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含淀粉的試樣: 稱取混合均勻的固體試樣約2.5 g 或液體試樣約10 g(極ng確到0.1 mg)于三角瓶中,加入0.5 g 淀粉酶,用30 mL 溫水溶解。
不含淀粉的試樣 :稱取混合均勻的固體試樣約2.5 g或液體試樣約10 g(極ng確到0.1 mg)于三角瓶中,用30 mL溫水溶解。 測定液的制備 向上述處理過的試樣溶液中加入1 g 脂肪酶,于37 ℃ ±5 ℃恒溫空氣浴振蕩器中振蕩過夜,使其充分酶解。取出酶解好的試樣,加入2 mL 氫氧化鈉溶液,用50 mL 乙醇將溶液轉(zhuǎn)入250 mL 的分液漏斗中,充分混勻(必要時加少量飽和氯化鈉溶液)。加入50 mL 正己烷。充分振搖2 min,靜置分層。放出下層水相于另一個250 mL 分液漏斗中,留下有機相。 向水相中再次加入50 mL 正己烷再次萃取。合并有機相。用適量蒸餾水洗有機相兩次。將有機相通過無水硫酸鈉脫水過濾到一個500 mL 的燒瓶中,在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上于40 ℃ ±2 ℃下蒸發(fā)至近干。用正己烷轉(zhuǎn)移殘留物到一個10 mL 試管中,置氮吹儀上于40 ℃ ±2 ℃下吹干,準確加入1 mL 正己烷,充分振蕩溶解殘留物。將試管放入冰箱中在0 ℃以下冷凍1 h 備用。
色譜柱: Diamonsil C18(2), 150×4.6 mm, 5 μm(Cat.#:99601)
鋅粉還原柱 50×4.6 mm(Cat.#99102)——柱后衍生
流動相: 甲醇900 mL;二氯甲烷100 mL;冰醋酸0.3 mL;氯化鋅1.5 g;無水乙酸鈉0.5 g;溶解后用0.45 μm濾膜過濾。
流速: 1.0 mL/min
柱溫: 室溫
檢測器: 熒光檢測器,激發(fā)波長 243 nm,發(fā)射波長 430 nm
進樣量: 10 μL
適用于嬰幼兒食品和乳品中維生素K1 的測定

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