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樣品準(zhǔn)備
(1) 取2 g樣品,加入20 mL甲醇,充分混勻,超聲提取15 min;
(2) 取出上層清液,再向殘?jiān)屑尤?0 mL甲醇,充分混勻,超聲提取15 min,合并上清液;
(3) 向上清液中加入1 mL水,在35℃條件下減壓蒸餾至近干,加入2 mL水,待凈化。
SPE柱凈化——ProElut C18 500 mg/6 mL (Cat.#:63105)
(1)活 化:依次向柱中加入5 mL甲醇、5 mL水,棄去流出液;
(2)上 樣:再將待凈化液加入柱中,收集流出液;
(3)淋 洗:向柱中加入5 mL水,收集流出液。
(4)定 容:合并上述步驟(2)和(3)收集的流出液,用水定容至10 mL,供HPLC分析。
色譜柱:Suprsil C18-EP,250 mm×4.6 mm,5μm(Cat# 82106)
流 速:1.0mL/min
檢測器:UV214 nm
柱 溫:30℃
進(jìn)樣量:20 μL
流動相:乙酸銨*:乙腈=85:15 乙酸銨*:20mmol/L乙酸銨水溶液
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