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2018-12-30 10:00 386閱讀次數(shù)

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• 人5-羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白elisa試劑盒使用方法

  本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T11pg/ml-400pg/ml使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中5-羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白（5-HTT）含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人5-羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白（5-HTT）水平。用純化的人5-羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白（5-HTT）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入5-羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白（5-HTT），再與HRP標記的5-羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白（5-HTT）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的5-羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白（5-HTT）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人5-羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白（5-HTT）濃度。[詳細]

  2018-12-30 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 人5-羥色胺受體elisa試劑盒使用方法

  本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T20ng/L-500ng/L使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中5-羥色胺受體（5-HTR）含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人5-羥色胺受體（5-HTR）水平。用純化的人5-羥色胺受體（5-HTR）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入5-羥色胺受體（5-HTR），再與HRP標記的5-羥色胺受體（5-HTR）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的5-羥色胺受體（5-HTR）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人5-羥色胺受體（5-HTR）濃度。[詳細]

  2018-10-01 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 小鼠5-羥色胺轉(zhuǎn)運體蛋白（SERT）ELISA試劑盒

  小鼠5-羥色胺轉(zhuǎn)運體蛋白(SERT)ELISA試劑盒檢測范圍：96T3.5ng/L-160ng/L使用目的：本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中5-羥色胺轉(zhuǎn)運體蛋白(SERT)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠5-羥色胺轉(zhuǎn)運體蛋白(SERT)水平。用純化的小鼠5-羥色胺轉(zhuǎn)運體蛋白(SERT)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入5-羥色胺轉(zhuǎn)運體蛋白(SERT)，再與HRP標記的5-羥色胺轉(zhuǎn)運體蛋白(SERT)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的5-羥色胺轉(zhuǎn)運體蛋白(SERT)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中小鼠5-羥色胺轉(zhuǎn)運體蛋白(SERT)濃度。標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-12-06 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 5-羥色胺

  5-羥色胺[詳細]

  2024-10-08 05:22

  報價單

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• 人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4(GLUT4)ELISA試劑盒

  人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4(GLUT4)ELISA試劑盒[詳細]

  2015-09-11 00:00

  課件

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• 人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白（Glut-1）ELISA試劑盒說明書

  人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白（Glut-1）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人Glut-1單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的Glut-1與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人Glut-1，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液，在450nm處測OD值，Glut-1濃度與OD值成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中Glut-1濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標板（CoatedWells）96孔酶標抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標準品（Standards）：40ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本：血清、血漿（EDTA）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復凍融。2.標準品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成40ng/ml的溶液。設(shè)標準管8管，**管加標本稀釋液900ul，第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul，將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上作圖，畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應Glut-1含量。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的Glut-1檢測濃度小于30pg/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的人Glut-1。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10％。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔，每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細]

  2018-09-13 10:01

  產(chǎn)品樣冊

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• 人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1 (GLUT1)ELISA試劑盒

  人葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1 (GLUT1)ELISA試劑盒[詳細]

  2024-09-27 23:50

  專利

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• 大鼠5-羥色胺受體2C(HTR2C)ELISA試劑盒

  大鼠5-羥色胺受體2C(HTR2C)ELISA試劑盒[詳細]

  2016-08-01 00:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 小鼠5-羥色胺（5-HT）ELISA檢測試劑盒說明書

  小鼠5-羥色胺（5-HT）ELISA檢測試劑盒說明書[詳細]

  2015-05-20 00:00

  其它

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• 河蟹5-羥色胺（5-HT）elisa檢測試劑盒說明書

  實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中河蟹5-羥色胺(5-HT)水平。用純化的河蟹5-羥色胺(5-HT)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入5-羥色胺(5-HT)，再與HRP標記的5-羥色胺(5-HT)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的5-羥色胺(5-HT)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中河蟹5-羥色胺(5-HT)濃度。河蟹5-羥色胺(5-HT)elisa檢測試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品（640pg/ml）0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。河蟹5-羥色胺(5-HT)elisa檢測試劑盒操作步驟標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。320pg/ml5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液160pg/ml4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液80pg/ml3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液40pg/ml2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液20pg/ml1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié)：計算以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。河蟹5-羥色胺(5-HT)elisa檢測試劑盒注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2024-09-29 06:43

  產(chǎn)品樣冊

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• 人BCA蛋白elisa試劑盒使用方法

  本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T6pg/ml-280pg/ml使用目的：本試劑盒用于測定人細胞樣本中BCA蛋白含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人BCA蛋白水平。用純化的人BCA蛋白抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入BCA蛋白，再與HRP標記的BCA蛋白抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的BCA蛋白呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人BCA蛋白濃度。[詳細]

  2018-10-01 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 人IPO-38蛋白elisa試劑盒使用方法

  本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T5pg/ml-180pg/ml使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中IPO-38蛋白(IPO38)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人IPO-38蛋白(IPO38)水平。用純化的人IPO-38蛋白(IPO38)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入IPO-38蛋白(IPO38)，再與HRP標記的IPO-38蛋白(IPO38)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的IPO-38蛋白(IPO38)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人IPO-38蛋白(IPO38)濃度。[詳細]

  2018-10-01 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 人P24蛋白elisa試劑盒使用方法

  本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T2ng/L-48ng/L使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中P24蛋白(P24))含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人P24蛋白(P24)水平。用純化的人P24蛋白(P24)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入P24蛋白(P24)，再與HRP標記的P24蛋白(P24))抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的P24蛋白(P24)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人P24蛋白(P24)濃度。[詳細]

  2018-10-01 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 人MP-P蛋白elisa試劑盒使用方法

  本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T18pg/ml-650pg/ml使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中MP-P蛋白（MP-P）含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人MP-P蛋白（MP-P）水平。用純化的人MP-P蛋白（MP-P）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入MP-P蛋白（MP-P），再與HRP標記的MP-P蛋白（MP-P）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的MP-P蛋白（MP-P）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人MP-P蛋白（MP-P）濃度。[詳細]

  2018-12-30 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 人Runx3蛋白elisa試劑盒使用方法

  本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T30pg/ml-800pg/ml使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中Runx3蛋白含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人Runx3蛋白水平。用純化的人Runx3蛋白抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入Runx3蛋白，再與HRP標記的Runx3蛋白抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的Runx3蛋白呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人Runx3蛋白濃度。[詳細]

  2018-12-30 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 人銅轉(zhuǎn)運蛋白1（COPT1）ELISA試劑盒說明書

  人銅轉(zhuǎn)運蛋白1（COPT1）ELISA試劑盒說明書[詳細]

  2015-02-28 00:00

  專利

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• 5-羥色胺ELISA Kit使用說明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer45-羥色胺ELISAKit使用說明書（德國IBL:RE59121）1、應用范圍此試劑盒可用于人血清、血漿、血小板和尿液中五羥色胺的體外定量檢測。進一步的研究表明：此試劑盒還可用于組織勻漿和細胞培養(yǎng)上清液的研究。2、前言說明五羥色胺是色氨酸代謝的中間產(chǎn)物，它主要存在于腸嗜鉻細胞、血清素激活的神經(jīng)元和血小板中，它已被確定為是神經(jīng)系統(tǒng)的一種神經(jīng)遞質(zhì)。循環(huán)血液中的五羥色胺幾乎都集中于血小板內(nèi)。循環(huán)五羥色胺濃度的變化可反映出人體的一些病理變化，這些病理變化包括：慢性肌緊張性頭痛、精神分裂癥、高血壓、舞蹈癥、杜氏肌肉萎縮癥和早期急性闌尾炎。血清五羥色胺的檢測對類癌綜合征的檢測具有重要臨床意義。人們預計：在不久的將來，人們對血小板內(nèi)五羥色胺的研究興趣（包括五羥胺的吸收及釋放動力學研究）應該會不斷增長。3、實驗原理樣品準備（將五羥色胺轉(zhuǎn)變?yōu)镹-乙酰五羥色胺）是樣品的稀釋的一部分，將每一份樣品分別于?；噭┮黄饻赜涂梢缘玫锦；奈辶u色胺。此實驗采用的是競爭性ELISA的原理，生物素標記的和非生物素標記的抗原競爭性結(jié)合到一定數(shù)量的抗體結(jié)合位點上。Z后，結(jié)合到抗體上的生物素標記抗原的量于樣品中被分析物的濃度成反比。當反應系統(tǒng)達到平衡后，洗板除去未結(jié)合的生物素標記抗原，用抗生物素堿性磷酸酶做標記、對硝基苯磷酸做底物來檢測結(jié)合到抗體上的生物素標記抗原的量。用已知標準品做一條標準曲線，將未知樣品的酶活性在標準曲線上進行定標就可以得到未知樣品中五羥色胺的濃度。4、貯存與穩(wěn)定性試劑盒和運輸環(huán)境和儲存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑的準備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。打開了的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定，前提是要將試劑盒用袋子密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下。5、樣品的采集與儲存注意有些食物會含有一定量的五羥色胺，另外，有些藥物也會刺激五羥色胺的釋放，從而導致五羥色胺的濃度升高。病人應當禁食富含五羥色胺的食物，如：阿司匹林、促腎上腺皮質(zhì)激素、MAOYZ劑、phenazetin、兒茶酚氨、利血平和煙堿。血清注意靜脈穿刺采集全血的常規(guī)注意事項。從采集到血液樣品的那一刻起到檢測時都應保持血液樣品的化學整體性。不要使用明顯溶血、黃疸血和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁，則在實驗前應當離心以除去所有的微粒物質(zhì)。貯存18-25℃2-8℃≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性2小時6小時3個月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。收集病人24h內(nèi)的所有尿液，之后將其加入到10-15ml6N的HCl防腐劑中。確定用于結(jié)果結(jié)算的總體積。使用前請將所有樣品混合并離心。貯存≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復凍融。穩(wěn)定性6個月血漿、血小板98%以上的循環(huán)五羥色胺都位于血小板內(nèi)，在血液凝集時就可以釋放出來。用靜脈穿刺的方法將全血收集到含EDTA或檸檬酸的塑料試管中（如10mlMonovetteNC試管中加入1ml檸檬酸溶液）。室溫下，將全血樣品以200×g的速率離心10分鐘得到富含血小板的血漿（PRP）。將PRP-上清轉(zhuǎn)移到另一試管中。為了獲得血小板乳糜微粒，我們將200ulPRP（350000～500000個血小板/ul）加入到800ul生理鹽水中，之后4℃下以4500×g的速率離心10分鐘（或4℃下10000×g的速率離心2分鐘）。離心后棄取上清。在血小板乳糜微粒中加入200ul雙蒸水，之后樣品就可以在-20℃以下的環(huán)境下凍存數(shù)周了。將凍融的樣品在室溫下以1000×g的速率離心2分鐘。整個實驗需要使用20ul上清液（見?；Ｈ绻霚y無血小板血漿（PFP）中五羥色胺的濃度，我們可以將PRP在4℃以4500×g的速率離心10分鐘（或4℃下10000×g的速率離心2分鐘）就可以獲得無血小板血漿（PFP）。游離五羥色胺的ELISA實驗要使用50ul上清液（見酰化）。注意：PRP中五羥色胺的直接檢測實驗表明：大約10%的PRP樣品可以檢測到不可預知的高濃度五羥色胺（結(jié)果用GX液相層析和流氏細胞術(shù)獲得）。為了避免這種差異性，我們建議您即檢測血小板中五羥色胺，也檢測無血小板血漿中的五羥色胺。無血小板血漿血小板微粒（從血漿中分離得到）避免熱源或太陽直射，避免反復凍融，冷凍狀態(tài)下運輸樣品。儲存≤-20℃≤-20℃≤-80℃穩(wěn)定性2周4周1年組織勻漿和細胞培養(yǎng)上清使用組織勻漿和細胞培養(yǎng)上清作樣品，一般無特殊注意事項注意：細胞培養(yǎng)基可能含有一定量的五羥色胺！儲存≤-20℃避免熱源或太陽直射，避免反復凍融。穩(wěn)定性6個月6、試劑盒成分注意試劑盒有足夠做96份單孔檢測或48份雙孔檢測所需的試劑成分。數(shù)量標記成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了羊抗兔抗血清。1×5mlANTISERUM組胺抗血清，藍色，即用，內(nèi)含：兔抗血清、Tris緩沖液和0.01%的NaN3。1×5mlBIOTIN五羥色胺生物素，黃色，即用，內(nèi)含0.1%的NaN3。1×0.2mlENZCONJCONC酶聯(lián)物，10倍濃縮，內(nèi)含堿性磷酸酶標記的抗生物素抗體、Tris緩沖液、HCl和0.01%的NaN3。1×7×0.5mlCALA-G標準品A-G，0;0.08;0.24;0.73;2.2;6.6;19.8ng/ml,0;0.45;1.4;4.1;12.5;37.4;112.3nmol/l,即用，內(nèi)含?；奈辶u色胺、磷酸鹽緩沖液和0.1%的NaN3。1×2×0.5mlCONTROL1+2LYO質(zhì)控品1+2，凍干，內(nèi)含人血清和0.02%的NaN3。具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標簽。1×3mlACYLREAG?；噭﹥?nèi)含乙酸酐和丙酮，即用1×50mlASSAYBUFCONC檢測緩沖液，10倍濃縮，內(nèi)含磷酸緩沖液、BSA和1%的NaN3。1×50mlWASHBUFCONC洗滌液，20倍濃縮，內(nèi)含磷酸緩沖液、吐溫和0.1%的硫柳汞。1×9×PNPPSUBSPNPP底物片，密封于鋁鉑金屬袋內(nèi)，內(nèi)含對硝基苯酚磷酸鹽。1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液，即用，內(nèi)含二乙醇胺、水和0.05%的NaN3。1×15mlPNPPSTOPPNPP終止液，即用，內(nèi)含1M的NaOH和0.25M的EDTA。3×FOIL粘性金屬板7、實驗所需器材但試劑盒不提供1）移液器，體積：20;25;50;100;1000ul2）玻璃試管（12×75mm）3）試管架4）振蕩器（500rpm）5）旋渦混合器6）水浴箱，37℃7）帶儲器的8道移液器8）洗滌瓶，自動或半自動洗板機9）離心機：≥1500×g10）可在405nm處讀數(shù)的酶標儀（參考波長：600-650nm）11）雙蒸水或去離子水12）吸水紙、取樣吸頭和計時器8、實驗前的準備說明供手動和自動操作參考用注意用于96孔檢測的試劑成分可分成3次用。下述體積是使用4條（32孔）時所需要的體積。如果客戶想將標準品從7支減為6支的話，我們可以省掉標準品G。則檢測范圍相應的減少到155ug/l（血漿）或706ug/l（血清，尿液，組織勻漿和細胞培養(yǎng)上清）。血清、尿液、組織勻漿和細胞培養(yǎng)上清樣品可以選擇簡短操作步驟進行，只需溫育3.5個小時（但血漿樣品不能采用簡短操作步驟進行），以上樣品也可以選擇可選操作步驟進行檢測（將樣品溫育一整夜），血漿樣品必須按照溫育一整夜進行檢測。8.1凍干或濃縮成分的準備稀釋/溶解成分加入稀釋劑比例備注儲存穩(wěn)定性15ml檢測緩沖液150ml雙蒸水1：10出現(xiàn)黃褐色并不會影響實驗結(jié)果2-8℃2周15ml洗滌液300ml雙蒸水1：202-8℃4周質(zhì)控品0.5ml雙蒸水靜置15min,混合時無泡沫≤-20℃有效期內(nèi)穩(wěn)定60ul酶聯(lián)物6ml稀釋的檢測緩沖液1:101臨時配置,只能使用一次18-25℃2小時3PNPP底物片8mlPNPP底物緩沖液臨時配置，只能使用一次18-25℃5小時8.2樣品的稀釋樣品五羥色胺濃度高于Z高標準品的必須用檢測緩沖液進行進一步的稀釋。8.3樣品和質(zhì)控品的酰化樣品A：血清，尿液，血小板提取物，組織勻漿和質(zhì)控品樣品B：無血小板血漿注意請不要?；瘶藴势?，標準品已經(jīng)?；?。樣品準備可使血清、尿液、血小板乳糜微粒、組織勻漿和細胞培養(yǎng)上清被稀釋107倍，而血漿樣品則被稀釋23.5倍。結(jié)果計算時必須將此稀釋因子考慮進去。8.3.1樣品A：血清、尿液、血小板提取物、組織勻漿和質(zhì)控品1將質(zhì)控品和樣品A分別20ul加入到玻璃試管中。2在每一試管中加入100ul稀釋好的檢測緩沖液，旋渦混合。3在每一試管中加入25ul?；噭?（3%），加入后立即旋渦混合。4將試管蓋好，將試管放到37℃水浴箱內(nèi)溫育15分鐘。5在每一試管中加入2ml已稀釋好的檢測緩沖液，旋渦混合61500×g下離心10分鐘注意準備好的樣品必須立即檢測。其上清可在18-25℃下穩(wěn)定存放1小時。8.3.2樣品B：無血小板血漿1將50ul樣品B加入到玻璃試管中。2在每一試管中加入100ul稀釋好的檢測緩沖液，旋渦混合。3在每一試管中加入25ul酰化試劑，加入后立即旋渦混合。4將試管蓋好，將試管放到37℃水浴箱內(nèi)溫育15分鐘。5在每一試管中加入1ml已稀釋好的檢測緩沖液，旋渦混合61500×g下離心10分鐘注意準備好的樣品必須立即檢測。其上清可在18-25℃下穩(wěn)定存放1小時。9、實驗步驟9.1簡短操作步驟（僅供樣品A使用，不能應用于血漿）1將標準品、?；玫馁|(zhì)控品和?；玫臉悠犯?0ul加入到相應的微孔中。2在每一微孔中加入50ul五羥色胺生物素。3在每一微孔中加入50ul五羥色胺抗血清。4蓋板，室溫（18-25℃）下振蕩（500rpm）溫育90min。5移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應液，每孔用250ul稀釋好的洗滌液洗板3次,吸水紙上拍干以除去殘余液體。6在每一微孔中加入150ul臨時準備好的酶聯(lián)物。7蓋板，室溫（18-25℃）下振蕩（500rpm）溫育60min。8移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應液，每孔用250ul稀釋好的洗滌液洗板3次,吸水紙上拍干以除去殘余液體。9如果有條件的話，可以用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液時，每孔間的時間間隔應當相同。使用主動置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。10在每一微孔中加入200ul臨時配置好的PNPP底物液。11室溫（18-25℃）下振蕩（500rpm）溫育60min。12在每一微孔中加入50ulPNPP終止液以終止底物反應，輕輕振板以使溶液混合均勻。13加終止液后60min內(nèi)405nm處讀取OD值。9.2可選操作步驟（溫育一整夜，樣品A和樣品B均適用）9.2.1**天1將標準品、?；玫馁|(zhì)控品和樣品分別50ul加入到相應的微孔中。2在每一微孔中加入50ul五羥色胺生物素。3在每一微孔中加入50ul五羥色胺抗血清。4蓋板，輕輕振板，2-8℃下溫育16-20小時（一整夜）。9.2.2第二天1移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應液，每孔用250ul稀釋好的洗滌液洗板3次，吸水紙上拍干以除去參與液體。2在每一微孔中加入150ul臨時配置好的酶聯(lián)物。3蓋板，室溫振蕩器上（500rpm）溫育60分鐘。4移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應液，每孔用250ul稀釋好的洗滌液洗板3次，吸水紙上拍干以除去殘余液體。5如果有條件的話，可以用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液時，每孔間的時間間隔應當相同。使用主動置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。6在每一微孔中加入200ul臨時配置好的PNPP底物液。7室溫振蕩器上（500rpm）溫育30分鐘。8在每一微孔中加入50ulPNPP終止液，振板以混合孔內(nèi)成分。9加終止液后60min內(nèi)405nm處讀取OD值。（參考波長：600-650nm）10、結(jié)果計算將所有標準品、質(zhì)控品和樣品的OD值減去空白孔的OD值。在半對數(shù)坐標紙上，以標準品的OD值（Y軸，線性）對其濃度（X軸，對數(shù)）繪制出一條標準曲線，或采用自動計算的方法繪制出一條標準曲線。用Cubicspline、4參數(shù)或雙對數(shù)可以得到較好的曲線圖。在計算標準曲線時，應當應用到每一個標準品數(shù)值（兩個數(shù)值中，明顯逸出的數(shù)值應當被忽略掉，采用更加合理的一個數(shù)值用）。樣品的濃度可以從標準曲線上定量得到。由于樣品被稀釋了，所以Z終樣品結(jié)果必須乘以相應的稀釋因子，單位為ng/ml。血清、尿液、血小板、組織勻漿、細胞培養(yǎng)上清、質(zhì)控品：×107無血小板血漿：×23.5進行了進一步稀釋的樣品結(jié)果應當乘以相應的稀釋因子。實驗必須滿足如下標準才符合要求：50%OD/Odmax（）：0.60-1.00ng/ml（平均0.8ng/ml）△OD標準品A-標準品G≥0.80OD轉(zhuǎn)換系數(shù)：五羥色胺（ng/ml）×5.67=nmol/l如果樣品中五羥色胺濃度高于Z高標準品，則此樣品必須按照實驗前準備說明進行稀釋并重新檢測。11、期望值實驗結(jié)果不能當作任何ZL結(jié)果的**原因，疾病的判斷還應當與其它臨床觀察和診斷檢測相結(jié)合。以下結(jié)果為正常人群的正常值（97.5%）：樣品數(shù)量單位平均值建議每個實驗室讀確定自己的正常值范圍范圍血清99ng/ml88.630-200無血小板血漿35ng/ml3.71.8-7.5血小板35ng/109血小板490217-86124小時尿液49μg/d83.1≤200本譯文僅供參考，詳情請以原文為準。ZGdu家總代理：深圳市科潤達生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口太子路18號海景廣場11C研發(fā)ZX：深圳市蛇口沿山路10號6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細]

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