本文由 上海伯易生物科技有限公司 整理匯編

2018-09-04 10:00 2246閱讀次數(shù)

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• miRNA研究新思路

  miRNA研究新思路[詳細(xì)]

  2018-09-04 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 研究發(fā)現(xiàn)識(shí)別miRNA靶標(biāo)新方法

  研究發(fā)現(xiàn)識(shí)別miRNA靶標(biāo)新方法[詳細(xì)]

  2016-07-27 00:00

  專利

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• PolyShooter siRNA/miRNA 轉(zhuǎn)染試劑 P09410

  PolyShooter siRNA/miRNA 轉(zhuǎn)染試劑 P09410[詳細(xì)]

  2024-09-28 01:11

  操作手冊(cè)

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• ZG醫(yī)學(xué)科學(xué)院JBC解析抑癌miRNA

  ZG醫(yī)學(xué)科學(xué)院JBC解析抑癌miRNA[詳細(xì)]

  2013-10-12 00:00

  課件

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• miRNA定量及均一化cDNA文庫(kù)技術(shù)

  進(jìn)行一次逆轉(zhuǎn)錄即可實(shí)現(xiàn)所有目標(biāo)miRNA的測(cè)定？沒錯(cuò)，采用加尾法，一次逆轉(zhuǎn)錄就可以得到全部miRNA對(duì)應(yīng)的cDNA。我們知道，真核生物mRNA都是有poly-A尾巴的，這樣Oligo-dT（逆轉(zhuǎn)錄引物）就很容易結(jié)合到mRNA上來合成cDNA了。miRNA就缺了poly-A尾巴，怎么辦呢？在逆轉(zhuǎn)錄試劑盒中加入poly-A聚合酶，先給它們加上一串poly-A尾巴，然后用帶有一段通用序列的Oligo-dT和逆轉(zhuǎn)錄酶來合成cDNA。這樣一來，一次逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)就合成了所有miRNA以及其他snRNA、mRNA對(duì)應(yīng)的cDNA，接下來想用來檢測(cè)什么都可以！您只需要提供1μg合格的totalRNA，就可以對(duì)所有感興趣的miRNA進(jìn)行檢測(cè)。這既可避免莖環(huán)法（各目標(biāo)miRNA單獨(dú)逆轉(zhuǎn)錄）帶來的逆轉(zhuǎn)錄效率、加樣誤差等方面的影響，還可節(jié)約多條特異逆轉(zhuǎn)錄引物和多次逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的花費(fèi)，可謂一舉兩得，何樂而不為？均一化cDNA文庫(kù)基因轉(zhuǎn)錄水平上的巨大差異常常給文庫(kù)篩選和分析帶來障礙，采用均一化文庫(kù)技術(shù)可有效克服這一問題?！【换痗DNA文庫(kù)具有以下4方面的優(yōu)點(diǎn)：**，在經(jīng)濟(jì)上具有廣泛的應(yīng)用空間，可以節(jié)約大量試驗(yàn)成本。第二，增加克隆低豐度mRNA的機(jī)會(huì)，適用于分析各種發(fā)育階段或各種組織的基因表達(dá)及突變檢測(cè)。第三，與原始豐度的mRNA拷貝數(shù)相對(duì)應(yīng)的cDNA探針與均一化的cDNA文庫(kù)作雜交，可以估計(jì)出大多數(shù)基因的表達(dá)水平及發(fā)現(xiàn)一些組織特異的基因。而以往的文庫(kù)構(gòu)建，忽略了mRNA豐度的影響。第四，可以用于遺傳圖譜的制作和進(jìn)行大規(guī)模的原位雜交，作為優(yōu)化的文庫(kù)系統(tǒng)還可以用于大規(guī)模的測(cè)序?，F(xiàn)在，在構(gòu)建均一化的cDNA文庫(kù)中至少有2種主要的觀點(diǎn)：一種是基于復(fù)性動(dòng)力學(xué)的原理，高豐度的cDNA在退火條件下復(fù)性的速度快，而低豐度的cDNA復(fù)性要很長(zhǎng)時(shí)間，從而可以通過控制復(fù)性時(shí)間來降低豐度；另一種是基于基因組DNA在拷貝數(shù)上具有相對(duì)均一化的性質(zhì)，通過cDNA與基因組DNA飽和雜交而降低在文庫(kù)中高拷貝存在的cDNA的豐度。**種方法的掌握對(duì)技術(shù)的要求比較高，對(duì)多數(shù)人而言需要多次摸索才能找到Z適條件；而后一種方法易于掌握，但有研究者根據(jù)復(fù)性動(dòng)力學(xué)的原理也提出了其不利因素，即采用基因組DNA飽和雜交的方法會(huì)因?yàn)榈涂截惖谋磉_(dá)基因拷貝數(shù)少而無法被雜交上。DSN（duplexspecificenzyme）是Z近發(fā)現(xiàn)的一種熱穩(wěn)定核酸酶（Shagin.,2002）。該酶能夠選擇性降解雙鏈DNA和DNARNA雜交體中的DNA，對(duì)單鏈核酸分子幾乎沒有作用。同目前常用的均一化技術(shù)相比，基于DSN的均一化技術(shù)操作步驟簡(jiǎn)單，所需要的起始材料也比較少，具有較好的應(yīng)用前景。上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司開展miRNA定量檢測(cè)服務(wù)已經(jīng)近三年時(shí)間，服務(wù)項(xiàng)目幾百個(gè)。擁有自己的miRNA引物庫(kù)（人類），對(duì)其他物種可以自行設(shè)計(jì)引物，檢測(cè)樣品范圍廣，包括：細(xì)胞、組織、血液、血漿、血清、細(xì)胞培養(yǎng)上清等，操作規(guī)范，時(shí)間可控，為廣大研究工作者提供了良好的便利。同時(shí)，其作為國(guó)內(nèi)cDNA文庫(kù)構(gòu)建的主流服務(wù)供應(yīng)商，在長(zhǎng)期穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)服務(wù)過程中積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)成功構(gòu)建包括動(dòng)物、植物、細(xì)菌等幾十個(gè)物種的cDNA文庫(kù)。他們基于雙鏈特異性核酸酶（Duplex-SpecificNuclease,DSN）的先進(jìn)cDNA文庫(kù)均一化技術(shù)，能減低高豐度表達(dá)基因100倍以上，有效富集低豐度表達(dá)基因，從而降低冗余率。[詳細(xì)]

  2024-09-29 02:39

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)實(shí)現(xiàn)對(duì)miRNA靶向物mRNAs的相對(duì)

  通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)實(shí)現(xiàn)對(duì)miRNA靶向物mRNAs的相對(duì)[詳細(xì)]

  2024-09-16 03:14

  期刊論文

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• 超級(jí)電容研究

  超級(jí)電容研究[詳細(xì)]

  2008-12-19 00:00

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 藻類研究

  藻類研究[詳細(xì)]

  2013-06-20 00:00

  課件

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• 振動(dòng)試驗(yàn)臺(tái)研究

  附件是《黃土無襯砌隧道破壞機(jī)制振動(dòng)臺(tái)實(shí)驗(yàn)研究》，來自軍事醫(yī)學(xué)院務(wù)部，中科院武漢巖土力學(xué)研究所,論文僅供學(xué)術(shù)研究，如需轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處。[詳細(xì)]

  2018-09-26 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 熱穩(wěn)定性研究

  熱穩(wěn)定性研究[詳細(xì)]

  2024-09-28 01:08

  其它

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• 茶葉粉在國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀及研究工藝

  茶葉粉的國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀及研究工藝[詳細(xì)]

  2022-06-29 10:58

  其它

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• 研究實(shí)驗(yàn)大樓

  研究實(shí)驗(yàn)大樓[詳細(xì)]

  2003-12-02 00:00

  專利

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• 脂肪乳穩(wěn)定性研究

  脂肪乳穩(wěn)定性研究[詳細(xì)]

  2006-08-11 00:00

  其它

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• 水泥DTA研究

  水泥DTA研究[詳細(xì)]

  2012-01-09 00:00

  專利

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• 碳納米管特性研究

  碳納米管特性研究[詳細(xì)]

  2012-01-09 00:00

  期刊論文

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• 膠原蛋白的研究

  膠原蛋白的研究[詳細(xì)]

  2011-01-06 00:00

  期刊論文

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• 膳食纖維檢測(cè)研究

  膳食纖維檢測(cè)研究[詳細(xì)]

  2009-05-20 00:00

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 冷凍干燥過程研究

  真空冷凍干燥是先將制品凍結(jié)到共晶點(diǎn)溫度以下，使水分變成固態(tài)的冰，然后在適當(dāng)?shù)臏囟群驼婵斩认拢贡A為水蒸氣。再用真空系統(tǒng)的冷凝器(水汽凝結(jié)器)將水蒸氣冷凝，從而獲得干燥制品的技術(shù)。該過程主要可分為：制品準(zhǔn)備、預(yù)凍、一次干燥（升華干燥）、二次干燥（解吸干燥）和密封保存五個(gè)步驟。[詳細(xì)]

  2018-09-10 11:11

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 球磨機(jī)選型研究

  磨礦是在磨礦機(jī)中進(jìn)行，在金屬選礦廠 一般采用球磨機(jī)和棒磨機(jī)。 球磨機(jī)按排礦方式不同分為格子型球磨機(jī)和溢流型沫磨機(jī)。 球磨機(jī)按照排礦方式不同而分為格子型球磨機(jī)和溢流型琢磨機(jī)，是目前這礦廠采用Z普遍的磨礦機(jī)。[詳細(xì)]

  2018-09-11 12:05

  標(biāo)準(zhǔn)

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