本文由 深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司 整理匯編

2018-11-14 10:00 1826閱讀次數(shù)

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• 腎上腺素ELISA Kit使用說明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4腎上腺素ELISAKit使用說明書（德國(guó)IBL：RE59251）1、應(yīng)用范圍此試劑盒可用于人血清和尿液中腎上腺素的體外定量檢測(cè)。2、臨床意義兒茶酚胺類激素腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺主要由腎上腺髓質(zhì)、交感神經(jīng)系統(tǒng)和大腦產(chǎn)生。它們幾乎影響所有的組織，并與其它激素和神經(jīng)系統(tǒng)一起參與各種生理過程的調(diào)節(jié)。在許多疾病中，兒茶酚胺激素及其代謝產(chǎn)物變腎上腺素和去甲變腎上腺素的分泌量都會(huì)增加，因而這些激素可用于疾病的診斷。所以，這些激素的檢測(cè)對(duì)于疾病的診斷及神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤疾病的具有重要意義。它主要用于嗜鉻細(xì)胞瘤的診斷，當(dāng)然也用于成神經(jīng)細(xì)胞瘤和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞瘤的診斷。因?yàn)樵趯?shí)驗(yàn)一開始時(shí)有提取步驟，用戶可使用各種動(dòng)物材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。所有動(dòng)物的兒茶酚胺的化學(xué)結(jié)構(gòu)相同，因此此試劑盒可用于測(cè)大鼠、小鼠或其它動(dòng)物。3、實(shí)驗(yàn)原理此固相ELISA試劑盒利用的夾心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗體。之后加入的液態(tài)抗體可以結(jié)合到抗原分子的一個(gè)抗原決定簇上，而抗原分子可在溫育期內(nèi)結(jié)合到固相抗體上。樣品中的抗原與酶標(biāo)二抗一起在微孔內(nèi)溫育，此酶標(biāo)二抗可結(jié)合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結(jié)果可直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取。4、貯存與穩(wěn)定性試劑盒和運(yùn)輸環(huán)境和儲(chǔ)存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽(yáng)直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑的準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定，前提是要將試劑盒用袋子密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下。5、樣品的采集與儲(chǔ)存注意人體內(nèi)的兒茶酚氨和間甲腎上腺素的釋放會(huì)受到一些食品和藥物的影響。因此在樣品采集前72小時(shí)內(nèi)病人應(yīng)禁止服用下列食物和藥品：維生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMTYZ劑，還有降血壓類藥物。血漿（EDTA）注意血液采集后兩小時(shí)內(nèi)，將血液樣品冷藏于2-8℃的環(huán)境下直致離心獲取血漿。注意靜脈穿刺采集全血的常規(guī)注意事項(xiàng)。從采集到血液樣品的那一刻起到檢測(cè)時(shí)都應(yīng)保持血液樣品的化學(xué)整體性。不要使用明顯溶血、黃疸的和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁，則在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)當(dāng)離心以除去所有的微粒物質(zhì)。貯存2-8℃≤-20℃避免熱源或太陽(yáng)直射，避免反復(fù)凍融，冷凍狀態(tài)下運(yùn)輸樣品。穩(wěn)定性6h1個(gè)月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。將病人24h內(nèi)的所有尿液都收集到，并混合于含10-15ml6N的HCl防腐劑的試劑瓶中。貯存≤-20℃避免熱源或太陽(yáng)直射，避免反復(fù)凍融，冷凍狀態(tài)下運(yùn)輸樣品。穩(wěn)定性6個(gè)月6、試劑盒成分注意：試劑盒有足夠做96份單孔檢測(cè)或48份雙孔檢測(cè)所需的試劑成分?jǐn)?shù)量標(biāo)志成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，單克?。?。1×6×2.5mlCALA-F標(biāo)準(zhǔn)品A-F，即用腎上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml（0;8;27;82;273;819nmol/L）去甲腎上素:0;5;15;50;150;500ng/mL（0;30;89;296;887;2955nmol/L）多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL（0;78;228;750;2938;14688nmol/L）內(nèi)含[-]腎上腺素，[-]去甲腎上腺素，[-]多巴胺（有生物活性）,0.1M的HCl1×2×2.5mlCONTROL1+2質(zhì)控品1+2即用,內(nèi)含[-]腎上腺素，[-]去甲腎上腺素，[-]多巴胺（具有生物活性）,0.1M的HCl,具體濃度及可允許范圍請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽.1×250μLENZCONJCONC酶聯(lián)物濃縮型（100×）內(nèi)含：堿性磷酸酶標(biāo)記的抗體，Tris緩沖液，HCl，0.01%的NaN32×EXTRPLATE提取板（微孔板）每板24孔，包被了硼酸親和凝膠。1×60mlEXTRBUF提取緩沖液粉紅色，即用，內(nèi)含：0.016%的NaN3。2×1.25mlCOMTLYOCOMT凍干粉內(nèi)含：兒茶酚-氧位-甲基轉(zhuǎn)移酶（豬肝），NaN31×2mlCOMTADDCOMT添加劑內(nèi)含：人血漿，穩(wěn)定劑，0.01%硫柳汞。1×7mlANTISERUMDO腎上腺素抗血清紫羅蘭色，即用，內(nèi)含：抗腎上腺素抗體（兔），緩沖液，穩(wěn)定劑。2×1.25mlCOENZ酶聯(lián)復(fù)合物即用，內(nèi)含：S-腺苷-L-蛋白酸，穩(wěn)定劑。1×3mlENZBUF酶緩沖液即用，內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，穩(wěn)定劑。1×17mlRELEASEBUFRelease緩沖液黃色，即用，內(nèi)含：0.1M的HCl，指示劑。1×3mlACYLREAG?；噭┘从?，內(nèi)含：二甲基甲酰胺，乙醇。注意：有毒，高可燃性。1×50mlWASHBURCONC洗滌液濃縮型（10×）內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，吐溫，0.2%的NaN31×9×PNPPSUBSPNPP底物片內(nèi)含：對(duì)硝基苯磷酸（PNPP）1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液即用，內(nèi)含：二乙醇胺，水，0.05%的NaN31×15mlPNPPSTOPPNPP終止液即用，內(nèi)含：1M的NaOH，0.25M的EDTA3×FOIL粘性金屬板7、實(shí)驗(yàn)所需器材（但試劑盒不提供）1）移液器（10；10-100；100-1000μL）2）軌道搖床（200-900rpm）3）旋渦混合器4）帶儲(chǔ)器的8通道移液器5）洗滌瓶，自動(dòng)或半自動(dòng)包被板清洗系統(tǒng)6）酶標(biāo)儀7）雙蒸水或去離子水8）吸水紙，取樣吸頭，計(jì)時(shí)器8、實(shí)驗(yàn)前說明注意用于96人份檢測(cè)色試劑盒成分可分成兩次進(jìn)行。，下列所述體積為做48人份時(shí)所需要的量。8.1樣品的稀釋如果樣品中腎上腺素濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的應(yīng)按照下列所述進(jìn)行稀釋：樣品待稀釋稀釋液備注血漿腎上腺素濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品中腎上腺素的濃度雙蒸水提取步驟前尿液腎上腺素濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品中腎上腺素的濃度0.1N的HCl提取步驟前8.2樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的提?。ㄌ崛“澹?）將標(biāo)準(zhǔn)品、已稀釋好的質(zhì)控品、已稀釋好的尿液樣品各20μL和500μL血漿樣品加入到提取板相應(yīng)的微孔中。除血漿樣品孔外，在所有的微孔中加入500μL雙蒸水以消除體積差別。2）在每一微孔中加入1000μL提取緩沖液3）蓋板。在軌道搖床（600-900rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取30min。在提取過程中，液體的表面應(yīng)該會(huì)浸濕粘性金屬板，但液體的量不能超過微孔的2/3。液體是否濺出并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。4）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。5）每孔加入2ml雙蒸水6）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。7）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。8）每孔加入150μL提取緩沖液，再向每孔中加入50μL?；噭?，立即混合均勻。9）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取20min。（無需蓋板）10）快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。11）每孔加入2ml雙蒸水。12）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。13）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。14）每孔加入300μLRelease緩沖液。15）在軌道搖床（400-500rpm）上18-25℃的環(huán)境下振蕩30min。（無需蓋板）已準(zhǔn)備好的樣品應(yīng)當(dāng)在當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)。如果不行的話，您可將提取板用粘性金屬板蓋好，在2-8℃的環(huán)境下可存放一夜。9、實(shí)驗(yàn)步驟9.1COMT酶溶液的準(zhǔn)備注意：COMT酶溶液應(yīng)在使用前直接臨時(shí)配置。在COMT凍干粉中加入1.25ml雙蒸水，充分混和。再加入1.25ml酶聯(lián)溶液，然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加劑以充分混合溶解的COMT試劑*，COMT酶溶液Z后的體積為每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋渦混合器混合，但要避免氣泡產(chǎn)生，配置好的COMT溶液可在室溫下穩(wěn)定存放1小時(shí)。*如果只需要一定量的COMT溶液，則剩余的COMT溶液應(yīng)立即凍存于-20℃的環(huán)境下。COMT溶液可在此環(huán)境下穩(wěn)定存放1-2個(gè)月。9.2樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的酶分化注意如果要檢測(cè)腎上腺素和去甲腎上腺素，我們建議您先檢測(cè)腎上腺素。如果使用自動(dòng)置換型衣液器加樣，請(qǐng)將取樣吸頭內(nèi)的殘余液體加入到提取板的相應(yīng)微孔內(nèi)，否則剩余的提取液不夠去甲腎上腺素檢測(cè)用。將提取板放到有一定坡度的位置上。實(shí)驗(yàn)開始前，確定好腎上腺素和去甲腎上腺素的檢測(cè)孔并標(biāo)記好。9.3尿液與血漿中的甲腎上腺素1在每一微孔內(nèi)加入25ul臨時(shí)配制的COMT酶溶液，輕輕振板以使溶液混合均勻。2將提取好的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品分別25ul加入到相應(yīng)的微孔內(nèi)。在此步驟中，我們可以將取樣吸頭直接深入到COMT溶液里。加樣后，溶液顏色變成粉色，輕輕振板以使溶液混合均勻。3向每一微孔中加入50ul甲腎上腺素抗血清（綠色）。4蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育120min。8.4凍干粉或濃縮成分的準(zhǔn)備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性20ml洗滌液180ml雙蒸水1：10充分混合2-8℃4W60μL酶聯(lián)物6ml洗滌緩沖液（已稀釋好）1：101臨時(shí)配置，僅能使用一次，混合時(shí)避免氣泡產(chǎn)生18-25℃30min4PNPP底物片10.7mlPNPP底物緩沖液臨時(shí)配置，僅能使用一次18-25℃10min9.5ELISA實(shí)驗(yàn)步驟1）移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250-300ul稀釋好的洗滌液洗板4次。Z后在吸水紙上拍干以除去殘余液體。2）在每一微孔中加入100ul臨時(shí)配置好的酶聯(lián)物。3）蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育60min。4）移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250-300ul稀釋好的洗滌液洗板4次。Z后在吸水紙上拍干一除去殘余液體。5）如果可以的話，使用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時(shí)間間隔應(yīng)當(dāng)相同，使用自動(dòng)置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。6）在每一微孔中加入200ul底物液。7）不要蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育60min。8）在每一微孔內(nèi)加入50ulPNPP終止液以終止酶反應(yīng)。輕輕振板以使溶液混合均勻。9）加終止液后60min內(nèi)405nm處讀取OD值。10、期望值實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能當(dāng)作判斷任何ZL結(jié)果的**因素，疾病的判斷還應(yīng)當(dāng)與其它臨床觀察和診斷檢測(cè)相結(jié)合。以下結(jié)果為正常人群的正常值（5%-95%），建議每個(gè)實(shí)驗(yàn)室讀確定自己的正常值范圍：尿液血漿μg/dnmol/dpg/mLnmol/L去甲腎上腺素＜20＜110＜125＜0.68本譯文僅供參考，詳情請(qǐng)以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理：深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口工業(yè)區(qū)太子路18號(hào)海景廣場(chǎng)11C研發(fā)基地：深圳市蛇口沿山路10號(hào)6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費(fèi)電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細(xì)]

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• 去甲變腎上腺素ELISA Kit使用說明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4去甲變腎上腺素ELISAKit使用說明書（德國(guó)IBL：RE59171）前言說明兒茶酚胺類腎上腺素、去甲腎上腺素、多巴胺都是在腎上腺髓質(zhì)、交感神經(jīng)系統(tǒng)和腦中合成的。它們幾乎影響所有的組織，并與其它激素和神經(jīng)系統(tǒng)一起參與各種生理過程的調(diào)節(jié)。因?yàn)閮翰璺影奉愇镔|(zhì)以及它們的代謝產(chǎn)物變腎上腺素和去甲變腎上腺素在許多疾病中的分泌都會(huì)增加，因此對(duì)它們進(jìn)行檢測(cè)可用于這些疾病的診斷。在這一實(shí)驗(yàn)中，診斷和神經(jīng)系統(tǒng)的續(xù)發(fā)性腫瘤都具有特殊的重要性。這一技術(shù)主要用于嗜鉻細(xì)胞瘤、神經(jīng)細(xì)胞瘤和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞瘤的診斷檢測(cè)。10%的嗜鉻細(xì)胞瘤表現(xiàn)為惡性增長(zhǎng)。而在良性腫瘤中可發(fā)現(xiàn)兒茶酚胺類物質(zhì)及它們的代謝產(chǎn)物變腎上腺素和去甲變腎上腺素都會(huì)增加。1、應(yīng)用范圍此酶免試劑盒可用于人體尿液中去甲變腎上腺素的體外定量檢測(cè),可手動(dòng)操作也可自動(dòng)操作.2、實(shí)驗(yàn)原理此ELISA試劑盒利用的是競(jìng)爭(zhēng)法原理，生物素標(biāo)記抗原和未用生物素標(biāo)記抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合一定量的抗體結(jié)合位點(diǎn)。結(jié)合到抗體上生物素標(biāo)記抗原的量與樣品中被分析物的濃度成反比。反應(yīng)系統(tǒng)達(dá)到平衡后，未結(jié)合的生物素標(biāo)記的抗原用洗滌液洗去。以抗生物素堿性磷酸酶作為標(biāo)記物，以PNPP（對(duì)硝基苯酚磷酸鹽）作為底物液來檢測(cè)結(jié)合到抗體上的生物素抗原的量。將未知物的酶反應(yīng)活性和已知標(biāo)準(zhǔn)品的反應(yīng)曲線相比較，可以得到未知物的量。3、意事項(xiàng)和預(yù)防措施1）此試劑盒僅用于體外診斷和專業(yè)人士使用。2）在檢測(cè)開始之前，仔細(xì)和完整的閱讀說明書，使用試劑盒提供的包裝插件的有效版本，確保所有的程序都清楚。尋求更多信息（比如：臨床背景，檢測(cè)操作，自動(dòng)化操作說明，可選擇的軟件，文獻(xiàn)等等），請(qǐng)查看IBL公司主頁(yè)。3）如果試劑盒有破壞的請(qǐng)與IBL公司聯(lián)系或是提交你的申請(qǐng)，但自您拿到試劑盒后Z遲不超過一個(gè)星期。檢測(cè)時(shí)請(qǐng)不要使用已被損害的試劑，以確保自身安全。4）按照批號(hào)和有效期，不混合使用不同批號(hào)的試劑，也不要使用過期的試劑。5）遵守好的實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)則和安全指南。穿實(shí)驗(yàn)服，帶橡皮手套，有必要時(shí)請(qǐng)戴護(hù)目鏡。6）此試劑盒中含有會(huì)傷害眼睛和皮膚的有害試劑。請(qǐng)閱讀材料來源和標(biāo)簽獲取詳細(xì)信息。產(chǎn)品的材料安全數(shù)據(jù)單能夠從IBL公司主頁(yè)上下載，也可直接咨詢IBL公司獲取。7）根據(jù)國(guó)家生物有害物質(zhì)及安全條例，所有化學(xué)藥品和準(zhǔn)備或使用過的試劑都應(yīng)當(dāng)做有害物質(zhì)進(jìn)行處理。8）不要接觸終止液，以免造成皮膚損傷或著燒。4、存與穩(wěn)定性試劑盒和運(yùn)輸環(huán)境和儲(chǔ)存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽(yáng)直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑的準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定，前提是要將試劑盒用袋子密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下。5、樣品的采集與貯存注意人體內(nèi)的兒茶酚氨和間甲腎上腺素的釋放會(huì)受到一些食品和藥物的影響。因此在樣品采集前72小時(shí)內(nèi)病人應(yīng)禁止服用下列食物和藥品：維生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMTYZ劑，還有降血壓類藥物。尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。將病人24h內(nèi)的所有尿液都收集到，并混合于含10-15ml6N的HCl防腐劑的試劑瓶中。貯存≤-20℃避免熱源或太陽(yáng)直射，避免反復(fù)凍融，冷凍狀態(tài)下運(yùn)輸樣品。穩(wěn)定性6個(gè)月6、試劑盒成分注意試劑盒有足夠做96份單孔檢測(cè)或48份雙孔檢測(cè)或間甲腎上腺素和去甲變腎上腺素共同檢測(cè)時(shí)所需的試劑成分?jǐn)?shù)量標(biāo)記成分1×50mLASSAYBUFCONC檢測(cè)緩沖液，10倍濃縮，內(nèi)含磷酸緩沖液，BSA（牛血清白蛋白），1%的NaN31×2.25mLACYLREAG?；噭从?，內(nèi)含二甲基甲酰胺1×10mLINDICATIORBUF指示劑緩沖液，紫色，即用，內(nèi)含Tris緩沖液和苯酚紅（pH小于7.5時(shí)顏色會(huì)發(fā)生變化）。2×50×HYDRTUB水解試管，可處理的聚苯乙烯試管1×20mLHClHCl，即用，內(nèi)含0.1MHCl1×12×8MTP包被板，可拆分，包被有抗兔IgG（羊，多克?。?×7×0.35mLCALA-G標(biāo)準(zhǔn)品，A-G含去甲變腎上腺素和0.1M的HCl0;77;192;480;1200;3000;7500μmol/L0;0.42;1.05;2.63;6.56;16.4;41.0μmol/L1×2×0.5mLCONTROL1+2質(zhì)控1+2，即用，濃度及允許范圍請(qǐng)見標(biāo)簽3×BIOTINLYO去甲變腎上腺素生物素（凍干品），內(nèi)含去變甲狀腺生物素,Tris緩沖液,<0.1%NaN3（可再生）1×7mLANTISERUM去甲變腎上腺素抗血清，內(nèi)含含抗血清（兔）,磷酸緩沖液,0.1%NaN31×250μlENZCONJCONC酶聯(lián)物（100×），含抗生物素抗體,并聯(lián)結(jié)到堿性磷酸酶上,Tris緩沖液,0.01%NaN39×PNPPSUBSPNPP底物片，含PNPP1×27mLPNPPBUFPNPP底物緩沖液，含二乙醇胺、水和0.05%NaN31×15mLPNPPSTOPPNPP終止液，即用，內(nèi)含1M的NaOH和0.25M的EDTA。1×50mLWASHBUFCONC洗滌液（10×），含Tris緩沖液,HCL,吐溫,0.2%NaN33×FOIL粘性金屬板7、實(shí)驗(yàn)所需器材（但試劑盒不提供）1）移液器，體積：10;50;100;1000ul2）玻璃試管（12×75mm）3）振蕩器（200-900rpm）4）旋渦混合器5）水浴箱，90℃6）帶試劑儲(chǔ)器的8孔移液器7）洗滌瓶，自動(dòng)或半自動(dòng)包被板洗滌系統(tǒng)。8）可在405nm處讀數(shù)的酶標(biāo)儀（參考波長(zhǎng)：600-650nm）9）雙蒸水或去離子水10）吸水紙，取樣吸頭和計(jì)時(shí)器8、注意事項(xiàng)1）樣品的不合理處理及實(shí)驗(yàn)操作的任何改動(dòng)都將影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。取樣體積、溫育時(shí)間、欲處理步驟都必須嚴(yán)格按說明進(jìn)行。只能使用標(biāo)準(zhǔn)移液器和標(biāo)準(zhǔn)設(shè)備。2）一旦實(shí)驗(yàn)開始，所有的步驟都必須完整的進(jìn)行下去，切勿中斷。確保所有試劑、材料和設(shè)備都已準(zhǔn)備好。把所有試劑和樣品都平衡至18-25℃，在使用前，輕輕搖動(dòng)液體試劑和樣品，試劑混合過程時(shí)要避免產(chǎn)生氣泡。3）請(qǐng)勿接觸試劑、移液器、微孔/試管。加試劑和樣本時(shí)，請(qǐng)使用新的吸頭，以避免交叉污染。不用的試劑應(yīng)用蓋子蓋好，以免重復(fù)使用。4）我們建議對(duì)樣品進(jìn)行雙份檢測(cè)，以便能糾正潛在的滴定錯(cuò)誤5）用定標(biāo)儀對(duì)反應(yīng)板進(jìn)行校準(zhǔn)。6）溫育時(shí)間會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。微孔加樣的順序和時(shí)間都必須一致。建議使用8孔移液器加樣。7）包被板的清洗很重要，清洗不合理將會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。建議使用多孔移液器或自動(dòng)包被板清洗系統(tǒng)進(jìn)行清洗。溫育期間避免微孔干燥，清洗和吸液時(shí)不要碰到包被板微孔。清洗時(shí)，確保所有的微孔都充滿蒸餾水，并且無殘留物。8）濕度會(huì)對(duì)包被孔產(chǎn)生影響，所以包被板未平衡到室溫時(shí)不要打開包裝。不使用的微孔應(yīng)立即裝入含干燥劑的包裝袋中。9、實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備說明手動(dòng)或自動(dòng)操作參考說明注意這種96人份的試劑盒可分成3份獨(dú)立進(jìn)行，以下體積為4條（32人份）一次檢測(cè)所需體積。如果想把標(biāo)準(zhǔn)品從7份減到6份，可以把標(biāo)準(zhǔn)品G棄取。而允許范圍相應(yīng)的減少到3000μg/l。如果檢測(cè)是用了很多板條，則體積應(yīng)相應(yīng)改變。9.1凍干成分或濃縮成分的準(zhǔn)備特別注意如果你使用甲狀腺ELISA試劑盒來同時(shí)檢測(cè)間甲腎上腺素和去甲變腎上腺素，請(qǐng)勿混合間甲腎上腺素和去甲變腎上腺素酶聯(lián)物。稀釋/溶解成分稀釋比例備注貯存穩(wěn)定性15mL檢測(cè)用緩沖液150mL雙蒸水1:102-8°C2周15mL洗滌液150mL雙蒸水1:102-8°C4周1瓶去甲變腎上腺素生物素2mL稀釋的檢測(cè)緩沖液臨時(shí)配制,僅使用一次,靜置5min,混合時(shí)避免氣泡.≤-20°C2個(gè)月60μl酶聯(lián)物6mL稀釋的檢測(cè)緩沖液1:101臨時(shí)配制,僅使用一次18-25°C5小時(shí)3PNPP底物片8mLPNPP底物緩沖液臨時(shí)配制,僅使用一次18-25°C5小時(shí)9.2總?cè)ゼ鬃兡I上腺素檢測(cè)用的尿液樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的水解（在水解試管中）注意水解這一步驟在總?cè)ゼ鬃兡I上腺素和總間甲腎上腺素的檢測(cè)中是必備的。而在游離去甲變腎上腺素和變腎上腺素的檢測(cè)中則無須水解。樣品被懷疑高于Z高標(biāo)準(zhǔn)的樣品必須在水解步驟前用0.1MHCL進(jìn)行稀釋。9.2.1水解試管中樣品的準(zhǔn)備1）將標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和尿液樣品各10μL加入到相應(yīng)的水解試管中2）在每一試管中加入40μL0.1M的HCl。3）蓋好試管，90°C下水解1h（用溫度計(jì)測(cè)溫度）。之后平衡至室溫，旋渦混合。4）在每一試管中加入100μL指示劑緩沖液，旋渦混合。5）在每一試管中加入20μL的?；饔迷噭尤胫甘緞┖罅⒓凑鹗?，確保加入的?；噭┖驮嚬軆?nèi)物質(zhì)完全混合。6）蓋好試管，室溫下溫育15min。7）在每一試管中加入1mL稀釋的檢測(cè)緩沖液。10、實(shí)驗(yàn)步驟手動(dòng)和自動(dòng)操作1）將?；瘶?biāo)準(zhǔn)品、?；|(zhì)控品和?；∪藰悠贩謩e50μL加入到相應(yīng)的微孔中。2）在每一微孔中加入50μL去甲變腎上腺素生物素。3）在每一微孔中加入50μL去甲變腎上腺素抗血清。4）蓋板，小心振蕩包被板。振蕩器（500rpm）上室溫溫育1h（500rpm）5）移去粘性金屬板。棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250μL洗滌液洗板6次（洗板機(jī)洗）,（人工清洗則洗3次即可），吸水紙上拍干。6）在每一微孔中加入150μL臨時(shí)配制的酶聯(lián)物。7）蓋上一新的粘性金屬板。振蕩器（500rpm）上室溫（18-25℃）溫育30min。8）移去粘性金屬板。棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250μL洗滌液洗板6次（洗板機(jī)洗）,（人工清洗則洗3次即可），吸水紙上拍干。9）如果有條件的話，使用8孔微量移液器加底物液和終止液時(shí)。確保底物液和終止液都是相同的時(shí)間間隔加入。使用自動(dòng)置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。10）在每一微孔中加入100μL臨時(shí)配制的PNPP底物液。11）振蕩器（500rpm）上室溫（18-25℃）溫育20min。12）在每一微孔中加入100μLPNPP終止液以終止底物反應(yīng)，輕輕振板以混合溶液。13）加入終止液后60min之內(nèi)在405nm處測(cè)OD值（參考波長(zhǎng)：600-650nm）11、結(jié)果計(jì)算在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上或用自動(dòng)的方法，以標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為Y軸，濃度為X軸，繪制一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。用立體圖、4參數(shù)對(duì)數(shù)圖或?qū)?shù)-對(duì)數(shù)圖都可獲得良好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，用標(biāo)準(zhǔn)品的每一單值進(jìn)行計(jì)算（樣品結(jié)果明顯異常的值必須刪除掉，應(yīng)使用更加合理的單值）。樣品的濃度可直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線上獲得。一旦樣品稀釋了，就應(yīng)當(dāng)乘以相應(yīng)的稀釋因子。如果樣品所測(cè)得的濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)，則應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備說明所述對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，并重新檢測(cè)。計(jì)算每一尿液樣品的24小時(shí)的排泄量：μg/24h=μg/L×L/24h轉(zhuǎn)換：1ng/mL=1μmol/L去甲變腎上腺素（μg/L）×5.46×10-3=μmol/L12、期望值實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能當(dāng)作判斷任何ZL結(jié)果的**因素，疾病的判斷還應(yīng)當(dāng)與其它臨床觀察和診斷檢測(cè)相結(jié)合。以下結(jié)果為正常人群的正常值（5%-95%）：平均值：230ug/d范圍：35-445ug/d（95%）建議每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都確定自己實(shí)驗(yàn)室的正常值范圍。本譯文僅供參考，詳情請(qǐng)以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理：深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口太子路18號(hào)海景廣場(chǎng)11C研發(fā)ZX：深圳市蛇口沿山路10號(hào)6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費(fèi)電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細(xì)]

  2018-11-14 10:00

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  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4組胺ELISAKit使用說明書（德國(guó)IBL：RE59221）1、應(yīng)用范圍此試劑盒可用于人血漿和尿液中組胺的體外定量檢測(cè)。深化此實(shí)驗(yàn)可用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液的研究。2、前言說明組胺（β-咪唑乙胺）是人體中Z重要的介質(zhì)，它主要存在于過敏反應(yīng)的起始階段（速發(fā)型過敏）。組胺是由組胺酸經(jīng)脫氨基作用產(chǎn)生的。組胺幾乎存在于機(jī)體的所有組織中，主要儲(chǔ)存于柱狀細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞的異染性顆粒中。組胺通常都是以無活性的復(fù)合體性存在，只有當(dāng)需要的時(shí)候才會(huì)釋放。像其它的介質(zhì)一樣，組胺不僅能調(diào)節(jié)過敏反應(yīng)的各種臨床癥狀，也可以調(diào)節(jié)終止過敏反應(yīng)的一系列效應(yīng)。組胺在組織中的生物活性是通過三種受體來完成的，它們分別是H1，H2和H3受體。臨床檢測(cè)組胺的方法有：定量檢測(cè)各種速發(fā)型過敏反應(yīng)中嗜堿性白細(xì)胞釋放組胺的量，也可以檢測(cè)過敏藥物ZL后各種體液（血漿，尿液，細(xì)胞培養(yǎng)上清）中組胺的量。3、實(shí)驗(yàn)原理此ELISA試劑盒利用的是競(jìng)爭(zhēng)法的原理。樣品中未知量的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合到包被在微孔中的抗體結(jié)合位點(diǎn)上。溫育后洗板以終止競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與樣品中抗原的量成反比。樣品的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線上直接獲取。4、儲(chǔ)存與穩(wěn)定性試劑盒必須在2-8℃的環(huán)境下運(yùn)輸和儲(chǔ)存，避免太陽(yáng)直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。如果將包被板密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下時(shí)，試劑在有效期內(nèi)穩(wěn)定。5、樣品的采集與儲(chǔ)存血漿（EDTA，肝素）按照靜脈穿刺的常規(guī)注意事項(xiàng)采集樣品，血液樣品自采集到實(shí)驗(yàn)時(shí)都必須保證其化學(xué)完整性。不要使用明顯溶血、黃疸和脂血樣品?；鞚岬臉悠窇?yīng)當(dāng)在實(shí)驗(yàn)開始前離心以除去所有的顆粒性物質(zhì)。儲(chǔ)存2-8℃≤-20℃≤-70℃避免太陽(yáng)直射，避免反復(fù)凍融。穩(wěn)定性5小時(shí)3個(gè)月2年尿液實(shí)驗(yàn)必須使用自然產(chǎn)生的尿液，也可使用24小時(shí)內(nèi)產(chǎn)生的尿液。收集病人24小時(shí)內(nèi)產(chǎn)生的尿液，并混合于含10-15ml6NHCl防腐劑的容器中。為了計(jì)算結(jié)果，請(qǐng)確定尿液的總體積。實(shí)驗(yàn)開始前請(qǐng)先將樣品離心。自然的尿液酸化尿液避免太陽(yáng)直射，避免反復(fù)凍融。儲(chǔ)存2-8℃2-8℃≤-20℃穩(wěn)定性8小時(shí)3天6個(gè)月細(xì)胞培養(yǎng)上清使用細(xì)胞培養(yǎng)上清作樣品，一般沒特殊注意事項(xiàng)細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi)的組胺濃度可能稍微要高些。全血全血中組胺釋放量的檢測(cè)必須用肝素化全血，具體信息請(qǐng)見相應(yīng)的說明書（RE95000）6、試劑盒成分注意：試劑盒有足夠做96份單孔檢測(cè)或48份雙孔檢測(cè)所需的試劑成分?jǐn)?shù)量標(biāo)記成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了羊抗兔抗血清。1×5mlANTISERUM組胺抗血清，藍(lán)色，即用，內(nèi)含：兔抗血清、Tris緩沖液和0.01%的硫柳汞1×75ulENZCONJCONC酶聯(lián)物，200倍濃縮，內(nèi)含辣根過氧酶標(biāo)記的組胺。7×0.4mlCALPA-GLYO血漿標(biāo)準(zhǔn)品A-G，凍干，用于血漿樣品的定標(biāo)。內(nèi)含：組胺、人血漿。具體濃度請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽或質(zhì)控單。2×0.4mlCONTROLP1+2LYO血漿質(zhì)控1+2，凍干，內(nèi)含：組胺、人血清。具體濃度及可允許范圍請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽。1×2.0ml5×0.25mlCALU/CA-F尿液/細(xì)胞培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)品A-F，0;2.7;8.1;24.3;73;219ng/ml,即用，用于尿液和細(xì)胞培養(yǎng)樣品的定標(biāo)。內(nèi)含：組胺和0.1M的HCl。2×0.25mlCONTROLU/C1+2尿液質(zhì)控1+2，即用，內(nèi)含：組胺、人尿液（酸化的）。具體濃度及可允許范圍請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽。1×2.25mlACYLREAG酰化試劑，即用，內(nèi)含：DMF1×60mlASSAYBUFCONC檢測(cè)緩沖液，5倍濃縮，內(nèi)含Tris緩沖液、吐溫、BSA和0.05%的硫柳汞。1×50mlWASHBUFCONC洗滌液，20倍濃縮，內(nèi)含磷酸緩沖液、吐溫和0.1%的硫柳汞。1×10mlINDICATORBUF指示緩沖液，紫色，即用，內(nèi)含：Tris緩沖液、苯酚（pH＜7.5時(shí)顏色會(huì)發(fā)生改變＝和0.1%的硫柳汞。1×12mlTMBSUBSTMB底物液，即用，內(nèi)含TMB、緩沖液和穩(wěn)定劑。1×12mlTMBSTOPTMB終止液，即用，1M的H2SO4。3×FOIL粘性金屬板7、實(shí)驗(yàn)所需器材但試劑盒不提供1）移液器，體積：10;20;50;100;1000ul2）試管（12×75mm）3）試管架4）振蕩器5）旋渦混合器（500rpm）6）帶儲(chǔ)器的8道移液器7）洗滌瓶，自動(dòng)或半自動(dòng)洗板機(jī)8）酶標(biāo)儀（參考波長(zhǎng)：600-650nm）9）蒸餾水或去離子水10）吸水紙、取樣吸頭和計(jì)時(shí)器8、實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備說明注意96人份的試劑盒可分成三份分別進(jìn)行檢測(cè)，下述體積為檢測(cè)32人份時(shí)所需要的體積。8.1凍干或濃縮成分的準(zhǔn)備稀釋/溶解成分稀釋劑比例備注儲(chǔ)存穩(wěn)定性20ml檢測(cè)緩沖液100ml蒸餾水1：52-8℃2周15ml洗滌液300ml蒸餾水1：2018-25℃將晶體溶解掉2-8℃4周血漿標(biāo)準(zhǔn)品0.4ml蒸餾水靜置15min,混合時(shí)無泡沫-20℃1個(gè)月血漿質(zhì)控品0.4ml蒸餾水靜置15min,混合時(shí)無泡沫-20℃1個(gè)月10ul（*）酶聯(lián)物2ml檢測(cè)緩沖液1:200臨時(shí)配置,只能使用一次18-25℃30分鐘（*）在稀釋前,確保塞子內(nèi)無殘留液體.8.2樣品的稀釋樣品中組胺濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的樣品,應(yīng)當(dāng)在?；坝孟鄳?yīng)的稀釋液稀釋,尿液樣品用0.1M的HCl,血漿樣品用樣品稀釋液（Cat.no.KEHP711）,試劑盒內(nèi)未提供。8.3樣品的?；迷嚬軠?zhǔn)備樣品注意不能血漿標(biāo)準(zhǔn)曲線確定酰化尿液或細(xì)胞培養(yǎng)樣品中組胺的濃度,也不能用U/C標(biāo)準(zhǔn)曲線確定?；獫{樣品中組胺的濃度.8.3.1血漿1將血漿標(biāo)準(zhǔn)品、血漿質(zhì)控品和病人樣品分別100ul加入到相應(yīng)的試管中。2在每一試管中加入100ul指示緩沖液，旋渦混合。3在每一試管中加入20ul酰化試劑，加入酰化試劑后立即旋渦混合。4將試管蓋好，室溫（18-25℃）溫育30分鐘。5在每一試管中加入750ul已稀釋好的檢測(cè)緩沖液，旋渦混合。8.3.2尿液，細(xì)胞培養(yǎng)上清1將U/C標(biāo)準(zhǔn)品、尿液質(zhì)控品和病人尿液或細(xì)胞培養(yǎng)上清分別50ul加入到相應(yīng)的試管中。2在每一試管中加入50ul指示緩沖液，旋渦混合。如果指示劑變成無色，說明溶液的pH值很低，樣品中含有很多酸性物質(zhì)。在這種情況下，再向試管中加入50ul指示緩沖液直至溶液略帶微紅。3在每一試管中加入10ul?；噭?，加入酰化試劑后立即旋渦混合。4將試管蓋好，室溫（18-25℃）溫育30分鐘。5在每一試管中加入2000ul已稀釋好的檢測(cè)緩沖液，旋渦混合。注意：酰化處理好的樣品可在2-8℃下存放一晚，-20℃環(huán)境下可存放2天。9、實(shí)驗(yàn)步驟1將?；幚磉^的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和病人樣品分別50ul加入到相應(yīng)的微孔中。2在每一微孔中加入50ul臨時(shí)配置好的酶聯(lián)物。3在每一微孔中加入50ul組胺抗血清。4蓋板，振蕩器（500rpm）上室溫溫育3小時(shí)。5移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)物，每孔用250ul稀釋好的洗滌液洗板4次，吸水紙上拍干以除去殘余液體。6如果有條件的話，可以用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液時(shí)，每孔的時(shí)間間隔應(yīng)當(dāng)相同。使用主動(dòng)置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。7在每一微孔中加入100ulTMB底物液。8血漿：振蕩器（500rpm）上室溫溫育40min。尿液/細(xì)胞培養(yǎng)上清：振蕩器（500rpm）上室溫溫育20min。9在每一微孔中加入100ulTMB終止液以終止底物反應(yīng)。輕輕振板使溶液混合均勻。10加終止液后15min內(nèi)450nm處讀取OD值。（參考波長(zhǎng)：600-650nm）10、期望值實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能當(dāng)作任何ZL結(jié)果的**原因，疾病的判斷還應(yīng)當(dāng)與其它臨床觀察和診斷檢測(cè)相結(jié)合。以下結(jié)果為正常人群的正常值（5%-95%），建議每個(gè)實(shí)驗(yàn)室讀確定自己的正常值范圍：血漿尿液24小時(shí)尿液自然產(chǎn)生的尿液ng/mlug/dug/g肌酐酸0.2-1.05-568-53本譯文僅供參考，詳情請(qǐng)以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理：深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口太子路18號(hào)海景廣場(chǎng)11C研發(fā)ZX：深圳市蛇口沿山路10號(hào)6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費(fèi)電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細(xì)]

  2018-11-14 10:00

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• 去甲腎上腺素ELISA Kit使用說明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4去甲腎上腺素ELISAKit使用說明書（德國(guó)IBL：RE59261）1、應(yīng)用范圍此試劑盒可用于人血清和尿液中去甲腎上腺素的體外定量檢測(cè)。2、臨床意義兒茶酚胺類激素腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺主要由腎上腺髓質(zhì)、交感神經(jīng)系統(tǒng)和大腦產(chǎn)生。它們幾乎影響所有的組織，并與其它激素和神經(jīng)系統(tǒng)一起參與各種生理過程的調(diào)節(jié)。在許多疾病中，兒茶酚胺激素及其代謝產(chǎn)物變腎上腺素和去甲變腎上腺素的分泌量都會(huì)增加，因而這些激素可用于疾病的診斷。所以，這些激素的檢測(cè)對(duì)于疾病的診斷及神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤疾病的具有重要意義。它主要用于嗜鉻細(xì)胞瘤的診斷，當(dāng)然也用于成神經(jīng)細(xì)胞瘤和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞瘤的診斷。因?yàn)樵趯?shí)驗(yàn)一開始時(shí)有提取步驟，用戶可使用各種動(dòng)物材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。所有動(dòng)物的兒茶酚胺的化學(xué)結(jié)構(gòu)相同，因此此試劑盒可用于測(cè)大鼠、小鼠或其它動(dòng)物。3、實(shí)驗(yàn)原理此固相ELISA試劑盒利用的夾心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗體。之后加入的液態(tài)抗體可以結(jié)合到抗原分子的一個(gè)抗原決定簇上，而抗原分子可在溫育期內(nèi)結(jié)合到固相抗體上。樣品中的抗原與酶標(biāo)二抗一起在微孔內(nèi)溫育，此酶標(biāo)二抗可結(jié)合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結(jié)果可直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取。4、貯存與穩(wěn)定性試劑盒和運(yùn)輸環(huán)境和儲(chǔ)存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽(yáng)直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑的準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定，前提是將試劑盒用袋子密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下。5、樣品的采集與儲(chǔ)存注意人體內(nèi)的兒茶酚氨和間甲腎上腺素的釋放會(huì)受到一些食品和藥物的影響。因此在樣品采集前72小時(shí)內(nèi)病人應(yīng)禁止服用下列食物和藥品：維生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMTYZ劑，還有降血壓類藥物。血漿（EDTA）注意血液采集后兩小時(shí)內(nèi)，將血液樣品冷藏于2-8℃的環(huán)境下直致離心獲取血漿。注意靜脈穿刺采集全血的常規(guī)注意事項(xiàng)。從采集到血液樣品的那一刻起到檢測(cè)時(shí)都應(yīng)保持血液樣品的化學(xué)整體性。不要使用明顯溶血、黃疸的和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁，則在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)當(dāng)離心以除去所有的微粒物質(zhì)。貯存2-8℃≤-20℃避免熱源或太陽(yáng)直射，避免反復(fù)凍融，冷凍狀態(tài)下運(yùn)輸樣品。穩(wěn)定性6h1個(gè)月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。將病人24h內(nèi)的所有尿液都收集到，并混合于含10-15ml6N的HCl防腐劑的試劑瓶中。貯存≤-20℃避免熱源或太陽(yáng)直射，避免反復(fù)凍融，冷凍狀態(tài)下運(yùn)輸樣品。穩(wěn)定性6個(gè)月6、試劑盒成分注意：試劑盒有足夠做96份單孔檢測(cè)或48份雙孔檢測(cè)所需的試劑成分?jǐn)?shù)量標(biāo)志成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，單克隆）。1×6×2.5mlCALA-F標(biāo)準(zhǔn)品A-F，即用腎上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml（0;8;27;82;273;819nmol/L）去甲腎上素:0;5;15;50;150;500ng/mL（0;30;89;296;887;2955nmol/L）多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL（0;78;228;750;2938;14688nmol/L）內(nèi)含[-]腎上腺素，[-]去甲腎上腺素，[-]多巴胺（有生物活性）,0.1M的HCl1×2×2.5mlCONTROL1+2質(zhì)控品1+2即用,含:[-]腎上腺素，[-]去甲腎上腺素，[-]多巴胺（具有生物活性）,0.1M的HCl,具體濃度及可允許范圍請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽.1×250μLENZCONJCONC酶聯(lián)物濃縮型（100×）內(nèi)含：堿性磷酸酶標(biāo)記的抗體，Tris緩沖液，HCl，0.01%的NaN32×EXTRPLATE提取板（微孔板）每板24孔，包被了硼酸親和凝膠。1×60mlEXTRBUF提取緩沖液粉紅色，即用，內(nèi)含：0.016%的NaN32×1.25mlCOMTLYOCOMT凍干粉內(nèi)含：兒茶酚-氧位-甲基轉(zhuǎn)移酶（豬肝），NaN31×2mlCOMTADDCOMT添加劑內(nèi)含：人血漿，穩(wěn)定劑，0.01%硫柳汞。1×7mlANTISERUMDO去甲腎上腺素抗血清紫羅蘭色，即用，內(nèi)含：抗去甲腎上腺素抗體（兔），緩沖液，穩(wěn)定劑。2×1.25mlCOENZ酶聯(lián)復(fù)合物即用，內(nèi)含：S-腺苷-L-蛋白酸，穩(wěn)定劑。1×3mlENZBUF酶緩沖液即用，內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，穩(wěn)定劑。1×17mlRELEASEBUFRelease緩沖液黃色，即用，內(nèi)含：0.1M的HCl，指示劑。1×3mlACYLREAG酰化試劑即用，內(nèi)含：二甲基甲酰胺，乙醇。注意：有毒，高可燃性。1×50mlWASHBURCONC洗滌液濃縮型（10×）內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，吐溫，0.2%的NaN31×9×PNPPSUBSPNPP底物片內(nèi)含：對(duì)硝基苯磷酸（PNPP）1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液即用，內(nèi)含：二乙醇胺，水，0.05%的NaN31×15mlPNPPSTOPPNPP終止液即用，內(nèi)含：1M的NaOH，0.25M的EDTA3×FOIL粘性金屬板7、實(shí)驗(yàn)所需器材（但試劑盒不提供）1）移液器（10；10-100；100-1000μL）2）軌道搖床（200-900rpm）3）旋渦混合器4）帶儲(chǔ)器的8通道移液器5）洗滌瓶，自動(dòng)或半自動(dòng)包被板清洗系統(tǒng)6）酶標(biāo)儀7）雙蒸水或去離子水8）吸水紙，取樣吸頭，計(jì)時(shí)器8、實(shí)驗(yàn)前說明注意用于96人份檢測(cè)色試劑盒成分可分成兩次進(jìn)行。，下列所述體積為做48人份時(shí)所需要的量。8.1樣品的稀釋如果樣品中去甲腎上腺素濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的應(yīng)按照下列所述進(jìn)行稀釋：樣品待稀釋稀釋液備注血漿去甲腎上腺素濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品中去甲腎上腺素的濃度雙蒸水提取步驟前尿液去甲腎上腺素濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品中去甲腎上腺素的濃度0.1N的HCl提取步驟前8.2樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的提取（提取板，手動(dòng)操作版）1）將標(biāo)準(zhǔn)品、已稀釋好的質(zhì)控品、已稀釋好的尿液樣品各20μL和500μL血漿樣品加入到提取板相應(yīng)的微孔中。除血漿樣品孔外，在所有的微孔中加入500μL雙蒸水以消除體積差別。2）在每一微孔中加入1000μL提取緩沖液3）蓋板。在軌道搖床（600-900rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取30min。在提取過程中，液體的表面應(yīng)該會(huì)浸濕粘性金屬板，但液體的量不能超過微孔的2/3。液體是否濺出并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。4）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。5）每孔加入2ml雙蒸水6）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。7）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。8）每孔加入150μL提取緩沖液，再向每孔中加入50μL酰化試劑，立即混合均勻。9）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取20min。（無需蓋板）10）快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。11）每孔加入2ml雙蒸水。12）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。13）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。14）每孔加入300μLRelease緩沖液。15）在軌道搖床（400-500rpm）上18-25℃的環(huán)境下振蕩30min。（無需蓋板）已準(zhǔn)備好的樣品應(yīng)當(dāng)在當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)。如果不行的話，您可將提取板用粘性金屬板蓋好，在2-8℃的環(huán)境下可存放一夜。9、實(shí)驗(yàn)步驟9.1COMT酶溶液的準(zhǔn)備注意：COMT酶溶液應(yīng)在使用前直接臨時(shí)配置。在COMT凍干粉中加入1.25ml雙蒸水，充分混和。再加入1.25ml酶聯(lián)溶液，然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加劑以充分混合溶解的COMT試劑*，COMT酶溶液Z后的體積為每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋渦混合器混合，但要避免氣泡產(chǎn)生，配置好的COMT溶液可在室溫下穩(wěn)定存放1小時(shí)。*如果只需要一定量的COMT溶液，則剩余的COMT溶液應(yīng)立即凍存于-20℃的環(huán)境下。COMT溶液可在此環(huán)境下穩(wěn)定存放1-2個(gè)月。9.2樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的酶分化注意如果要檢測(cè)腎上腺素和去甲腎上腺素，我們建議您先檢測(cè)腎上腺素。如果使用自動(dòng)置換型衣液器加樣，請(qǐng)將取樣吸頭內(nèi)的殘余液體加入到提取板的相應(yīng)微孔內(nèi)，否則剩余的提取液不夠去甲腎上腺素檢測(cè)用。將提取板放到有一定坡度的位置上。實(shí)驗(yàn)開始前，確定好腎上腺素和去甲腎上腺素的檢測(cè)孔并標(biāo)記好。9.3尿液與血漿中的去甲腎上腺素1在每一微孔內(nèi)加入25ul臨時(shí)配制的COMT酶溶液，輕輕振板以使溶液混合均勻。2將提取好的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品分別25ul加入到相應(yīng)的微孔內(nèi)。在此步驟中，我們可以將取樣吸頭直接深入到COMT溶液里。加樣后，溶液顏色變成粉色，輕輕振板以使溶液混合均勻。3向每一微孔中加入50ul去甲腎上腺素抗血清（藍(lán)色）。4蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育120min。8.4凍干粉或濃縮成分的準(zhǔn)備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性20ml洗滌液180ml雙蒸水1：10充分混合2-8℃4W60μL酶聯(lián)物6ml洗滌緩沖液（已稀釋好）1：101臨時(shí)配置，僅能使用一次，混合時(shí)避免氣泡產(chǎn)生18-25℃30min4PNPP底物片10.7mlPNPP底物緩沖液臨時(shí)配置，僅能使用一次18-25℃10min9.5ELISA實(shí)驗(yàn)步驟1）移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250-300ul稀釋好的洗滌液洗板4次。Z后在吸水紙上拍干以除去殘余液體。2）在每一微孔中加入100ul臨時(shí)配置好的酶聯(lián)物。3）蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育60min。4）移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250-300ul稀釋好的洗滌液洗板4次。Z后在吸水紙上拍干一除去殘余液體。5）如果可以的話，使用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時(shí)間間隔應(yīng)當(dāng)相同，使用自動(dòng)置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。6）在每一微孔中加入200ul底物液。7）不要蓋板，在軌道搖床上（400-600rpm）18-25℃的環(huán)境下孵育60min。8）在每一微孔內(nèi)加入50ulPNPP終止液以終止酶反應(yīng)。輕輕振板以使溶液混合均勻。9）加終止液后60min內(nèi)405nm處讀取OD值。10、期望值實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能當(dāng)作判斷任何ZL結(jié)果的**因素，疾病的判斷還應(yīng)當(dāng)與其它臨床觀察和診斷檢測(cè)相結(jié)合。以下結(jié)果為正常人群的正常值（5%-95%），建議每個(gè)實(shí)驗(yàn)室讀確定自己的正常值范圍：尿液血漿μg/dnmol/dpg/mLnmol/L去甲腎上腺素＜90＜535＜600＜3.55本譯文僅供參考，詳情請(qǐng)以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理：深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口工業(yè)區(qū)太子路18號(hào)海景廣場(chǎng)11C研發(fā)基地：深圳市蛇口沿山路10號(hào)6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費(fèi)電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細(xì)]

  2018-11-14 10:00

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• 多巴胺ELISA Kit使用說明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4多巴胺ELISAKit使用說明書（德國(guó)IBL：RE59161）1、應(yīng)用范圍此試劑盒可用于人血漿和尿液中多巴胺的體外定量檢測(cè)，可手動(dòng)操作，也可自動(dòng)操作。進(jìn)一步的研究表明：此試劑盒還可用于組織勻漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液的研究。2、前言說明兒茶酚氨類激素腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺主要由腎上腺髓質(zhì)、交感神經(jīng)系統(tǒng)和大腦產(chǎn)生。它們幾乎影響所有的組織，并與其它激素和神經(jīng)系統(tǒng)一起參與各種生理過程的調(diào)節(jié)。在許多疾病中，兒茶酚氨激素及其代謝產(chǎn)物間甲腎上腺素和去甲變腎上腺素的分泌量都會(huì)增加，因而這些激素可用于疾病的診斷。所以，這些激素的檢測(cè)對(duì)于疾病的診斷及神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤疾病的具有重要意義。它主要用于嗜鉻細(xì)胞瘤的診斷，當(dāng)然也用于成神經(jīng)細(xì)胞瘤和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞瘤的診斷。因?yàn)樵趯?shí)驗(yàn)一開始時(shí)有提取步驟，所以用戶可使用各種各樣的動(dòng)物材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。如果用此試劑盒測(cè)大鼠、小鼠或其它動(dòng)物，則兒茶酚氨的化學(xué)結(jié)構(gòu)與動(dòng)物的相同。3、實(shí)驗(yàn)原理此固相酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)利用的是ELISA的夾心法。微孔中包被了羊抗兔抗體。在溫育時(shí)間之內(nèi)，加入的溶液抗在體可直接與抗原分子上的一個(gè)表位結(jié)合。樣品中的抗原與酶標(biāo)二抗（可與抗原分子上的不同表位結(jié)合）在包被孔中溫育。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結(jié)果可直接用標(biāo)準(zhǔn)曲線確定。4、貯存與穩(wěn)定性試劑盒和運(yùn)輸環(huán)境和儲(chǔ)存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽(yáng)直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑的準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定，前提是要將試劑盒用袋子密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下。5、樣品的采集與儲(chǔ)存注意人體內(nèi)的兒茶酚氨和間甲腎上腺素的釋放會(huì)受到一些食品和藥物的影響。因此在樣品采集前72小時(shí)內(nèi)病人應(yīng)禁止服用下列食物和藥品：維生素B，咖啡，香蕉，α甲基多巴，MAO，COMTYZ劑，還有降血壓類藥物。血漿（EDTA）注意血液采集后兩小時(shí)內(nèi)，將血液樣品冷藏于2-8℃的環(huán)境下直致離心獲取血漿。注意靜脈穿刺采集全血的常規(guī)注意事項(xiàng)。從采集到血液樣品的那一刻起到檢測(cè)時(shí)都應(yīng)保持血液樣品的化學(xué)整體性。不要使用明顯溶血、黃疸血和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁，則在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)當(dāng)離心以除去所有的微粒物質(zhì)。貯存2-8℃≤-20℃避免熱源或太陽(yáng)直射，避免反復(fù)凍融，冷凍狀態(tài)下運(yùn)輸樣品。穩(wěn)定性6h1個(gè)月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。收集病人24h內(nèi)的所有尿液，之后將其加入到10-15ml6N的HCl防腐劑中。貯存≤-20℃避免熱源或太陽(yáng)直射，避免反復(fù)凍融，冷凍狀態(tài)下運(yùn)輸樣品。穩(wěn)定性6個(gè)月6、試劑盒成分注意試劑盒所提供的試劑足夠做96孔單孔檢測(cè)或48孔雙份檢測(cè)。注意此包被板也可用于檢測(cè)腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺。數(shù)量標(biāo)志成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，單克?。?。1×6×2.5mlCALA-F標(biāo)準(zhǔn)品A-F腎上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml（0;8;27;82;273;819nmol/L）去甲腎上素:0;5.0;15;50;150;500ng/mL（0;30;89;296;887;2955nmol/L）多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL（0;78;228;750;2938;14688nmol/L）即用,內(nèi)含:腎上腺素-去甲腎上腺素-多巴胺（具有生物活性）,0.1M的HCl1×2×2.5mlCONTROL1+2質(zhì)控品1+2即用,含:腎上腺素-去甲腎上腺素-多巴胺（具有生物活性）,0.1M的HCl,具體濃度及可允許范圍請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽.1×250μLENZCONJCONC酶聯(lián)物濃縮型（100×）內(nèi)含：堿性磷酸酶標(biāo)記的抗體，Tris緩沖液，HCl，0.01%的NaN34×EXTRPLATE提取板（微孔板）每板24孔，包被了硼酸親和凝膠。2×60mlEXTRBUF提取緩沖液粉紅色，即用，內(nèi)含：0.016%的NaN31×1.25mlCOMTLYOCOMT凍干粉內(nèi)含：兒茶酚-氧位-甲基轉(zhuǎn)移酶（豬肝），NaN31×2mlCOMTADDCOMT添加劑內(nèi)含：人血漿，穩(wěn)定劑，0.01%硫柳汞。1×7mlANTISERUMDO多巴胺抗血清紫羅蘭色，即用，內(nèi)含：抗多巴胺抗體（兔），緩沖液，穩(wěn)定劑。2×1.25mlCOENZ酶聯(lián)復(fù)合物即用，內(nèi)含：S-腺苷-L-蛋白酸，穩(wěn)定劑。1×3mlENZBUF酶緩沖液即用，內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，穩(wěn)定劑。4×13mlRELEASEBUFRelease緩沖液黃色，即用，內(nèi)含：0.1M的HCl，指示劑。2×3mlACYLREAG酰化試劑即用，內(nèi)含：二甲基甲酰胺，乙醇。注意：有毒，高可燃性。2×50mlWASHBURCONC洗滌液濃縮型（10×）內(nèi)含：Tris緩沖液，HCl，吐溫，0.2%的NaN31×9×PNPPSUBSPNPP底物片內(nèi)含：對(duì)硝基苯磷酸（PNPP）1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液即用，內(nèi)含：二乙醇胺，水，0.05%的NaN31×15mlPNPPSTOPPNPP終止液即用，內(nèi)含：1M的NaOH，0.25M的EDTA1×20mlHClHCl即用，內(nèi)含：0.1M的HCl3×FOIL粘性金屬板7、實(shí)驗(yàn)所需器材（但試劑盒不提供）1）移液器（10；10-100；100-1000μL）2）軌道搖床（200-900rpm）3）旋渦混合器4）帶儲(chǔ)器的8通道移液器5）洗滌瓶，自動(dòng)或半自動(dòng)包被板清洗系統(tǒng)6）酶標(biāo)儀7）雙蒸水或去離子水8）吸水紙，取樣吸頭，計(jì)時(shí)器9）樣品稀釋用試管。8、手動(dòng)操作8.1實(shí)驗(yàn)前說明注意用于96人份檢測(cè)色試劑盒成分可分成兩次進(jìn)行。下列所述體積為做48人份時(shí)所需要的量。注意試劑盒中的質(zhì)控品和所有尿液樣品在使用前都必須在試管中用0.1M的HCl按1：5的比例進(jìn)行稀釋（例如：20μL尿液+80μL0.1M的HCl）。標(biāo)準(zhǔn)品無需稀釋。8.2樣品的稀釋如果樣品中多巴胺濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的應(yīng)按照下列所述進(jìn)行稀釋：樣品待稀釋稀釋液備注血漿多巴胺濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品中多巴胺的濃度雙蒸水提取步驟前尿液多巴胺濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品中多巴胺的濃度0.1N的HCl提取步驟前8.3樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的提取（提取板）1）將標(biāo)準(zhǔn)品、已稀釋好的質(zhì)控品、已稀釋好的尿液樣品各20μL和500μL血漿樣品加入到提取板相應(yīng)的微孔中。除血漿樣品孔外，在所有的微孔中加入500μL雙蒸水以消除體積差別。2）在每一微孔中加入1000μL提取緩沖液3）蓋板。在軌道搖床（600-900rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取30min。在提取過程中，液體的表面應(yīng)該會(huì)浸濕粘性金屬板，但液體的量不能超過微孔的2/3。液體是否濺出并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。4）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。5）每孔加入2ml雙蒸水6）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。7）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。8）每孔加入150μL提取緩沖液，再向每孔中加入50μL?；噭?，立即混合均勻。9）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取20min。（無需蓋板）10）快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。11）每孔加入2ml雙蒸水。12）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。13）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。14）每孔加入300μLRelease緩沖液。15）在軌道搖床（400-500rpm）上18-25℃的環(huán)境下振蕩30min。（無需蓋板）已準(zhǔn)備好的樣品應(yīng)當(dāng)在當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)。如果不行的話，您可將提取板用粘性金屬板蓋好，在2-8℃的環(huán)境下可存放一夜。8.4凍干粉或濃縮成分的準(zhǔn)備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性25ml洗滌液225ml雙蒸水1：10充分混合2-8℃4W60μL酶聯(lián)物6ml洗滌緩沖液（已稀釋好）1：101臨時(shí)配置，僅能使用一次，混合時(shí)避免氣泡產(chǎn)生18-25℃5h4PNPP底物片10.7mlPNPP底物液臨時(shí)配置，僅能使用一次18-25℃5h9、實(shí)驗(yàn)步驟（手動(dòng)操作）9.1COMT酶溶液的準(zhǔn)備注意：COMT酶溶液應(yīng)在使用前直接臨時(shí)配置在COMT凍干粉中加入1.25ml雙蒸水，充分混和。再加入1.25ml酶聯(lián)溶液，然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加劑以充分混合溶解的COMT試劑*，COMT酶溶液Z后的體積為每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋渦混合器混合，但要避免氣泡產(chǎn)生，配置好的COMT溶液可在室溫下穩(wěn)定存放1小時(shí)。*如果只需要一定量的COMT溶液，則剩余的COMT溶液應(yīng)立即凍存于-20℃的環(huán)境下。COMT溶液可在此環(huán)境下穩(wěn)定存放1-2個(gè)月。9.2樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的酶化注意如果使用自動(dòng)置換型移液器，請(qǐng)將取樣吸頭內(nèi)的殘余液體加回到提取板相應(yīng)的微孔內(nèi)。將提取板置于一斜坡位置比較適當(dāng)?？蒲杏媒M織勻漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清可按如下建議處理：細(xì)胞培養(yǎng)上清必須根據(jù)其培養(yǎng)基及其相應(yīng)濃度進(jìn)行處理：根據(jù)尿液樣品的操作說明（至少提取20ul上清液），未稀釋樣品的靈敏度大概為1.0ng/ml。如果基質(zhì)內(nèi)添加了血清（FCS），血漿（至少提取500ul上清）操作的靈敏度可以是5pg/ml。無高氯酸的組織勻漿可用做勻漿樣品，具體信息請(qǐng)咨詢IBL漢堡公司。9.3檢測(cè)尿液和血漿中的多巴氨1在包被板的每一微孔中加入75μL剛配置好的COMT酶溶液，輕輕振蕩。2在尿液樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的微孔中加入90μLRelease緩沖液（血漿樣品孔除外）。將已提取好的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和尿液樣品分別10μL加入到相應(yīng)的微孔中。將100ul提取好的血漿樣品加入到相應(yīng)的微孔中。在此加樣步驟中，可直接將取樣吸頭伸入到COMT溶液中。溶液顏色變成粉色，輕輕振蕩。3在每一微孔中加入50ul多巴胺抗血清（紫色）。4蓋板，在振蕩器（400-600rpm）上室溫（18-25℃）溫育120min5移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。吸水紙上拍干以除去殘余液體。6在每一微孔中加入100ul臨時(shí)配置好的酶聯(lián)物。7蓋板，在振蕩器（400-600rpm）上室溫（18-25℃）溫育60min8移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。吸水紙上拍干以除去殘余液體。9如果可以的話，使用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時(shí)間間隔應(yīng)當(dāng)相同，使用自動(dòng)置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。10在每一微孔中加入200ul底物液。11在振蕩器（400-600rpm）上室溫（18-25℃）溫育40min12在每一微孔中加入50ulPNPP終止液，輕輕振板以使溶液混合均勻。13加終止液后60min內(nèi)405nm處讀取OD值。（參考波長(zhǎng)：620-650nm）10、自動(dòng)操作步驟10.1實(shí)驗(yàn)前說明注意用于96人份檢測(cè)色試劑盒成分可分成兩次進(jìn)行。下列所述體積為做48人份時(shí)所需要的量。注意試劑盒中的質(zhì)控品和所有尿液樣品在使用前都必須在試管中用0.1M的HCl按1：5的比例進(jìn)行稀釋（例如：20μL尿液+80μL0.1M的HCl）。標(biāo)準(zhǔn)品無需稀釋。10.2樣品的稀釋如果樣品中多巴胺濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的應(yīng)按照下列所述進(jìn)行稀釋：樣品待稀釋稀釋液備注血漿多巴胺濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品中多巴胺的濃度雙蒸水提取步驟前尿液多巴胺濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品中多巴胺的濃度0.1N的HCl提取步驟前10.3樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的提?。ㄌ崛“澹?）將標(biāo)準(zhǔn)品、已稀釋好的質(zhì)控品、已稀釋好的尿液樣品各30μL和750μL血漿樣品加入到提取板相應(yīng)的微孔中。除血漿樣品孔外，在所有的微孔中加入750μL雙蒸水以消除體積差別。2）在每一微孔中加入1000μL提取緩沖液3）蓋板。在軌道搖床（600-900rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取30min。在提取過程中，液體的表面應(yīng)該會(huì)浸濕粘性金屬板，但液體的量不能超過微孔的2/3。液體是否濺出并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。4）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。5）每孔加入2ml雙蒸水6）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。7）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。8）每孔加入150μL提取緩沖液，再向每孔中加入50μL?；噭?，立即混合均勻。9）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下提取20min。（無需蓋板）10）快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。11）每孔加入2ml雙蒸水。12）用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上（600-900rpm）18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。13）移去粘性金屬板，快速棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，在吸水紙上拍干。14）每孔加入450μLRelease緩沖液。15）在軌道搖床（400-500rpm）上18-25℃的環(huán)境下振蕩30min。（無需蓋板）已準(zhǔn)備好的樣品應(yīng)當(dāng)在當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)。如果不行的話，您可將提取板用粘性金屬板蓋好，在2-8℃的環(huán)境下可存放一夜。10.4凍干粉或濃縮成分的準(zhǔn)備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性25ml洗滌液450ml雙蒸水1：10充分混合2-8℃4W150μL酶聯(lián)物15ml洗滌緩沖液（已稀釋好）1：101臨時(shí)配置，僅能使用一次，混合時(shí)避免氣泡產(chǎn)生18-25℃5h4PNPP底物片10.7mlPNPP底物液臨時(shí)配置，僅能使用一次18-25℃5h11、實(shí)驗(yàn)步驟（自動(dòng)操作）11.1COMT酶溶液的準(zhǔn)備注意：COMT酶溶液應(yīng)在使用前直接臨時(shí)配置在COMT凍干粉中加入1.25ml雙蒸水，充分混和。再加入1.25ml酶聯(lián)溶液，然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加劑以充分混合溶解的COMT試劑*，COMT酶溶液Z后的體積為每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋渦混合器混合，但要避免氣泡產(chǎn)生，配置好的COMT溶液可在室溫下穩(wěn)定存放1小時(shí)。*如果只需要一定量的COMT溶液，則剩余的COMT溶液應(yīng)立即凍存于-20℃的環(huán)境下。COMT溶液可在此環(huán)境下穩(wěn)定存放1-2個(gè)月。11.2實(shí)驗(yàn)步驟在使用自動(dòng)方法做實(shí)驗(yàn)時(shí)，我們建議按1：10的比例預(yù)先稀釋提取好的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和尿液樣品（如果是手動(dòng)操作則用Release緩沖液進(jìn)行稀釋）。如果稀釋了，第二個(gè)步驟可簡(jiǎn)化為：將已提取好的血漿樣品、已提取好的標(biāo)準(zhǔn)品（按1：10的比例預(yù)先稀釋）、質(zhì)控品和尿液樣品各100μL加入到微孔中。在進(jìn)行預(yù)稀釋時(shí)，應(yīng)當(dāng)考慮到自動(dòng)操作的死容積。1）在包被板的每一微孔中加入75μL剛配置好的COMT酶溶液，輕輕振蕩。2）在尿液樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的微孔中加入90μLRelease緩沖液（血漿樣品孔除外）。將已提取好的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和尿液樣品分別10μL加入到相應(yīng)的微孔中。在此加樣步驟中，可直接將取樣吸頭伸入到COMT溶液中。溶液顏色變成粉色，輕輕振蕩。3）每孔中加入50μL多巴胺抗血清。4）蓋板。在振蕩器（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下溫育120min5）棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。6）每孔加入100μL酶聯(lián)物7）蓋板。在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下溫育60min8）棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，用250-300μL已稀釋好的洗滌液洗板6次。9）加底物液和終止液時(shí)，其時(shí)間間隔應(yīng)相同10）每孔加入200μL底物液11）在軌道搖床（400-600rpm）上18-25℃的環(huán)境下溫育40min。如果自動(dòng)操作時(shí)的溫度超過25℃時(shí)，則應(yīng)相應(yīng)的將溫育時(shí)間縮短至30min。12）每孔加入50μLPNPP終止液以終止底物反應(yīng)，輕輕振蕩包被板以充分混合試劑成分。13）加終止液后60min之內(nèi)405nm處讀取OD值。（參考波長(zhǎng)：620-650nm）12、期望值實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能當(dāng)作判斷任何ZL結(jié)果的**因素，疾病的判斷還應(yīng)當(dāng)與其它臨床觀察和診斷檢測(cè)相結(jié)合。以下結(jié)果為正常人群的正常值（5%-95%），建議每個(gè)實(shí)驗(yàn)室讀確定自己的正常值范圍：尿液血漿μg/dnmol/dpg/mLnmol/L多巴胺＜600＜3917＜100＜0.65本譯文僅供參考，詳情請(qǐng)以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理：深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口工業(yè)區(qū)太子路18號(hào)海景廣場(chǎng)11C研發(fā)基地：深圳市蛇口沿山路10號(hào)6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費(fèi)電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細(xì)]

  2018-11-14 10:00

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  兔腎上腺素（EPI）elisa試劑盒使用說明書[詳細(xì)]

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• 人腎上腺素（EPI）ELISA試劑盒使用說明書

  人腎上腺素（EPI）ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。實(shí)驗(yàn)原理人腎上腺素（EPI）ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人腎上腺素（EPI）水平。用純化的人腎上腺素（EPI）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入腎上腺素（EPI），再與HRP標(biāo)記的腎上腺素（EPI）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腎上腺素（EPI）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人腎上腺素（EPI）濃度。人腎上腺素（EPI）ELISA試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品（400ng/L）0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。人腎上腺素（EPI）ELISA試劑盒操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。200ng/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100ng/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ng/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25ng/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液12.5ng/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。人腎上腺素（EPI）ELISA試劑盒注意事項(xiàng)1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請(qǐng)避光保存。7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。人腎上腺素（EPI）ELISA試劑盒保存條件及有效期1．試劑盒保存：2-8℃。2．有效期：6個(gè)月[詳細(xì)]

  2019-01-02 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 5-羥色胺ELISA Kit使用說明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer45-羥色胺ELISAKit使用說明書（德國(guó)IBL:RE59121）1、應(yīng)用范圍此試劑盒可用于人血清、血漿、血小板和尿液中五羥色胺的體外定量檢測(cè)。進(jìn)一步的研究表明：此試劑盒還可用于組織勻漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液的研究。2、前言說明五羥色胺是色氨酸代謝的中間產(chǎn)物，它主要存在于腸嗜鉻細(xì)胞、血清素激活的神經(jīng)元和血小板中，它已被確定為是神經(jīng)系統(tǒng)的一種神經(jīng)遞質(zhì)。循環(huán)血液中的五羥色胺幾乎都集中于血小板內(nèi)。循環(huán)五羥色胺濃度的變化可反映出人體的一些病理變化，這些病理變化包括：慢性肌緊張性頭痛、精神分裂癥、高血壓、舞蹈癥、杜氏肌肉萎縮癥和早期急性闌尾炎。血清五羥色胺的檢測(cè)對(duì)類癌綜合征的檢測(cè)具有重要臨床意義。人們預(yù)計(jì)：在不久的將來，人們對(duì)血小板內(nèi)五羥色胺的研究興趣（包括五羥胺的吸收及釋放動(dòng)力學(xué)研究）應(yīng)該會(huì)不斷增長(zhǎng)。3、實(shí)驗(yàn)原理樣品準(zhǔn)備（將五羥色胺轉(zhuǎn)變?yōu)镹-乙酰五羥色胺）是樣品的稀釋的一部分，將每一份樣品分別于?；噭┮黄饻赜涂梢缘玫锦；奈辶u色胺。此實(shí)驗(yàn)采用的是競(jìng)爭(zhēng)性ELISA的原理，生物素標(biāo)記的和非生物素標(biāo)記的抗原競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合到一定數(shù)量的抗體結(jié)合位點(diǎn)上。Z后，結(jié)合到抗體上的生物素標(biāo)記抗原的量于樣品中被分析物的濃度成反比。當(dāng)反應(yīng)系統(tǒng)達(dá)到平衡后，洗板除去未結(jié)合的生物素標(biāo)記抗原，用抗生物素堿性磷酸酶做標(biāo)記、對(duì)硝基苯磷酸做底物來檢測(cè)結(jié)合到抗體上的生物素標(biāo)記抗原的量。用已知標(biāo)準(zhǔn)品做一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，將未知樣品的酶活性在標(biāo)準(zhǔn)曲線上進(jìn)行定標(biāo)就可以得到未知樣品中五羥色胺的濃度。4、貯存與穩(wěn)定性試劑盒和運(yùn)輸環(huán)境和儲(chǔ)存環(huán)境溫度為2-8℃，避免熱源或太陽(yáng)直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑的準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。打開了的試劑盒在有效期內(nèi)穩(wěn)定，前提是要將試劑盒用袋子密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下。5、樣品的采集與儲(chǔ)存注意有些食物會(huì)含有一定量的五羥色胺，另外，有些藥物也會(huì)刺激五羥色胺的釋放，從而導(dǎo)致五羥色胺的濃度升高。病人應(yīng)當(dāng)禁食富含五羥色胺的食物，如：阿司匹林、促腎上腺皮質(zhì)激素、MAOYZ劑、phenazetin、兒茶酚氨、利血平和煙堿。血清注意靜脈穿刺采集全血的常規(guī)注意事項(xiàng)。從采集到血液樣品的那一刻起到檢測(cè)時(shí)都應(yīng)保持血液樣品的化學(xué)整體性。不要使用明顯溶血、黃疸血和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁，則在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)當(dāng)離心以除去所有的微粒物質(zhì)。貯存18-25℃2-8℃≤-20℃避免熱源或太陽(yáng)直射，避免反復(fù)凍融，冷凍狀態(tài)下運(yùn)輸樣品。穩(wěn)定性2小時(shí)6小時(shí)3個(gè)月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。收集病人24h內(nèi)的所有尿液，之后將其加入到10-15ml6N的HCl防腐劑中。確定用于結(jié)果結(jié)算的總體積。使用前請(qǐng)將所有樣品混合并離心。貯存≤-20℃避免熱源或太陽(yáng)直射，避免反復(fù)凍融。穩(wěn)定性6個(gè)月血漿、血小板98%以上的循環(huán)五羥色胺都位于血小板內(nèi)，在血液凝集時(shí)就可以釋放出來。用靜脈穿刺的方法將全血收集到含EDTA或檸檬酸的塑料試管中（如10mlMonovetteNC試管中加入1ml檸檬酸溶液）。室溫下，將全血樣品以200×g的速率離心10分鐘得到富含血小板的血漿（PRP）。將PRP-上清轉(zhuǎn)移到另一試管中。為了獲得血小板乳糜微粒，我們將200ulPRP（350000～500000個(gè)血小板/ul）加入到800ul生理鹽水中，之后4℃下以4500×g的速率離心10分鐘（或4℃下10000×g的速率離心2分鐘）。離心后棄取上清。在血小板乳糜微粒中加入200ul雙蒸水，之后樣品就可以在-20℃以下的環(huán)境下凍存數(shù)周了。將凍融的樣品在室溫下以1000×g的速率離心2分鐘。整個(gè)實(shí)驗(yàn)需要使用20ul上清液（見?；?。如果您想測(cè)無血小板血漿（PFP）中五羥色胺的濃度，我們可以將PRP在4℃以4500×g的速率離心10分鐘（或4℃下10000×g的速率離心2分鐘）就可以獲得無血小板血漿（PFP）。游離五羥色胺的ELISA實(shí)驗(yàn)要使用50ul上清液（見酰化）。注意：PRP中五羥色胺的直接檢測(cè)實(shí)驗(yàn)表明：大約10%的PRP樣品可以檢測(cè)到不可預(yù)知的高濃度五羥色胺（結(jié)果用GX液相層析和流氏細(xì)胞術(shù)獲得）。為了避免這種差異性，我們建議您即檢測(cè)血小板中五羥色胺，也檢測(cè)無血小板血漿中的五羥色胺。無血小板血漿血小板微粒（從血漿中分離得到）避免熱源或太陽(yáng)直射，避免反復(fù)凍融，冷凍狀態(tài)下運(yùn)輸樣品。儲(chǔ)存≤-20℃≤-20℃≤-80℃穩(wěn)定性2周4周1年組織勻漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清使用組織勻漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清作樣品，一般無特殊注意事項(xiàng)注意：細(xì)胞培養(yǎng)基可能含有一定量的五羥色胺！儲(chǔ)存≤-20℃避免熱源或太陽(yáng)直射，避免反復(fù)凍融。穩(wěn)定性6個(gè)月6、試劑盒成分注意試劑盒有足夠做96份單孔檢測(cè)或48份雙孔檢測(cè)所需的試劑成分。數(shù)量標(biāo)記成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了羊抗兔抗血清。1×5mlANTISERUM組胺抗血清，藍(lán)色，即用，內(nèi)含：兔抗血清、Tris緩沖液和0.01%的NaN3。1×5mlBIOTIN五羥色胺生物素，黃色，即用，內(nèi)含0.1%的NaN3。1×0.2mlENZCONJCONC酶聯(lián)物，10倍濃縮，內(nèi)含堿性磷酸酶標(biāo)記的抗生物素抗體、Tris緩沖液、HCl和0.01%的NaN3。1×7×0.5mlCALA-G標(biāo)準(zhǔn)品A-G，0;0.08;0.24;0.73;2.2;6.6;19.8ng/ml,0;0.45;1.4;4.1;12.5;37.4;112.3nmol/l,即用，內(nèi)含?；奈辶u色胺、磷酸鹽緩沖液和0.1%的NaN3。1×2×0.5mlCONTROL1+2LYO質(zhì)控品1+2，凍干，內(nèi)含人血清和0.02%的NaN3。具體濃度及可允許范圍請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽。1×3mlACYLREAG?；噭﹥?nèi)含乙酸酐和丙酮，即用1×50mlASSAYBUFCONC檢測(cè)緩沖液，10倍濃縮，內(nèi)含磷酸緩沖液、BSA和1%的NaN3。1×50mlWASHBUFCONC洗滌液，20倍濃縮，內(nèi)含磷酸緩沖液、吐溫和0.1%的硫柳汞。1×9×PNPPSUBSPNPP底物片，密封于鋁鉑金屬袋內(nèi)，內(nèi)含對(duì)硝基苯酚磷酸鹽。1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液，即用，內(nèi)含二乙醇胺、水和0.05%的NaN3。1×15mlPNPPSTOPPNPP終止液，即用，內(nèi)含1M的NaOH和0.25M的EDTA。3×FOIL粘性金屬板7、實(shí)驗(yàn)所需器材但試劑盒不提供1）移液器，體積：20;25;50;100;1000ul2）玻璃試管（12×75mm）3）試管架4）振蕩器（500rpm）5）旋渦混合器6）水浴箱，37℃7）帶儲(chǔ)器的8道移液器8）洗滌瓶，自動(dòng)或半自動(dòng)洗板機(jī)9）離心機(jī)：≥1500×g10）可在405nm處讀數(shù)的酶標(biāo)儀（參考波長(zhǎng)：600-650nm）11）雙蒸水或去離子水12）吸水紙、取樣吸頭和計(jì)時(shí)器8、實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備說明供手動(dòng)和自動(dòng)操作參考用注意用于96孔檢測(cè)的試劑成分可分成3次用。下述體積是使用4條（32孔）時(shí)所需要的體積。如果客戶想將標(biāo)準(zhǔn)品從7支減為6支的話，我們可以省掉標(biāo)準(zhǔn)品G。則檢測(cè)范圍相應(yīng)的減少到155ug/l（血漿）或706ug/l（血清，尿液，組織勻漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清）。血清、尿液、組織勻漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清樣品可以選擇簡(jiǎn)短操作步驟進(jìn)行，只需溫育3.5個(gè)小時(shí)（但血漿樣品不能采用簡(jiǎn)短操作步驟進(jìn)行），以上樣品也可以選擇可選操作步驟進(jìn)行檢測(cè)（將樣品溫育一整夜），血漿樣品必須按照溫育一整夜進(jìn)行檢測(cè)。8.1凍干或濃縮成分的準(zhǔn)備稀釋/溶解成分加入稀釋劑比例備注儲(chǔ)存穩(wěn)定性15ml檢測(cè)緩沖液150ml雙蒸水1：10出現(xiàn)黃褐色并不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果2-8℃2周15ml洗滌液300ml雙蒸水1：202-8℃4周質(zhì)控品0.5ml雙蒸水靜置15min,混合時(shí)無泡沫≤-20℃有效期內(nèi)穩(wěn)定60ul酶聯(lián)物6ml稀釋的檢測(cè)緩沖液1:101臨時(shí)配置,只能使用一次18-25℃2小時(shí)3PNPP底物片8mlPNPP底物緩沖液臨時(shí)配置，只能使用一次18-25℃5小時(shí)8.2樣品的稀釋樣品五羥色胺濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的必須用檢測(cè)緩沖液進(jìn)行進(jìn)一步的稀釋。8.3樣品和質(zhì)控品的?；瘶悠稟：血清，尿液，血小板提取物，組織勻漿和質(zhì)控品樣品B：無血小板血漿注意請(qǐng)不要酰化標(biāo)準(zhǔn)品，標(biāo)準(zhǔn)品已經(jīng)?；恕悠窚?zhǔn)備可使血清、尿液、血小板乳糜微粒、組織勻漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清被稀釋107倍，而血漿樣品則被稀釋23.5倍。結(jié)果計(jì)算時(shí)必須將此稀釋因子考慮進(jìn)去。8.3.1樣品A：血清、尿液、血小板提取物、組織勻漿和質(zhì)控品1將質(zhì)控品和樣品A分別20ul加入到玻璃試管中。2在每一試管中加入100ul稀釋好的檢測(cè)緩沖液，旋渦混合。3在每一試管中加入25ul?；噭?（3%），加入后立即旋渦混合。4將試管蓋好，將試管放到37℃水浴箱內(nèi)溫育15分鐘。5在每一試管中加入2ml已稀釋好的檢測(cè)緩沖液，旋渦混合61500×g下離心10分鐘注意準(zhǔn)備好的樣品必須立即檢測(cè)。其上清可在18-25℃下穩(wěn)定存放1小時(shí)。8.3.2樣品B：無血小板血漿1將50ul樣品B加入到玻璃試管中。2在每一試管中加入100ul稀釋好的檢測(cè)緩沖液，旋渦混合。3在每一試管中加入25ul?；噭尤牒罅⒓葱郎u混合。4將試管蓋好，將試管放到37℃水浴箱內(nèi)溫育15分鐘。5在每一試管中加入1ml已稀釋好的檢測(cè)緩沖液，旋渦混合61500×g下離心10分鐘注意準(zhǔn)備好的樣品必須立即檢測(cè)。其上清可在18-25℃下穩(wěn)定存放1小時(shí)。9、實(shí)驗(yàn)步驟9.1簡(jiǎn)短操作步驟（僅供樣品A使用，不能應(yīng)用于血漿）1將標(biāo)準(zhǔn)品、?；玫馁|(zhì)控品和?；玫臉悠犯?0ul加入到相應(yīng)的微孔中。2在每一微孔中加入50ul五羥色胺生物素。3在每一微孔中加入50ul五羥色胺抗血清。4蓋板，室溫（18-25℃）下振蕩（500rpm）溫育90min。5移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250ul稀釋好的洗滌液洗板3次,吸水紙上拍干以除去殘余液體。6在每一微孔中加入150ul臨時(shí)準(zhǔn)備好的酶聯(lián)物。7蓋板，室溫（18-25℃）下振蕩（500rpm）溫育60min。8移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250ul稀釋好的洗滌液洗板3次,吸水紙上拍干以除去殘余液體。9如果有條件的話，可以用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液時(shí)，每孔間的時(shí)間間隔應(yīng)當(dāng)相同。使用主動(dòng)置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。10在每一微孔中加入200ul臨時(shí)配置好的PNPP底物液。11室溫（18-25℃）下振蕩（500rpm）溫育60min。12在每一微孔中加入50ulPNPP終止液以終止底物反應(yīng)，輕輕振板以使溶液混合均勻。13加終止液后60min內(nèi)405nm處讀取OD值。9.2可選操作步驟（溫育一整夜，樣品A和樣品B均適用）9.2.1**天1將標(biāo)準(zhǔn)品、?；玫馁|(zhì)控品和樣品分別50ul加入到相應(yīng)的微孔中。2在每一微孔中加入50ul五羥色胺生物素。3在每一微孔中加入50ul五羥色胺抗血清。4蓋板，輕輕振板，2-8℃下溫育16-20小時(shí)（一整夜）。9.2.2第二天1移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250ul稀釋好的洗滌液洗板3次，吸水紙上拍干以除去參與液體。2在每一微孔中加入150ul臨時(shí)配置好的酶聯(lián)物。3蓋板，室溫振蕩器上（500rpm）溫育60分鐘。4移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250ul稀釋好的洗滌液洗板3次，吸水紙上拍干以除去殘余液體。5如果有條件的話，可以用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液時(shí)，每孔間的時(shí)間間隔應(yīng)當(dāng)相同。使用主動(dòng)置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。6在每一微孔中加入200ul臨時(shí)配置好的PNPP底物液。7室溫振蕩器上（500rpm）溫育30分鐘。8在每一微孔中加入50ulPNPP終止液，振板以混合孔內(nèi)成分。9加終止液后60min內(nèi)405nm處讀取OD值。（參考波長(zhǎng)：600-650nm）10、結(jié)果計(jì)算將所有標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品的OD值減去空白孔的OD值。在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上，以標(biāo)準(zhǔn)品的OD值（Y軸，線性）對(duì)其濃度（X軸，對(duì)數(shù)）繪制出一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，或采用自動(dòng)計(jì)算的方法繪制出一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。用Cubicspline、4參數(shù)或雙對(duì)數(shù)可以得到較好的曲線圖。在計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，應(yīng)當(dāng)應(yīng)用到每一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)值（兩個(gè)數(shù)值中，明顯逸出的數(shù)值應(yīng)當(dāng)被忽略掉，采用更加合理的一個(gè)數(shù)值用）。樣品的濃度可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線上定量得到。由于樣品被稀釋了，所以Z終樣品結(jié)果必須乘以相應(yīng)的稀釋因子，單位為ng/ml。血清、尿液、血小板、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、質(zhì)控品：×107無血小板血漿：×23.5進(jìn)行了進(jìn)一步稀釋的樣品結(jié)果應(yīng)當(dāng)乘以相應(yīng)的稀釋因子。實(shí)驗(yàn)必須滿足如下標(biāo)準(zhǔn)才符合要求：50%OD/Odmax（）：0.60-1.00ng/ml（平均0.8ng/ml）△OD標(biāo)準(zhǔn)品A-標(biāo)準(zhǔn)品G≥0.80OD轉(zhuǎn)換系數(shù)：五羥色胺（ng/ml）×5.67=nmol/l如果樣品中五羥色胺濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品，則此樣品必須按照實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備說明進(jìn)行稀釋并重新檢測(cè)。11、期望值實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能當(dāng)作任何ZL結(jié)果的**原因，疾病的判斷還應(yīng)當(dāng)與其它臨床觀察和診斷檢測(cè)相結(jié)合。以下結(jié)果為正常人群的正常值（97.5%）：樣品數(shù)量單位平均值建議每個(gè)實(shí)驗(yàn)室讀確定自己的正常值范圍范圍血清99ng/ml88.630-200無血小板血漿35ng/ml3.71.8-7.5血小板35ng/109血小板490217-86124小時(shí)尿液49μg/d83.1≤200本譯文僅供參考，詳情請(qǐng)以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理：深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口太子路18號(hào)海景廣場(chǎng)11C研發(fā)ZX：深圳市蛇口沿山路10號(hào)6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費(fèi)電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細(xì)]

  2018-11-14 10:00

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• 人β干擾素（IFN-β）ELISA Kit使用說明書

  人β干擾素（IFN-β）ELISA Kit使用說明書[詳細(xì)]

  2015-03-23 00:00

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• 褪黑激素ELISA Kit使用說明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4褪黑激素ELISAELISAKit使用說明書（德國(guó)IBL：RE54021）1、應(yīng)用范圍此試劑盒可用于人血清和血漿中褪黑激素的體外定量檢測(cè)。2、前言說明松果體因其在光周期現(xiàn)象中的重要作用，已經(jīng)被人們認(rèn)為是神經(jīng)內(nèi)分泌的傳感器。松果體主要分泌的激素是：N-乙酰-5-甲氧色胺和褪黑激素，褪黑激素一般是由色氨酸合成而來的。血漿褪黑激素的濃度可在夜間達(dá)到Z高。褪黑激素特有的波動(dòng)變化可以反映出一些關(guān)于時(shí)間變化的信息，如夜晚的長(zhǎng)短。褪黑激素的分泌會(huì)受到神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。交感神經(jīng)系統(tǒng)在調(diào)節(jié)褪黑激素分泌方面發(fā)揮有重要作用，它主要是通過釋放去甲腎上腺素來調(diào)節(jié)的。據(jù)報(bào)道，褪黑激素分泌方式和水平的變化與人的一些生理狀態(tài)一致，如：失眠、時(shí)差感、情緒低落、壓力大、精神分裂癥、丘腦下部性閉經(jīng)、妊娠、神經(jīng)想食欲缺乏、某些癌癥、免疫系統(tǒng)紊亂和青春期性成熟的影響。大多數(shù)循環(huán)褪黑激素都可在肝內(nèi)代謝成6-羥基褪黑激素，之后變成6-硫酸褪黑激素而隨尿液排除。尿液中6-羥基褪黑激素硫酸鹽的濃度與血液中褪黑激素的總水平有很好的相關(guān)性。3、實(shí)驗(yàn)原理此ELISA試劑盒利用的是競(jìng)爭(zhēng)法的原理。生物素和非生物素標(biāo)記的抗原競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合包被板上有限的抗體結(jié)合位點(diǎn)。生物素抗原結(jié)合到抗體上的量與樣品中抗原的量成反比。系統(tǒng)達(dá)到平衡后，洗板除去游離的生物素抗原，結(jié)合到抗體上的生物素抗原可以用抗生物素堿性磷酸酶標(biāo)記物和對(duì)硝基苯磷酸底物檢測(cè)出來。用已知的標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)據(jù)做一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，將未知樣品的酶活性與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較就可以定量出未知樣品的量。4、儲(chǔ)存與穩(wěn)定性試劑盒必須在2-8℃的環(huán)境下運(yùn)輸和儲(chǔ)存，避免太陽(yáng)直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述,如果將包被板密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下時(shí),試劑在有效期內(nèi)穩(wěn)定。用甲醇洗提后的提取柱可用于其它樣品的提取或儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下。提取柱可重復(fù)使用4次。5、樣品的采集與儲(chǔ)存血清，血漿（EDTA，肝素）按照靜脈穿刺的常規(guī)注意事項(xiàng)采集樣品，血液樣品自采集到實(shí)驗(yàn)時(shí)都必須保證其化學(xué)完整性。不要使用明顯溶血、黃疸和脂血樣品?；鞚岬臉悠窇?yīng)當(dāng)在實(shí)驗(yàn)開始前離心以除去所有的顆粒性物質(zhì)。儲(chǔ)存2-8℃≤-20℃≤-70℃避免太陽(yáng)直射，避免反復(fù)凍融。穩(wěn)定性24小時(shí)3個(gè)月1年6、試劑盒成分?jǐn)?shù)量標(biāo)記成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，多克?。?。3×2mlBIOTINLYO褪黑激素生物素，凍干，內(nèi)含穩(wěn)定劑。3×2mlANTISERUMLYO褪黑激素硫酸鹽抗血清，凍干粉，內(nèi)含抗血清（兔，多克?。┖头€(wěn)定劑。1×250ulENZCONJCONC酶聯(lián)物，80倍濃縮，內(nèi)含堿性磷酸酶標(biāo)記的抗生物素抗體（羊）、Tris緩沖液和穩(wěn)定劑。1×6×2mlCALA-FLYO標(biāo)準(zhǔn)品A-F，凍干粉，內(nèi)含穩(wěn)定劑，提取濃度請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽或QC質(zhì)控品。1×2×2mlCONTROL1+2LYO質(zhì)控品1+2，凍干粉，內(nèi)含穩(wěn)定劑，濃度/可接受范圍請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽。1×50mlASSAYBUFCONC檢測(cè)緩沖液，10倍濃縮，內(nèi)含磷酸緩沖液、吐溫和穩(wěn)定劑。1×9×PNPPSUBSPNPP底物片，密封于鋁鉑金屬袋中，內(nèi)含對(duì)硝基苯硫酸鹽。1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液，即用，內(nèi)含二乙醇氨和水。1×15mlPNPPSTOPPNPP終止液，即用，內(nèi)含1M的NaOH和0.25M的EDTA。2×10EXTRCOL提取柱，即用，C18RP，1m3/100mg。另需提取柱可從IBL定夠（編號(hào)：KEME761）3×FOIL粘性金屬板7、實(shí)驗(yàn)所需器材但試劑盒不提供1）移液器，體積：50;500ul2）試管（12×75mm）3）軌道振蕩器（400-600rpm）4）旋渦混合器5）帶儲(chǔ)器的8道移液器6）洗滌瓶，自動(dòng)或半自動(dòng)洗板機(jī)7）離心機(jī)（冷凍離心機(jī)更適宜）：200-500×g，也可選用多頭抽真空裝置（例如：Mallinekrodt-Baker或Waters）。8）甲醇（HPLC級(jí)）9）蒸發(fā)離心機(jī)10）可在405nm處讀數(shù)的酶標(biāo)儀（參考波長(zhǎng)600-650nm）11）蒸餾水或去離子水12）吸水紙、取樣吸頭和計(jì)時(shí)器8、實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備說明注意用于96人份檢測(cè)色試劑盒成分可分成3次進(jìn)行。下列所述體積為檢測(cè)32人份時(shí)所需要的量。8.1凍干或濃縮成分的準(zhǔn)備稀釋/溶解成分稀釋劑比例備注儲(chǔ)存穩(wěn)定性15ml檢測(cè)緩沖液150ml雙蒸水1：102-8℃4周標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品2.0ml雙蒸水靜置15min，混合時(shí)避免氣泡≤-20℃直至有效期褪黑激素生物素2.0ml蒸餾水靜置15min，混合時(shí)避免氣泡臨時(shí)配置,只能使用一次褪黑激素抗血清2.0ml蒸餾水靜置15min，混合時(shí)避免氣泡70ul酶聯(lián)物5.6ml已稀釋的檢測(cè)緩沖液1:813PNPP底物片8mlPNPP底物緩沖液10ml未稀釋甲醇100ml蒸餾水10%（v/v）如果溶液的需要量比較大,應(yīng)該將試管內(nèi)的溶液混合.避免反復(fù)凍融。8.2樣品的稀釋如果懷疑樣品中的褪黑激素濃度比Z高標(biāo)準(zhǔn)品的高，必須將樣品在提取步驟前用檢測(cè)緩沖液進(jìn)行進(jìn)一步的稀釋。8.3樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的提?。ㄌ崛≈┌凑沾瞬襟E進(jìn)行提取，提取量大約為90-1**%。為了避免柱子堵塞，提取樣品前將樣品過濾或離心一下。注意每份樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品都必須提取，提取必須提前進(jìn)行。干燥的提取物（甲醇蒸發(fā)后）可在2-8℃或-20℃下儲(chǔ)存24個(gè)小時(shí)。用甲醇洗提后，提取柱就可以用于下一份樣品的提取或是存放到2-8℃的環(huán)境下。提取柱可以反復(fù)使用4次。如果是重復(fù)使用，在再次從A.1開始（柱的調(diào)制）。A、標(biāo)準(zhǔn)版本：離心與蒸發(fā)離心步驟1.柱的調(diào)制1將提取柱放到聚苯乙烯或玻璃試管中（12×75mm）。2在提取柱中加入2×1ml的甲醇（未稀釋的），200g離心1min使溶劑通過提取柱，棄取洗出液。3向提取柱中加入2×1ml的蒸餾水，200g離心1min使溶劑通過提取柱，棄取洗出液。4為了避免柱子變干，請(qǐng)立即提取樣品。2.樣品提取5將提取柱放到相應(yīng)的標(biāo)記聚苯乙烯或玻璃試管中（12×75mm）。6向提取柱中加入0.5ml標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品，200g離心1min使溶劑通過提取柱，棄取洗出液。3、洗滌7向提取柱中加入2×1ml的10%甲醇（蒸餾水稀釋），500g離心1min使溶劑通過提取柱，棄取洗出液。4、提取物的洗脫8將提取柱放到新的標(biāo)記聚苯乙烯或玻璃試管中（12×75mm）9向提取柱中加入1ml未稀釋的甲醇，200g離心1min使溶劑通過提取柱。10將提取柱從試管中移出，避免液滴還停留在柱子中。將柱子用于下一份樣品的提取或存放于2-8℃的環(huán)境下。提取柱可重復(fù)使用四次。5.提取物的蒸發(fā)和重新配置11用蒸發(fā)離心機(jī)將甲醇蒸發(fā)掉。12用0.15ml的蒸餾水重新稀釋配置樣品13旋渦混和1分鐘，并立即檢測(cè)樣品。B、選擇性版本：用多頭抽真空裝置代替離心機(jī)提取步驟仍然按照A1-5進(jìn)行，柱子不變。用真空和≤5ml/min的流速使溶劑通過柱子。樣品和提取物用≤2ml/min的流速。用蒸發(fā)離心機(jī)或氮?dú)庹舭l(fā)干燥溶劑。9、實(shí)驗(yàn)步驟1將提取好的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品分別50ul加入到相應(yīng)的微孔中。2在每一微孔中加入50ul褪黑激素生物素。3在每一微孔內(nèi)加入50ul褪黑激素抗血清。4蓋板，輕輕震板，2-8℃下溫育14-20小時(shí)。5移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250ul稀釋好的檢測(cè)緩沖液洗板3次，吸水紙上拍干以除出殘余液體。6在每一微孔中加入150ul臨時(shí)配置好的酶聯(lián)物。7蓋板，室溫（18-25℃）軌道振蕩器上（500rpm）溫育120min。8大約在溫育結(jié)束10分鐘前準(zhǔn)備好PNPP底物液。9移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250ul稀釋好的檢測(cè)緩沖液洗板3次，吸水紙上拍干以除出殘余液體。10如果有8道移液器，請(qǐng)用8道移液器加底物液和終止液，加底物液和終止液的時(shí)間間隔應(yīng)當(dāng)相同。使用主動(dòng)置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。11在每一微孔中加入200ul臨時(shí)配置好的PNPP底物液。12室溫（18-25℃）軌道振蕩器上（500rpm）溫育20-40min。13在每一微孔中加入50ulPNPP終止液，輕輕震板以使溶液混合均勻。14加終止液后60min內(nèi)在405nm處讀取OD值。（參考波長(zhǎng)：600-650nm）10、結(jié)果計(jì)算在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上或自動(dòng)計(jì)算的方法，以標(biāo)準(zhǔn)品的OD值（Y軸，線性）對(duì)其濃度（X軸，對(duì)數(shù)）做一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。使用三次回歸、四參數(shù)或雙對(duì)數(shù)曲線方程可以得到更好的標(biāo)準(zhǔn)曲線。在推算標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，應(yīng)當(dāng)充分利用好每一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)值（明顯逸出的數(shù)值應(yīng)當(dāng)被忽略，再使用更加合理的數(shù)值代替它）。樣品的濃度可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線上直接讀取。從坐標(biāo)紙上讀取結(jié)果時(shí)應(yīng)當(dāng)把起始的稀釋倍數(shù)考慮進(jìn)去。將稀釋了的樣品結(jié)果乘以稀釋因子即可得到其相應(yīng)的結(jié)果。樣品中抗體濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的樣品，應(yīng)當(dāng)按實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備說明所述的方法進(jìn)行稀釋，并重新檢測(cè)。轉(zhuǎn)換系數(shù)：褪黑激素（pg/ml）×4.30=pmol/l典型標(biāo)準(zhǔn)曲線（例子：不能用來定量）標(biāo)準(zhǔn)品褪黑激素（pg/ml）平均OD值OD/ODmax（%）A0.01.517100B3.01.38391.1C101.21480.1D300.86757.1E1000.43428.6F3000.26017.111、期望值實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能當(dāng)作確定ZL結(jié)果的**因素，疾病的判斷還應(yīng)當(dāng)與其它臨床觀察和診斷檢測(cè)相結(jié)合。對(duì)明顯健康的一組人群進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，人體內(nèi)的褪黑激素水平有著明顯的生理周期變化，褪黑激素白天的水平很低，而晚上的水平則很高，而且個(gè)體之間的差異也很大。此外，褪黑激素的水平也與年齡有關(guān)系，其Z高濃度是在嬰兒（3歲）樣品中發(fā)現(xiàn)的。對(duì)6個(gè)明顯健康獻(xiàn)血者的褪黑激素生理周期進(jìn)行研究。褪黑激素大概在白天下午四點(diǎn)Zdi，其平均值是4.6pg/ml；早晨4點(diǎn)達(dá)到**，平均值為77.5pg/ml。健康個(gè)體之間的褪黑激素Z高值差異很大，建議每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都確定自己實(shí)驗(yàn)室的正常值范圍。本譯文僅供參考，詳情請(qǐng)以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理：深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口太子路18號(hào)海景廣場(chǎng)11C研發(fā)ZX：深圳市蛇口沿山路10號(hào)6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費(fèi)電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細(xì)]

  2018-11-14 10:00

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• 人甲氧基腎上腺素（MEPI）ELISA試劑盒使用說明書

  本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測(cè)定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中人甲氧基腎上腺素（MEPI）的含量。實(shí)驗(yàn)原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人甲氧基腎上腺素（MEPI）水平。用純化的人甲氧基腎上腺素（MEPI）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入甲氧基腎上腺素（MEPI），再與HRP標(biāo)記的甲氧基腎上腺素（MEPI）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的甲氧基腎上腺素（MEPI）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人甲氧基腎上腺素（MEPI）含量。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品：135pg/mL0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為90pg/mL，60pg/mL，30pg/mL，15pg/mL，7.5pg/mL）。加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng)：試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物請(qǐng)避光保存。嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。計(jì)算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%檢測(cè)范圍：3.5pg/mL-120pg/mL保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個(gè)月[詳細(xì)]

  2018-11-07 14:16

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• 大鼠β2腎上腺素受體（β2-AR）ELISA試劑盒使用說明書

  大鼠β2腎上腺素受體(β2-AR)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。實(shí)驗(yàn)原理大鼠β2腎上腺素受體(β2-AR)ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠β2腎上腺素受體(β2-AR)水平。用純化的大鼠β2腎上腺素受體(β2-AR)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入β2腎上腺素受體(β2-AR)，再與HRP標(biāo)記的β2腎上腺素受體(β2-AR)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的β2腎上腺素受體(β2-AR)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠β2腎上腺素受體(β2-AR)濃度。大鼠β2腎上腺素受體(β2-AR)ELISA試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品（160pg/ml）0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。大鼠β2腎上腺素受體(β2-AR)ELISA試劑盒操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。80pg/ml5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液40pg/ml4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20pg/ml3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10pg/ml2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5pg/ml1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50l，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40l，然后再加待測(cè)樣品10l（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50l，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50l，再加入顯色劑B50l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.10.終止：每孔加終止液50l，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。大鼠β2腎上腺素受體(β2-AR)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請(qǐng)避光保存。7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。大鼠β2腎上腺素受體(β2-AR)ELISA試劑盒保存條件及有效期1．試劑盒保存：2-8℃。2．有效期：6個(gè)月[詳細(xì)]

  2018-11-22 10:00

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• 小鼠腎上腺素（EPI）ELISA試劑盒說明書

  小鼠腎上腺素（EPI）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠EPI（Epinephrine,Adrenalinum）單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的EPI與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗小鼠EPI，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液，在450nm處測(cè)OD值，EPI濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中EPI濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：1280ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成2560ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入2560ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測(cè)程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品256、128、64、32、16、8、4、0ng/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)EPI含量。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的EPI檢測(cè)濃度小于2ng/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的小鼠EPI。不與小鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:00

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• 大鼠腎上腺素（EPI）ELISA試劑盒說明書

  電話：021-6533363955229872網(wǎng)址：http://www.westang.com大鼠腎上腺素（EPI）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠EPI（Epinephrine,Adrenalinum）單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的EPI與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗大鼠EPI，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液硫酸，在450nm處測(cè)OD值，EPI濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中EPI濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：2560ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成2560ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入2560ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測(cè)程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品256、128、64、32、16、8、4、0ng/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)EPI含量。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的EPI檢測(cè)濃度小于2ng/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的大鼠EPI。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:00

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• 人腎上腺素（EPI）ELISA試劑盒說明書

  人腎上腺素（EPI）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人EPI（Epinephrine,Adrenalinum）單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的EPI與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人EPI，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液，在450nm處測(cè)OD值，EPI濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中EPI濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：1280ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成2560ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入2560ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測(cè)程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品256、128、64、32、16、8、4、0ng/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)EPI含量。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的EPI檢測(cè)濃度小于2ng/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人EPI。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:01

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• 人腎上腺素（Adrenalin）ELISA試劑盒說明書

  人腎上腺素（Adrenalin）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人Adrenalin單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的Adrenalin與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人Adrenalin，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液，在450nm處測(cè)OD值，Adrenalin濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中Adrenalin濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：6ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清1：5倍稀釋。血清、血漿1：20倍稀釋。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.3ml蒸餾水混勻，配成20ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，每管加入標(biāo)本稀釋液300ul。在**管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測(cè)程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0.156、0ng/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)Adrenalin含量。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的Adrenalin檢測(cè)濃度小于0.1ng/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人Adrenalin。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:01

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• 人腎上腺素（AD）ELISA試劑盒說明書

  人腎上腺素（AD）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和唾液等其它生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人AD單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的AD與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人AD，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液，在450nm處測(cè)OD值，AD濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中AD濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：40ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、唾液、組織勻漿等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。血清、血漿作1：2稀釋（取100ul，加標(biāo)本稀釋液100ul,稀釋2倍）。細(xì)胞培養(yǎng)上清可以不做稀釋直接檢測(cè)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成40ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測(cè)程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)AD含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的AD檢測(cè)濃度小于31pg/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人AD。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:01

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• 豚鼠腎上腺素（EPI）elisa試劑盒說明書

  豚鼠腎上腺素(EPI)elisa試劑盒使用目的：本試劑盒用于測(cè)定豚鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中腎上腺素（EPI）含量。豚鼠腎上腺素(EPI)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中豚鼠腎上腺素（EPI）水平。用純化的豚鼠腎上腺素（EPI）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入腎上腺素（EPI），再與HRP標(biāo)記的腎上腺素（EPI）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腎上腺素（EPI）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中豚鼠腎上腺素（EPI）濃度。豚鼠腎上腺素(EPI)elisa試劑盒組成：130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品（96pg/ml）0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求：1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。豚鼠腎上腺素(EPI)elisa試劑盒操作步驟：1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。48pg/ml5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液24pg/ml4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液12pg/ml3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液6pg/ml2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液3.0pg/ml1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。豚鼠腎上腺素(EPI)elisa試劑盒計(jì)算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)：1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請(qǐng)避光保存。7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。豚鼠腎上腺素(EPI)elisa試劑盒保存條件及有效期：1．試劑盒保存：2-8℃。2．有效期：6個(gè)月[詳細(xì)]

  2019-01-02 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 價(jià)格人β干擾素（IFN-β）ELISA Kit使用說明書

  價(jià)格人β干擾素（IFN-β）ELISA Kit使用說明書[詳細(xì)]

  2015-03-20 00:00

  其它

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• 褪黑激素硫酸鹽ELISA Kit使用說明書

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4褪黑激素硫酸鹽ELISAKit使用說明書（德國(guó)IBL：RE54031）1、應(yīng)用范圍此試劑盒可用于人尿液中褪黑激素硫酸鹽（又叫6-羥基褪黑激素硫酸鹽和6-硫酸褪黑激素）的體外定量檢測(cè)。2、前言說明松果體因其在光周期現(xiàn)象中的重要作用，已經(jīng)被人們認(rèn)為是神經(jīng)內(nèi)分泌的傳感器。松果體主要分泌的激素是：N-乙酰-5-甲氧色胺和褪黑激素，褪黑激素一般是由色氨酸合成而來的。血漿褪黑激素的濃度可在夜間達(dá)到**。褪黑激素特有的波動(dòng)變化可以反映出一些關(guān)于時(shí)間變化的信息，如夜晚的長(zhǎng)短。褪黑激素的分泌會(huì)受到神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。交感神經(jīng)系統(tǒng)在調(diào)節(jié)褪黑激素分泌方面發(fā)揮有重要作用，它主要是通過釋放去甲腎上腺素來調(diào)節(jié)的。據(jù)報(bào)道，褪黑激素分泌方式和水平的變化與人的一些生理狀態(tài)一致，如：失眠、時(shí)差感、情緒低落、壓力大、精神分裂癥、丘腦下部性閉經(jīng)、妊娠、神經(jīng)想食欲缺乏、某些癌癥、免疫系統(tǒng)紊亂和青春期性成熟的影響。大多數(shù)循環(huán)褪黑激素都可在肝內(nèi)代謝成6-羥基褪黑激素，之后變成6-硫酸褪黑激素而隨尿液排除。尿液中6-羥基褪黑激素硫酸鹽的濃度與血液中褪黑激素的總水平有很好的相關(guān)性。3、實(shí)驗(yàn)原理此ELISA試劑盒利用的是競(jìng)爭(zhēng)法的原理。樣品中未知量的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合到包被在微孔中的抗體結(jié)合位點(diǎn)上。溫育后洗板以終止競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與樣品中抗原的量成反比。樣品的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線上直接獲取。4、儲(chǔ)存與穩(wěn)定性試劑盒必須在2-8℃的環(huán)境下運(yùn)輸和儲(chǔ)存，避免太陽(yáng)直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。如果將包被板密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下時(shí)，試劑在有效期內(nèi)穩(wěn)定。5、樣品的采集與儲(chǔ)存尿液實(shí)驗(yàn)必須使用自然產(chǎn)生的尿液，也可使用24小時(shí)內(nèi)產(chǎn)生的尿液。收集病人24小時(shí)內(nèi)產(chǎn)生的尿液，將它加入到含10-15ml6NHCl防腐劑的容器中。為了計(jì)算結(jié)果，請(qǐng)確定尿液的總體積。實(shí)驗(yàn)開始前請(qǐng)先將樣品離心。儲(chǔ)存2-8℃2-8℃避免太陽(yáng)直射，避免反復(fù)凍融穩(wěn)定性4天15年6、試劑盒成分?jǐn)?shù)量標(biāo)記成分1×12×8MTP包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，多克?。?×5mlANTISERUM褪黑激素硫酸鹽抗血清，即用，內(nèi)含：兔抗血清、Tris緩沖液和0.01%的硫柳汞1×0.2mlENZCONJCONC酶聯(lián)物，40倍濃縮，內(nèi)含過氧酶標(biāo)記的褪黑激素硫酸鹽、Tris緩沖液和1%的硫柳汞。1×7×0.1mlCALA-G標(biāo)準(zhǔn)品A-G，0;1.7;5.2;15.6;46.7;140;420ng/mL0;5.2;15.9;47.6;142;427;1281nmol/L。即用，內(nèi)含褪黑激素硫酸鹽、Tris緩沖液和0.01%的硫柳汞。1×2×0.1mlCONTROL1+2質(zhì)控品1+2，即用，內(nèi)含0.02%的；硫柳汞。具體濃度及可允許范圍請(qǐng)見試劑瓶標(biāo)簽。1×60mlASSAYBUFCONC檢測(cè)緩沖液，紅色，即用，內(nèi)含Tris緩沖液、BSA和0.01%的硫柳汞。1×50mlWASHBUFCONC洗滌液，20倍濃縮，內(nèi)含磷酸緩沖液、吐溫和0.1%的硫柳汞。1×0.9mlTMBSUBSCONCTMB底物液，31倍濃縮，內(nèi)含TMB、緩沖液和穩(wěn)定劑。1×27mlTMB緩沖液TMB底物緩沖液，儲(chǔ)存時(shí)避免太陽(yáng)直射，即用，內(nèi)含H2O2、檸檬酸鹽緩沖液和穩(wěn)定劑。1×12mlTMBSTOPTMB終止液，即用，1M的H2SO4。3×FOIL粘性金屬板7、實(shí)驗(yàn)所需器材但試劑盒不提供1）移液器，體積：10;50;100;1000ul2）試管（12×75mm）3）試管架4）振蕩器（500rpm）5）旋渦混合器（500rpm）6）帶儲(chǔ)器的8道移液器7）洗滌瓶，自動(dòng)或半自動(dòng)洗板機(jī)8）酶標(biāo)儀（參考波長(zhǎng)：600-650nm）9）蒸餾水或去離子水10）吸水紙、取樣吸頭和計(jì)時(shí)器8、實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備說明8.1凍干或濃縮成分的準(zhǔn)備稀釋/溶解成分稀釋劑比例備注儲(chǔ)存穩(wěn)定性15ml洗滌液300ml雙蒸水1：2018-25℃將晶體溶解掉2-8℃4周50ul酶聯(lián)物2ml檢測(cè)緩沖液1:41臨時(shí)配置,只能使用一次18-25℃30min300ulTMB底物液9mlTMB底物緩沖液1：31臨時(shí)配置,只能使用一次18-25℃10min8.2標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和病人尿液樣品的稀釋1將標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和病人尿液樣品分別10ul加入到聚苯乙烯或聚丙烯或玻璃試管中，避免太陽(yáng)直射。2在每一試管中加入500ul檢測(cè)緩沖液，旋渦混合。褪黑激素硫酸鹽濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品濃度的樣品必須用檢測(cè)緩沖液進(jìn)行進(jìn)一步的稀釋。9、實(shí)驗(yàn)步驟1將已稀釋好的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和病人樣品分別50ul加入到相應(yīng)的微孔中。2在每一微孔中加入50ul臨時(shí)配置好的酶聯(lián)物。3在每一微孔內(nèi)加入50ul褪黑激素硫酸鹽抗血清。4蓋板，室溫（18-25℃）包被板振蕩器（500rpm）溫育2小時(shí)。5在溫育快要結(jié)束的10分鐘前，請(qǐng)將TMB底物液準(zhǔn)備好。6移去粘性金屬板，棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用250ul稀釋好的洗滌液洗板4次，吸水紙上拍干以除出殘余液體。7如果可以的話，請(qǐng)用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時(shí)間間隔應(yīng)當(dāng)相同，使用8在每一微孔中加入200ulTMB底物液。9室溫（18-25℃）包被板振蕩器（500rpm）溫育30min。10在每一微孔中加入100ulTMB終止液，輕請(qǐng)振板以混合溶液。11加終止液后60min內(nèi)在450nm處讀取OD值。10、期望值實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能當(dāng)作確定ZL結(jié)果的**因素，疾病的判斷還應(yīng)當(dāng)與其它臨床觀察和診斷檢測(cè)相結(jié)合。以下為明顯正常人群褪黑激素硫酸鹽的正常值：年齡數(shù)目褪黑激素硫酸鹽24小時(shí)尿液（ug）夜間尿液（ug/h）平均值90%的比例平均值90%的比例20-352636.815.6-58.12.80.9-5.636-501729.69.9-52.92.10.6-3.651-651620.412.3-32.81.50.9-2.5＞1615.87.5-32.71.00.3-2.3建議每個(gè)實(shí)驗(yàn)室讀確定自己的正常值范圍本譯文僅供參考，詳情請(qǐng)以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理：深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司辦公地址：深圳市蛇口太子路18號(hào)海景廣場(chǎng)11C研發(fā)ZX：深圳市蛇口沿山路10號(hào)6層電話：0755-26814430,26680196郵政編碼：518067免費(fèi)電話：800-8306296傳真：0755-26814431[詳細(xì)]

  2018-11-14 10:00

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