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植物3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶活性直接光度法定量 檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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本文由 上海哈靈生物科技有限公司 整理匯編
2015-05-19 00:00 363閱讀次數(shù)
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植物3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶活性直接光度法定量 檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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植物3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶活性直接光度法定量 檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 植物3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶活性直接光度法定量 檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-19 00:00
產(chǎn)品樣冊
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組織3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶光譜法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 組織3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶光譜法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2024-09-20 22:50
產(chǎn)品樣冊
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血液3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶光譜法定量檢測試劑盒 產(chǎn)品說明書(中文版)
- 血液3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶光譜法定量檢測試劑盒 產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2024-09-28 00:08
其它
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細(xì)胞3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶光譜...
- 細(xì)胞3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶光譜中文版說明書[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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組織3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶光譜
- 主要用途組織3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶光譜法定量檢測試劑是一種旨在運(yùn)用3-羥-3-甲戊二酰輔酶A作為底物,在還原酶的催化下,還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化后吸光峰值的降低,即采用光譜法來測定組織裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解懸液、微粒體,或純化酶樣品3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶的活性檢測,以及YZ劑篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景甲戊二羥酸通路(mevalonatepathway),又稱為3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶通路或甲戊二羥酸依賴性通路,是所有高等真核生物和許多細(xì)菌具有的重要的細(xì)胞代謝通路,用于體內(nèi)產(chǎn)生二甲基丙烯焦磷酸(dimethylallylpyrophosphate;DMAPP)和異戊二烯焦磷酸(isopentenylpyrophosphate;IPP)作為生物大分子合成的基礎(chǔ),包括蛋白質(zhì)異戊二烯化、細(xì)胞膜維護(hù)、激素合成、蛋白固著、蛋白糖化等。3-羥-3-甲戊二酰輔酶A還原酶(3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoAreductase;HMGR;EC1.1.1.34)是控制甲戊二羥酸通路的關(guān)鍵的酶,調(diào)節(jié)膽固醇和類異戊二烯脂分子的產(chǎn)生。HMG-COA還原酶位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上,含有8個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域,其中活性結(jié)構(gòu)域在細(xì)胞漿里。HMG-COA還原酶是許多降脂藥物的靶標(biāo),包括lovastatin(Mevacor)、atorvastatin(Lipitor)、pravastatin(Pravachol)和simvastatin(Zocor)。在HMG-COA還原酶的催化下,將4個(gè)電子的3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原為甲戊二羥酸(mevalonate),同時(shí)產(chǎn)生還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotidephosphate;NADPH)被氧化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(oxidizednicotinamideadeninedinucleotidephosphate;NADP),其氧化后的吸光峰值變化(340nm波長),來定量分析3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶的活性。3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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血液3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)
- 主要用途血液3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶光譜法定量檢測試劑是一種旨在運(yùn)用3-羥-3-甲戊二酰輔酶A作為底物,在還原酶的催化下,還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化后吸光峰值的降低,即采用光譜法來測定血液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種動(dòng)物或人體血液樣品(血清、血漿、紅細(xì)胞等)或純化酶樣品3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶的活性檢測,以及YZ劑篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景甲戊二羥酸通路(mevalonatepathway),又稱為3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶通路或甲戊二羥酸依賴性通路,是所有高等真核生物和許多細(xì)菌具有的重要的細(xì)胞代謝通路,用于體內(nèi)產(chǎn)生二甲基丙烯焦磷酸(dimethylallylpyrophosphate;DMAPP)和異戊二烯焦磷酸(isopentenylpyrophosphate;IPP)作為生物大分子合成的基礎(chǔ),包括蛋白質(zhì)異戊二烯化、細(xì)胞膜維護(hù)、激素合成、蛋白固著、蛋白糖化等。3-羥-3-甲戊二酰輔酶A還原酶(3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoAreductase;HMGR;EC1.1.1.34)是控制甲戊二羥酸通路的關(guān)鍵的酶,調(diào)節(jié)膽固醇和類異戊二烯脂分子的產(chǎn)生。HMG-COA還原酶位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上,含有8個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域,其中活性結(jié)構(gòu)域在細(xì)胞漿里。HMG-COA還原酶是許多降脂藥物的靶標(biāo),包括lovastatin(Mevacor)、atorvastatin(Lipitor)、pravastatin(Pravachol)和simvastatin(Zocor)。在HMG-COA還原酶的催化下,將4個(gè)電子的3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原為甲戊二羥酸(mevalonate),同時(shí)產(chǎn)生還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotidephosphate;NADPH)被氧化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(oxidizednicotinamideadeninedinucleotidephosphate;NADP),其氧化后的吸光峰值變化(340nm波長),來定量分析3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶的活性。3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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植物3-羥-3-甲戊二酰輔酶A試劑盒說明書
- 主要用途植物3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶活性直接光度法定量檢測試劑是一種旨在運(yùn)用3-羥-3-甲戊二酰輔酶A作為底物,在還原酶的催化下,還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化后吸光峰值的降低,即采用光度法來測定植物裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種植物組織,包括種子(seed)、葉片(leaf)、根(root)、胚胎葉(cotyledon)、上胚軸(epicotyl)等裂解懸液、微粒體,或純化酶樣品3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶的活性檢測,以及YZ劑篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景甲戊二羥酸通路(mevalonatepathway),又稱為3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶通路或甲戊二羥酸依賴性通路,是所有高等真核生物和許多細(xì)菌具有的重要的細(xì)胞代謝通路,用于體內(nèi)產(chǎn)生二甲基丙烯焦磷酸(dimethylallylpyrophosphate;DMAPP)和異戊二烯焦磷酸(isopentenylpyrophosphate;IPP)作為生物大分子合成的基礎(chǔ),包括蛋白質(zhì)異戊二烯化、細(xì)胞膜維護(hù)、激素合成、蛋白固著、蛋白糖化等。3-羥-3-甲戊二酰輔酶A還原酶(3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoAreductase;HMGR;EC1.1.1.34)是控制甲戊二羥酸通路的關(guān)鍵的酶,調(diào)節(jié)膽固醇和類異戊二烯脂分子的產(chǎn)生。HMG-COA還原酶位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上,含有8個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域,其中活性結(jié)構(gòu)域在細(xì)胞漿里。HMG-COA還原酶是許多降脂藥物的靶標(biāo),包括lovastatin(Mevacor)、atorvastatin(Lipitor)、pravastatin(Pravachol)和simvastatin(Zocor)。在植物組織中,HMG-COA還原酶位于質(zhì)體、線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上,含有2個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域,組織發(fā)育、光照、病原菌感染、創(chuàng)傷等將誘導(dǎo)HMG-COA還原酶活性增加。在HMG-COA還原酶的催化下,將4個(gè)電子的3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原為甲戊二羥酸(mevalonate),同時(shí)產(chǎn)生還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotidephosphate;NADPH)被氧化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(oxidizednicotinamideadeninedinucleotidephosphate;NADP),其氧化后的吸光峰值變化(340nm波長),來定量分析3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶的活性。3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMG CoA)試劑盒
- 大鼠3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA)ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿,組織及相關(guān)液體樣本中3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA)的含量。(HMGCoA)實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA)水平。用純化的大鼠3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA),再與HRP標(biāo)記的3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA)正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA)濃度。(HMGCoA)試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:270ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180ng/L,120ng/L,60ng/L,30ng/L,15ng/L)。加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng):試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-09-04 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠3-羥3-甲基戊二酰輔酶A (HMG CoA)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
- 大鼠3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿,組織及相關(guān)液體樣本中3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA)水平。用純化的大鼠3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA),再與HRP標(biāo)記的3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA)正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:270ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180ng/L,120ng/L,60ng/L,30ng/L,15ng/L)。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%檢測范圍:4ng/L-250ng/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月www.biokanu.com[詳細(xì)]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A合酶1(HMGCS1)檢測試劑盒
- 人3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A合酶1(HMGCS1)檢測試劑盒[詳細(xì)]
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2015-03-18 00:00
選購指南
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倉鼠羥甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶 (HMG-CoAR) 說明書
- www.biokanu.com倉鼠羥甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMG-CoAR)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定倉鼠血清,組織及相關(guān)液體樣本中羥甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMG-CoAR)的活性。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中倉鼠羥甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMG-CoAR)水平。用純化的倉鼠羥甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMG-CoAR)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中加入羥甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMG-CoAR),再與HRP標(biāo)記的羥甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMG-CoAR)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的羥甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMG-CoAR)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中倉鼠羥甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMG-CoAR)的濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:720U/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟:1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為480U/L,320U/L,160U/L,80U/L,40U/L)。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和15%檢測范圍:20U/L-550U/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠3-羥3甲基戊二酰輔酶A (HMG CoA)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
- 大鼠3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿,組織及相關(guān)液體樣本中3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA)水平。用純化的大鼠3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA),再與HRP標(biāo)記的3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA)正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠3-羥3-甲基戊二酰輔酶A(HMGCoA)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:270ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180ng/L,120ng/L,60ng/L,30ng/L,15ng/L)。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%檢測范圍:4ng/L-250ng/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月www.biokanu.com[詳細(xì)]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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3-羥酰輔酶A脫氫酶(3HCD)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
- 檢測范圍:96T0.4ng/L-20ng/L使用目的:本試劑盒用于測定微生物樣本中3-羥酰輔酶A脫氫酶(3HCD)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中3-羥酰輔酶A脫氫酶(3HCD)水平。用純化的3-羥酰輔酶A脫氫酶(3HCD)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入3-羥酰輔酶A脫氫酶(3HCD),再與HRP標(biāo)記的3-羥酰輔酶A脫氫酶(3HCD)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的3-羥酰輔酶A脫氫酶(3HCD)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中3-羥酰輔酶A脫氫酶(3HCD)濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-03 10:00
產(chǎn)品樣冊
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組織乙酰輔酶A羧化酶(ACETYL-COA CARBOXYLASE)活性光度法定量 檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 組織乙酰輔酶A羧化酶(ACETYL-COA CARBOXYLASE)活性光度法定量 檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2014-12-23 00:00
選購指南
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組織乙酰輔酶A羧化酶活性光度法定量 檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途組織乙酰輔酶A羧化酶(ACETYL-COACARBOXYLASE)活性光度法定量檢測試劑是一種旨在通過底物乙酰輔酶A和碳酸氫鹽受到乙酰輔酶A羧化酶的催化反應(yīng)后,進(jìn)而由丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續(xù)循環(huán)法反應(yīng)系統(tǒng),測定產(chǎn)生ADP過程中,伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的氧化反應(yīng),即采用光度法測定其氧化后峰值的變化,以分析組織裂解樣品中乙酰輔酶A羧化酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解萃取液樣品(動(dòng)物、人體)、部分或完全純化酶樣品中乙酰輔酶A羧化酶活性的定量檢測,以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,高度敏感。技術(shù)背景乙酰輔酶A羧化酶(AcetylCoACarboxylase;ACC;EC6.4.1.2),又稱為乙酰輔酶A碳酸氫鹽連接酶(AcetylCoA:bicarbonateligase-ATP),是ATP依賴性含生物素酶,參與脂肪酸生物合成。哺乳動(dòng)物乙酰輔酶A羧化酶單體分子量為225-250Kd,含有許多磷酸化位點(diǎn),以及1個(gè)生物素輔基位點(diǎn)、2個(gè)催化位點(diǎn)和1個(gè)異構(gòu)(allosteric)位點(diǎn)。乙酰輔酶A羧化酶催化生物素輔基(prostheticgroup)的羧基化反應(yīng),然后將生物素上的羧基轉(zhuǎn)移到輔酶A上,產(chǎn)生丙二酰輔酶A(malonylCoA),成為長鏈脂肪酸合成前的關(guān)鍵步驟。AMP活化蛋白激酶(AMP-ActivatedKinase;AMPK)調(diào)節(jié)該酶的活性,而十四烷基氧糠酸(5-(tetradecyloxy)-2-furoicacid;TOFA)YZ該酶的活性?;诘孜镆阴]o酶A(acetylCoA)和碳酸氫鹽,在ATP的存在下,受到乙酰輔酶A羧化酶的催化,獲得產(chǎn)物丙二酰輔酶A和ADP,進(jìn)而通過丙酮酸激酶(pyruvatekinase;PK)和乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase;LDH)反應(yīng)系統(tǒng)中,還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizednicotinamideadeninedinucleotide;NAD),其吸光峰值的變化(340nm),來定量分析乙酰輔酶A羧化酶的活性。其反應(yīng)方式為:AcetylCoACarboxylaseAcetylCo-A+ATP+HCO3→MalonylCoA+ADP+PipyruvatekinasePhosphoenolpyruvate+ADP→pyruvate+ATPlactatedehydrogenasepyruvate+NADH→lactate+NAD+(高吸收峰)(低吸收峰)產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)60毫升裂解液(ReagentB)10毫升緩沖液(ReagentC)20毫升酶促液(ReagentD)2毫升反應(yīng)液(ReagentE)2毫升底物液(ReagentF)2毫升陰性液(ReagentG)500微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融;有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于樣品保存的容器15毫升錐形離心管:用于樣品處理的容器DOUNCE勻漿器:用于裂解組織(微型)臺(tái)式離心機(jī):用于樣品預(yù)處理1厘米光徑比色皿或96孔板:用于光度分析操作的容器分光光度儀或酶標(biāo)儀:用于樣品光度分析[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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組織谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 組織谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-05-28 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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細(xì)胞谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細(xì)胞谷氨酰胺酶活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2015-01-15 00:00
其它
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3-酮脂酰-輔酶A硫解酶elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T0.1pg/mL-8pg/mL使用目的:本試劑盒用于測定微生物樣本中3-酮脂酰-輔酶A硫解酶(3KCT)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中3-酮脂酰-輔酶A硫解酶(3KCT)水平。用純化的3-酮脂酰-輔酶A硫解酶(3KCT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入3-酮脂酰-輔酶A硫解酶(3KCT),再與HRP標(biāo)記的3-酮脂酰-輔酶A硫解酶(3KCT)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的3-酮脂酰-輔酶A硫解酶(3KCT)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中3-酮脂酰-輔酶A硫解酶(3KCT)濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細(xì)胞長鏈脂酰輔酶A合成酶活性酶連續(xù)循環(huán)光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 細(xì)胞長鏈脂酰輔酶A合成酶活性酶連續(xù)循環(huán)光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細(xì)胞長鏈脂酰輔酶A合成酶(LONG-CHAINACYLCOASYNTHETASE;LACS)活性酶連續(xù)循環(huán)光度法定量檢測試劑是一種旨在通過肌激酶、丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶的酶連續(xù)反應(yīng)系統(tǒng)中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后峰值的降低,即采用光度法來測定細(xì)胞裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種細(xì)胞裂解懸液樣品(動(dòng)物、人體等)長鏈脂酰輔酶A合成酶的活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景脂肪酸β氧化過程(β-oxidation)在動(dòng)物組織的線粒體發(fā)生的脂肪酸代謝通路,可概括為活化、轉(zhuǎn)移、β氧化及Z后經(jīng)三羧酸循環(huán)被徹底氧化生成CO2和H2O,并釋放能量等四個(gè)階段。脂酰輔酶A合成酶(acylcoAsynthetase;EC.6.2.1.3),又稱為脂肪酸硫激酶(fattyacidthiokinase)或脂酰輔酶A連接酶(acylcoAligase),是脂肪酸進(jìn)入β-氧化前的活化所必需:在ATP、CoA-SH、Mg2+存在下,催化飽和或不飽和直鏈脂肪酸分子(C4)連接輔酶A合成相應(yīng)的脂酰輔酶A。其為一高能化合物,水溶性增強(qiáng),提高代謝活性。當(dāng)脂肪酸進(jìn)入細(xì)胞后,在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及線粒體外膜上先被活化,形成脂酰輔酶A衍生物,然后再進(jìn)入線粒體內(nèi)氧化。脂酰輔酶A合成酶分成三種底物特異性的種類:小于4個(gè)碳(C4)的短鏈脂酰輔酶A合成酶(acetyl-CoAsynthetase),介于4至12個(gè)碳(C4-C12)的中鏈脂酰輔酶A合成酶(butyryl-CoAsynthetase),和大于12個(gè)碳(C12)的長鏈脂酰輔酶A合成酶(palmitoylCoAsynthetase)?;陂L鏈脂肪酸棕櫚酸(palmitate)和輔酶A在長鏈脂酰輔酶A合成酶的作用下,產(chǎn)生棕櫚酰輔酶A(palmitoyl-CoA)后,通過肌激酶(myokinase)、丙酮酸激酶(pyruvatekinase)和乳酸脫氫酶(lacticdehydrogenase)系統(tǒng),測定還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizednicotinamideadeninedinucleotide;NAD)的變化(340nm波長),來定量分析長鏈脂酰輔酶A合成酶的活性。長鏈脂酰輔酶A合成酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)系統(tǒng)為:Long-chainacylcoAsynthetasepalmitate+CoA+ATP→palmitoyl-CoA+AMP+PPimyokinaseAMP+ATP→2ADPpyruvatekinase2ADP+2phosphoenolpyruvate→2ATP+2pyruvatelacticdehydrogenase2pyruvate+2β-NADH→2lactate+2β-NAD+產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)120毫升裂解液(ReagentB)10毫升緩沖液(ReagentC)5毫升反應(yīng)液(ReagentD)500微升酶促液(ReagentE)250微升底色液(ReagentF)250微升陰性液(ReagentG)250微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存反應(yīng)液(ReagentD)、酶促液(ReagentE)和底色液(ReagentF)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里;反應(yīng)液(ReagentD)和底色液(ReagentF)避免光照;有效保證6月用戶自備15毫升錐形離心管:用于樣品制備的容器1.5毫升離心管:用于樣品保存的容器細(xì)胞刮脫棒:用于脫離貼壁細(xì)胞(微型)臺(tái)式離心機(jī):用于樣品制備200微升1厘米光徑比色皿或96孔板:用于光度分析的容器分光光度儀或酶標(biāo)儀:用于光度分析實(shí)驗(yàn)步驟樣品準(zhǔn)備準(zhǔn)備好25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶或60mm細(xì)胞培養(yǎng)皿的待測培養(yǎng)細(xì)胞(1至5X106細(xì)胞)小心加入3毫升清理液(ReagentA),覆蓋生長表面小心抽去清理液使用細(xì)胞刮脫棒輕柔刮脫細(xì)胞(注意:可以使用胰酶消化)加入3毫升清理液(ReagentA),混勻細(xì)胞移入到預(yù)冷的15毫升錐形離心管(注意:懸浮細(xì)胞從這一步驟開始)放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為300g小心抽去上清液加入500微升裂解液(ReagentB),充分混勻轉(zhuǎn)移到預(yù)冷的1.5毫升離心管QL渦旋震蕩15秒置于冰槽里孵育30分鐘放進(jìn)4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心移取500微升上清液到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管移取10微升進(jìn)行蛋白定量檢測(注意:建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒-HL30030.1)即刻放進(jìn)-70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作測定準(zhǔn)備開啟并設(shè)定好分光光度儀(溫度為25℃):波長340nm,間隔5分鐘,讀數(shù)3次(共15分鐘),并置零從-20℃冰箱里取出試劑,置于冰槽里融化;反應(yīng)液(ReagentD)和底色液(ReagentF)避免光照緩沖液(ReagentC)室溫下均衡溫度背景對照測定移取195微升緩沖液(ReagentC)到新的比色皿加入25微升反應(yīng)液(ReagentD)加入12.5微升酶促液(ReagentE)加入12.5微升底色液(ReagentF)上下傾倒數(shù)次,混勻在25℃溫度下孵育3分鐘加入5微升陰性液(ReagentG)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放進(jìn)分光光度儀檢測,此為背景空對照(0分鐘讀數(shù)-15分鐘讀數(shù))樣品測定移取195微升緩沖液(ReagentC)到新的比色皿加入25微升反應(yīng)液(ReagentD)加入12.5微升酶促液(ReagentE)加入12.5微升底色液(ReagentF)上下傾倒數(shù)次,混勻在25℃溫度下孵育3分鐘加入5微升待測樣品(20微克蛋白)(注意:樣品須清澈)上下傾倒數(shù)次,混勻(限定在3秒之內(nèi))即刻放進(jìn)分光光度儀檢測,此為樣品讀數(shù)(0分鐘讀數(shù)-15分鐘讀數(shù))五、計(jì)算樣品活性[(樣品讀數(shù)-背景讀數(shù))X0.25(體系容量;毫升)X樣品稀釋倍數(shù)]÷[0.005(樣品容量;毫升)X6.22(毫摩爾吸光系數(shù))X15(反應(yīng)時(shí)間;分鐘)X2]=單位/毫升÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=單位/毫克單位=微摩爾棕櫚酰輔酶A/分鐘酶標(biāo)儀測定在96孔板上做好相應(yīng)標(biāo)記:背景對照和樣品分別移取195微升緩沖液(ReagentC)到96孔板里分別加入25微升反應(yīng)液(ReagentD)分別加入12.5微升酶促液(ReagentE)分別加入12.5微升底色液(ReagentF)輕輕搖動(dòng)96孔板在25℃溫度下孵育3分鐘分別加入5微升陰性液(ReagentG)或待測樣品(20微克蛋白)到相應(yīng)孔里(注意:樣品須清澈)輕輕搖動(dòng)96孔板即刻放進(jìn)酶標(biāo)儀檢測:0分鐘讀數(shù)和15分鐘讀數(shù)活性計(jì)算:[(樣品讀數(shù)-背景讀數(shù))X樣品稀釋倍數(shù)X0.25(體系容量;毫升)]÷[0.005(樣品容量;毫升)X6.22(毫摩爾吸光系數(shù))X0.6(光徑距離;厘米)X15(反應(yīng)時(shí)間;分鐘)X2]=單位/毫升÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=單位/毫克單位=微摩爾棕櫚酰輔酶A/分鐘注意事項(xiàng)本產(chǎn)品為20次操作,包括背景對照操作時(shí),須戴手套系統(tǒng)操作過程中,背景測定只需1次建議使用比色皿測定樣品須澄清,至關(guān)重要加樣后3秒內(nèi)光度測定測定值由高到低變化;測定可持續(xù)15分鐘光度測定后,比色皿須清洗徹底樣本測定0分鐘讀數(shù)高于15分鐘讀數(shù)表明具有酶活性建議待測樣本蛋白濃度為20微克/5微升(本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒-HL30030.1)如果待測樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品濃度長鏈脂酰輔酶A合成酶單位活性定義為:在25℃,pH8.1條件下,每分鐘內(nèi)能夠合成1微摩爾棕櫚酰輔酶A所需的酶量作為一個(gè)活性單位本公司提供系列脂肪酸代謝檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感[詳細(xì)]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
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組織乙醛脫氫酶2活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 組織乙醛脫氫酶2活性光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
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2014-12-30 00:00
安裝說明
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