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赭曲霉素(Ochratoxin)試劑盒使用說明書
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本文由 上海恒遠(yuǎn)ELISA試劑盒供應(yīng)商 整理匯編
2024-09-29 11:12 1094閱讀次數(shù)
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赭曲霉素(Ochratoxin)試劑盒使用說明書使用目的:本試劑盒用于飼料、魚、蝦和肉類組織(如雞、牛肉和豬肉),雞蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿樣中赭曲霉素(Ochratoxin)殘留的定量檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒采用直接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,在微孔板包被有赭曲霉素(Ochratoxin)偶聯(lián)抗原,加入赭曲霉素(Ochratoxin)標(biāo)準(zhǔn)品或樣品,游離赭曲霉素(Ochratoxin)與微孔條上預(yù)包被的赭曲霉素(Ochratoxin)偶聯(lián)抗原互相競(jìng)爭(zhēng)抗赭曲霉素(Ochratoxin)抗體酶標(biāo)記物,用TMB底物顯色,加入終止液后顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色,用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè),吸光值與樣品中赭曲霉素(Ochratoxin)含量成反比,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中赭曲霉素(Ochratoxin)的含量。試劑盒組成1預(yù)包被的赭曲霉素(Ochratoxin)偶聯(lián)抗原的可拆酶標(biāo)板:1塊(12孔×8條)。2赭曲霉素(Ochratoxin)標(biāo)準(zhǔn)品:6瓶(1ml/瓶),含量分別是:0μg/ml,0.01μg/ml,0.02μg/ml,0.04μg/ml,0.08μg/ml,0.16μg/ml3抗赭曲霉素(Ochratoxin)抗體酶結(jié)合物:1瓶(6ml)。4顯色液A:1瓶(6ml)。5顯色液B:1瓶(6ml)。6終止液:1瓶(6ml),2M硫酸。7樣本稀釋液:1瓶(10×,6ml),用于樣品稀釋用。8濃縮洗滌液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。貯存1試劑盒貯存于2~8℃,切勿冷凍2未用完的微孔板應(yīng)該密封干燥保存注意事項(xiàng)1使用試劑盒前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說明書。2不要使用過期試劑盒。3試劑盒使用前,將試劑恢復(fù)至室溫(25±2℃),建議至少回溫2小時(shí)。4標(biāo)準(zhǔn)品中含有,使用時(shí)應(yīng)特別注意,操作時(shí)應(yīng)帶手套。5終止液中含有硫酸,使用時(shí)防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。6不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不能混用,否則會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果。7不同批號(hào)試劑盒中的試劑不得混用;不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不得混用,否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。8稀釋樣本時(shí)必須用本試劑盒中的樣本稀釋液,否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果9混合試劑時(shí)應(yīng)避免起泡。樣品處理程序(樣品在提取過程中,要嚴(yán)格按說明書操作,提取過程中應(yīng)準(zhǔn)確稀釋,否則會(huì)出現(xiàn)結(jié)果不準(zhǔn)確,樣品應(yīng)當(dāng)保存在陰涼避光之處及冷藏保存)1取10g粉碎的樣品,加20ml70%甲醇溶液2QL振蕩3分鐘3用WhatmanNo1濾紙過濾4取25l處理后的樣品,加入25l樣本稀釋液于反應(yīng)孔中(樣本稀釋倍數(shù)為2)酶免分析步驟1實(shí)驗(yàn)須知2實(shí)驗(yàn)開始前請(qǐng)將所有試劑于盒外充分恢復(fù)至室溫(25±2℃),時(shí)間約2小時(shí)?;販刂潦覝兀?5±2℃)后再取出微孔條,多余的微孔條重新密封立即于2~8℃干燥保存注:一定保證回溫充分,否則影響檢測(cè)的極ng確度和準(zhǔn)確度。3使用后請(qǐng)立即將試劑放回2~8℃保存4請(qǐng)不要改變分析程序5請(qǐng)使用極ng確的微量移液器6操作一旦開始,請(qǐng)不要中斷任何程序7ELISA結(jié)果的可重復(fù)性極大程度的取決于操作程序,請(qǐng)嚴(yán)格按照要求操作8為避免交叉污染,每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品均應(yīng)使用不同的吸頭加樣9加樣時(shí)請(qǐng)勿讓吸頭接觸微孔中的溶液或內(nèi)表面10分析步驟11預(yù)先進(jìn)行編號(hào),標(biāo)記B0、標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位置,推薦進(jìn)行雙孔檢測(cè)12取所需數(shù)量的微孔(微孔條可拆),將多余板條重新密封并立即放回2~8℃保存13樣品稀釋液(10×)、濃縮洗滌液(10×)稀釋成工作液(蒸餾水或去離子水稀釋)14在B0孔中加入50l0.0ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品溶液15在各標(biāo)準(zhǔn)孔中加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液16在各樣品孔中加入50l樣品溶液17在所有孔中加入50l的抗B1抗體酶結(jié)合物18輕輕晃動(dòng)反應(yīng)板幾秒鐘。1937℃溫浴30min(溫浴過程中不時(shí)輕拍反應(yīng)板,可以減少雙孔誤差)20甩掉孔中液體,用洗液洗滌微孔板5次,Z后一次應(yīng)在吸水紙上拍打以完全除去孔中液體。21反應(yīng)22洗滌程序完成后,立即用微量移液器在每個(gè)微孔中先加入50l顯色液A,再加50l顯色液B;輕微晃動(dòng)反應(yīng)板使之徹底混勻2337℃溫浴10min24每孔中加入50l終止液,混勻25在450nm下檢測(cè)吸光度,結(jié)果在5min內(nèi)讀取。上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司是一家生物高新技術(shù)企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主要銷售ELISA試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品,血清,抗體,生物試劑、培養(yǎng)基等科研試劑,保證質(zhì)量,價(jià)格合理,歡迎您來電咨詢(021-6051734813817140470)。公司網(wǎng)址:http://www.gbdelisa.com
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赭曲霉素(Ochratoxin)試劑盒使用說明書
- 赭曲霉素(Ochratoxin)試劑盒使用說明書使用目的:本試劑盒用于飼料、魚、蝦和肉類組織(如雞、牛肉和豬肉),雞蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿樣中赭曲霉素(Ochratoxin)殘留的定量檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒采用直接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,在微孔板包被有赭曲霉素(Ochratoxin)偶聯(lián)抗原,加入赭曲霉素(Ochratoxin)標(biāo)準(zhǔn)品或樣品,游離赭曲霉素(Ochratoxin)與微孔條上預(yù)包被的赭曲霉素(Ochratoxin)偶聯(lián)抗原互相競(jìng)爭(zhēng)抗赭曲霉素(Ochratoxin)抗體酶標(biāo)記物,用TMB底物顯色,加入終止液后顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色,用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè),吸光值與樣品中赭曲霉素(Ochratoxin)含量成反比,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中赭曲霉素(Ochratoxin)的含量。試劑盒組成1預(yù)包被的赭曲霉素(Ochratoxin)偶聯(lián)抗原的可拆酶標(biāo)板:1塊(12孔×8條)。2赭曲霉素(Ochratoxin)標(biāo)準(zhǔn)品:6瓶(1ml/瓶),含量分別是:0μg/ml,0.01μg/ml,0.02μg/ml,0.04μg/ml,0.08μg/ml,0.16μg/ml3抗赭曲霉素(Ochratoxin)抗體酶結(jié)合物:1瓶(6ml)。4顯色液A:1瓶(6ml)。5顯色液B:1瓶(6ml)。6終止液:1瓶(6ml),2M硫酸。7樣本稀釋液:1瓶(10×,6ml),用于樣品稀釋用。8濃縮洗滌液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。貯存1試劑盒貯存于2~8℃,切勿冷凍2未用完的微孔板應(yīng)該密封干燥保存注意事項(xiàng)1使用試劑盒前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說明書。2不要使用過期試劑盒。3試劑盒使用前,將試劑恢復(fù)至室溫(25±2℃),建議至少回溫2小時(shí)。4標(biāo)準(zhǔn)品中含有,使用時(shí)應(yīng)特別注意,操作時(shí)應(yīng)帶手套。5終止液中含有硫酸,使用時(shí)防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。6不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不能混用,否則會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果。7不同批號(hào)試劑盒中的試劑不得混用;不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不得混用,否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。8稀釋樣本時(shí)必須用本試劑盒中的樣本稀釋液,否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果9混合試劑時(shí)應(yīng)避免起泡。樣品處理程序(樣品在提取過程中,要嚴(yán)格按說明書操作,提取過程中應(yīng)準(zhǔn)確稀釋,否則會(huì)出現(xiàn)結(jié)果不準(zhǔn)確,樣品應(yīng)當(dāng)保存在陰涼避光之處及冷藏保存)1取10g粉碎的樣品,加20ml70%甲醇溶液2QL振蕩3分鐘3用WhatmanNo1濾紙過濾4取25l處理后的樣品,加入25l樣本稀釋液于反應(yīng)孔中(樣本稀釋倍數(shù)為2)酶免分析步驟1實(shí)驗(yàn)須知2實(shí)驗(yàn)開始前請(qǐng)將所有試劑于盒外充分恢復(fù)至室溫(25±2℃),時(shí)間約2小時(shí)?;販刂潦覝兀?5±2℃)后再取出微孔條,多余的微孔條重新密封立即于2~8℃干燥保存注:一定保證回溫充分,否則影響檢測(cè)的極ng確度和準(zhǔn)確度。3使用后請(qǐng)立即將試劑放回2~8℃保存4請(qǐng)不要改變分析程序5請(qǐng)使用極ng確的微量移液器6操作一旦開始,請(qǐng)不要中斷任何程序7ELISA結(jié)果的可重復(fù)性極大程度的取決于操作程序,請(qǐng)嚴(yán)格按照要求操作8為避免交叉污染,每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品均應(yīng)使用不同的吸頭加樣9加樣時(shí)請(qǐng)勿讓吸頭接觸微孔中的溶液或內(nèi)表面10分析步驟11預(yù)先進(jìn)行編號(hào),標(biāo)記B0、標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位置,推薦進(jìn)行雙孔檢測(cè)12取所需數(shù)量的微孔(微孔條可拆),將多余板條重新密封并立即放回2~8℃保存13樣品稀釋液(10×)、濃縮洗滌液(10×)稀釋成工作液(蒸餾水或去離子水稀釋)14在B0孔中加入50l0.0ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品溶液15在各標(biāo)準(zhǔn)孔中加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液16在各樣品孔中加入50l樣品溶液17在所有孔中加入50l的抗B1抗體酶結(jié)合物18輕輕晃動(dòng)反應(yīng)板幾秒鐘。1937℃溫浴30min(溫浴過程中不時(shí)輕拍反應(yīng)板,可以減少雙孔誤差)20甩掉孔中液體,用洗液洗滌微孔板5次,Z后一次應(yīng)在吸水紙上拍打以完全除去孔中液體。21反應(yīng)22洗滌程序完成后,立即用微量移液器在每個(gè)微孔中先加入50l顯色液A,再加50l顯色液B;輕微晃動(dòng)反應(yīng)板使之徹底混勻2337℃溫浴10min24每孔中加入50l終止液,混勻25在450nm下檢測(cè)吸光度,結(jié)果在5min內(nèi)讀取。上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司是一家生物高新技術(shù)企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主要銷售ELISA試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品,血清,抗體,生物試劑、培養(yǎng)基等科研試劑,保證質(zhì)量,價(jià)格合理,歡迎您來電咨詢(021-6051734813817140470)。公司網(wǎng)址:http://www.gbdelisa.com[詳細(xì)]
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2024-09-29 11:12
產(chǎn)品樣冊(cè)
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食品中雜色曲霉素的測(cè)定GB5009.252016
- 食品中雜色曲霉素的測(cè)定GB5009.252016[詳細(xì)]
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2018-08-23 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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赭曲霉毒素檢測(cè)試劑盒
- 赭曲霉毒素檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-28 00:43
選購指南
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赭曲霉毒素免疫親和柱說明書
- 資料名稱:赭曲霉毒素免疫親和柱說明書
適用產(chǎn)品:赭曲霉毒素免疫親和柱
正文語言:中文
文件編號(hào):BP012-2
文件版本:2.0
文件格式:PDF
文件大小:0.8MB
內(nèi)容簡(jiǎn)介:赭曲霉毒素免疫親和柱適用于基質(zhì)復(fù)雜、限量要求低的樣品中赭曲霉毒素檢測(cè)的凈化。可以進(jìn)行TLC、HPLC、GC、LC-MS/MS、EIA的定量分析,適用于谷物、食品和飼料等的樣品凈化。[詳細(xì)]
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2018-05-18 10:49
其它
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赭曲霉毒素快速檢測(cè)試劑盒
- 赭曲霉毒素快速檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2012-08-24 00:00
報(bào)價(jià)單
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甘蔗中3- 硝基丙酸的檢測(cè)(曲霉素/青霉素)
- 甘蔗中3- 硝基丙酸的檢測(cè)(曲霉素/青霉素)[詳細(xì)]
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2015-07-08 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)酶聯(lián) 試劑盒使用說明書
- 人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)酶聯(lián) 試劑盒使用說明書[詳細(xì)]
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2014-03-19 00:00
應(yīng)用文章
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赭曲霉毒素ELISA快速檢測(cè)試劑盒
- 赭曲霉毒素ELISA快速檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2012-08-21 00:00
選購指南
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兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)elisa試劑盒使用說明書
- 兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)elisa試劑盒使用說明書[詳細(xì)]
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2024-10-08 05:24
安裝說明
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試劑盒使用說明書
- 試劑盒使用說明書[詳細(xì)]
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2015-01-23 00:00
操作手冊(cè)
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人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子 (vWF)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
- 檢測(cè)范圍:96T20U/L-400U/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(vWF)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(vWF)水平。用純化的人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(vWF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(vWF),再與HRP標(biāo)記的血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(vWF)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(vWF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(vWF)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(800U/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。400U/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200U/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100U/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50U/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25U/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月__[詳細(xì)]
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2018-10-03 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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HGF-INElisa試劑盒使用說明書
- 人造血生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)神經(jīng)肽(HGF-IN)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中造血生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)神經(jīng)肽(HGF-IN)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人造血生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)神經(jīng)肽(HGF-IN)水平。用純化的人造血生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)神經(jīng)肽(HGF-IN)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入造血生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)神經(jīng)肽(HGF-IN),再與HRP標(biāo)記的造血生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)神經(jīng)肽(HGF-IN)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的造血生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)神經(jīng)肽(HGF-IN)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人造血生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)神經(jīng)肽(HGF-IN)含量。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:9pg/mL0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為6pg/mL,4pg/mL,2pg/mL,1pg/mL,0.5pg/mL)。加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng):試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請(qǐng)避光保存。嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%檢測(cè)范圍:0pg/mL-7pg/mL保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-10-23 10:31
產(chǎn)品樣冊(cè)
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免疫組化試劑盒使用說明書
- 上海哈靈生物科技有限公司免疫組化試劑盒使用說明書保存方法:2-8℃保存。有效期:一年。生產(chǎn)日期:見封口。工作原理:辣根過氧化物酶(HRP)的分子量(40000),它不會(huì)遮蓋抗原的結(jié)合部位,具有較高活性及特異性,可溶性佳,生成的產(chǎn)物不擴(kuò)散,可作用于多種底物,產(chǎn)生不同顏色且HRP穿透力強(qiáng),易進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。DAB在H2O2存在的情況下,可以作為HRP的電子供體,產(chǎn)生褐色的不溶顆粒,可作為顯色的試劑。試劑盒內(nèi)容:名稱規(guī)格10.01mol/LpH6.0枸櫞酸鹽緩沖液0.5L2PBS緩沖液1L3廣譜二抗1.5mL430%H2O25mL5DAB顯色液I0.3mL6DAB顯色液II0.3mL自備試劑:無水乙醇、蘇木素。操作步驟:1.60℃常規(guī)脫蠟至水后,將石蠟切片先后浸入二甲苯Ⅰ,二甲苯Ⅱ各10min。然后逐級(jí)降濃度酒精入水,每次3-5min。①無水酒精3-5min②90%酒精3-5min③85%酒精3-5min④75%酒精3-5min⑤PBS洗滌3次每次5min2.熱修復(fù)抗原:將切片置于0.01mol/LpH6.0枸櫞鈉緩沖液,微波爐加熱至沸騰后斷電,間隔5-10min后,反復(fù)1-2次,置于室溫自然冷卻。0.01mol/LpH7.0左右的PBS洗滌3次,每次5min3.消除內(nèi)源性過氧化物酶:用3%H2O2室溫孵育5-10min,以消除內(nèi)源性過氧化物酶的活性。PBS洗滌2-3次,每次5min;4.滴加一抗:滴加適當(dāng)稀釋的一抗到切片上,37℃孵育一定時(shí)間或者4℃隔天,pH7.4的PBS洗滌3次,每次5min。(一抗的稀釋度、孵育時(shí)間和溫度與染色強(qiáng)度、背景有直接關(guān)系。一般來說,陽性染色強(qiáng)度不夠時(shí),可提高一抗?jié)舛群脱娱L(zhǎng)孵育時(shí)間;背景過高時(shí),可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時(shí)間。)5.加入廣譜二抗,37℃孵育一段時(shí)間,取出后PBS洗滌3次,每次5min。6.DAB顯色:取DAB顯色液I及II各50微升加至入1mL的水中,配成DAB工作液,滴加到切片上,室溫顯色,鏡下控制反應(yīng)時(shí)間。若無背景出現(xiàn)則可繼續(xù)顯色。蒸餾水充分洗滌以終止反應(yīng)。7..觀察顯色后自來水沖,蘇木精復(fù)染1-2min,,自來水沖10min,梯度酒精脫水,二甲苯透明,中性樹膠封片,干燥,分析拍照[詳細(xì)]
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2024-10-08 14:03
產(chǎn)品樣冊(cè)
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2015-04-21 00:00
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