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植物查爾酮合成酶(chalcone synthase)活性比色法試劑盒
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本文由 上海銘博生物科技有限公司 整理匯編
2018-11-08 10:00 339閱讀次數(shù)
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植物查爾酮合成酶(chalconesynthase)活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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植物查爾酮合成酶(chalcone synthase)活性比色法試劑盒
- 植物查爾酮合成酶(chalconesynthase)活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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植物查爾酮合成酶(chalcone synthase)說明書
- 植物查爾酮合成酶(chalconesynthase)活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途植物查爾酮合成酶(chalconesynthase)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過香豆酰輔酶A和丙二酰輔酶A縮合反應(yīng)系統(tǒng)中釋放出巰基輔酶A,使用Ellman試劑后,產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化,即采用比色法來測定植物裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種植物組織,包括種子(seed)、葉片(leaf)、根(root)、胚胎葉(cotyledon)、上胚軸(epicotyl)等查爾酮合成酶的活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景查爾酮合成酶(chalconesynthase;CHS;EC2.3.1.74)是聚酮體合成酶(polyketidesynthase;PKS)大家屬中的一員,是啟動類黃酮(flavonoid)化合物合成通路中**步關(guān)鍵酶,形成植物系統(tǒng)性獲得性抗性(systematicacquiredresistance;SAR)的基礎(chǔ)。查爾酮合成酶存在于細菌、植物和真菌中。在所有裸子植物(gymnosperm)和被子植物(angiosperm)的各種不同發(fā)育階段中的不同組織中表達。查爾酮合成酶為同源二聚體,分子量為40至4000Kd,由環(huán)境壓力,包括UV照射、傷口、病原菌襲擊等誘導(dǎo),通過丙二酰輔酶A脫羧基反應(yīng)(decarboxylation)、與香豆酰輔酶縮合、聚酮體鏈延展(chainelongation)、中間產(chǎn)物環(huán)狀化(cyclization)和芳構(gòu)化(aromatization)產(chǎn)生查爾酮,一種類黃酮化合物前體,作為化學(xué)信使,由此生成各種后續(xù)繼發(fā)性代謝化合物,參與抗病原微生物例如異黃酮植物保護素(isoflavonoidphytoalexin)、花青素花色素化、抵御環(huán)境壓力(UV光保護)、花粉育性(pollenfertility)、抗氧化、共生根系結(jié)瘤(symbioticrootnodulation),以及作為抗生素、免疫YZ劑、抗腫瘤和抗真菌的藥物作用。還在細菌的囊腫形成和阿米巴細胞分化中產(chǎn)生作用?;谙愣辊]o酶A和丙二酰輔酶A,在敏感性YZ劑木犀草素(Luteolin)存在與否的情況下,受到查爾酮合成酶的作用,縮合產(chǎn)生查爾酮,并釋放出巰基輔酶A(CoA-SH),進而與Ellman試劑5,5-二硫基-雙(2-硝基苯甲酸)[5,5,-dithiobis-(2-nitrobenzoicacid);DTNB]反應(yīng)后,產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoicacid;TNB),通過其吸收峰值的變化(412nm波長),來定量分析查爾酮合成酶的活性。查爾酮合成酶反應(yīng)系統(tǒng)為:產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升緩沖液(ReagentC)毫升反應(yīng)液(ReagentD)毫升底物液(ReagentE)毫升專性液(ReagentF)微升產(chǎn)品說明書[詳細]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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植物α-淀粉酶(α-AMYLASE)活性比色法定量檢測試劑盒
- 主要用途植物α-淀粉酶(α-AMYLASE)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用具有還原力的黃色3,5-二硝基水楊酸與受到α-淀粉酶中性環(huán)境下水解產(chǎn)生的還原基團分子反應(yīng),生成強烈吸光的3-氨基-5-硝基水楊酸,即采用比色法測定其還原后峰值的升高變化,以此測定樣品中α-淀粉酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種新鮮植物組織,包括葉片(leaf)、谷粒(grain)、種子(seed)等裂解萃取液樣品α-淀粉酶的活性檢測。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景淀粉酶(AMYLASE)屬于糖苷水解酶類(glycosidehydrolase)。淀粉酶通過水解方式,分解淀粉的α-1,4鏈接,釋放出葡萄糖、麥芽糖(maltose)、麥芽三糖(maltotriose)、糊精(dextrin)等簡單糖分子。淀粉酶分成三類:α-淀粉酶、β-淀粉酶和γ-淀粉酶。其中α淀粉酶(EC3.2.1.1),又稱為α-1,4-葡聚糖-4-葡聚糖水解酶(α-1,4-glucan4-glucanohydrolase)或糖原酶(glycogenase),是鈣離子依賴性鈣金屬蛋白酶(calciummetalloenzyme),分解淀粉為葡萄糖、麥芽糖(maltose)、麥芽三糖(maltotriose)、糊精(dextrin)等,為主要的消化酶,尤其在人體中,例如唾液和胰淀粉酶等。β淀粉酶(EC3.2.1.2),又稱為α-1,4-葡聚糖麥芽糖水解酶(1,4-α-D-glucanmaltohydrolase)或糖基淀粉酶(saccharogenamylase),分解淀粉為葡萄糖等。植物、真菌、細菌等均能產(chǎn)生,而人體組織不含有。γ-淀粉酶(EC3.2.1.2),又稱為α-1,4-葡聚糖葡萄糖苷酶(Glucan1,4-α-glucosidase)或溶酶體α-葡萄糖苷酶(lysosomalα-glucosidase),在酸性環(huán)境下分解淀粉為葡萄糖。淀粉是一種復(fù)雜分子,由多聚糖直鏈淀粉(amylose)和支鏈淀粉(amylopectin)構(gòu)成。植物和細菌產(chǎn)生大多數(shù)淀粉。在淀粉酶的催化作用下,分解產(chǎn)生簡單糖分子,作為能源儲存,植物用于光合作用。植物和細菌性淀粉酶常用于工業(yè),包括烘培食物和乳制品的制造,以及酒精和紙材的生產(chǎn)?;诘矸?,在中性環(huán)境下,通過α-淀粉酶的水解,釋放出麥芽糖等含有游離的還原性基團(例如酮基等),進一步使用具有還原力的黃色3,5-二硝基水楊酸(3,5-Dinitrosalicylicacid;DNS)與之反應(yīng),產(chǎn)生紅棕色的3-氨基-5-硝基水楊酸(3-amino-5-nitrosalicylicacid),在分光光度儀(540nm波長)下測定,以定量分析α-淀粉酶的活性。其反應(yīng)方式為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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植物查爾酮合酶(酶聯(lián)免疫分析使用說明書
- 植物查爾酮合酶(酶聯(lián)免疫分析使用目的:本試劑盒用于測定植物組織,細胞及其它相關(guān)樣本中查爾酮合酶(CHS)活性。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中植物查爾酮合酶(CHS)水平。用純化的植物查爾酮合酶(CHS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入植物查爾酮合酶(CHS),再與HRP標(biāo)記的查爾酮合酶(CHS)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物查爾酮合酶(CHS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中植物查爾酮合酶(CHS)活性濃度。標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。植物查爾酮合酶(酶聯(lián)免疫分析操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。80U/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液40U/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20U/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10U/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5U/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。植物查爾酮合酶(酶聯(lián)免疫分析操作程序總結(jié):計算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊
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真菌酵母β1,3 D葡聚糖合成酶活性比色法定量檢測試劑盒
- 真菌/酵母細胞β1,3-D-葡聚糖合成酶活性定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途真菌/酵母細胞β1,3-D-葡聚糖合成酶活性定量檢測試劑是一種旨在通過β1,3-D-葡聚糖合成酶反應(yīng)系統(tǒng)中尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖底物聚合成葡聚糖,與熒光染料結(jié)合產(chǎn)生熒光峰值的變化,來測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種真菌或酵母細胞株裂解懸液中β1,3-D-葡聚糖合成酶的活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,具有高通量特點。技術(shù)背景真菌/酵母細胞壁結(jié)構(gòu)具有豐富的糖蛋白外層和碳水化合物內(nèi)層,包括(1,3)-β-D,(1,6)-β-D和(1,3)-α-D-葡聚糖(glucan)。其中(1,3)-β-D為主要元素。1,3-β-D-葡聚糖合成酶(1,3-β-D-glucansynthase;GS;EC.2.4.1.34),又稱為尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖:1,3-β-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(UDP-glucose:1,3-β-glucosyltransferase),催化以尿嘧啶核苷-5’-二磷酸葡萄糖(UDP-glucose)為底物,通過1,3-β鏈接聚合為葡聚糖的反應(yīng),構(gòu)成真菌/酵母細胞壁結(jié)構(gòu)中主要碳水化合物成分1,3-β-D-葡聚糖,為細胞生長所必需。1,3-β-D-葡聚糖合成酶具有兩種結(jié)構(gòu)體:1個調(diào)節(jié)亞體,GTPaseRho1p和4個催化亞體,Bgs1p-4p或Fksp。(1,3)-β-D-葡聚糖合成酶成為抗真菌藥物,例如卡泊芬凈(caspofungi)等的靶標(biāo)?;诘孜颱DP-glucose在葡聚糖合成酶的催化下,聚合成(1,3)-β-D-葡聚糖產(chǎn)物,與苯胺藍(Anilineblue;4,4-(carbonyl-bis(benzene-4,1-diyl)-bis-(imino)-bis-benzenesulfonicacid)反應(yīng)產(chǎn)生復(fù)合物,呈現(xiàn)熒光峰值的變化(激發(fā)波長400nm,散發(fā)波長460nm),由此定量測定β1,3-D-葡聚糖合成酶的活性。產(chǎn)品內(nèi)容裂解液(ReagentA)毫升強化液(ReagentB)毫升緩沖液(ReagentC)毫升底物液(ReagentD)微升終止液(ReagentE)微升反應(yīng)液(ReagentF)毫升稀釋液(ReagentG)微升標(biāo)準(zhǔn)液(ReagentH)微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存在-20℃冰箱里;反應(yīng)液(ReagentF)避免光照;終止液(ReagentE)具有腐蝕性,注意操作安全;有效保證6月1[詳細]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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植物堿性焦磷酸酶活性比色法法定量檢測試劑盒
- 主要用途植物堿性焦磷酸酶(AlkalinePyrophosphatase)活性比色法法定量檢測試劑是一種旨在使用無機焦磷酸,在堿性焦磷酸酶去磷酸化后,釋放出游離磷酸根,由硫酸亞鐵氨還原產(chǎn)生鉬藍顯色反應(yīng)后峰值的變化,采用比色法測定其峰值的變化,以此進行測算單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種植物組織,包括種子、球莖(bulb)、塊莖(tuber)、根(root)、種葉(coleoptile)和葉片裂解懸液樣品或純化以及粗提的酶蛋白的堿性焦磷酸酶活性及其YZ劑的檢測。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景焦磷酸酶(Pyrophosphatase;PPase;;EC3.6.1.1),又稱為無機焦磷酸酶(inorganicpyrophosphatase),屬于磷酸酶家族,包括磷酸單酯酶(phosphomonoesterase)、磷酸二酯酶(phosphodiesterase)等。通過釋放磷酸根,參與DNA合成、RNA合成、輔酶合成、鈣吸收、骨形成、氨基酸合成和脂肪酸代謝的激活等代謝活動。焦磷酸酶分為堿性和酸性,前者作用于合成代謝,而后者作用于分解反應(yīng)。焦磷酸酶催化無機焦磷酸水解產(chǎn)生2個磷酸根離子的反應(yīng),為能量釋放反應(yīng)(exergonicreaction)。在植物中,尤其碳4或碳3植物的葉片中,活性Z高。在固碳還原和光合作用起著重要作用成為碳4植物通路的指標(biāo)。基于底物無機焦磷酸,在堿性條件下,受到堿性焦磷酸酶的去磷酸化作用,釋放出游離磷酸根,由硫酸亞鐵氨還原產(chǎn)生鉬藍顯色反應(yīng)后,在分光光度儀下(660nm波長)產(chǎn)生峰值的變化,由此測定堿性焦磷酸酶的活性。[詳細]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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植物蔗糖磷酸合成酶(SPS)ELISA試劑盒
- 植物蔗糖磷酸合成酶(SPS)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-30 10:16
選購指南
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細菌脂肪酶(LIPASE)活性比色法定量檢測試劑盒
- 主要用途細菌脂肪酶(LIPASE)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過底物三丁酸二巰基丙醇受到脂肪酶水解,釋放出巰基基團,使用Ellman試劑,產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化,即采用比色法來測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心改良、成功實驗證明的。其適用于各種細菌細胞裂解液樣品脂肪酶的總活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景脂肪酶(lipase;EC3.1.1.3)是可溶性酶蛋白分子,催化不溶性脂質(zhì)分子的酯鍵(esterbond)的水解。許多細菌產(chǎn)生細胞外酶(exoenzyme),稱為水解酶(hydrolase),在水分子的參與下,催化底物的水解,成為細菌生理特征之一。其中脂肪酶(Lipase),裂解脂肪分子,例如甘油三酯(triglyceride;TAG)、脂肪、油等,產(chǎn)生1個分子甘油(glycerol)和3個分子脂肪酸分子(fattyacid),由此用于合成細菌脂質(zhì)和其它細胞成分,以及氧化產(chǎn)生能量。食品工業(yè)中,常用于食品發(fā)酵(rancidity),例如人造奶油(margarine)等。甚至用于廚房清潔劑和替代能源的生物催化作用。同時據(jù)此用以識別革藍氏陰性細菌,例如枯草芽孢桿菌(Bac.Subtilis)等。細菌脂肪酶在水分子的參與下,催化三丁酸二巰基丙醇(dimercaptopropanoltributyrate;DMPTB或BALB)的水解,產(chǎn)生二巰基丙醇(dimercaptopropanol;DMP),并釋放出巰基基團(-SH),與Ellman試劑5,5-二硫基-雙(2-硝基苯甲酸)[5,5’-dithiobis-(2-nitrobenzoicacid);DTNB]反應(yīng)后,產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoicacid;TNB),通過其吸收峰值的變化(412nm波長),來定量分析脂肪酶的活性。脂肪酶反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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植物蔗糖磷酸合成酶(SPS)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
- 植物蔗糖磷酸合成酶(SPS)酶聯(lián)免疫分析試劑盒本試劑盒僅供研究使用檢測范圍:96T10IU/L-240IU/L使用目的:本試劑盒用于測定植物組織,細胞及其它相關(guān)樣本中蔗糖磷酸合成酶(SPS)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中植物蔗糖磷酸合成酶(SPS)水平。用純化的植物蔗糖磷酸合成酶(SPS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入植物蔗糖磷酸合成酶(SPS),再與HRP標(biāo)記的蔗糖磷酸合成酶(SPS)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物蔗糖磷酸合成酶(SPS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中植物蔗糖磷酸合成酶(SPS)濃度。植物蔗糖磷酸合成酶(SPS)酶聯(lián)免疫分析試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(480IU/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。植物蔗糖磷酸合成酶(SPS)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。240IU/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150l的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液120IU/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150l的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液60IU/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150l的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液30IU/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150l的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液15IU/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150l的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié):計算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。植物蔗糖磷酸合成酶(SPS)酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照植物蔗糖磷酸合成酶(SPS)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-11-23 10:00
產(chǎn)品樣冊
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植物黃烷酮-3-羥化酶試劑盒說明書
- 植物黃烷酮-3-羥化酶(Flavanone-3-hydroxylase;F3H)活性酶連續(xù)反應(yīng)光度法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途植物黃烷酮-3-羥化酶(Flavanone-3-hydroxylase;F3H)活性酶連續(xù)反應(yīng)光度法定量檢測試劑是一種旨在使用黃烷酮-3-羥化酶、琥珀酸輔酶A合成酶、丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續(xù)循環(huán)法反應(yīng)系統(tǒng),伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的氧化反應(yīng),即采用光度法測定其氧化后峰值(NADH濃度)的變化,以此進行測算單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種植物組織,包括種子(seed)、葉片(leaf)、根(root)、胚胎葉(cotyledon)、上胚軸(epicotyl)等黃烷酮-3-羥化酶的活性檢測。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景黃烷酮-3-羥化酶(Flavanone-3-hydroxylase;F3H;EC1.14.11.9),又稱為黃烷酮-3-雙加氧酶(Flavanone-3-dioxygenase),全稱為黃烷酮-2-酮戊二酸:氧分子氧化還原酶(3-羥基化)(flavanone-2-oxoglutarate:oxygenoxidoreductase(3-hydroxylating)),屬于氧化還原酶家族中一員,為可溶性非亞鐵血紅素性含鐵2酮戊二酸依賴性雙加氧酶(2-oxo-glutaratedependentdioxygenase;2-ODD),單體蛋白,催化黃烷酮,例如2S柚皮素(2Snaringenin)的立體選擇性羥基化反應(yīng)(stereospecifichydroxylation)為2R,3R二氫黃酮醇類(dihydroflavonol),例如2R,3R二氫山柰酚(2R,3Rdihydrokaempferol;DHK),是生物合成黃酮類、花青素(anthocyanidins)、兒茶素(catechins)等化合物的關(guān)鍵步驟,,從而調(diào)節(jié)類黃酮通路?;诘孜镨制に厥艿近S烷酮-3-羥化酶的催化,獲得氧化,同時分解2-酮戊二酸,產(chǎn)生二氫山柰酚和琥珀酸,進而通過琥珀酸輔酶A合成酶(SuccinylCoAsynthetase)、丙酮酸激酶(pyruvatekinase;PK)和乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase;LDH)反應(yīng)系統(tǒng)中,由還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideadeninedinucleotide;NAD),所產(chǎn)生的峰值變化(340nm),來定量分析黃烷酮-3-羥化酶的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為:Flavanone-3-hydroxylaseNaringenin+2-oxoglutarate+O2→dihydrokaempterol+succinate+CO2SuccinylCoAsynthetaseSuccinate+CoA+ATP→SuccinylCoA+Pi+ADPpyruvatekinasePhosphoenolpyruvate+ADP→pyruvate+ATPlactatedehydrogenasepyruvate+NADH→lactate+NAD+(高吸收峰)(低吸收峰)產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)60毫升裂解液(ReagentB)20毫升緩沖液(ReagentC)20毫升酶促液(ReagentD)400微升反應(yīng)液(ReagentE)2毫升底物液(ReagentF)2毫升陰性液(ReagentG)1毫升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里,其余的保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融;底物液(ReagentF),避免光照,有效保證6月[詳細]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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組織酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量檢測試劑盒
- 主要用途組織酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過酪氨酸酶反應(yīng)系統(tǒng)中底物酪氨酸氧化后,產(chǎn)生多巴色素,呈現(xiàn)吸光峰值的變化,即采用比色法來測定組織裂解懸液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種人體和動物組織,尤其是皮膚、眼睛和黑色素瘤組織裂解懸液樣品中酪氨酸酶的活性檢測,以及YZ劑篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景酪氨酸酶(tyrosinase;EC1.14.18.1)是一種單酚單加氧酶(monophenolmonooxygenase),又稱為單酚酶(monophenolase)或單酚二羥基苯丙氨酸:O2氧化還原酶(monophenoldihydroxyphenylalanin:O2oxidoreductase),具有雙功能的含銅糖蛋白,廣泛存在于植物、酵母和動物組織中,其蛋白結(jié)構(gòu)、大小、糖基化方式、激活特征等都不同。人體酪氨酸酶是一個跨膜蛋白,而催化結(jié)構(gòu)域在黑色素細胞(melanocyte)或色素細胞的黑色素器(melanosome)里。酪氨酸酶通過催化L-酪氨酸(L-tyrosine)等的o-羥基化(o-hydroxylation)反應(yīng)變成L-多巴(L-dopamine),進而氧化產(chǎn)生黑色素底物多巴醌(dopaquinone),從而由多巴色素(dopachrome)轉(zhuǎn)化為黑色素(melanin)中的真黑素(eumelanin),以及其它色素,包括毛發(fā)和眼睛色素。紫外線可以激活酪氨酸酶活性,嚴(yán)重時,會引起色素沉著(hyperpigmentation)。酪氨酸酶基因突變將導(dǎo)致I型眼皮膚白化病(oculocutaneousalbinism)。酪氨酸酶YZ劑成為增白化妝品的重要元素?;诘孜锢野彼?,在酪氨酸酶的催化下,產(chǎn)生多巴色素,通過其吸光值的變化(475nm波長),來定量測定酪氨酸酶的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細胞酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量檢測試劑盒
- 主要用途細胞酪氨酸酶(tyrosinase)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過酪氨酸酶反應(yīng)系統(tǒng)中底物酪氨酸氧化后,產(chǎn)生多巴色素,呈現(xiàn)吸光峰值的變化,即采用比色法來測定細胞裂解懸液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種人體和動物細胞,尤其是黑色素細胞和黑色素瘤細胞裂解懸液樣品中酪氨酸酶的活性檢測,以及YZ劑篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景酪氨酸酶(tyrosinase;EC1.14.18.1)是一種單酚單加氧酶(monophenolmonooxygenase),又稱為單酚酶(monophenolase)或單酚二羥基苯丙氨酸:O2氧化還原酶(monophenoldihydroxyphenylalanin:O2oxidoreductase),具有雙功能的含銅糖蛋白,廣泛存在于植物、酵母和動物組織中,其蛋白結(jié)構(gòu)、大小、糖基化方式、激活特征等都不同。人體酪氨酸酶是一個跨膜蛋白,而催化結(jié)構(gòu)域在黑色素細胞(melanocyte)或色素細胞的黑色素器(melanosome)里。酪氨酸酶通過催化L-酪氨酸(L-tyrosine)等的o-羥基化(o-hydroxylation)反應(yīng)變成L-多巴(L-dopamine),進而氧化產(chǎn)生黑色素底物多巴醌(dopaquinone),從而由多巴色素(dopachrome)轉(zhuǎn)化為黑色素(melanin)中的真黑素(eumelanin),以及其它色素,包括毛發(fā)和眼睛色素。紫外線可以激活酪氨酸酶活性,嚴(yán)重時,會引起色素沉著(hyperpigmentation)。酪氨酸酶基因突變將導(dǎo)致I型眼皮膚白化病(oculocutaneousalbinism)。酪氨酸酶YZ劑成為增白化妝品的重要元素。基于底物酪氨酸,在酪氨酸酶的催化下,產(chǎn)生多巴色素,通過其吸光值的變化(475nm波長),來定量測定酪氨酸酶的活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細菌異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒
- 主要用途細菌異檸檬酸脫氫酶(ISOCITRATEDEHYDROGENASE)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酸(NADP)還原后峰值的變化,即采用比色法來測定細菌裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種細菌細胞裂解懸液樣品異檸檬酸脫氫酶的活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景異檸檬酸脫氫酶(isocitratedehydrogenase;IDH;EC1.1.1.42)是三羧酸循環(huán)(citricacidcycle)或克雷布斯循環(huán)(Krehescycle)中的酶之一,存在于所有生物體內(nèi)。細菌異檸檬酸脫氫酶有2種同工酶:同源雙體,40至45Kd分子量;單體,80至100Kd分子量。在細菌體內(nèi),氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(oxidizedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate;NADP)依賴性異檸檬酸脫氫酶獲得輔酶NADP和輔助因子錳或鎂離子(Mn)的推動,脫去底物異檸檬酸的氫和二氧化碳(氧化性脫羧基作用),轉(zhuǎn)化為α-酮戊二酸(α-ketoglutarate),同時生成還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(reducedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate;NADPH)。一旦磷酸化或在乙酸環(huán)境中,以及有限的葡萄糖條件下,異檸檬酸脫氫酶則失活,從而控制三羧酸循環(huán)和乙醛酸旁路(glyoxylatebypass)之間碳的流動?;诋悪幟仕崦摎涿傅腘ADP依賴性,和作用后所產(chǎn)生的NADPH,通過分光光度儀的峰值變化(340nm波長),來定量分析異檸檬酸脫氫酶的活性。異檸檬酸脫氫酶反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細菌琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測試劑盒
- 主要用途細菌琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用合成電子受體染料,通過反應(yīng)系統(tǒng)測定染料還原后峰值的降低,即采用比色法測算樣品中單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種細菌菌株裂解懸液和膜蛋白樣品琥珀酸脫氫酶的特異性活性檢測。用于衰老、能量代謝、蛋白組學(xué)、發(fā)酵分析等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景琥珀酸脫氫酶(succinatedehydrogenase;SDH;EC1.3.99.1)是三羧酸循環(huán)(tricarboxylicacidcycle;TCA)或Krebs循環(huán)中與細胞線粒體膜相關(guān)的重要元素,位于線粒體內(nèi)膜,參與細胞呼吸鏈。細菌琥珀酸脫氫酶,又稱為SdhCDAB,為膜結(jié)合性蛋白,分為周邊(peripheral)和跨膜(transmembrane)部分,其中周邊親水部分由SdhA和SdhB亞體組成:SdhA亞體含有黃素蛋白(flavoprotein),是琥珀酸的活性部位;SdhB含有鐵硫蛋白(iron-sulfurprotein),進行電子傳遞;跨膜疏水部分由SdhC和SdhD亞體組成:SdhC含有亞鐵血紅素-B(Heme-B),SdhD含有泛醌(ubiquinone)結(jié)合部位(Q部位)。其作用在于參與三羧酸循環(huán)(TCAcycle)和呼吸鏈活動。琥珀酸脫氫酶催化琥珀酸(succinate)的氧化反應(yīng),產(chǎn)生延胡索酸(furmarate),通過黃素腺嘌呤二核苷酸(FlavinAdenineDinucleotide;FAD)傳遞電子?;阽晁崦摎涿傅姆磻?yīng)原理,使用人工電子受體染料二氯靛酚鈉(2,6-Dichloroindophenolsodium;DCIP),接受來自還原型黃素腺嘌呤二核苷酸(ReducedflavinAdenineDinucleotide;FADH2)的電子,而被還原,在分光光度儀下,其吸光值(600nm波長)的變化,來測算琥珀酸脫氫酶的活性。其反應(yīng)方式為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細胞丙酮酸激酶總活性比色法定量檢測試劑盒
- 主要用途細胞丙酮酸激酶總活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶的酶偶聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)中還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后峰值的降低,即采用比色法來測定細胞裂解萃取樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞裂解萃取懸液樣品(動物、人體、植物、昆蟲等)丙酮酸激酶的總活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景丙酮酸激酶(PyruvateKinase;PK)是細胞代謝的調(diào)節(jié)酶,催化細胞糖酵解的Z后反應(yīng):將磷酸烯醇丙酮酸(phosphoenolpyruvate;PEP)轉(zhuǎn)化成丙酮酸(pyruvate),同時產(chǎn)生ATP。丙酮酸激酶由4個相同的亞單位構(gòu)成,在肝組織、肌肉組織和紅細胞中有不同類型的異構(gòu)體。果糖-2,6-二磷酸(Fructose-2,6-bisphosphate;F2,6BP)是該酶的激活劑,而ATP、蛋氨酸(alanine)、乙酰輔酶A(Acetyl-CoA)是該酶的YZ劑。丙酮酸激酶的活性檢測用來評價細胞或組織,包括紅細胞的損害狀況?;诹姿嵯┐急徂D(zhuǎn)化成丙酮酸后,通過乳酸脫氫酶系統(tǒng),測定還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideadeninedinucleotide;NAD)的峰值變化(340nm波長),來定量分析丙酮酸激酶的活性。丙酮酸激酶反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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體液總脂肪酶(lipase)活性比色法定量檢測試劑盒
- 主要用途體液總脂肪酶(lipase)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過底物三丁酸二巰基丙醇受到脂肪酶水解,釋放出巰基基團,使用Ellman試劑,產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化,即采用比色法來測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心改良、成功實驗證明的。其適用于各種動物和人體各種體液包括尿液、腦脊液、唾液、精液等樣品脂肪酶的總活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景脂肪酶(lipase;EC3.1.1.3)是可溶性糖蛋白分子,催化不溶性脂質(zhì)分子的酯鍵(esterbond)的水解。在人體中,其來源于產(chǎn)生。在消化系統(tǒng)中,脂肪酶(Lipase),裂解脂肪分子,例如甘油三酯(triglyceride;TAG),產(chǎn)生1個分子甘油(glycerol)和3個分子游離脂肪酸分子(fattyacid)。脂肪酶異常與炎、管阻塞、癌、腎病、唾液腺炎癥、腸道阻塞等相關(guān);異常降低則與中脂肪酶產(chǎn)生細胞的性損傷有關(guān)。脂肪酶的活性檢測是臨床診斷的指標(biāo)之一?;谥久冈谒肿拥膮⑴c下,催化三丁酸二巰基丙醇(dimercaptopropanoltributyrate;DMPTB或BALB)的水解,產(chǎn)生二巰基丙醇(dimercaptopropanol;DMP),并釋放出巰基基團(-SH),進而與Ellman試劑5,5-二硫基-雙(2-硝基苯甲酸)[5,5’-dithiobis-(2-nitrobenzoicacid);DTNB]反應(yīng)后,產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoicacid;TNB),通過其吸收峰值的變化(412nm波長),來定量分析脂肪酶的活性。脂肪酶反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細菌蛋白酶(PROTEASE)活性比色法定量檢測試劑盒說明書
- 細菌蛋白酶(PROTEASE)活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途細菌蛋白酶(PROTEASE)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過底物偶氮酪蛋白受到蛋白酶水解,產(chǎn)生橘紅色產(chǎn)物的吸光峰值的變化,即采用比色法來測定樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心改良、成功實驗證明的。其適用于各種細菌細胞裂解液以及培養(yǎng)上清樣品蛋白酶的總活性檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景蛋白酶(protease)又稱為肽酶(peptidase)或蛋白質(zhì)酶(proteinase),是一類蛋白水解的酶,屬于水解酶(hydrolase)家屬中一員,存在于所有生物體內(nèi)。通過肽鍵的水解,進行蛋白質(zhì)的分解代謝,參與體內(nèi)血液凝結(jié)、補體系統(tǒng)、凋亡、細胞生長和分化等一系列生理活動。蛋白酶基本分成6類,包括絲氨酸(serine)、蘇氨酸(threonine)、半胱氨酸(cysteine)、谷氨酸(glutamate)、天冬氨酸(aspartate)、金屬(metalloprotease)蛋白酶等;也可以分成酸性、中性和堿性蛋白酶等;還可以分成內(nèi)切肽酶,例如胰蛋白酶(trypsin),和外切肽酶,例如羧基肽酶A(carboxypeptidase)。細菌蛋白酶與碳和氮循環(huán)有關(guān);作為外毒素(exotoxin),也是細菌致病的毒力(virulence)因子;同時細菌蛋白酶可以應(yīng)用于食品、制藥、皮革、診斷、水處理、銀回收和潔凈劑工業(yè)等。同時據(jù)此用以識別革藍氏陰性細菌,例如枯草芽孢桿菌(Bac.Subtilis)等?;诘孜锱嫉业鞍祝╝zocasein或sulfanilamideazocasein),在細菌蛋白酶的催化水解下,產(chǎn)生橘紅色產(chǎn)物,通過其吸收峰值的變化(440nm波長),來定量分析蛋白酶的總活性。其反應(yīng)系統(tǒng)為:產(chǎn)品內(nèi)容裂解液(ReagentA)毫升反應(yīng)液(ReagentB)毫升終止液(ReagentC)毫升中和液(ReagentD)毫升陰性液(ReagentE)微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存反應(yīng)液(ReagentB)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;終止液(ReagentC)和中和液(ReagentD)具有腐蝕性,注意操作安全;有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于樣品操作的容器微型臺式離心機:用于樣品制備恒溫水槽:用于孵育反應(yīng)比色皿:用于比色的容器分光光度儀:用于比色分析實驗步驟樣品準(zhǔn)備準(zhǔn)備好500微升待測細菌(OD600=0.4至0.8,即1至2X107細胞/毫升)轉(zhuǎn)移到到1.5毫升離心管放進4℃微型臺式離心機離心5分鐘,速度為1000g(或3500RPM,例如EPPENDORF5415)小心抽去上清液加入xx微升裂解液(ReagentA),充分混勻QL渦旋震蕩15秒置于冰槽里15分鐘放進4℃微型臺式離心機離心15分鐘,速度為16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心移取500微升上清液到新的預(yù)冷的1.5毫升離心管移取10微升進行蛋白定量檢測(注意:建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒-30030.1)即刻放進-70℃保存或置于冰槽里繼續(xù)后續(xù)操作測定準(zhǔn)備準(zhǔn)備好待測樣品(例如細菌裂解萃取液或培養(yǎng)上清等),置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀(溫度為37℃):波長440nm,并置零實驗開始前,將反應(yīng)液(ReagentB)置于65℃恒溫水槽孵育20分鐘后使用三、背景測定移取xx微升反應(yīng)液(ReagentB)到新的1.5毫升離心管加入xx微升陰性液(ReagentE)上下傾倒數(shù)次,混勻在37℃溫度下孵育30分鐘加入xx微升終止液(ReagentC)渦旋震蕩5秒在冰槽里孵育15分鐘即刻放進4℃微型臺式離心機離心15分鐘,速度為3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升離心管加入xx微升中和液(ReagentD),混勻轉(zhuǎn)移到比色皿里即刻放進分光光度儀檢測,此為背景空對照樣品活性測定移取xx微升反應(yīng)液(ReagentB)到新的1.5毫升離心管加入100微升待測樣品(蛋白總量100微克)(注意:樣品需澄清)上下傾倒數(shù)次,混勻在37℃溫度下孵育30分鐘加入xx微升終止液(ReagentC)渦旋震蕩5秒在冰槽里孵育15分鐘即刻放進4℃微型臺式離心機離心15分鐘,速度為3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升離心管(注意:沉淀物為橘紅色)加入xx微升中和液(ReagentD),混勻轉(zhuǎn)移到比色皿里即刻放進分光光度儀檢測,此為樣品讀數(shù)計算樣品活性注意事項本產(chǎn)品為20次操作操作時,須戴手套終止液(ReagentC)和中和液(ReagentD)具有腐蝕性,注意操作安全系統(tǒng)檢測時,背景測定只需一次樣品須澄清,至關(guān)重要比色測定后,比色皿須清洗徹底建議待測樣本的蛋白濃度為100微克/100微升(本公司提供Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒30030.1)如果待測樣品濃度過高或過低,可以調(diào)整樣品濃度蛋白酶活性單位濃度定義:在37℃下,pH7.5的情況下,每單位酶在單位時間內(nèi)(每分鐘)產(chǎn)生0.01吸光值的升高變化本公司提供系列細菌生理生化檢測試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測敏感[詳細]
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2018-11-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
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Ca-ATP酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- Ca-ATP酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途ATP酶存在于組織細胞及細胞器的膜上,是生物膜上的一種蛋白酶,機體在缺氧及等狀態(tài)下,ATP酶受到損傷,活力下降。ATP酶活力的大小是各種細胞能量代謝及功能有無損傷的重要指標(biāo)。本測試盒可測鈉鉀ATP酶、鈣鎂ATP酶的活性。樣品為各種組織及紅細胞等,本法的Zda特點是樣品前處理不需要高速離心機,方法簡便、快速。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)6毫升反應(yīng)液(ReagentB)6毫升底物液(ReagentC)6毫升陰性液(ReagentD)6毫升標(biāo)準(zhǔn)品(reagentE)6微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentC)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里;底物液(ReagentC)避免光照,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于反應(yīng)液配制的容器微型臺式離心機:用于樣品制備比色皿或酶標(biāo)板:用于比色的容器分光光度儀:用于比色分析酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析實驗步驟實驗開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentC)置入冰槽里融化。底物液(ReagentC)避免光照。然后進行下列操作。樣品準(zhǔn)備選擇一:血漿樣品1.準(zhǔn)備好ACD抗凝管(注意:避免使用肝素或EDTA抗凝管)2.抽取2毫升血液,置于抗凝管里3.放進4℃微型臺式離心機離心10分鐘,速度為5000g4.小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血漿成分(注意:避免觸碰白色液體層)5.即刻置于冰槽里備用或放進-70℃冰箱里保存6.(選擇步驟)移取50微升進行蛋白定量測定選擇二:血清樣品1.準(zhǔn)備好不含抗凝劑的儲存管2.抽取2毫升血液,置于儲存管里3.室溫下,靜置30分鐘,直至血液凝結(jié)4.放進4℃微型臺式離心機離心15分鐘,速度為5000g5.小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血清成分(注意:避免觸碰白色液體層)6.即刻置于冰槽里備用或放進-70℃冰箱里保存7.(選擇步驟)移取50微升進行蛋白定量測定選擇三:組織樣本準(zhǔn)確稱取組織重量,按照重量(g):體積(ml)=1:9的比例,加入9倍的是PBS或者生理鹽水,冰水浴條件下機械勻漿,2500轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,去上清液待測。二、測定準(zhǔn)備1.準(zhǔn)備好上述待測樣品,置于冰槽里2.設(shè)定好分光光度儀(溫度為37℃):波長440nm三、樣本測定1.在96孔酶標(biāo)板上做好相應(yīng)標(biāo)記:背景對照,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔2.分別移取50微升緩沖液(ReagentA)到相應(yīng)孔中3.設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)品孔(加入50微升標(biāo)準(zhǔn)品),樣本孔(加入50微升樣本)陰性液孔(加入50微升陰性液(ReagentD)4.分別加入50微升反應(yīng)液(ReagentB)5.輕輕搖動96孔酶標(biāo)板6.在37℃溫度下孵育2分鐘7.放進酶標(biāo)儀,置零8.取出酶標(biāo)板,分別加入50微升底物液(ReagentC)9.輕輕搖動酶標(biāo)板10.即刻放進酶標(biāo)儀檢測,包括(0分鐘初始讀數(shù)和5分鐘讀數(shù))四,樣本計算樣本活性=樣本OD值/標(biāo)準(zhǔn)OD值*標(biāo)品濃度[詳細]
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2024-09-29 05:34
產(chǎn)品樣冊
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昆蟲脂肪酸合成酶(FAS)說明書活性
- www.biokanu.com昆蟲脂肪酸合成酶(FAS)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定昆蟲血清,血漿及相關(guān)液體樣本中脂肪酸合成酶(FAS)的活性。實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中昆蟲脂肪酸合成酶(FAS)水平。用純化的昆蟲脂肪酸合成酶(FAS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入脂肪酸合成酶(FAS),再與HRP標(biāo)記的FAS抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的脂肪酸合成酶(FAS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中昆蟲脂肪酸合成酶(FAS)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:72IU/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟:1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為48IU/L,32IU/L,16IU/L,8IU/L,4IU/L)。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。注意事項:1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。計算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和15%檢測范圍:2IU/L-50IU/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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植物脂酰輔酶A合成酶(ACS)試劑盒使用說明書
- 植物脂酰輔酶A合成酶(ACS)試劑盒使用說明書[詳細]
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2014-03-26 00:00
課件
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