飼料中維生素A的測(cè)定

1  儀器及試劑

儀 器：

1). 分析天平一臺(tái)（精度0.1mg）；

2). 恒溫水浴鍋一臺(tái)；

3). 容量瓶；

4). 微量進(jìn)樣器（5ul或10μl）一支；

5). 微量可調(diào)移液槍（1000ul）一支、吸頭多個(gè)；

6). 旋渦混勻器一臺(tái)；

7). LC-10TvpGX液相色譜儀；

試 劑：

1). 超純水（≥18MΩ?cm）；

2). 甲醇，色譜純；

3). 維生素A乙酸酯標(biāo)準(zhǔn)品：含量≥99%；

4). 維生素A乙酸酯標(biāo)準(zhǔn)貯備液；

5). 維生素A乙酸酯標(biāo)準(zhǔn)工作液；

2  樣品制備

稱取飼料樣品1g，極ng確至0.0001g，置于100ml的棕色容量瓶中，加入約80ml的甲醇，瓶塞不要擰緊，于65℃超聲波水浴中超聲提取30min，冷卻至室溫，用甲醇稀釋至刻度，充分搖勻。如果試樣中維生素A乙酸酯的標(biāo)示量低于107IU/kg，則將溶液過(guò)0.45μm濾膜過(guò)濾，進(jìn)樣測(cè)定。否則，需將溶液用甲醇進(jìn)一步稀釋，使維生素A乙酸酯的進(jìn)樣濃度與維生素A乙酸酯標(biāo)準(zhǔn)工作液濃度接近。

3  色譜條件

色譜柱：Vertex C18色譜柱　150mm×4.6mm×5μm；

流動(dòng)相：甲醇+水（98+2）；

流速：1.0mlmin；

溫度：室溫；

進(jìn)樣量：20μl；

檢測(cè)波長(zhǎng)：326nm。

4  色譜圖