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植物查爾酮合成酶(chalcone synthase)說明書

本文由 上海銘博生物科技有限公司 整理匯編

2018-11-08 10:00 2115閱讀次數(shù)

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植物查爾酮合成酶(chalconesynthase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途植物查爾酮合成酶(chalconesynthase)活性比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過香豆酰輔酶A和丙二酰輔酶A縮合反應(yīng)系統(tǒng)中釋放出巰基輔酶A,使用Ellman試劑后,產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化,即采用比色法來測(cè)定植物裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適合于各種植物組織,包括種子(seed)、葉片(leaf)、根(root)、胚胎葉(cotyledon)、上胚軸(epicotyl)等查爾酮合成酶的活性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景查爾酮合成酶(chalconesynthase;CHS;EC2.3.1.74)是聚酮體合成酶(polyketidesynthase;PKS)大家屬中的一員,是啟動(dòng)類黃酮(flavonoid)化合物合成通路中**步關(guān)鍵酶,形成植物系統(tǒng)性獲得性抗性(systematicacquiredresistance;SAR)的基礎(chǔ)。查爾酮合成酶存在于細(xì)菌、植物和真菌中。在所有裸子植物(gymnosperm)和被子植物(angiosperm)的各種不同發(fā)育階段中的不同組織中表達(dá)。查爾酮合成酶為同源二聚體,分子量為40至4000Kd,由環(huán)境壓力,包括UV照射、傷口、病原菌襲擊等誘導(dǎo),通過丙二酰輔酶A脫羧基反應(yīng)(decarboxylation)、與香豆酰輔酶縮合、聚酮體鏈延展(chainelongation)、中間產(chǎn)物環(huán)狀化(cyclization)和芳構(gòu)化(aromatization)產(chǎn)生查爾酮,一種類黃酮化合物前體,作為化學(xué)信使,由此生成各種后續(xù)繼發(fā)性代謝化合物,參與抗病原微生物例如異黃酮植物保護(hù)素(isoflavonoidphytoalexin)、花青素花色素化、抵御環(huán)境壓力(UV光保護(hù))、花粉育性(pollenfertility)、抗氧化、共生根系結(jié)瘤(symbioticrootnodulation),以及作為抗生素、免疫YZ劑、抗腫瘤和抗真菌的藥物作用。還在細(xì)菌的囊腫形成和阿米巴細(xì)胞分化中產(chǎn)生作用?;谙愣辊]o酶A和丙二酰輔酶A,在敏感性YZ劑木犀草素(Luteolin)存在與否的情況下,受到查爾酮合成酶的作用,縮合產(chǎn)生查爾酮,并釋放出巰基輔酶A(CoA-SH),進(jìn)而與Ellman試劑5,5-二硫基-雙(2-硝基苯甲酸)[5,5,-dithiobis-(2-nitrobenzoicacid);DTNB]反應(yīng)后,產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoicacid;TNB),通過其吸收峰值的變化(412nm波長(zhǎng)),來定量分析查爾酮合成酶的活性。查爾酮合成酶反應(yīng)系統(tǒng)為:產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升緩沖液(ReagentC)毫升反應(yīng)液(ReagentD)毫升底物液(ReagentE)毫升專性液(ReagentF)微升產(chǎn)品說明書

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