB底物液。9室溫（18-25℃）包被板振蕩器（500rpm）溫育30min。10在每一微孔中加入100ulTMB終止液，輕請振板以混合溶液。11加終止液后60min內(nèi)在450nm處讀取OD值。10、期望值實驗結(jié)果不能當作確定ZL結(jié)果的**因素，疾病的判斷還應當與其它臨床觀察和診斷檢測相結(jié)合。以下為明顯正常人群褪黑激素硫酸鹽的正常值：年齡數(shù)目褪黑激素硫酸鹽24小時尿液（ug）夜間尿液（ug/h）平均值90%的比例平均值90%的比例20-352636.815.6-58.12.80.9-5.636-501729.69.9-52.92.10.6-3.651-651620.412.3-32.81.50.9-2.5＞1615.87.5-32.71.00.3-2.3建議每個實驗室讀確定自己的正常值范圍本譯文僅供參考，詳情請以原文為準。ZGdu家總代理：深圳市科潤達生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口太子路18號海景廣場11C研發(fā)ZX：深圳市蛇口沿山路10號6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細]

  2018-11-14 10:00

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• 去甲變腎上腺素ELISA Kit使用說明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4去甲變腎上腺素ELISAKit使用說明書（德國IBL：RE59171）前言說明兒茶酚胺類腎上腺素、去甲腎上腺素、多巴胺都是在腎上腺髓質(zhì)、交感神經(jīng)系統(tǒng)和腦中合成的。它們幾乎影響所有的組織，并與其它激素和神經(jīng)系統(tǒng)一起參與各種生理過程的調(diào)節(jié)。因為兒茶酚胺類物質(zhì)以及它們的代謝產(chǎn)物變腎上腺素和去甲變腎上腺素在許多疾病中的分泌都會增加，因此對它們進行檢測可用于這些疾病的診斷。在這一實驗中，診斷和神經(jīng)系統(tǒng)的續(xù)發(fā)性腫瘤都具有特殊的重要性。這一技術(shù)主要用于嗜鉻細胞瘤、神經(jīng)細胞瘤和神經(jīng)節(jié)細胞瘤的診斷檢測。10%的嗜鉻細胞瘤表現(xiàn)為惡性增長。而在良性腫瘤中可發(fā)現(xiàn)兒茶酚胺類物質(zhì)及它們的代謝產(chǎn)物變腎上腺素和去甲變腎上腺素都會增加。1、應用范圍此酶免試劑盒可用于人體尿液中去甲變腎上腺素的體外定量檢測,可手動操作也可自動操作.2、實驗原理此ELISA試劑盒利用的是競爭法原理，生物素標記抗原和未用生物素標記抗原競爭結(jié)合一定量的抗體結(jié)合位點。結(jié)合到抗體上生物素標記抗原的量與樣品中被分析物的濃度成反比。反應系統(tǒng)達到平衡后，未結(jié)合的生物素標記的抗原用洗滌液洗去。以抗生物素堿性磷酸酶作為標記物，以PNPP（對硝基苯酚磷酸鹽）作為底物液來檢測結(jié)合到抗體上的生物素抗原的量。將未知物的酶反應活性和已知標準品的反應曲線相比較，可以得到未知物的量。3、意事項和預防措施1）此試劑盒僅用于體外診斷和專業(yè)人士使用。2）在檢測開始之前，仔細和完整的閱讀說明書，使用試劑盒提供的包裝插件的有效版本，確保所有的程序都清楚。尋求更多信息（比如：臨床背景，檢測操作，自動化操作說明，可選擇的軟件，文獻等等），請查看IBL公司主頁。3）如果試劑盒有破壞的請與IBL公司聯(lián)系或是提交你的申請，但自您拿到試劑盒后Z遲不超過一個星期。檢測時請不要使用已被損害的試劑，以確保自身安全。4）按照批號和有效期，不混合使用不同批號的試劑，也不要使用過期的試劑。5）遵守好的實驗準則和安全指南。穿實驗服，帶橡皮手套，有必要時請戴護目鏡。6）此試劑盒中含有會傷害眼睛和皮膚的有害試劑。請閱讀材料來源和標簽獲取詳細信息。產(chǎn)品的材料安全數(shù)據(jù)單能夠從IBL公司主頁上下載，也可直接咨詢IBL公司獲取。7）根據(jù)國家生物有害物質(zhì)及安全條例，所有化學藥品和準備或使用過的試劑都應當做有害物質(zhì)進行處理。8）不要接觸終止液，以免造成皮膚損傷或著燒。4、存與穩(wěn)定性試劑盒和運輸環(huán)境和儲存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑的準備將在相關章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定，前提是要將試劑盒用袋子密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下。5、樣品的采集與貯存注意人體內(nèi)的兒茶酚氨和間甲腎上腺素的釋放會受到一些食品和藥物的影響。因此在樣品采集前72小時內(nèi)病人應禁止服用下列食物和藥品：維生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMTYZ劑，還有降血壓類藥物。尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。將病人24h內(nèi)的所有尿液都收集到，并混合于含10-15ml6N的HCl防腐劑的試劑瓶中。貯存≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性6個月6、試劑盒成分注意試劑盒有足夠做96份單孔檢測或48份雙孔檢測或間甲腎上腺素和去甲變腎上腺素共同檢測時所需的試劑成分數(shù)量標記成分1×50mLASSAYBUFCONC檢測緩沖液，10倍濃縮，內(nèi)含磷酸緩沖液，BSA（牛血清白蛋白），1%的NaN31×2.25mLACYLREAG?；噭从?，內(nèi)含二甲基甲酰胺1×10mLINDICATIORBUF指示劑緩沖液，紫色，即用，內(nèi)含Tris緩沖液和苯酚紅（pH小于7.5時顏色會發(fā)生變化）。2×50×HYDRTUB水解試管，可處理的聚苯乙烯試管1×20mLHClHCl，即用，內(nèi)含0.1MHCl1×12×8MTP包被板，可拆分，包被有抗兔IgG（羊，多克?。?×7×0.35mLCALA-G標準品，A-G含去甲變腎上腺素和0.1M的HCl0;77;192;480;1200;3000;7500μmol/L0;0.42;1.05;2.63;6.56;16.4;41.0μmol/L1×2×0.5mLCONTROL1+2質(zhì)控1+2，即用，濃度及允許范圍請見標簽3×BIOTINLYO去甲變腎上腺素生物素（凍干品），內(nèi)含去變甲狀腺生物素,Tris緩沖液,<0.1%NaN3（可再生）1×7mLANTISERUM去甲變腎上腺素抗血清，內(nèi)含含抗血清（兔）,磷酸緩沖液,0.1%NaN31×250μlENZCONJCONC酶聯(lián)物（100×），含抗生物素抗體,并聯(lián)結(jié)到堿性磷酸酶上,Tris緩沖液,0.01%NaN39×PNPPSUBSPNPP底物片，含PNPP1×27mLPNPPBUFPNPP底物緩沖液，含二乙醇胺、水和0.05%NaN31×15mLPNPPSTOPPNPP終止液，即用，內(nèi)含1M的NaOH和0.25M的EDTA。1×50mLWASHBUFCONC洗滌液（10×），含Tris緩沖液,HCL,吐溫,0.2%NaN33×FOIL粘性金屬板7、實驗所需器材（但試劑盒不提供）1）移液器，體積：10;50;100;1000ul2）玻璃試管（12×75mm）3）振蕩器（200-900rpm）4）旋渦混合器5）水浴箱，90℃6）帶試劑儲器的8孔移液器7）洗滌瓶，自動或半自動包被板洗滌系統(tǒng)。8）可在405nm處讀數(shù)的酶標儀（參考波長：600-650nm）9）雙蒸水或去離子水10）吸水紙，取樣吸頭和計時器8、注意事項1）樣品的不合理處理及實驗操作的任何改動都將影響實驗結(jié)果。取樣體積、溫育時間、欲處理步驟都必須嚴格按說明進行。只能使用標準移液器和標準設備。2）一旦實驗開始，所有的步驟都必須完整的進行下去，切勿中斷。確保所有試劑、材料和設備都已準備好。把所有試劑和樣品都平衡至18-25℃，在使用前，輕輕搖動液體試劑和樣品，試劑混合過程時要避免產(chǎn)生氣泡。3）請勿接觸試劑、移液器、微孔/試管。加試劑和樣本時，請使用新的吸頭，以避免交叉污染。不用的試劑應用蓋子蓋好，以免重復使用。4）我們建議對樣品進行雙份檢測，以便能糾正潛在的滴定錯誤5）用定標儀對反應板進行校準。6）溫育時間會影響實驗結(jié)果。微孔加樣的順序和時間都必須一致。建議使用8孔移液器加樣。7）包被板的清洗很重要，清洗不合理將會導致錯誤的實驗結(jié)果。建議使用多孔移液器或自動包被板清洗系統(tǒng)進行清洗。溫育期間避免微孔干燥，清洗和吸液時不要碰到包被板微孔。清洗時，確保所有的微孔都充滿蒸餾水，并且無殘留物。8）濕度會對包被孔產(chǎn)生影響，所以包被板未平衡到室溫時不要打開包裝。不使用的微孔應立即裝入含干燥劑的包裝袋中。9、實驗前的準備說明手動或自動操作參考說明注意這種96人份的試劑盒可分成3份獨立進行，以下體積為4條（32人份）一次檢測所需體積。如果想把標準品從7份減到6份，可以把標準品G棄取。而允許范圍相應的減少到3000μg/l。如果檢測是用了很多板條，則體積應相應改變。9.1凍干成分或濃縮成分的準備特別注意如果你使用甲狀腺ELISA試劑盒來同時檢測間甲腎上腺素和去甲變腎上腺素，請勿混合間甲腎上腺素和去甲變腎上腺素酶聯(lián)物。稀釋/溶解成分稀釋比例備注貯存穩(wěn)定性15mL檢測用緩沖液150mL雙蒸水1:102-8°C2周15mL洗滌液150mL雙蒸水1:102-8°C4周1瓶去甲變腎上腺素生物素2mL稀釋的檢測緩沖液臨時配制,僅使用一次,靜置5min,混合時避免氣泡.≤-20°C2個月60μl酶聯(lián)物6mL稀釋的檢測緩沖液1:101臨時配制,僅使用一次18-25°C5小時3PNPP底物片8mLPNPP底物緩沖液臨時配制,僅使用一次18-25°C5小時9.2總?cè)ゼ鬃兡I上腺素檢測用的尿液樣品、標準品和質(zhì)控品的水解（在水解試管中）注意水解這一步驟在總?cè)ゼ鬃兡I上腺素和總間甲腎上腺素的檢測中是必備的。而在游離去甲變腎上腺素和變腎上腺素的檢測中則無須水解。樣品被懷疑高于Z高標準的樣品必須在水解步驟前用0.1MHCL進行稀釋。9.2.1水解試管中樣品的準備1）將標準品、質(zhì)控品和尿液樣品各10μL加入到相應的水解試管中2）在每一試管中加入40μL0.1M的HCl。3）蓋好試管，90°C下水解1h（用溫度計測溫度）。之后平衡至室溫，旋渦混合。4）在每一試管中加入100μL指示劑緩沖液，旋渦混合。5）在每一試管中加入20μL的?；饔迷噭尤胫甘緞┖罅⒓凑鹗?，確保加入的?；噭┖驮嚬軆?nèi)物質(zhì)完全混合。6）蓋好試管，室溫下溫育15min。7）在每一試管中加入1mL稀釋的檢測緩沖液。10、實驗步驟手動和自動操作1）將?；瘶藴势贰Ⅴ；|(zhì)控品和酰化病人樣品分別50μL加入到相應的微孔中。2）在每一微孔中加入50μL去甲變腎上腺素生物素。3）在每一微孔中加入50μL去甲變腎上腺素抗血清。4）蓋板，小心振蕩包被板。振蕩器（500rpm）上室溫溫育1h（500rpm）5）移去粘性金屬板。棄取孔內(nèi)反應液，每孔用250μL洗滌液洗板6次（洗板機洗）,（人工清洗則洗3次即可），吸水紙上拍干。6）在每一微孔中加入150μL臨時配制的酶聯(lián)物。7）蓋上一新的粘性金屬板。振蕩器（500rpm）上室溫（18-25℃）溫育30min。8）移去粘性金屬板。棄取孔內(nèi)反應液，每孔用250μL洗滌液洗板6次（洗板機洗）,（人工清洗則洗3次即可），吸水紙上拍干。9）如果有條件的話，使用8孔微量移液器加底物液和終止液時。確保底物液和終止液都是相同的時間間隔加入。使用自動置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。10）在每一微孔中加入100μL臨時配制的PNPP底物液。11）振蕩器（500rpm）上室溫（18-25℃）溫育20min。12）在每一微孔中加入100μLPNPP終止液以終止底物反應，輕輕振板以混合溶液。13）加入終止液后60min之內(nèi)在405nm處測OD值（參考波長：600-650nm）11、結(jié)果計算在半對數(shù)坐標紙上或用自動的方法，以標準品的OD值為Y軸，濃度為X軸，繪制一條標準曲線。用立體圖、4參數(shù)對數(shù)圖或?qū)?shù)-對數(shù)圖都可獲得良好的實驗結(jié)果。對于標準曲線圖，用標準品的每一單值進行計算（樣品結(jié)果明顯異常的值必須刪除掉，應使用更加合理的單值）。樣品的濃度可直接從標準曲線上獲得。一旦樣品稀釋了，就應當乘以相應的稀釋因子。如果樣品所測得的濃度高于Z高標準，則應根據(jù)實驗前準備說明所述對樣品進行稀釋，并重新檢測。計算每一尿液樣品的24小時的排泄量：μg/24h=μg/L×L/24h轉(zhuǎn)換：1ng/mL=1μmol/L去甲變腎上腺素（μg/L）×5.46×10-3=μmol/L12、期望值實驗結(jié)果不能當作判斷任何ZL結(jié)果的**因素，疾病的判斷還應當與其它臨床觀察和診斷檢測相結(jié)合。以下結(jié)果為正常人群的正常值（5%-95%）：平均值：230ug/d范圍：35-445ug/d（95%）建議每個實驗室都確定自己實驗室的正常值范圍。本譯文僅供參考，詳情請以原文為準。ZGdu家總代理：深圳市科潤達生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口太子路18號海景廣場11C研發(fā)ZX：深圳市蛇口沿山路10號6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細]

  2018-11-14 10:00

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• 人（Human）白介素1α（IL-1α）ELISA Kit使用說明書

  人原鈣黏素1（PCDH1）ELISAKit人白介素2受體（IL-2R）ELISAKit人皮膚T細胞虜獲趨化因子（CTACK/CCL27）ELISAKit人胸腎表達趨化因子（BRAK/CXCL14）ELISAKit人B-淋巴細胞趨化因子1（BLC-1/CXCL13）ELISAKit人結(jié)締組織活化肽Ⅲ（CTAPⅢ）ELISAKit人巨噬細胞集落刺激因子受體（M-CSFR）ELISAKit人免疫球蛋白AFc段受體Ⅰ（FcαRⅠ/CD89）ELISAKit人免疫球蛋白EFc段受體Ⅱ（FcεRⅡ/CD23）ELISAKit人免疫球蛋白GFc段受體Ⅲ（FcγRⅢ/CD16）ELISAKit人免疫球蛋白GFc段受體Ⅱ（FcγRⅡ/CD32）ELISAKit人免疫球蛋白GFc段受體Ⅰ（FcγRⅠ/CD64）ELISAKitGFc段受體Ⅰ（FcγRⅠ/CD64）ELISAKit人免疫球蛋白GFc段受體Ⅲ（FcγRⅢ/CD16）ELISAKit人免疫球蛋白GFc段受體Ⅱ（FcγRⅡ/CD32）ELISAKit人免疫球蛋白GFc段受體Ⅰ（FcγRⅠ/CD64）ELISAKit人粒細胞趨化蛋白-2（GCP-2/CXCL6）ELISAKit人ω干擾素（IFN-ω）ELISAKit人糖基化依賴的細胞黏附分子（GlyCAM-1）ELISAKit人干擾素調(diào)節(jié)因子（IRF）ELISAKit人淋巴毒素β（LTB）ELISAKit人淋巴毒素α（LTA）ELISAKit人CC趨化因子受體1（CCR1）ELISAKit人CX3C趨化因子受體1（CX3CR1）ELISAKit人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子（PARC/CCL18）ELISAKit人黏膜地址素細胞黏附分子（MAdCAM-1）ELISAKit人β干擾素（IFN-β/IFNB）ELISAKit人可溶性CD38（sCD38）ELISAKit人可溶性CD21（CR2/sCD21）ELISAKit人可溶性瘦素受體（sLR）ELISAKit人Toll樣受體9（TLR-9/CD289）ELISAkit人轉(zhuǎn)化生長因子β2（TGFβ2）ELISAKit人單核細胞趨化蛋白4（MCP-4/CCL13）ELISAKit人白三烯D4（LTD4）ELISAKit人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白（N-Cad）ELISAKit人肝素結(jié)合性表皮生長因子（HB-EGF）ELISAKit人紅細胞刺激因子（ESF）ELISAKit人腫瘤壞死因子相關激活誘導因子（TRANCE）ELISAKit人生長激素釋放因子（GH-RF）ELISAKit人巨噬細胞趨化因子（MCF）ELISAKit人α/β干擾素受體（IFN-α/βR）ELISAKit人B細胞生長因子（BCGF）ELISAKit人B細胞分化因子（BCDF）ELISAKit人上皮細胞粘附分子（Ep-CAM/CD362）ELISAKit人可溶性粘附分子（Sam）ELISAKit人巨噬細胞替代激活相關化學因子1（AmAC-1）ELISAKit人可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2（VEGFR-2/sFLK-1）ELISAKit人胸腺基質(zhì)淋巴細胞生成素（TSLP）ELISAKit人穿孔素/成孔蛋白（PF/PFP）ELISAKit人多效生長因子（PTN）ELISAKit人可溶性CD28（sCD28）ELISAKit人淋巴細胞因子ELISAKit人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子（TARC/CCL17）ELISAKit人神經(jīng)細胞粘附分子配體1（NCAM-L1/CD171）ELISAKit人神經(jīng)保護因子（CVNPF）ELISAKit人可溶性腫瘤壞死因子α受體（sTNFαR）ELISAKit人可溶性細胞因子受體（sCKR）ELISAKit人可溶性凋亡相關因子配體（sFASL）ELISAKit人細胞凋亡YZ因子（IAP）ELISAKit人集落刺激因子（CSF）ELISAKit人γ干擾素誘導單核細胞因子（MIGF/CXCL9）ELISAKit人干擾素誘導T細胞趨化因子（ITAC/CXCL11）ELISAKit人CD14分子（CDl4）ELISAKit人凋亡誘導因子（AIF）ELISAKit人白細胞共同抗原（LCA/CD45）ELISAKit人CD4分子（CD4）ELISAKit人P鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白（P-cad）ELISAKit人角化細胞生長因子（KGF）ELISAKit人血小板衍生生長因子BB（PDGF-BB）ELISAKit人CXC趨化因子配體16（CXCL16）ELISAKit人CXC趨化因子受體3（CXCR3）ELISAKit人γ干擾素誘導蛋白16/p16（IFI16/p16）ELISAKit人基質(zhì)細胞衍生因子1a（SDF-1a/CXCL12）ELISAKit人淋巴細胞趨化因子（Lptn/LTN/XCL1）ELISAKit人α干擾素（IFN-α）ELISAKit人可溶性CD86（B7-2/sCD86）ELISAKit人白介素27（IL-27）ELISAKit人白介素23（IL-23）ELISAKit人巨噬細胞移動YZ因子（MIF）ELISAKit人組織因子途徑Y(jié)Z物（TFPI）ELISAKit人干擾素誘導蛋白10（IP-10/CXCL10）ELISAKit人白介素1（IL-1）ELISAKit人白介素17（IL-17）ELISAKit人白介素1β（IL-1β）ELISAKit人表皮生長因子（EGF）ELISAKit人堿性成纖維細胞生長因子（bFGF）ELISAKit人巨噬細胞炎性蛋白5（MIP-5）ELISAKit人可溶性E選擇素（sE-selectin）ELISAKit人可溶性細胞間粘附分子1（sICAM-1）ELISAKit人細胞間粘附分子2（ICAM-2/CD102）ELISAKit人細胞間粘附分子3（ICAM-3/CD50）ELISAKit人結(jié)締組織生長因子（CTGF）ELISAKit人白介素18（IL-18）ELISAKit人粘膜相關上皮趨化因子（MEC/CCL28）ELISAKit人粘膜相關上皮趨化因子（MEC/CCL28）ELISAKit人B細胞活化因子受體（BAFF-R）ELISAKit人血管內(nèi)皮細胞生長因子受體3（VEGFR-3/Flt-4）ELISAKit人血管內(nèi)皮細胞生長因子受體1（VEGFR-1/Flt1）ELISAKit人血管內(nèi)皮細胞生長因子D（VEGF-D）ELISAKit[詳細]

  2024-09-30 09:18

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