飼料中煙酸的測(cè)定

1  儀器及試劑

1.1儀 器

1). 分析天平一臺(tái)（精度0.1mg）；

2). 恒溫水浴鍋一臺(tái)；

3). 容量瓶；

4). 微量進(jìn)樣器（5ul或10μl）一支；

5). 微量可調(diào)移液槍（1000ul）一支、吸頭多個(gè)；

6). 旋渦混勻器一臺(tái)；

7). 離心機(jī)一臺(tái)；

8). LC-10TvpGX液相色譜儀；

1.2試 劑

1). 超純水（≥18MΩ?cm）；

2). 甲醇，色譜純；

3). 三乙胺；

4). 冰乙酸；

5). 己烷磺酸鈉；

6). 煙酸標(biāo)準(zhǔn)品：含量≥99%；

7). 煙酸標(biāo)準(zhǔn)貯備液；

8). 煙酸標(biāo)準(zhǔn)工作液；

1.3  標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

煙酸標(biāo)準(zhǔn)貯備液：稱取經(jīng)過(guò)干燥的煙酸標(biāo)準(zhǔn)純品25.0 mg，置于250ml棕色容量瓶中，用移動(dòng)相溶解，稀釋至刻度，于冰箱保存，可放置一周。

煙酸標(biāo)準(zhǔn)工作液液：準(zhǔn)確吸取煙酸標(biāo)準(zhǔn)貯備液10ml用流動(dòng)相稀釋至50ml或100ml標(biāo)準(zhǔn)溶液置于帶蓋小瓶貯存，供液相色譜儀分析用，當(dāng)日使用。

提取液：取500ml離子水，加10ml乙酸，1.3ml三乙胺，用去離子水定容至1L，此時(shí)pH為3.2，過(guò)0.45 μm濾膜，取上述溶液850mL與150ml醇混合。

2%的乙腈磷酸緩沖液：稱取4.84 g 的磷酸氫二鉀，9.82g 磷酸二氫鉀溶于去離子水中，加20 ml乙腈，用去離子水定容至1 L，混勻用20%氫氧化鉀調(diào)節(jié)pH至6.5。

碳酸鈉溶液:c(Na2CO3)=0.1 mol/L。

2  樣品制備

稱取試樣維生素預(yù)混料0.5-1g或復(fù)合預(yù)混料1-5g極ng確至0.0001g。置于100ml的棕色容量瓶中，加入10ml碳酸鈉溶液，浸濕試樣加70ml提取液混勻，于超聲波水浴中振蕩提取15min，用提取液定容至刻度，混合均勻，過(guò)濾或離心。再經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾，進(jìn)樣測(cè)定。

3  色譜條件

色譜柱：Vertex C18色譜柱　250mm×4.6mm×5μm；

流動(dòng)相：2%的乙腈磷酸緩沖溶液；

流速：1.4mL/min；

溫度：室溫；

進(jìn)樣量：20μL；

檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm。

4  色譜圖