本文由 上海恒遠ELISA試劑盒供應(yīng)商 整理匯編

2024-09-11 18:03 1944閱讀次數(shù)

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• ELISA試劑盒實驗原理與操作步驟

  上海勁馬生物科技有限公司ELISA試劑盒實驗原理與操作步驟實驗方法：酶聯(lián)免疫法/酶免法（ELISA）檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法操作步驟：具體請參照說明書（詳細說明書請聯(lián)系我司業(yè)務(wù)人員：021-60517348，13817140470。）注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。保存條件及有效期1．試劑盒保存：2-8℃2．有效期：6個月[詳細]

  2024-09-11 18:03

  產(chǎn)品樣冊

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• 魚甲狀腺素（T4）ELISA試劑盒操作步驟及實驗原理

  魚甲狀腺素（T4）ELISA試劑盒操作步驟及實驗原理[詳細]

  2015-04-22 00:00

  操作手冊

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• ELISA試劑盒操作步驟

  ELISA試劑盒操作步驟[詳細]

  2015-06-27 00:00

  期刊論文

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• ELISA實驗原理、步驟、問題分析

  上海恒遠生物科技有限公司專業(yè)供應(yīng)各種屬elisa試劑盒，提供免費代測服務(wù)，保證實驗結(jié)果客觀真實性。我公司對試劑盒質(zhì)量1**%保證，若存在質(zhì)量問題，我們無條件包退換。若需要了解試劑盒的詳細信息，請來的咨詢：電話：021-6052049813636351217業(yè)務(wù)QQ:1005074258何經(jīng)理ELISA實驗原理、步驟、ELISA問題分析ELISA實驗原理酶聯(lián)免疫吸附測定（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）原理1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測定（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）用于IgG定量測定的文章，使得1966年開始用于抗原定位的酶標抗體技術(shù)發(fā)展成液體標本中微量物質(zhì)的測定方法。ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高，故可極大地地放大反應(yīng)效果，從而使測定方法達到很高的敏感度類型及步驟ELISA的主要常用類型及步驟1.間接法測抗體間接法是檢測抗體常用的方法。其原理為利用酶標記的抗抗體（二抗）以檢測與固相抗原結(jié)合的受檢抗體，故稱為間接法。操作步驟如下：1）將特異性抗原與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗原，洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。2）加稀釋的樣本，保溫反應(yīng)。樣本中的特異抗體與固相抗原結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體，樣本中的其他成份在洗滌過程中被洗去。3）加酶標抗抗體。固相免疫復(fù)合物中的抗體與酶標抗抗體結(jié)合，從而間接記上酶。洗滌后，固相載體上的酶量與樣本中受檢抗體的量正相關(guān)。4）加底物顯色。2.雙抗體夾心法測抗原雙抗體夾心法是檢測抗原Z常用的方法，操作步驟如下：1）將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。2）加受檢樣本，保溫反應(yīng)。樣本中的抗原與固相抗體結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。3）加酶標抗體，保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與樣本中受檢抗原的量相關(guān)。4）加底物顯色。3.雙抗原夾心法測抗體反應(yīng)原理和模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進行包被和制備酶結(jié)合物，以檢測相應(yīng)的抗體。與間接法測抗體的不同之處為以酶標抗原代替酶標抗抗體4.競爭法測抗原小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個以上的位點，因此不能用雙抗體夾心法進行測定，可以采用競爭法模式。其原理是標本中的抗原和一定量的酶標抗原競爭與固相抗體結(jié)合。標本中抗原量含量愈多，結(jié)合在固相上的酶標抗原愈少，Z后的顯色也愈淺。小分子激素、藥物等ELISA測定多用此法。ELISAQ&A如何選擇合適的陽性對照?陽性對照的基本組成應(yīng)該盡量與檢測樣本的組成一致，一般陽性對照多以含蛋白保護劑的緩沖液為基質(zhì)，加入一定量的待檢物質(zhì)。比如，以人血清為標本的測定，陽性對照多用確定的病人血清或者以復(fù)鈣人血漿為原料加入一定量標準品。如何選擇合適的陰性對照?陰性對照的基本組成也應(yīng)該盡量與檢測樣本的組成一致，**先行檢測確定其中不含待檢物質(zhì)。比如，檢測人血清標本時，陰性對照應(yīng)該選擇正常人血清;檢測免疫動物血清中抗體效價時，陰性對照應(yīng)該選擇該動物的免疫前血清。如何選擇Zyou化的包被條件?1.包被抗原的選擇包被抗原可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類。天然蛋白需經(jīng)純化才能用直接吸附法包被，對于含雜質(zhì)較多的抗原可以采用間接捕獲法包被（先用能夠與目的抗原反應(yīng)的物質(zhì)如抗體直接吸附在酶標板上，再通過特異性反應(yīng)使抗原固相化）。經(jīng)純化的重組蛋白一般皆可直接包板。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有機化合物，由于分子量太小，往往難于直接吸附在酶標板上，一般都先使其與無關(guān)蛋白質(zhì)如BSA等偶聯(lián)，偶聯(lián)物吸附于固相載體上。2.包被液的選擇一般常用的是pH9.6的碳酸鹽緩沖液，如果包被的抗原在堿性條件下不穩(wěn)定的話，也可以使用pH7.2的磷酸鹽緩沖液。3.包被溫度的選擇通常是4-8度條件下過夜或者37度保溫2小時，我們強烈建議4-8度條件下包被，有利于蛋白活性的保持。4.包被濃度的選擇包被的Z適濃度隨固相載體和包被物的性質(zhì)變化，一般蛋白質(zhì)的包被濃度為1-5ug/ml，要明確針對特定包被抗原的Z適包被濃度需要通過實驗來確定。包板后需要封閉嗎?應(yīng)該選擇什么樣的封閉體系?封閉是否必要，取決于ELISA的模式及具體的實驗條件。一般說來，雙抗體夾心法，只要酶標記物是高活性的，操作時洗滌徹底，不經(jīng)封閉也可得到滿意的結(jié)果。而在間接法測定中，封閉一般是必不可少的。常用的封閉劑有0.05%-0.5%的BSA、10%的小牛血清、1%明膠、5%的脫脂奶粉，AbMART推薦使用5%脫脂奶粉，價廉而且封閉能力強，不過5%脫脂奶粉只適合短期內(nèi)使用，不宜長期保存，所以試劑盒中較少使用。如何正確使用酶結(jié)合物?1.酶結(jié)合物的稀釋液在稀釋液中常加入高濃度的無關(guān)蛋白質(zhì)（例如1%BSA或5%脫脂奶粉），通過競爭YZ酶結(jié)合物在固相載體上的非特異性吸附。一般還加入能夠YZ蛋白質(zhì)吸附于塑料表面的非離子型表面活性劑，如吐溫20（0.05%的濃度較為適宜）。2.正確稀釋酶結(jié)合物酶結(jié)合物的合適工作濃度需要通過預(yù)實驗來確定，濃度過高易導(dǎo)致本底偏高，濃度過低則會導(dǎo)致陽性信號的減弱。酶結(jié)合物**在使用前稀釋，稀釋后的酶結(jié)合物不宜長期保存，因為低濃度的酶結(jié)合物極易失活。問題可能的原因解決方法陰性對照產(chǎn)生了陽性的結(jié)果試劑或者耗材污染更換試劑，使用一次性耗材洗板出現(xiàn)問題更換更強配方的洗滌液，增加洗板次數(shù)，延長洗板時間如果是在雙抗體夾心法中出現(xiàn)，有可能是包被抗體與二抗間有交叉反應(yīng)更換包被抗體或二抗使用了過多的抗體減少抗體使用量整板出現(xiàn)高背景二抗產(chǎn)生了非特異性吸附減少二抗使用量，縮短二抗反應(yīng)時間顯色液不新鮮使用現(xiàn)配的顯色液顯色反應(yīng)時間過長沒有終止控制顯色反應(yīng)時間，及時終止反應(yīng)試劑或者耗材污染更換試劑，使用一次性耗材反應(yīng)溫度過高導(dǎo)致的非特異性吸附嚴格控制反應(yīng)在Z適溫度下進行封閉條件不佳導(dǎo)致的非特異性吸附更換封閉能力更強的封閉液，延長封閉時間反應(yīng)信號偏低包被條件不合適提高包板濃度，延長包板時間抗原抗體反應(yīng)不夠充分延長反應(yīng)時間，確保反應(yīng)在Z適溫度下進行顯色液配方不恰當(dāng)增加顯色底物的量二抗結(jié)合不夠提高二抗?jié)舛?，延長反應(yīng)時間，更換效果更好的二抗梯度稀釋做ELISA時產(chǎn)生跳孔現(xiàn)象酶標板疊放導(dǎo)致傳熱不均勻，各孔反應(yīng)溫度有差異盡量避免酶標板疊放在一起移液器稀釋時未能保持連續(xù)性定期校準移液器，確保移液器的正確使用反應(yīng)溶液蒸發(fā)酶標板用封條密封或者加蓋洗板不均勻確定洗板機能夠正常工作酶標板底有雜物或者水珠讀板時清理干凈酶標板底部[詳細]

  2018-11-16 10:02

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• ELISA的概念、原理、操作步驟

  ELISA的概念、原理、操作步驟ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定（Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay）的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項技術(shù)自70年代初問世以來，發(fā)展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域?！　。ㄒ唬≡怼　LISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的GX催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實際應(yīng)用中，通過不同的設(shè)計，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法（圖a）、用于檢測抗原的雙抗體夾心法（圖b）以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法?！　。ǘ〔僮鞑襟E方法一　用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:　　1.　包被：用0.05MPH9.碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）?！　?.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）?！　?.　加酶標抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小時，洗滌?！　?.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘?！　?.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。　　6.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性?！　》椒ǘ∮糜跈z測未知抗體的間接法：　　　1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。2、次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。同時做空白、陰性及陽性孔對照于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,Z后一遍用DDW（超純水）洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。3.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。4.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。5.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。（三）　試劑器材　　1.　試劑　　（1）　包被緩沖液（PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液）:　　　　NaCO31.59克　NaHCO3　2.93克　　加蒸餾水至1000ml　?。?）　洗滌緩沖液（PH7.4PBS）：0.15M　KH2PO40.2克　Na2HPO412H2O　2.9克　NaCl8.0克KCl0.2克Tween-200.05％0.5ml加蒸餾水至1000ml　?。?）　稀釋液:牛血清白蛋白（BSA）0.1克　加洗滌緩沖液至100ml　或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5～10％使用?！　。?）　終止液（2MH2SO4）：蒸餾水178.3ml，逐滴加入濃硫酸（98％）21.7ml。　?。?）　底物緩沖液（PH5.0磷酸檸檬酸）:0.2MNa2HPO4（28.4克／L）25.7ml　0.1M檸檬酸（19.2克／L）24.3ml　加蒸餾水50ml?！　。?）　TMB（四甲基聯(lián)苯胺）使用液:TMB（10mg／5ml無水乙醇）0.5ml底物緩沖液（PH5.5）10ml0.75％H2O2　32μl　?。?）　ABTS使用液:ABTS　0.5mg　底物緩沖液（PH5.5）1ml　3％H2O2　2μl　?。?）　抗原、抗體和酶標記抗體?！　。?）　正常人血清和陽性對照血清。　　2.　器材:　?。?）　聚苯乙烯塑料板（簡稱酶標板）40孔或96孔，ELISA檢測儀，50μl及100μl加樣器，塑料滴頭，小毛巾，洗滌瓶。　?。?）　小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等?！　。?）　4℃冰箱，37℃孵育箱。（四）　注意事項　　1.　正式試驗時，應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉?！　?.　在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括:　　（1）　固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好?！　。?）包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質(zhì)包被的Z適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值Zda而蛋白量Z少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml?！　。?）　酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。　?。?）　酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。ELISA相關(guān)儀器試劑設(shè)備酶標儀洗板機化學(xué)發(fā)光檢測儀ELISA檢測試劑盒ELISPOT檢測ELISA試劑盒抗體酶標板[詳細]

  2018-11-15 10:03

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• 人羥脯氨酸Elisa試劑盒操作步驟

  加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。EPI豬腎上腺素規(guī)格：48T/96THSP-90豬熱休克蛋白90規(guī)格：48T/96THSP-70豬熱休克蛋白70規(guī)格：48T/96THSP-40豬熱休克蛋白40規(guī)格：48T/96THSP-20豬熱休克蛋白20規(guī)格：48T/96TNE豬去甲腎上腺素規(guī)格：48T/96TGLUT2豬葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2規(guī)格：48T/96TPrednisolone豬潑尼松龍規(guī)格：48T/96TCORT豬皮質(zhì)酮/腎上腺酮規(guī)格：48T/96TCortisol豬皮質(zhì)醇規(guī)格：48T/96TBNP豬腦鈉素/腦鈉尿肽規(guī)格：48T/96TSGLT1豬鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運載體1規(guī)格：48T/96TeNOS-3豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3規(guī)格：48T/96TeNOS豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶規(guī)格：48T/96TET-1豬內(nèi)皮素1規(guī)格：48T/96T[詳細]

  2018-09-27 10:00

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• 雞γ干擾素ELISA試劑盒操作步驟

  操作步驟標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。120pg/ml5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液60pg/ml4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液30pg/ml3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液15pg/ml2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液7.5pg/ml1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。[詳細]

  2018-10-01 10:00

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• 牛血紅蛋白ELISA試劑盒操作步驟

  牛血紅蛋白（Hb）ELISA試劑盒使用說明書僅供科學(xué)研究使用實驗?zāi)康模罕驹噭┖杏糜跍y定牛血清，血漿及相關(guān)液體樣本中血紅蛋白（Hb）含量。實驗原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中牛血紅蛋白（Hb）水平。用純化的牛血紅蛋白（Hb）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入血紅蛋白（Hb），再與HRP標記的血紅蛋白（Hb）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血紅蛋白（Hb）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中牛血紅蛋白（Hb）濃度。試劑盒組成：請下載產(chǎn)品說明書。樣本處理及要求：請下載產(chǎn)品說明書。1.試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和15%檢測范圍：5ug/ml-100ug/ml保存條件及有效期：1.試劑盒保存：2-8℃2．有效期：6個月[詳細]

  2018-11-15 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 人一氧化氮（NO）ELISA試劑盒操作步驟

  使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中一氧化氮（NO）含量。標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。200μmol/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液100μmol/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液50μmol/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液25μmol/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液12.5μmol/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.[詳細]

  2018-12-30 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 大鼠多巴胺ELISA檢測試劑盒實驗步驟

  大鼠多巴胺ELISA檢測試劑盒實驗步驟[詳細]

  2015-04-21 00:00

  操作手冊

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• 沖擊實驗方法與步驟

  沖擊實驗方法與步驟[詳細]

  2024-10-03 21:18

  專利

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• 加A試劑盒實驗步驟

  利用具有3’-5’外切酶活性的高保真DNa聚合酶，如Pfu等進行PCR擴增時，其PCR產(chǎn)物為不帶A尾的平末端DNa片段，如想將該片段克隆到T載體上，需要先利用A-Tai領(lǐng)Enzyme在平末端片段后加上A尾后才能與T載體上3’末端的T堿基互補連接。本產(chǎn)品是在平末端DNa片段的3’末端添加一個A尾，使平末端的DNa片段進行TA克隆成為可能。本試劑盒提供了加A尾需要的所有成分，可以在30分鐘完成整個過程。與平末端DNa片段克隆相比，TA克隆具有較高的克隆效率，可大大提高實驗成功率。[詳細]

  2018-09-04 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 植物凝集素ELISA 檢測試劑盒操作步驟

  植物凝集素ELISA檢測試劑盒PHA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗.已知PHA濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將PHA和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中PHA的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制：植物凝集素ELISA檢測試劑盒試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品：40nmol/L1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進行稀稀植物凝集素ELISA檢測試劑盒自備材料蒸餾水。加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。植物凝集素ELISA檢測試劑盒安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項:植物凝集素ELISA檢測試劑盒試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法:植物凝集素ELISA檢測試劑盒血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備:植物凝集素ELISA檢測試劑盒標準品：標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：0nmol/L（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。操作步驟:植物凝集素ELISA檢測試劑盒使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，植物凝集素ELISA檢測試劑盒振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案:植物凝集素ELISA檢測試劑盒標準品濃度（nmol/L）A4040樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標準品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析:植物凝集素ELISA檢測試劑盒1、儀器值：植物凝集素ELISA檢測試劑盒于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應(yīng)的PHA標準品濃度為橫坐標（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的PHA含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍：0-40nmol/L4、敏感度：0.1nmol/L[詳細]

  2018-09-27 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 大鼠鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶（CaN）Elisa試劑盒操作步驟

  使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CaN)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中大鼠鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CaN)水平。用純化的大鼠鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CaN)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CaN)，再與HRP標記的鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CaN)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CaN)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CaN)濃度。標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。[詳細]

  2018-10-01 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 豬傳染性胃腸炎ELISA試劑盒操作步驟

  使用目的：本試劑盒用于測定豬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中傳染性胃腸炎(TGEV)含量。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品（480U/L）0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個[詳細]

  2018-10-01 10:00

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• 猴免疫球蛋白G elisa試劑盒操作步驟

  操作步驟1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。120μg/ml5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液60μg/ml4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液30μg/ml3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液15μg/ml2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液7.5μg/ml1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。[詳細]

  2018-10-08 10:01

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• 小鼠甲狀腺素（T4）elisa試劑盒操作步驟

  使用目的：本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中甲狀腺素(T4)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中小鼠甲狀腺素(T4)水平。用純化的小鼠甲狀腺素(T4)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入甲狀腺素(T4)，再與HRP標記的甲狀腺素(T4)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的甲狀腺素(T4)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中小鼠甲狀腺素(T4)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品（480μg/L）0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個[詳細]

  2018-10-08 10:01

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• 小鼠促性腺激素（GTH）ELISA試劑盒操作步驟

  使用目的：本試劑盒用于測定小鼠血清和細胞上清液樣本中促性腺激素（GTH）含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中小鼠促性腺激素（GTH）水平。用純化的小鼠促性腺激素（GTH）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入促性腺激素（GTH），再與HRP標記的促性腺激素（GTH）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促性腺激素（GTH）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中小鼠促性腺激素（GTH）濃度。標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。160ng/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液80ng/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液40ng/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液20ng/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液10ng/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-12-30 10:00

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• 人百日咳（PT）ELISA試劑盒操作步驟

  使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中百日咳（PT）含量。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品（2400ng/L）0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。1200ng/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液600ng/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液300ng/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液150ng/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液75ng/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-12-30 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 人癌胚抗原（CEA）elisa試劑盒操作步驟

  人癌胚抗原（CEA）elisa試劑盒操作步驟試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品（96ng/ml）0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。48ng/ml5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液24ng/ml4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液12ng/ml3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液6ng/ml2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液3ng/ml1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-12-30 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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