提取

(1) 取0.5 g樣品于15 mL離心管中，加入2 mL正己烷混勻，加入10 mL乙腈，渦旋混合2 min，6000 rpm下離心2 min，收集上清液；

(2) 向步驟(1)下層殘渣中加入10mL乙腈，按照步驟(1)重復(fù)提取一次，收集上清液。

(3) 合并步驟(1)、(2)的上清液，在40 ℃下減壓蒸至低于5 mL，待凈化。

凈化 ProElut AFT-2 12 mL（Cat.#65906）

a活 化：向柱中加入10 mL乙腈，流出液棄去；

b上 樣：加入待凈化液，收集流出液；

c洗 脫：加入20 mL 乙腈，收集流出液，合并步驟(b)、(c)流出液；

d衍 生：將流出液在40 ℃下減壓蒸至完全干燥，依次加入0.5 mL正己烷和0.5 mL三氟乙酸，旋緊玻璃塞充分混勻衍生液，45 ℃靜置10 min，吹干衍生液，用流動相定容至1 mL。

色譜條件 色譜柱：Diamonsil C18(2), 250 mm×4.6 mm, 5 μm（Cat# 99603）

流 速：1.0 mL/min

進(jìn)樣量：20 μL

柱 溫：30 ℃

檢測器：熒光檢測器，Ex：365 nm；Em：435 nm

流動相：A：水 B：異丙醇+乙腈=3+2； A : B=8 : 2