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人胰島素(Ins)ELISA試劑盒說明
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本文由 上海恒遠ELISA試劑盒供應(yīng)商 整理匯編
2018-11-16 10:02 444閱讀次數(shù)
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本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T1mIU/L-40mIU/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中胰島素(Ins)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人胰島素(Ins)水平。用純化的人胰島素(Ins)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰島素(Ins),再與HRP標(biāo)記的人胰島素(Ins)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人胰島素(Ins)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人胰島素(Ins)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(80mIU/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。40mIU/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20mIU/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10mIU/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5mIU/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.5mIU/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。8.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。計算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月
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人胰島素(Ins)ELISA試劑盒說明
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T1mIU/L-40mIU/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中胰島素(Ins)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人胰島素(Ins)水平。用純化的人胰島素(Ins)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰島素(Ins),再與HRP標(biāo)記的人胰島素(Ins)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人胰島素(Ins)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人胰島素(Ins)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(80mIU/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。40mIU/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20mIU/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10mIU/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5mIU/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.5mIU/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。8.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。計算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊
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人胰島素(INS)ELISA試劑盒
- 人胰島素(INS)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-28 00:30
報價單
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人胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒說明書
- 人胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中胰島素(INS)的活性。上海喬羽生物科技有限公司ELISA試劑盒說明書關(guān)鍵詞:ELISA試劑盒說明書、酶聯(lián)免疫試劑盒、分析檢測試劑盒實驗原理:人胰島素(INS)ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人胰島素(INS)水平。用純化的人胰島素(INS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰島素(INS),再與HRP標(biāo)記的羊抗人抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰島素(INS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人胰島素(INS)濃度。[詳細]
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2018-11-09 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人胰島素(Ins)ELISA試劑盒使用說明書
- 使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中胰島素(Ins)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人胰島素(Ins)水平。用純化的人胰島素(Ins)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰島素(Ins),再與HRP標(biāo)記的人胰島素(Ins)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人胰島素(Ins)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人胰島素(Ins)濃度。[詳細]
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2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊
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人胰島素(INS)檢測試劑盒
- 人胰島素(INS)檢測試劑盒[詳細]
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2015-03-16 00:00
期刊論文
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豬胰島素(INS)ELISA試劑盒
- 豬胰島素(INS)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-12 00:00
報價單
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豬胰島素(INS)ELISA試劑盒
- 豬胰島素(INS)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-28 18:27
其它
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小鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒
- 小鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-28 00:27
操作手冊
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大鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒
- 大鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-28 01:11
安裝說明
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小鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒說明書
- l本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中小鼠胰島素(INS)的含量。l有效期:6個月l保存條件:2-8℃實驗原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被小鼠胰島素(INS)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素(INS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。[詳細]
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2024-09-28 00:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠胰島素(INS)定量檢測試劑盒(ELISA)
- 本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。大鼠胰島素(INS)定量檢測試劑盒(ELISA)使用說明書【試劑盒名稱】大鼠胰島素(INS)定量檢測試劑盒(ELISA)【試劑盒用途】定量檢測大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中胰島素(INS)的含量?!緳z測原理】本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本加入到預(yù)先包被大鼠胰島素(INS)單克隆抗體透明酶標(biāo)包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分,再加入酶標(biāo)工作液,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中大鼠胰島素(INS)濃度呈正相關(guān),450nm波長下測定OD值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的OD值,計算樣本中大鼠胰島素(INS)含量?!驹噭┖薪M成】1酶標(biāo)包被板12孔×8條7顯色劑A液6mL2標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL×6管8顯色劑B液6mL320倍濃縮洗滌液25mL9終止液6mL4樣本稀釋液6mL10說明書1份5特殊稀釋液6mL11封板膜2張6酶標(biāo)試劑6mL12密封袋1個備注:標(biāo)準(zhǔn)品(1號→6號)濃度依次為:16、8、4、2、1、0.5mU/L?!拘枰刺峁┑脑噭┖推鞑摹?、37℃恒溫箱2、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀3、精密移液器及一次性吸頭4、蒸餾水5、一次性試管6、吸水紙【操作步驟】1、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL;待測樣本孔中先2加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。6、加酶標(biāo)工作液:每孔加入酶標(biāo)工作液50μL,空白對照孔不加。7、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。8、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。9、顯色:每孔先加入顯色劑A液50μL,再加入顯色劑B液50μL,平板混勻器混勻30s(或用手輕輕震蕩混勻30s),37℃避光顯色15min。10、終止:取出酶標(biāo)板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11、測定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。12、計算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值,計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。Z終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。【樣本要求】1、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的YZ劑。2、標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能立即試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3、樣本應(yīng)充分離心,不得有溶血及顆粒?!咀⒁馐马棥?、實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。2、酶標(biāo)包被板開封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計算結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。5、本試劑盒定量范圍為0.5-16mU/L,超過此范圍,為標(biāo)準(zhǔn)曲線延伸計算所得,不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準(zhǔn)確結(jié)果(0.5-16mU/L范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本Z終濃度。6、若顯色過淺,可適當(dāng)延長底物溫育時間。7、為避免交叉污染,標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復(fù)使用封板膜。8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號的試劑不得混用。9、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。3【操作程序總結(jié)】準(zhǔn)備試劑,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,37℃反應(yīng)30分鐘洗板4次,加入酶標(biāo)試劑,37℃反應(yīng)30分鐘洗板4次,加入顯色液A、B,37℃顯色15分鐘加入終止液15分鐘之內(nèi)讀OD值計算【檢測范圍】0.5mU/L-16mU/L【規(guī)格】96人份/盒【貯藏】2-8℃,避光防潮保存?!居行凇?個月[詳細]
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2018-09-03 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠(Rat)胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒
- 檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被胰島素(INS)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰島素(INS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。[詳細]
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2018-12-02 10:00
產(chǎn)品樣冊
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豬胰島素(INS)定量檢測試劑盒(ELISA)
- 上海金穗生物科技有限公司是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品研發(fā)和銷售的綜合性生命科學(xué)公司,公司以超前的市場觀念、良好的產(chǎn)品形象以及雄厚的技術(shù)實力取得了多家國內(nèi)外知名公司的代理權(quán),目前擁有國內(nèi)外各產(chǎn)品,坐擁上海,輻射全ZG。面向各地科研院所、高等院校、衛(wèi)生檢驗檢疫部門、工農(nóng)業(yè)部門、環(huán)境保護部門相關(guān)實驗室和制藥、食品、飲料、化工、畜牧、水產(chǎn)等企業(yè)提供服務(wù)。市場業(yè)務(wù)遍布全國各地,公司始終堅持不懈地跟蹤Zxin科研方向,掌控Zxin國際前沿科學(xué)新技術(shù),不斷進取,為廣大客戶提供**、Z快的服務(wù)和優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品而不懈努力。400-021-1237[詳細]
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2024-09-29 14:41
產(chǎn)品樣冊
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免費代測人(Human)胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒
- 人(Human)胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿試驗原理:INS試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知INS濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將INS和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中INS的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制:試劑盒成份96孔配置48孔配置96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)塑料膜板蓋1塊半塊標(biāo)準(zhǔn)品:200ng/ml1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)生物素標(biāo)記的抗INS抗體1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)親和鏈酶素-HRP1瓶(12ml)1瓶(5ml)洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)自備材料:1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。4.樣品收集、處理及保存方法:1、血清……操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。2、血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。5、保存……如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人(Human)胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒操作注意事項:●試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。●實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)?!癫挥玫钠渌噭?yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用?!袷褂靡淮涡缘奈^以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。●使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品?!竦孜顰應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值?!窦尤朐噭┑捻樞驊?yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣?!癜凑照f明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。安全性:1.避免直接接觸終止液和底物A、B,一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。試劑的準(zhǔn)備:1.標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:200ng/ml(6號標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul100ng/ml(5號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ng/ml(4號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25ng/ml(3號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液12.5ng/ml(2號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液6.25ng/ml(1號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0ng/ml(空白對照)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。試劑盒性能:1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。操作步驟:1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育5分鐘。避免光照。8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。人(Human)胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒結(jié)果判斷與分析:1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的INS標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的INS含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。3、檢測值范圍:0-200ng/ml4、敏感度:0.1ng/ml[詳細]
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2018-09-14 10:01
產(chǎn)品樣冊
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大鼠胰島素(INS)檢測試劑盒
- 大鼠胰島素(INS)檢測試劑盒[詳細]
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2014-09-29 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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人胰島素原(PI)ELISA試劑盒
- 人胰島素原(PI)ELISA試劑盒[詳細]
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2015-03-18 00:00
操作手冊
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人真胰島素(TI)ELISA試劑盒
- 人真胰島素(TI)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-28 00:12
報價單
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胰島素ELISA試劑盒
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4胰島素ELISA試劑盒(德國DRG:EIA2935)1、前言說明DRG公司的胰島素酶免試劑盒可用于人血清和血漿中(加入了肝素或檸檬酸的血漿)胰島素的定量檢測。此檢測試劑盒僅供體外診斷用。胰島素是調(diào)節(jié)葡萄糖代謝的主要激素,它由朗格漢氏小島的β細胞合成分泌,并以前胰島素的前體形式存在,前胰島素可加工形成C肽和胰島素。這兩種激素都以等量形式分泌到門脈循環(huán)中。成熟的胰島素分子由兩條多肽鏈組成,A鏈和B鏈(分別21個和30個氨基酸)。這兩條鏈通過鍵內(nèi)二硫鍵而連接到一起。胰島素的分泌主要受血漿葡萄糖濃度的影響,這種激素有一系列重要的代謝功能。它的主要功能是通過葡萄糖的運送來控制外周組織中葡萄糖的攝取和利用。胰島素和其它低血糖激素的作用(如YZ肝糖原的異生和糖原分解)可被高血糖激素(胰高血糖素,腎上腺素,生長激素和皮質(zhì)醇)的作用中和掉。在胰島素依賴性的糖尿?。↖DDM)和其它疾病例如垂體機能減退疾病中,胰島素的濃度會明顯降低。在非胰島素依賴性的糖尿病患者、肥胖患者、胰島素瘤患者和一些內(nèi)分泌功能紊亂(如庫欣綜合癥和支端肥大癥)患者的體內(nèi),其胰島素的水平會上升。2、實驗原理DRG公司的胰島素酶免實驗是一種基于夾心法原理的固相酶聯(lián)免吸附實驗(ELISA),反應(yīng)板上的微檢測孔包被有能結(jié)合胰島素分子上獨特抗原位點的單克隆抗體。一份含有內(nèi)源性胰島素的病人樣本在包被孔中與酶聯(lián)物進行孵育,該酶聯(lián)物是一種生物素標(biāo)記的抗胰島素抗體。孵育后,用洗滌液洗去未結(jié)合的酶聯(lián)物。在第二次溫育時,鏈親和素過氧酶復(fù)合物結(jié)合到生物素化抗胰島素抗體上,過氧酶復(fù)合物的結(jié)合量與樣品中胰島素的濃度成正比。加入底物液后,所顯示的顏色強度與病人樣品中胰島素的濃度成正比。3、試劑盒成分1)微孔板:12×8,96孔,包被抗胰島素的單克隆抗體。2)零標(biāo)準(zhǔn)品:1支,3ml,即用,0μIU/ml。3)標(biāo)準(zhǔn)品1-5:5支,1ml,即用,6.25;12.5;25;50;100μlU/ml。4)酶聯(lián)物:1支,5ml,即用,生物素化的鼠單克隆抗體。5)酶復(fù)合物:1支,7ml,即用,辣根過氧化物-鏈親和素復(fù)合物。6)TMB底物液:1支14ml即用。7)終止液:1支14ml即用包含0.5M硫酸,請勿接觸終止液,以免刺激或著燒皮膚。8)洗滌液:1瓶,30ml,40倍濃縮,見試劑準(zhǔn)備。注意:用樣品稀釋的零標(biāo)準(zhǔn)品視需要而定。4、實驗所需材料(但試劑盒不提供)1)酶標(biāo)儀2)標(biāo)準(zhǔn)移液器3)吸水紙4)蒸餾水5、試劑的儲存與穩(wěn)定性所有的未開啟的試劑在2-8℃下儲存至保質(zhì)期,不要使用過期的試劑。所有開啟的試劑應(yīng)在2-8℃下儲存。一旦打開微孔板的包裝,需將其重新密封。6、樣品的準(zhǔn)備將所有的試劑和所需要的板條在使用前平衡至室溫。洗滌液:用1170ml的蒸餾水稀釋30ml濃縮的洗滌液,Z終得到的容積為1200ml,稀釋好的洗滌液在室溫下可穩(wěn)定存放兩個星期。7、樣品的收集此ELISA試劑盒可使用血清也可使用(只有肝素或檸檬酸鹽抗凝的血漿)血漿作為樣品。不能使用明顯溶血黃疸和脂血的樣品。血清:靜脈穿刺采集全血,待其凝血,在室溫下離心分離血清。血漿:將全血采集到含有抗凝劑的離心管,采集后立即離心分離。8、樣品的儲存:樣品蓋好蓋子后,可在實驗前2-8℃下儲存5天,要更長時間儲存,應(yīng)在-20℃下凍存。在開始實驗前應(yīng)避免反復(fù)凍融樣品。9、樣品的稀釋:在**次實驗中,要是樣品的濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品,則樣品應(yīng)用按實驗步驟所描述的10倍或100倍稀釋。在計算濃度時需乘以此稀釋度。例子:a)按1:10稀釋:10μL的血清+90μL的零標(biāo)準(zhǔn)品(充分搖勻)。b)按1:100釋?。?0μL按a)稀釋的血清+90μL的零標(biāo)準(zhǔn)品(充分搖勻)10、實驗步驟所有的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品都必須做雙份檢測以確保所有微孔的檢測條件都一樣。1)將所需數(shù)目的板條置于板架上。。2)用一次性吸嘴將標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)控品和樣品分別25μL加入相應(yīng)的檢測孔中。3)每孔加入25μL的酶聯(lián)物。4)充分混合10秒,在此步驟中充分混合非常重要。5)室溫下溫育30分鐘。6)快速棄去檢測孔中的內(nèi)含物,每孔加入400μL的洗滌液洗板三次,在吸水紙上拍干以除去殘余液體。注意:洗板步驟是否正確操作會明顯影響實驗的靈敏度和極ng確度。7)每孔加入50μL的酶復(fù)合物。8)在室溫下溫育30分鐘。9)快速棄去檢測孔中的內(nèi)含物,每孔加入400μL的洗滌液洗板三次,在吸水紙上拍干以除去殘余液體。10)每孔加入50μL的底物液。11)在室溫下溫育15分鐘。12)每孔加入50μL的終止液終止反應(yīng)。13)在加終止液后10分鐘內(nèi)于450±10nm處讀取OD值。11、計算結(jié)果:1)計算標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)控品和病人樣品的平均吸光度。2)以吸光率為Y軸,濃度為X軸,按照從標(biāo)準(zhǔn)品中獲得的平均吸光率和其相對應(yīng)的濃度值,繪制一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。3)利用樣品的平均吸光率,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上得出其相應(yīng)的濃度值,4)自動方法:使用計算機三次方模式四參數(shù)模式或雙對數(shù)函數(shù)的計算機程序可得到結(jié)果。5)樣品的濃度可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上直接獲取。樣品的濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的濃度則需進一步稀釋。在計算濃度的時候,要乘以樣品的稀釋倍數(shù)。下面是胰島素ELISA的標(biāo)準(zhǔn)曲線的典型例子。標(biāo)準(zhǔn)品吸光率(450nm)零標(biāo)準(zhǔn)品(0μIU/ml)0.03標(biāo)準(zhǔn)品1(6.25μIU/ml)0.07標(biāo)準(zhǔn)品2(12.5μIU/ml)0.14標(biāo)準(zhǔn)品3(25μIU/ml)0.35標(biāo)準(zhǔn)品4(50μIU/ml)0.88標(biāo)準(zhǔn)品5(100μIU/ml)2.05參考值:建議各實驗室建立自己的正常值與非正常值。在一明顯正常成年人的研究中,用DRG公司的胰島素ELISA試劑盒進行檢測得到如下數(shù)值:2-25μIU/ml本譯文僅供參考,詳情請以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理:深圳市科潤達生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10號6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費電話:800-8306296傳真:0755-26814431[詳細]
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2018-11-14 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人胰島素樣生長因子-Ⅰelisa試劑盒操作方法
- 人胰島素樣生長因子-Ⅰelisa試劑盒操作方法[詳細]
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2015-05-14 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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人胰島素原(Proinsulin)ELISA試劑盒說明書
- 人胰島素原(Proinsulin)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人Proinsulin單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的Proinsulin與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人Proinsulin,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,Proinsulin濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中Proinsulin濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清可能需要稀釋,請先做預(yù)實驗,以確定稀釋倍數(shù)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)Proinsulin含量,再乘上稀釋倍數(shù)。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的Proinsulin檢測濃度小于14pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人Proinsulin。不與人其它細胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于9.7%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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