1 前言

粗纖維的測定方法雖然對飼料工業(yè)和畜牧業(yè)的發(fā)展起到了至關(guān)重要的作用，但不能給出飼料中纖維成分更精確的信息，同時(shí)也不能反映家畜利用纖維物質(zhì)的真實(shí)情況。因?yàn)橛?VanSoest 等人提出的中性洗滌纖維測定方法、酸性洗滌纖維測定方法和酸性洗滌木質(zhì)素測定方法得到廣泛應(yīng)用。由于酸性洗滌木質(zhì)素實(shí)驗(yàn)的酸性洗滌劑消煮的部分與酸性洗滌纖維實(shí)驗(yàn)相同，因此進(jìn)行此實(shí)驗(yàn)室也可得出酸性洗滌纖維的結(jié)果。本實(shí)驗(yàn)使用 F2000 全自動(dòng)纖維分析儀對飼料中酸性洗滌木質(zhì)素的含量進(jìn)行檢測。

2 儀器與試劑

2.1 儀器

F2000 全自動(dòng)纖維分析儀；F2000-B 冷浸提（選配）；500mL 燒杯；高速粉碎機(jī)；分析天平；鼓風(fēng)干燥箱；箱式電阻爐；封口機(jī)；油性簽字筆；自封袋；干燥器；0.42mm 篩。

2.2 試劑

實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)符合 GB/T6682 中三級用水的規(guī)格，使用試劑除特殊說明外，均為分析純。

硫酸；十六烷基三甲基溴化銨(C19H42NBr，CTAB)；丙酮(CH₃COCH₃)；石油醚（30~60℃)；

α高溫淀粉酶（活性 100kU/g，105℃，工業(yè)級）。

酸性洗滌劑(2%十六烷基三甲基溴化銨溶液)：稱取 20gCTAB 溶解于 1000mL1.00mol/L

硫酸(1/2H₂SO₄)溶液中，攪拌溶解。

注：十六烷基三甲基溴化銨對粘膜有刺激，需帶口罩。

12mol/L 硫酸(H₂SO₄)洗滌溶液：準(zhǔn)確移取 666.0mL 或稱取 1235.5g 硫酸（ρ=1.84，96%~98%）慢慢倒入內(nèi)裝300mL 蒸餾水的燒杯內(nèi)，注意不斷攪拌和冷卻，并用水定容至1000mL。

3 實(shí)驗(yàn)方法

3.1 樣品制備

將樣品粉碎并過 0.42mm 篩，樣品裝入自封袋內(nèi)備用。

精確稱取樣品約 0.5g±0.05g 記為 m，放入使用油性簽字筆標(biāo)記好的濾袋中。

將封口機(jī)加熱檔位調(diào)至 3-4 檔，將濾袋封口。封口后再次對濾袋稱重記為 m₀。

3.2 脫脂

將已封口的濾袋置于 500mL 燒杯中，加入石油醚，加入的量以漫過濾袋為準(zhǔn)，浸泡 10min，浸泡結(jié)束用手輕輕擠壓濾袋瀝干石油醚，并在鐵絲網(wǎng)上晾干備用。

3.3 消煮與洗滌

將濾袋置于樣品架中，將樣品架置于消煮罐內(nèi)，設(shè)置實(shí)驗(yàn)方法后，儀器自動(dòng)進(jìn)行消煮并洗滌。參數(shù)設(shè)置如下表。

3.4 丙酮洗滌

待消煮結(jié)束。將濾袋取出瀝干水分后置于 500mL 燒杯中，加入丙酮，加入的量以漫過濾袋為準(zhǔn)，浸泡 10min，浸泡結(jié)束用手輕輕擠壓濾袋瀝干丙酮，并在鐵絲網(wǎng)上晾干。

3.5 干燥*（若無需測試酸洗洗滌纖維含量，此步驟可跳過）

將濾袋放入干燥箱內(nèi)，以 100℃烘干至少 2h 或烘干至恒重，烘干結(jié)束將濾袋放入自封袋中冷卻，冷卻后稱重 m₁。

3.6 酸洗

在 F2000-B 冷浸提裝置或燒杯中用 12mol/L 的硫酸溶液消解，在 20~25℃保持 3h，然后用熱水洗滌至中性。

3.7 干燥

將濾袋瀝干水分后放入干燥箱內(nèi)，以 100℃烘干至少 2h 或烘干至恒重，烘干結(jié)束將濾袋放入自封袋中冷卻，冷卻后稱重 m₁。

3.8 灰化

準(zhǔn)備好瓷坩堝并稱重記為 m₂（取干凈的坩堝，在 600℃馬弗爐中灼燒至少 30 分鐘），將濾袋放在瓷坩堝內(nèi)，并在 600℃馬弗爐中灰化 2h，冷卻稱重坩堝記為 m₃。

4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

4.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

酸性洗滌木質(zhì)素計(jì)算公式為，

其中， m₀──濾袋和試樣重量，g；

m₁──100℃烘干后濾袋及試樣殘?jiān)兀琯（由步驟 3.7 得到的重量）；

m ── 試樣質(zhì)量，g；

m₂──坩堝的重量，g；

m₃──坩堝及灰分的重量，g。

酸性洗滌纖維計(jì)算公式為，

其中， m₀──濾袋和試樣重量，g；

m₁──100℃烘干后濾袋及試樣殘?jiān)?，g（由步驟 3.5 得到的重量）；

m ── 試樣質(zhì)量，g。

4.2 結(jié)論

此次測試的玉米秸稈中的酸性洗滌木質(zhì)素含量為 9.05%，測試結(jié)果與過濾法結(jié)果無顯著差異，濾袋法可批量處理樣品，明顯提高實(shí)驗(yàn)工作效率。

參考文獻(xiàn)

[1] GB/T 20805-2006 飼料中酸性洗滌木質(zhì)素(ADL)的測定[S]. 

注意事項(xiàng)

1）此方法對于所有樣品均需石油醚脫脂。

2）對于秸稈及牧草類密度較低樣品，取樣時(shí)可稱取 0.5g 為宜。

3）濾袋應(yīng)保存在干燥通風(fēng)的環(huán)境中，防止濾袋吸收過多水分。

4）濾袋封口時(shí)，封口機(jī)檔位調(diào)至 3-4 檔，用力按壓封口機(jī)約 5s 后松開，3s 后將濾袋取下。

5）配制酸性洗滌劑時(shí)，在加入十六烷基三甲基溴化銨后使用玻璃棒攪拌溶液使其溶解，完全溶解約需 2~3 小時(shí)。

6）對于淀粉含量高的樣品，可在消煮時(shí)加入 0.2mL/樣品α高溫淀粉酶。

標(biāo)簽：纖維分析儀