提取

(1) 取4 g樣品，加入3至5 mL檸檬酸水溶液*充分混勻，加入8 mL二甲基亞砜和10 mL甲醇，振蕩提取10 min；

(2) 加入15 mL甲基叔丁基醚：正己烷=1:1*，振蕩提取10 min，6000rpm離心2 min，取出上層清液；

(3) 向殘渣中加入10 mL甲基叔丁基醚：正己烷=1:1，按照步驟(2)重復(fù)提取一次，合并兩次上清液；

(4) 將上清液在35℃條件下減壓蒸餾至近干，待凈化。 檸檬酸水溶液*：20 g檸檬酸，加入100 mL水溶解； 甲基叔丁基醚：正己烷=1:1* 是體積比。

凈化 ProElut VDC 2 g/12 mL（Cat.#65358）

a活 化：依次向柱中加入10 mL乙酸乙酯、10 mL正己烷，棄去流出液；

b上 樣：用5 mL正己烷分兩次洗滌旋蒸瓶并加入柱中，棄去流出液；

c淋 洗：依次加入10 mL正己烷、10 mL10%乙酸乙酯正己烷，棄去流出液；

d洗 脫：加入20 mL 10%乙酸乙酯正己烷，收集流出液；

e重新溶解：將洗脫液在35 ℃減壓蒸餾至近干，用甲醇定容至1 mL，供HPLC分析。

色譜柱：Diamonsil C18(2), 250 mm×4.6 mm, 5 μm（Cat# 99603）

流 速：1.0 mL/min

進樣量：20 μL

柱 溫：30 ℃

檢測器：UV 254 nm

流動相：A：95% 甲醇水溶液 B：甲醇

嬰幼兒配方奶粉中維生素D2、D3的檢測