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細(xì)胞長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A合成酶活性酶連續(xù)循環(huán)光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書
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2018-11-19 10:00 804閱讀次數(shù)
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細(xì)胞長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A合成酶活性酶連續(xù)循環(huán)光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細(xì)胞長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A合成酶(LONG-CHAINACYLCOASYNTHETASE;LACS)活性酶連續(xù)循環(huán)光度法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過肌激酶、丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶的酶連續(xù)反應(yīng)系統(tǒng)中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后峰值的降低,即采用光度法來測(cè)定細(xì)胞裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解懸液樣品(動(dòng)物、人體等)長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A合成酶的活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景脂肪酸β氧化過程(β-oxidation)在動(dòng)物組織的線粒體發(fā)生的脂肪酸代謝通路,可概括為活化、轉(zhuǎn)移、β氧化及Z后經(jīng)三羧酸循環(huán)被徹底氧化生成CO2和H2O,并釋放能量等四個(gè)階段。脂酰輔酶A合成酶(acylcoAsynthetase;EC.6.2.1.3),又稱為脂肪酸硫激酶(fattyacidthiokinase)或脂酰輔酶A連接酶(acylcoAligase),是脂肪酸進(jìn)入β-氧化前的活化所必需:在ATP、CoA-SH、Mg2+存在下,催化飽和或不飽和直鏈脂肪酸分子(C4)連接輔酶A合成相應(yīng)的脂酰輔酶A。其為一高能化合物,水溶性增強(qiáng),提高代謝活性。當(dāng)脂肪酸進(jìn)入細(xì)胞后,在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及線粒體外膜上先被活化,形成脂酰輔酶A衍生物,然后再進(jìn)入線粒體內(nèi)氧化。脂酰輔酶A合成酶分成三種底物特異性的種類:小于4個(gè)碳(C4)的短鏈脂酰輔酶A合成酶(acetyl-CoAsynthetase),介于4至12個(gè)碳(C4-C12)的中鏈脂酰輔酶A合成酶(butyryl-CoAsynthetase),和大于12個(gè)碳(C12)的長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A合成酶(palmitoylCoAsynthetase)?;陂L(zhǎng)鏈脂肪酸棕櫚酸(palmitate)和輔酶A在長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A合成酶的作用下,產(chǎn)生棕櫚酰輔酶A(palmitoyl-CoA)后,通過肌激酶(myokinase)、丙酮酸激酶(pyruvatekinase)和乳酸脫氫酶(lacticdehydrogenase)系統(tǒng),測(cè)定還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizednicotinamideadeninedinucleotide;NAD)的變化(340nm波長(zhǎng)),來定量分析長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A合成酶的活性。長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A合成酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)系統(tǒng)為:Long-chainacylcoAsynthetasepalmitate+CoA+ATP→palmitoyl-CoA+AMP+PPimyokinaseAMP+ATP→2ADPpyruvatekinase2ADP+2phosphoenolpyruvate→2ATP+2pyruvatelacticdehydrogenase2pyruvate+2β-NADH→2lactate+2β-NAD+產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)120毫升裂解液(ReagentB)10毫升緩沖液(ReagentC)5毫升反應(yīng)液(ReagentD)500微升酶促液(ReagentE)250微升底色液(ReagentF)250微升陰性液(ReagentG)250微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存反應(yīng)液(ReagentD)、酶促液(ReagentE)和底色液(ReagentF)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里;反應(yīng)液(ReagentD)和底色液(ReagentF)避免光照;有效保證6月用戶自備15毫升錐形離心管:用于樣品制備的容器1.5毫升離心管:用于樣品保存的容器細(xì)胞刮脫棒:用于脫離貼壁細(xì)胞(微型)臺(tái)式離心機(jī):用于樣品制備200微升1厘米光徑比色皿或96孔板:用于光度分析的容器分光光度儀或酶標(biāo)儀:用于光度分析實(shí)驗(yàn)步驟樣品準(zhǔn)備準(zhǔn)備好25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶或60mm細(xì)胞培養(yǎng)皿的待測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞(1至5X106細(xì)胞)小心加入3毫升清理液(ReagentA),覆蓋生長(zhǎng)表面小心抽去清理液使用細(xì)胞刮脫棒輕柔刮脫細(xì)胞(注意:可以使用胰酶消化)加入3毫升清理液(ReagentA),混勻細(xì)胞移入到預(yù)冷的15毫升錐形離心管(注意:懸浮細(xì)胞從這一步驟開始)放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為300g小心抽去上清液加入500微升裂解液(ReagentB),充分混勻轉(zhuǎn)移到預(yù)冷的1.5毫升離心管QL渦旋震蕩15秒置于冰槽里孵育30分鐘放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心移取500微升上清液到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管移取10微升進(jìn)行蛋白定量檢測(cè)(注意:建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒-HL30030.1)即刻放進(jìn)-70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作測(cè)定準(zhǔn)備開啟并設(shè)定好分光光度儀(溫度為25℃):波長(zhǎng)340nm,間隔5分鐘,讀數(shù)3次(共15分鐘),并置零從-20℃冰箱里取出試劑,置于冰槽里融化;反應(yīng)液(ReagentD)和底色液(ReagentF)避免光照緩沖液(ReagentC)室溫下均衡溫度背景對(duì)照測(cè)定移取195微升緩沖液(ReagentC)到新的比色皿加入25微升反應(yīng)液(ReagentD)加入12.5微升酶促液(ReagentE)加入12.5微升底色液(ReagentF)上下傾倒數(shù)次,混勻在25℃溫度下孵育3分鐘加入5微升陰性液(ReagentG)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè),此為背景空對(duì)照(0分鐘讀數(shù)-15分鐘讀數(shù))樣品測(cè)定移取195微升緩沖液(ReagentC)到新的比色皿加入25微升反應(yīng)液(ReagentD)加入12.5微升酶促液(ReagentE)加入12.5微升底色液(ReagentF)上下傾倒數(shù)次,混勻在25℃溫度下孵育3分鐘加入5微升待測(cè)樣品(20微克蛋白)(注意:樣品須清澈)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè),此為樣品讀數(shù)(0分鐘讀數(shù)-15分鐘讀數(shù))五、計(jì)算樣品活性[(樣品讀數(shù)-背景讀數(shù))X0.25(體系容量;毫升)X樣品稀釋倍數(shù)]÷[0.005(樣品容量;毫升)X6.22(毫摩爾吸光系數(shù))X15(反應(yīng)時(shí)間;分鐘)X2]=單位/毫升÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=單位/毫克單位=微摩爾棕櫚酰輔酶A/分鐘酶標(biāo)儀測(cè)定在96孔板上做好相應(yīng)標(biāo)記:背景對(duì)照和樣品分別移取195微升緩沖液(ReagentC)到96孔板里分別加入25微升反應(yīng)液(ReagentD)分別加入12.5微升酶促液(ReagentE)分別加入12.5微升底色液(ReagentF)輕輕搖動(dòng)96孔板在25℃溫度下孵育3分鐘分別加入5微升陰性液(ReagentG)或待測(cè)樣品(20微克蛋白)到相應(yīng)孔里(注意:樣品須清澈)輕輕搖動(dòng)96孔板即刻放進(jìn)酶標(biāo)儀檢測(cè):0分鐘讀數(shù)和15分鐘讀數(shù)活性計(jì)算:[(樣品讀數(shù)-背景讀數(shù))X樣品稀釋倍數(shù)X0.25(體系容量;毫升)]÷[0.005(樣品容量;毫升)X6.22(毫摩爾吸光系數(shù))X0.6(光徑距離;厘米)X15(反應(yīng)時(shí)間;分鐘)X2]=單位/毫升÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=單位/毫克單位=微摩爾棕櫚酰輔酶A/分鐘注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次操作,包括背景對(duì)照操作時(shí),須戴手套系統(tǒng)操作過程中,背景測(cè)定只需1次建議使用比色皿測(cè)定樣品須澄清,至關(guān)重要加樣后3秒內(nèi)光度測(cè)定測(cè)定值由高到低變化;測(cè)定可持續(xù)15分鐘光度測(cè)定后,比色皿須清洗徹底樣本測(cè)定0分鐘讀數(shù)高于15分鐘讀數(shù)表明具有酶活性建議待測(cè)樣本蛋白濃度為20微克/5微升(本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒-HL30030.1)如果待測(cè)樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品濃度長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A合成酶單位活性定義為:在25℃,pH8.1條件下,每分鐘內(nèi)能夠合成1微摩爾棕櫚酰輔酶A所需的酶量作為一個(gè)活性單位本公司提供系列脂肪酸代謝檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感
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細(xì)胞長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A合成酶活性酶連續(xù)循環(huán)光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書
- 細(xì)胞長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A合成酶活性酶連續(xù)循環(huán)光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細(xì)胞長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A合成酶(LONG-CHAINACYLCOASYNTHETASE;LACS)活性酶連續(xù)循環(huán)光度法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過肌激酶、丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶的酶連續(xù)反應(yīng)系統(tǒng)中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后峰值的降低,即采用光度法來測(cè)定細(xì)胞裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解懸液樣品(動(dòng)物、人體等)長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A合成酶的活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景脂肪酸β氧化過程(β-oxidation)在動(dòng)物組織的線粒體發(fā)生的脂肪酸代謝通路,可概括為活化、轉(zhuǎn)移、β氧化及Z后經(jīng)三羧酸循環(huán)被徹底氧化生成CO2和H2O,并釋放能量等四個(gè)階段。脂酰輔酶A合成酶(acylcoAsynthetase;EC.6.2.1.3),又稱為脂肪酸硫激酶(fattyacidthiokinase)或脂酰輔酶A連接酶(acylcoAligase),是脂肪酸進(jìn)入β-氧化前的活化所必需:在ATP、CoA-SH、Mg2+存在下,催化飽和或不飽和直鏈脂肪酸分子(C4)連接輔酶A合成相應(yīng)的脂酰輔酶A。其為一高能化合物,水溶性增強(qiáng),提高代謝活性。當(dāng)脂肪酸進(jìn)入細(xì)胞后,在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及線粒體外膜上先被活化,形成脂酰輔酶A衍生物,然后再進(jìn)入線粒體內(nèi)氧化。脂酰輔酶A合成酶分成三種底物特異性的種類:小于4個(gè)碳(C4)的短鏈脂酰輔酶A合成酶(acetyl-CoAsynthetase),介于4至12個(gè)碳(C4-C12)的中鏈脂酰輔酶A合成酶(butyryl-CoAsynthetase),和大于12個(gè)碳(C12)的長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A合成酶(palmitoylCoAsynthetase)。基于長(zhǎng)鏈脂肪酸棕櫚酸(palmitate)和輔酶A在長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A合成酶的作用下,產(chǎn)生棕櫚酰輔酶A(palmitoyl-CoA)后,通過肌激酶(myokinase)、丙酮酸激酶(pyruvatekinase)和乳酸脫氫酶(lacticdehydrogenase)系統(tǒng),測(cè)定還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizednicotinamideadeninedinucleotide;NAD)的變化(340nm波長(zhǎng)),來定量分析長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A合成酶的活性。長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A合成酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)系統(tǒng)為:Long-chainacylcoAsynthetasepalmitate+CoA+ATP→palmitoyl-CoA+AMP+PPimyokinaseAMP+ATP→2ADPpyruvatekinase2ADP+2phosphoenolpyruvate→2ATP+2pyruvatelacticdehydrogenase2pyruvate+2β-NADH→2lactate+2β-NAD+產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)120毫升裂解液(ReagentB)10毫升緩沖液(ReagentC)5毫升反應(yīng)液(ReagentD)500微升酶促液(ReagentE)250微升底色液(ReagentF)250微升陰性液(ReagentG)250微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存反應(yīng)液(ReagentD)、酶促液(ReagentE)和底色液(ReagentF)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里;反應(yīng)液(ReagentD)和底色液(ReagentF)避免光照;有效保證6月用戶自備15毫升錐形離心管:用于樣品制備的容器1.5毫升離心管:用于樣品保存的容器細(xì)胞刮脫棒:用于脫離貼壁細(xì)胞(微型)臺(tái)式離心機(jī):用于樣品制備200微升1厘米光徑比色皿或96孔板:用于光度分析的容器分光光度儀或酶標(biāo)儀:用于光度分析實(shí)驗(yàn)步驟樣品準(zhǔn)備準(zhǔn)備好25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶或60mm細(xì)胞培養(yǎng)皿的待測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞(1至5X106細(xì)胞)小心加入3毫升清理液(ReagentA),覆蓋生長(zhǎng)表面小心抽去清理液使用細(xì)胞刮脫棒輕柔刮脫細(xì)胞(注意:可以使用胰酶消化)加入3毫升清理液(ReagentA),混勻細(xì)胞移入到預(yù)冷的15毫升錐形離心管(注意:懸浮細(xì)胞從這一步驟開始)放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為300g小心抽去上清液加入500微升裂解液(ReagentB),充分混勻轉(zhuǎn)移到預(yù)冷的1.5毫升離心管QL渦旋震蕩15秒置于冰槽里孵育30分鐘放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心移取500微升上清液到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管移取10微升進(jìn)行蛋白定量檢測(cè)(注意:建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒-HL30030.1)即刻放進(jìn)-70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作測(cè)定準(zhǔn)備開啟并設(shè)定好分光光度儀(溫度為25℃):波長(zhǎng)340nm,間隔5分鐘,讀數(shù)3次(共15分鐘),并置零從-20℃冰箱里取出試劑,置于冰槽里融化;反應(yīng)液(ReagentD)和底色液(ReagentF)避免光照緩沖液(ReagentC)室溫下均衡溫度背景對(duì)照測(cè)定移取195微升緩沖液(ReagentC)到新的比色皿加入25微升反應(yīng)液(ReagentD)加入12.5微升酶促液(ReagentE)加入12.5微升底色液(ReagentF)上下傾倒數(shù)次,混勻在25℃溫度下孵育3分鐘加入5微升陰性液(ReagentG)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè),此為背景空對(duì)照(0分鐘讀數(shù)-15分鐘讀數(shù))樣品測(cè)定移取195微升緩沖液(ReagentC)到新的比色皿加入25微升反應(yīng)液(ReagentD)加入12.5微升酶促液(ReagentE)加入12.5微升底色液(ReagentF)上下傾倒數(shù)次,混勻在25℃溫度下孵育3分鐘加入5微升待測(cè)樣品(20微克蛋白)(注意:樣品須清澈)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè),此為樣品讀數(shù)(0分鐘讀數(shù)-15分鐘讀數(shù))五、計(jì)算樣品活性[(樣品讀數(shù)-背景讀數(shù))X0.25(體系容量;毫升)X樣品稀釋倍數(shù)]÷[0.005(樣品容量;毫升)X6.22(毫摩爾吸光系數(shù))X15(反應(yīng)時(shí)間;分鐘)X2]=單位/毫升÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=單位/毫克單位=微摩爾棕櫚酰輔酶A/分鐘酶標(biāo)儀測(cè)定在96孔板上做好相應(yīng)標(biāo)記:背景對(duì)照和樣品分別移取195微升緩沖液(ReagentC)到96孔板里分別加入25微升反應(yīng)液(ReagentD)分別加入12.5微升酶促液(ReagentE)分別加入12.5微升底色液(ReagentF)輕輕搖動(dòng)96孔板在25℃溫度下孵育3分鐘分別加入5微升陰性液(ReagentG)或待測(cè)樣品(20微克蛋白)到相應(yīng)孔里(注意:樣品須清澈)輕輕搖動(dòng)96孔板即刻放進(jìn)酶標(biāo)儀檢測(cè):0分鐘讀數(shù)和15分鐘讀數(shù)活性計(jì)算:[(樣品讀數(shù)-背景讀數(shù))X樣品稀釋倍數(shù)X0.25(體系容量;毫升)]÷[0.005(樣品容量;毫升)X6.22(毫摩爾吸光系數(shù))X0.6(光徑距離;厘米)X15(反應(yīng)時(shí)間;分鐘)X2]=單位/毫升÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=單位/毫克單位=微摩爾棕櫚酰輔酶A/分鐘注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次操作,包括背景對(duì)照操作時(shí),須戴手套系統(tǒng)操作過程中,背景測(cè)定只需1次建議使用比色皿測(cè)定樣品須澄清,至關(guān)重要加樣后3秒內(nèi)光度測(cè)定測(cè)定值由高到低變化;測(cè)定可持續(xù)15分鐘光度測(cè)定后,比色皿須清洗徹底樣本測(cè)定0分鐘讀數(shù)高于15分鐘讀數(shù)表明具有酶活性建議待測(cè)樣本蛋白濃度為20微克/5微升(本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒-HL30030.1)如果待測(cè)樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品濃度長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A合成酶單位活性定義為:在25℃,pH8.1條件下,每分鐘內(nèi)能夠合成1微摩爾棕櫚酰輔酶A所需的酶量作為一個(gè)活性單位本公司提供系列脂肪酸代謝檢測(cè)試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)胞谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測(cè)試劑盒
- 主要用途細(xì)胞谷氨酰胺酶(glutaminase)活性光度法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過谷氨酰胺酶和谷氨酸脫氫酶的酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)還原后吸光峰值的,即采用光度法來測(cè)定細(xì)胞裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解懸液樣品(動(dòng)物、人體、昆蟲等)谷氨酰胺酶的活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景谷氨酰胺酶(glutaminase;EC3.5.1.2)是一種氨基酸水解酶(amidohydrolase),將谷氨酰胺脫氨基(deaminating)轉(zhuǎn)化為谷氨酸。其同工酶具有組織特異性:其功能在肝細(xì)胞中產(chǎn)生的氨,用于合成尿素;在腎小管上皮細(xì)胞中產(chǎn)生的氨通過氨離子分泌,調(diào)節(jié)腎的酸堿平衡;同時(shí)在膠質(zhì)細(xì)胞(glialcell)和腸細(xì)胞中也有表達(dá)。谷氨酰胺酶在藥物和食品工業(yè)方面應(yīng)用廣泛,例如調(diào)味品的生產(chǎn)和白血病ZL的藥物等。基于底物谷氨酰胺在谷氨酰胺酶酶的作用下,轉(zhuǎn)化為谷氨酸和氨氣,進(jìn)而在谷氨酸脫氫酶的催化下,伴隨著氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizednicotinamideadeninedinucleotide;NAD+)轉(zhuǎn)化為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH),產(chǎn)生的吸光峰值的變化(340nm波長(zhǎng)),來定量分析谷氨酰胺酶的活性。其酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)胞谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細(xì)胞谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-01-15 00:00
其它
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組織乙酰輔酶A羧化酶活性光度法定量 檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途組織乙酰輔酶A羧化酶(ACETYL-COACARBOXYLASE)活性光度法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過底物乙酰輔酶A和碳酸氫鹽受到乙酰輔酶A羧化酶的催化反應(yīng)后,進(jìn)而由丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續(xù)循環(huán)法反應(yīng)系統(tǒng),測(cè)定產(chǎn)生ADP過程中,伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的氧化反應(yīng),即采用光度法測(cè)定其氧化后峰值的變化,以分析組織裂解樣品中乙酰輔酶A羧化酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解萃取液樣品(動(dòng)物、人體)、部分或完全純化酶樣品中乙酰輔酶A羧化酶活性的定量檢測(cè),以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,高度敏感。技術(shù)背景乙酰輔酶A羧化酶(AcetylCoACarboxylase;ACC;EC6.4.1.2),又稱為乙酰輔酶A碳酸氫鹽連接酶(AcetylCoA:bicarbonateligase-ATP),是ATP依賴性含生物素酶,參與脂肪酸生物合成。哺乳動(dòng)物乙酰輔酶A羧化酶單體分子量為225-250Kd,含有許多磷酸化位點(diǎn),以及1個(gè)生物素輔基位點(diǎn)、2個(gè)催化位點(diǎn)和1個(gè)異構(gòu)(allosteric)位點(diǎn)。乙酰輔酶A羧化酶催化生物素輔基(prostheticgroup)的羧基化反應(yīng),然后將生物素上的羧基轉(zhuǎn)移到輔酶A上,產(chǎn)生丙二酰輔酶A(malonylCoA),成為長(zhǎng)鏈脂肪酸合成前的關(guān)鍵步驟。AMP活化蛋白激酶(AMP-ActivatedKinase;AMPK)調(diào)節(jié)該酶的活性,而十四烷基氧糠酸(5-(tetradecyloxy)-2-furoicacid;TOFA)YZ該酶的活性?;诘孜镆阴]o酶A(acetylCoA)和碳酸氫鹽,在ATP的存在下,受到乙酰輔酶A羧化酶的催化,獲得產(chǎn)物丙二酰輔酶A和ADP,進(jìn)而通過丙酮酸激酶(pyruvatekinase;PK)和乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase;LDH)反應(yīng)系統(tǒng)中,還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizednicotinamideadeninedinucleotide;NAD),其吸光峰值的變化(340nm),來定量分析乙酰輔酶A羧化酶的活性。其反應(yīng)方式為:AcetylCoACarboxylaseAcetylCo-A+ATP+HCO3→MalonylCoA+ADP+PipyruvatekinasePhosphoenolpyruvate+ADP→pyruvate+ATPlactatedehydrogenasepyruvate+NADH→lactate+NAD+(高吸收峰)(低吸收峰)產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)60毫升裂解液(ReagentB)10毫升緩沖液(ReagentC)20毫升酶促液(ReagentD)2毫升反應(yīng)液(ReagentE)2毫升底物液(ReagentF)2毫升陰性液(ReagentG)500微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融;有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于樣品保存的容器15毫升錐形離心管:用于樣品處理的容器DOUNCE勻漿器:用于裂解組織(微型)臺(tái)式離心機(jī):用于樣品預(yù)處理1厘米光徑比色皿或96孔板:用于光度分析操作的容器分光光度儀或酶標(biāo)儀:用于樣品光度分析[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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植物脂酰輔酶A合成酶(ACS)試劑盒使用說明書
- 植物脂酰輔酶A合成酶(ACS)試劑盒使用說明書[詳細(xì)]
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2014-03-26 00:00
課件
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組織谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途組織谷氨酰胺酶(glutaminase)活性光度法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過谷氨酰胺酶和谷氨酸脫氫酶的酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)還原后吸光峰值的,即采用光度法來測(cè)定組織裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解懸液樣品(動(dòng)物、人體、昆蟲等)谷氨酰胺酶的活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景谷氨酰胺酶(glutaminase;EC3.5.1.2)是一種氨基酸水解酶(amidohydrolase),將谷氨酰胺脫氨基(deaminating)轉(zhuǎn)化為谷氨酸。其同工酶具有組織特異性:其功能在肝細(xì)胞中產(chǎn)生的氨,用于合成尿素;在腎小管上皮細(xì)胞中產(chǎn)生的氨通過氨離子分泌,調(diào)節(jié)腎的酸堿平衡;同時(shí)在膠質(zhì)細(xì)胞(glialcell)和腸細(xì)胞中也有表達(dá)。谷氨酰胺酶在藥物和食品工業(yè)方面應(yīng)用廣泛,例如調(diào)味品的生產(chǎn)和白血病ZL的藥物等?;诘孜锕劝滨0吩诠劝滨0访该傅淖饔孟拢D(zhuǎn)化為谷氨酸和氨氣,進(jìn)而在谷氨酸脫氫酶的催化下,伴隨著氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizednicotinamideadeninedinucleotide;NAD+)轉(zhuǎn)化為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH),產(chǎn)生的吸光峰值的變化(340nm波長(zhǎng)),來定量分析谷氨酰胺酶的活性。其酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠脂酰輔酶A合成酶(ACS)ELISA試劑盒
- 大鼠脂酰輔酶A合成酶(ACS)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-09 00:00
專利
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組織谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 組織谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-28 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物V活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- MB50083v.A線粒體呼吸鏈復(fù)合物V活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物V(F0F1-ATP酶/ATP合成酶)活性光度法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續(xù)循環(huán)法反應(yīng)系統(tǒng),測(cè)定與ATP合成對(duì)應(yīng)的ATP水解產(chǎn)生ADP過程中,伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后吸光峰值的降低,即采用光度法測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體樣品(動(dòng)物、人體、酵母)以及細(xì)胞或組織裂解懸液樣品的F0F1-ATP酶/ATP合成酶的特異性活性檢測(cè)??捎糜谛募 ⒛芰看x、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測(cè)敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物V,通常稱為ATP合成酶(ATPsynthase)、F型ATP酶(FtypeATPase)和F1F0ATP酶(F1F0ATPase),是線粒體氧化磷酸化的反應(yīng)。其分子量為500KD,含有十六個(gè)亞單位,其中兩個(gè):ATP酶6和8為線粒體DNA編碼的。ATP酶主要有兩個(gè)結(jié)構(gòu)域:F0為質(zhì)子通道,由幾個(gè)膜蛋白構(gòu)成,包括a、b、c、d、e、F6、A6L、OSCP(oligomycinsensitiveconferringprotein)等;和F1催化活性結(jié)構(gòu)域,由水溶性的α3β3γδε蛋白構(gòu)成。其Z特征性的酶活性是寡霉素敏感的ATP合成酶。復(fù)合物V的主要功能在于產(chǎn)生大部分細(xì)胞所需的能量ATP。ATP的合成需要線粒體內(nèi)膜電子傳遞到氧分子時(shí),呼吸鏈蛋白所產(chǎn)生的質(zhì)子梯度變化。質(zhì)子通過F0結(jié)構(gòu)域傳遞到基質(zhì),激活F1催化活性結(jié)構(gòu)域,促使ATP合成。該酶異常會(huì)導(dǎo)致心肌和神經(jīng)系統(tǒng)疾病?;贏TP,在寡霉素參與下,受到F1F0ATP酶的水解,進(jìn)而通過丙酮酸激酶(pyruvatekinase;PK)和乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase;LDH)反應(yīng)系統(tǒng)中,還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideadeninedinucleotide;NAD),產(chǎn)生的吸光峰值的變化(340nm),來定量分析F1F0ATP酶活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為:F1F0ATPaseATP=ADP+PipyruvatekinasePhosphoenolpyruvate+ADP→pyruvate+ATPlactatedehydrogenasepyruvate+NADH→lactate+NAD+(高吸收峰)(低吸收峰)產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)20毫升反應(yīng)液(ReagentB)2.5毫升陰性液(ReagentC)2毫升底物液(ReagentD)500微升專性液(ReagentE)250微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融;反應(yīng)液(ReagentB),避免光照,有效保證6月用戶自備比色皿:用于光度分析的容器分光光度儀:用于光度分析培養(yǎng)箱:用于孵育反應(yīng)物實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化;反應(yīng)液(ReagentB)注意避光。然后進(jìn)行下列操作。測(cè)定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測(cè)樣品(例如純化線粒體樣品等),置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀(溫度為30℃):波長(zhǎng)為340nm,間隔30秒,讀數(shù)11次(共5分鐘),并置零緩沖液(ReagentA)室溫下均衡溫度背景對(duì)照測(cè)定移取780微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液(ReagentB)加入20微升底物液(ReagentD)放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘加入100微升陰性液(ReagentC)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè),此為背景空對(duì)照:340波長(zhǎng)讀數(shù)0分鐘-340波長(zhǎng)讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品總活性測(cè)定移取780微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液(ReagentB)加入20微升底物液(ReagentD)放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘加入100微升待測(cè)樣品(注意:10微克總線粒體蛋白)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè),此為樣品總活性讀數(shù):340波長(zhǎng)讀數(shù)0分鐘-340波長(zhǎng)讀數(shù)1分鐘或5分鐘樣品非特異活性測(cè)定實(shí)驗(yàn)開始前,移取100微升待測(cè)樣品(注意:10微克總線粒體蛋白)到1.5毫升離心管,加入20微升專性液(ReagentE),混勻后,放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育15分鐘。然后置于冰槽里備用移取760微升緩沖液(ReagentA)到新的比色皿加入100微升反應(yīng)液(ReagentB)加入20微升底物液(ReagentD)放進(jìn)30℃培養(yǎng)箱里孵育3分鐘加入120微升上述預(yù)處理的待測(cè)樣品上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè),此為樣品非特異活性讀數(shù):340波長(zhǎng)讀數(shù)0分鐘-340波長(zhǎng)讀數(shù)1分鐘或5分鐘計(jì)算樣品活性1)樣品活性(總活性和非特異活性)【(樣品讀數(shù)-背景讀數(shù))X1(體系容量;毫升)X樣品稀釋倍數(shù)】÷【0.1(樣品容量;毫升)X6.22(毫摩爾吸光系數(shù)X1或5(反應(yīng)時(shí)間;分鐘)】=單位/毫升÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=單位/毫克單位=微摩爾NADH/分鐘2)樣品特異活性樣品總活性-樣品非特異活性=樣品特異活性[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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組織乙酰輔酶A羧化酶(ACETYL-COA CARBOXYLASE)活性光度法定量 檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 組織乙酰輔酶A羧化酶(ACETYL-COA CARBOXYLASE)活性光度法定量 檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2014-12-23 00:00
選購(gòu)指南
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植物3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶活性直接光度法定量 檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 植物3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶活性直接光度法定量 檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-19 00:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)胞酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
- 主要用途細(xì)胞酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過酪氨酸酶反應(yīng)系統(tǒng)中底物酪氨酸氧化后,產(chǎn)生多巴色素,呈現(xiàn)吸光峰值的變化,即采用比色法來測(cè)定細(xì)胞裂解懸液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種人體和動(dòng)物細(xì)胞,尤其是黑色素細(xì)胞和黑色素瘤細(xì)胞裂解懸液樣品中酪氨酸酶的活性檢測(cè),以及YZ劑篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景酪氨酸酶(tyrosinase;EC1.14.18.1)是一種單酚單加氧酶(monophenolmonooxygenase),又稱為單酚酶(monophenolase)或單酚二羥基苯丙氨酸:O2氧化還原酶(monophenoldihydroxyphenylalanin:O2oxidoreductase),具有雙功能的含銅糖蛋白,廣泛存在于植物、酵母和動(dòng)物組織中,其蛋白結(jié)構(gòu)、大小、糖基化方式、激活特征等都不同。人體酪氨酸酶是一個(gè)跨膜蛋白,而催化結(jié)構(gòu)域在黑色素細(xì)胞(melanocyte)或色素細(xì)胞的黑色素器(melanosome)里。酪氨酸酶通過催化L-酪氨酸(L-tyrosine)等的o-羥基化(o-hydroxylation)反應(yīng)變成L-多巴(L-dopamine),進(jìn)而氧化產(chǎn)生黑色素底物多巴醌(dopaquinone),從而由多巴色素(dopachrome)轉(zhuǎn)化為黑色素(melanin)中的真黑素(eumelanin),以及其它色素,包括毛發(fā)和眼睛色素。紫外線可以激活酪氨酸酶活性,嚴(yán)重時(shí),會(huì)引起色素沉著(hyperpigmentation)。酪氨酸酶基因突變將導(dǎo)致I型眼皮膚白化病(oculocutaneousalbinism)。酪氨酸酶YZ劑成為增白化妝品的重要元素?;诘孜锢野彼幔诶野彼崦傅拇呋?,產(chǎn)生多巴色素,通過其吸光值的變化(475nm波長(zhǎng)),來定量測(cè)定酪氨酸酶的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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Ca-ATP酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書
- Ca-ATP酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途ATP酶存在于組織細(xì)胞及細(xì)胞器的膜上,是生物膜上的一種蛋白酶,機(jī)體在缺氧及等狀態(tài)下,ATP酶受到損傷,活力下降。ATP酶活力的大小是各種細(xì)胞能量代謝及功能有無損傷的重要指標(biāo)。本測(cè)試盒可測(cè)鈉鉀ATP酶、鈣鎂ATP酶的活性。樣品為各種組織及紅細(xì)胞等,本法的Zda特點(diǎn)是樣品前處理不需要高速離心機(jī),方法簡(jiǎn)便、快速。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)6毫升反應(yīng)液(ReagentB)6毫升底物液(ReagentC)6毫升陰性液(ReagentD)6毫升標(biāo)準(zhǔn)品(reagentE)6微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentC)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里;底物液(ReagentC)避免光照,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于反應(yīng)液配制的容器微型臺(tái)式離心機(jī):用于樣品制備比色皿或酶標(biāo)板:用于比色的容器分光光度儀:用于比色分析酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentC)置入冰槽里融化。底物液(ReagentC)避免光照。然后進(jìn)行下列操作。樣品準(zhǔn)備選擇一:血漿樣品1.準(zhǔn)備好ACD抗凝管(注意:避免使用肝素或EDTA抗凝管)2.抽取2毫升血液,置于抗凝管里3.放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為5000g4.小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血漿成分(注意:避免觸碰白色液體層)5.即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)-70℃冰箱里保存6.(選擇步驟)移取50微升進(jìn)行蛋白定量測(cè)定選擇二:血清樣品1.準(zhǔn)備好不含抗凝劑的儲(chǔ)存管2.抽取2毫升血液,置于儲(chǔ)存管里3.室溫下,靜置30分鐘,直至血液凝結(jié)4.放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心15分鐘,速度為5000g5.小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血清成分(注意:避免觸碰白色液體層)6.即刻置于冰槽里備用或放進(jìn)-70℃冰箱里保存7.(選擇步驟)移取50微升進(jìn)行蛋白定量測(cè)定選擇三:組織樣本準(zhǔn)確稱取組織重量,按照重量(g):體積(ml)=1:9的比例,加入9倍的是PBS或者生理鹽水,冰水浴條件下機(jī)械勻漿,2500轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,去上清液待測(cè)。二、測(cè)定準(zhǔn)備1.準(zhǔn)備好上述待測(cè)樣品,置于冰槽里2.設(shè)定好分光光度儀(溫度為37℃):波長(zhǎng)440nm三、樣本測(cè)定1.在96孔酶標(biāo)板上做好相應(yīng)標(biāo)記:背景對(duì)照,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔2.分別移取50微升緩沖液(ReagentA)到相應(yīng)孔中3.設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)品孔(加入50微升標(biāo)準(zhǔn)品),樣本孔(加入50微升樣本)陰性液孔(加入50微升陰性液(ReagentD)4.分別加入50微升反應(yīng)液(ReagentB)5.輕輕搖動(dòng)96孔酶標(biāo)板6.在37℃溫度下孵育2分鐘7.放進(jìn)酶標(biāo)儀,置零8.取出酶標(biāo)板,分別加入50微升底物液(ReagentC)9.輕輕搖動(dòng)酶標(biāo)板10.即刻放進(jìn)酶標(biāo)儀檢測(cè),包括(0分鐘初始讀數(shù)和5分鐘讀數(shù))四,樣本計(jì)算樣本活性=樣本OD值/標(biāo)準(zhǔn)OD值*標(biāo)品濃度[詳細(xì)]
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2024-09-29 05:34
產(chǎn)品樣冊(cè)
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真菌/酵母細(xì)胞β1,3- D-葡聚糖合成酶活性定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 真菌/酵母細(xì)胞β1,3- D-葡聚糖合成酶活性定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-04-16 00:00
其它
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真菌/酵母細(xì)胞β1,3- D-葡聚糖合成酶活性定量檢測(cè)試劑盒
- 主要用途真菌/酵母細(xì)胞β1,3-D-葡聚糖合成酶活性定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過β1,3-D-葡聚糖合成酶反應(yīng)系統(tǒng)中尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖底物聚合成葡聚糖,與熒光染料結(jié)合產(chǎn)生熒光峰值的變化,來測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種真菌或酵母細(xì)胞株裂解懸液中β1,3-D-葡聚糖合成酶的活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,具有高通量特點(diǎn)。技術(shù)背景真菌/酵母細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)具有豐富的糖蛋白外層和碳水化合物內(nèi)層,包括(1,3)-β-D,(1,6)-β-D和(1,3)-α-D-葡聚糖(glucan)。其中(1,3)-β-D為主要元素。1,3-β-D-葡聚糖合成酶(1,3-β-D-glucansynthase;GS;EC.2.4.1.34),又稱為尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖:1,3-β-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(UDP-glucose:1,3-β-glucosyltransferase),催化以尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖(UDP-glucose)為底物,通過1,3-β鏈接聚合為葡聚糖的反應(yīng),構(gòu)成真菌/酵母細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)中主要碳水化合物成分1,3-β-D-葡聚糖,為細(xì)胞生長(zhǎng)所必需。1,3-β-D-葡聚糖合成酶具有兩種結(jié)構(gòu)體:1個(gè)調(diào)節(jié)亞體,GTPaseRho1p和4個(gè)催化亞體,Bgs1p-4p或Fksp。(1,3)-β-D-葡聚糖合成酶成為抗真菌藥物,例如卡泊芬凈(caspofungi)等的靶標(biāo)?;诘孜颱DP-glucose在葡聚糖合成酶的催化下,聚合成(1,3)-β-D-葡聚糖產(chǎn)物,與苯胺藍(lán)(Anilineblue;4,4-(carbonyl-bis(benzene-4,1-diyl)-bis-(imino)-bis-benzenesulfonicacid)反應(yīng)產(chǎn)生復(fù)合物,呈現(xiàn)熒光峰值的變化(激發(fā)波長(zhǎng)400nm,散發(fā)波長(zhǎng)460nm),由此定量測(cè)定β1,3-D-葡聚糖合成酶的活性。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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組織乙醛脫氫酶2活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 組織乙醛脫氫酶2活性光度法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2014-12-30 00:00
安裝說明
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組織乙醛脫氫酶2活性光度法定量檢測(cè)試劑盒
- 主要用途組織乙醛脫氫酶2活性光度法定量檢測(cè)試劑盒是一種旨在使用乙醛脫氫酶2敏感性YZ劑,通過檢測(cè)反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)還原后峰值的,即采用光度法來測(cè)定組織裂解萃取液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解懸液樣品(動(dòng)物、人體等)乙醛脫氫酶2的特異活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景乙醛脫氫酶(aldehydedehydrogenase;ALDH;EC1.2.1.3),又稱為乙醛NAD氧化還原酶(aldehydeNAD-oxidoreductase)是一類NAD(P)依賴性酶,催化廣譜的外源性或內(nèi)源性脂肪族和芳香族乙醛類底物氧化,包括乙醇、氨基酸、生物胺(biogenicamine)、維生素、固醇類、脂質(zhì)、藥物和環(huán)境分子等代謝產(chǎn)物。乙醛脫氫酶是乙醇在體內(nèi)分解代謝過程中兩種主要酶之一。乙醛脫氫酶把乙醛中的兩個(gè)氫原子脫掉,使乙醛轉(zhuǎn)化為乙酸,生成的乙酸進(jìn)入脂肪酸氧化途徑,Z終被氧化成二氧化碳和水。乙醛脫氫酶主要有兩種同工酶:ALDH1和ALDH2。ALDH1存在于胞液中,ALDH2存在于線粒體中,ALDH2比ALDH1的活性高。乙醛脫氫酶的缺少,使酒精不能被完全分解為水和二氧化碳,而是以乙醛繼續(xù)留在體內(nèi),使人喝酒后產(chǎn)生惡心欲吐、昏迷不適等醉酒癥狀?;趤碜杂谝掖即x產(chǎn)生的乙醛(acetaldehyde),在7-羥基-3-(4-羥苯基)-異黃酮-7-糖苷(Daidzein-7-O-β-D-glucopyranoside;Daidzin)存在與否的情況下,由乙醛脫氫酶2的催化作用,轉(zhuǎn)化為乙酸(aceticacid)產(chǎn)物后,通過測(cè)定反應(yīng)體系中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizedreducednicotinamideadeninedinucleotide;NAD)轉(zhuǎn)化為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)的變化(340nm波長(zhǎng)),來定量分析乙醛脫氫酶2的特異活性。乙醛脫氫酶2反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)胞脂質(zhì)比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細(xì)胞脂質(zhì)比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-12 00:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物 II 活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書
- 線粒體呼吸鏈復(fù)合物II活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書免費(fèi)下載,下載后方可查看!![詳細(xì)]
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2018-10-01 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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線粒體呼吸鏈復(fù)合物I活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途線粒體呼吸鏈復(fù)合物I(NADH-輔酶Q還原酶)活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用合成輔酶Q同功類似物和特異性YZ劑,通過反應(yīng)系統(tǒng)測(cè)定樣品中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后峰值的降低,即采用比色法測(cè)定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種純化線粒體樣品(動(dòng)物、人體、酵母)以及細(xì)胞或組織裂解懸液樣品的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)-輔酶Q還原酶的特異性活性檢測(cè)。其用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測(cè)敏感。技術(shù)背景線粒體呼吸鏈復(fù)合物I,通常稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸輔酶Q還原酶(reducednicotinamideadeninedinucleotidecoenzymeQreductase;NADH-CoQreductase),又稱為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸脫氫酶(reducednicotinamideadeninedinucleotidedehydrogenase;NADHdehydrogenase),是線粒體電子傳遞鏈中Zda的結(jié)構(gòu)成分:含有30至40多個(gè)多肽結(jié)構(gòu)。其特征性的酶活性是魚藤酮敏感的NADH-輔酶Q還原酶(NADH:QReductase)。復(fù)合物I催化線粒體內(nèi)電子由供體NADH傳遞到內(nèi)膜上輔酶Q受體(泛醌;ubiquinone)的能量轉(zhuǎn)移反應(yīng),為整個(gè)呼吸鏈反應(yīng)系統(tǒng)的**步?;谳o酶Q底物,在魚藤酮存在與否的情況下,通過NADH-輔酶Q還原酶的催化,轉(zhuǎn)化成還原型泛醌(CoQH2),同時(shí)還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideadeninedinucleotide;NAD),在分光光度儀下產(chǎn)生吸收峰值的變化(340nm波長(zhǎng)),由此定量測(cè)定NADH-輔酶Q還原酶的特異活性。其反應(yīng)系統(tǒng)是:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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