資料庫(kù)
豬胰島素(INS)ELISA試劑盒
-
本文由 上海研生生化試劑有限公司 整理匯編
2024-09-28 18:27 170閱讀次數(shù)
文檔僅可預(yù)覽首頁(yè)內(nèi)容,請(qǐng)下載后查看全文信息!
-
立即下載
豬胰島素(INS)ELISA試劑盒
登錄或新用戶(hù)注冊(cè)
請(qǐng)用手機(jī)微信掃描下方二維碼
快速登錄或注冊(cè)新賬號(hào)
微信掃碼,手機(jī)電腦聯(lián)動(dòng)
更多資料
-
豬胰島素(INS)ELISA試劑盒
- 豬胰島素(INS)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
-
2013-12-12 00:00
報(bào)價(jià)單
-
豬胰島素(INS)ELISA試劑盒
- 豬胰島素(INS)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
-
2024-09-28 18:27
其它
-
豬胰島素(INS)定量檢測(cè)試劑盒(ELISA)
- 上海金穗生物科技有限公司是一家專(zhuān)門(mén)從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品研發(fā)和銷(xiāo)售的綜合性生命科學(xué)公司,公司以超前的市場(chǎng)觀念、良好的產(chǎn)品形象以及雄厚的技術(shù)實(shí)力取得了多家國(guó)內(nèi)外知名公司的代理權(quán),目前擁有國(guó)內(nèi)外各產(chǎn)品,坐擁上海,輻射全ZG。面向各地科研院所、高等院校、衛(wèi)生檢驗(yàn)檢疫部門(mén)、工農(nóng)業(yè)部門(mén)、環(huán)境保護(hù)部門(mén)相關(guān)實(shí)驗(yàn)室和制藥、食品、飲料、化工、畜牧、水產(chǎn)等企業(yè)提供服務(wù)。市場(chǎng)業(yè)務(wù)遍布全國(guó)各地,公司始終堅(jiān)持不懈地跟蹤Zxin科研方向,掌控Zxin國(guó)際前沿科學(xué)新技術(shù),不斷進(jìn)取,為廣大客戶(hù)提供**、Z快的服務(wù)和優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品而不懈努力。400-021-1237[詳細(xì)]
-
2024-09-29 14:41
產(chǎn)品樣冊(cè)
-
小鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒
- 小鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
-
2024-09-28 00:27
操作手冊(cè)
-
大鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒
- 大鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
-
2024-09-28 01:11
安裝說(shuō)明
-
人胰島素(INS)ELISA試劑盒
- 人胰島素(INS)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
-
2024-09-28 00:30
報(bào)價(jià)單
-
人胰島素(Ins)ELISA試劑盒說(shuō)明
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T1mIU/L-40mIU/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中胰島素(Ins)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人胰島素(Ins)水平。用純化的人胰島素(Ins)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰島素(Ins),再與HRP標(biāo)記的人胰島素(Ins)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人胰島素(Ins)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中人胰島素(Ins)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(80mIU/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書(shū)1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。40mIU/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20mIU/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10mIU/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5mIU/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.5mIU/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。8.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
-
2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊(cè)
-
小鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
- l本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中小鼠胰島素(INS)的含量。l有效期:6個(gè)月l保存條件:2-8℃實(shí)驗(yàn)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被小鼠胰島素(INS)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素(INS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。[詳細(xì)]
-
2024-09-28 00:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
-
大鼠胰島素(INS)定量檢測(cè)試劑盒(ELISA)
- 本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。大鼠胰島素(INS)定量檢測(cè)試劑盒(ELISA)使用說(shuō)明書(shū)【試劑盒名稱(chēng)】大鼠胰島素(INS)定量檢測(cè)試劑盒(ELISA)【試劑盒用途】定量檢測(cè)大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中胰島素(INS)的含量?!緳z測(cè)原理】本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本加入到預(yù)先包被大鼠胰島素(INS)單克隆抗體透明酶標(biāo)包被板中,溫育足夠時(shí)間后,洗滌除去未結(jié)合的成分,再加入酶標(biāo)工作液,溫育足夠時(shí)間后,洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過(guò)氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中大鼠胰島素(INS)濃度呈正相關(guān),450nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的OD值,計(jì)算樣本中大鼠胰島素(INS)含量?!驹噭┖薪M成】1酶標(biāo)包被板12孔×8條7顯色劑A液6mL2標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL×6管8顯色劑B液6mL320倍濃縮洗滌液25mL9終止液6mL4樣本稀釋液6mL10說(shuō)明書(shū)1份5特殊稀釋液6mL11封板膜2張6酶標(biāo)試劑6mL12密封袋1個(gè)備注:標(biāo)準(zhǔn)品(1號(hào)→6號(hào))濃度依次為:16、8、4、2、1、0.5mU/L?!拘枰刺峁┑脑噭┖推鞑摹?、37℃恒溫箱2、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀3、精密移液器及一次性吸頭4、蒸餾水5、一次性試管6、吸水紙【操作步驟】1、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔和空白對(duì)照孔,記錄各孔位置,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL;待測(cè)樣本孔中先2加入待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對(duì)照孔不加。4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說(shuō)明書(shū)操作洗板)。6、加酶標(biāo)工作液:每孔加入酶標(biāo)工作液50μL,空白對(duì)照孔不加。7、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。8、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說(shuō)明書(shū)操作洗板)。9、顯色:每孔先加入顯色劑A液50μL,再加入顯色劑B液50μL,平板混勻器混勻30s(或用手輕輕震蕩混勻30s),37℃避光顯色15min。10、終止:取出酶標(biāo)板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11、測(cè)定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的吸光值(OD值)。12、計(jì)算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值,計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來(lái)計(jì)算。Z終濃度為實(shí)際測(cè)定濃度乘以稀釋倍數(shù)。【樣本要求】1、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因?yàn)榀B氮鈉(NaN3)是辣根過(guò)氧化物酶(HRP)的YZ劑。2、標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能立即試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3、樣本應(yīng)充分離心,不得有溶血及顆粒。【注意事項(xiàng)】1、實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。2、酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照都做雙份檢測(cè),取平均值,以減小實(shí)驗(yàn)誤差。4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計(jì)算結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。5、本試劑盒定量范圍為0.5-16mU/L,超過(guò)此范圍,為標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)延伸計(jì)算所得,不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果,請(qǐng)用特殊稀釋液稀釋后測(cè)定準(zhǔn)確結(jié)果(0.5-16mU/L范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本Z終濃度。6、若顯色過(guò)淺,可適當(dāng)延長(zhǎng)底物溫育時(shí)間。7、為避免交叉污染,標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照每加一個(gè)就要更換一次吸頭;酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復(fù)使用封板膜。8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號(hào)的試劑不得混用。9、底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。3【操作程序總結(jié)】準(zhǔn)備試劑,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,37℃反應(yīng)30分鐘洗板4次,加入酶標(biāo)試劑,37℃反應(yīng)30分鐘洗板4次,加入顯色液A、B,37℃顯色15分鐘加入終止液15分鐘之內(nèi)讀OD值計(jì)算【檢測(cè)范圍】0.5mU/L-16mU/L【規(guī)格】96人份/盒【貯藏】2-8℃,避光防潮保存?!居行凇?個(gè)月[詳細(xì)]
-
2018-09-03 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
-
人胰島素(INS)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 人胰島素(INS)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中胰島素(INS)的活性。上海喬羽生物科技有限公司ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)關(guān)鍵詞:ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)、酶聯(lián)免疫試劑盒、分析檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:人胰島素(INS)ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人胰島素(INS)水平。用純化的人胰島素(INS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰島素(INS),再與HRP標(biāo)記的羊抗人抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰島素(INS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中人胰島素(INS)濃度。[詳細(xì)]
-
2018-11-09 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
-
人胰島素(Ins)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
- 使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中胰島素(Ins)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人胰島素(Ins)水平。用純化的人胰島素(Ins)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰島素(Ins),再與HRP標(biāo)記的人胰島素(Ins)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人胰島素(Ins)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中人胰島素(Ins)濃度。[詳細(xì)]
-
2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊(cè)
-
大鼠(Rat)胰島素(INS)ELISA檢測(cè)試劑盒
- 檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被胰島素(INS)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰島素(INS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。[詳細(xì)]
-
2018-12-02 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
-
人胰島素(INS)檢測(cè)試劑盒
- 人胰島素(INS)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
-
2015-03-16 00:00
期刊論文
-
大鼠胰島素(INS)檢測(cè)試劑盒
- 大鼠胰島素(INS)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
-
2014-09-29 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
-
豬胰島素(Insulin)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 豬胰島素(Insulin)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑盒僅供研究使用檢測(cè)范圍:3mIU/L-80mIU/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定豬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中胰島素(Insulin)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中豬胰島素(Insulin)水平。用純化的豬胰島素(Insulin)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加胰島素(Insulin),再與HRP標(biāo)記的胰島素(Insulin)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰島素(Insulin)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中豬胰島素(Insulin)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(160mIU/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書(shū)1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。80mIU/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液40mIU/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20mIU/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10mIU/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5mIU/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
-
2018-11-15 10:03
產(chǎn)品樣冊(cè)
-
免費(fèi)代測(cè)人(Human)胰島素(INS)ELISA檢測(cè)試劑盒
- 人(Human)胰島素(INS)ELISA檢測(cè)試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿試驗(yàn)原理:INS試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知INS濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將INS和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中INS的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制:試劑盒成份96孔配置48孔配置96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)塑料膜板蓋1塊半塊標(biāo)準(zhǔn)品:200ng/ml1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)空白對(duì)照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)生物素標(biāo)記的抗INS抗體1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)親和鏈酶素-HRP1瓶(12ml)1瓶(5ml)洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)自備材料:1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。4.樣品收集、處理及保存方法:1、血清……操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。5、保存……如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人(Human)胰島素(INS)ELISA檢測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng):●試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存?!駥?shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)?!癫挥玫钠渌噭?yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用?!袷褂靡淮涡缘奈^以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器?!袷褂酶蓛舻乃芰先萜髋渲孟礈煲?。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品?!竦孜顰應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值?!窦尤朐噭┑捻樞驊?yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣?!癜凑照f(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。安全性:1.避免直接接觸終止液和底物A、B,一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。2.實(shí)難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。試劑的準(zhǔn)備:1.標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:200ng/ml(6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul100ng/ml(5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ng/ml(4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25ng/ml(3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液12.5ng/ml(2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液6.25ng/ml(1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0ng/ml(空白對(duì)照)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋?zhuān)赫麴s水50倍稀釋。試劑盒性能:1.靈敏度:Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線(xiàn)性。樣品線(xiàn)性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。操作步驟:1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育5分鐘。避免光照。8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。9.在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。人(Human)胰島素(INS)ELISA檢測(cè)試劑盒結(jié)果判斷與分析:1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的INS標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線(xiàn),樣品的INS含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)換算出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。3、檢測(cè)值范圍:0-200ng/ml4、敏感度:0.1ng/ml[詳細(xì)]
-
2018-09-14 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
-
豬胰島素(Insulin)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
- 使用目的:本試劑盒用于測(cè)定豬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中胰島素(Insulin)含量。豬胰島素(Insulin)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中豬胰島素(Insulin)水平。用純化的豬胰島素(Insulin)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加胰島素(Insulin),再與HRP標(biāo)記的胰島素(Insulin)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰島素(Insulin)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中豬胰島素(Insulin)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(160mIU/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書(shū)1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。豬胰島素(Insulin)ELISA試劑盒操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。80mIU/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液40mIU/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20mIU/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10mIU/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5mIU/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。豬胰島素(Insulin)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
-
2018-09-19 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
-
豬胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒
- 豬胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
-
2013-12-12 00:00
操作手冊(cè)
-
豬胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒
- 豬胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
-
2024-09-17 19:14
專(zhuān)利
-
胰島素ELISA試劑盒
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4胰島素ELISA試劑盒(德國(guó)DRG:EIA2935)1、前言說(shuō)明DRG公司的胰島素酶免試劑盒可用于人血清和血漿中(加入了肝素或檸檬酸的血漿)胰島素的定量檢測(cè)。此檢測(cè)試劑盒僅供體外診斷用。胰島素是調(diào)節(jié)葡萄糖代謝的主要激素,它由朗格漢氏小島的β細(xì)胞合成分泌,并以前胰島素的前體形式存在,前胰島素可加工形成C肽和胰島素。這兩種激素都以等量形式分泌到門(mén)脈循環(huán)中。成熟的胰島素分子由兩條多肽鏈組成,A鏈和B鏈(分別21個(gè)和30個(gè)氨基酸)。這兩條鏈通過(guò)鍵內(nèi)二硫鍵而連接到一起。胰島素的分泌主要受血漿葡萄糖濃度的影響,這種激素有一系列重要的代謝功能。它的主要功能是通過(guò)葡萄糖的運(yùn)送來(lái)控制外周組織中葡萄糖的攝取和利用。胰島素和其它低血糖激素的作用(如YZ肝糖原的異生和糖原分解)可被高血糖激素(胰高血糖素,腎上腺素,生長(zhǎng)激素和皮質(zhì)醇)的作用中和掉。在胰島素依賴(lài)性的糖尿?。↖DDM)和其它疾病例如垂體機(jī)能減退疾病中,胰島素的濃度會(huì)明顯降低。在非胰島素依賴(lài)性的糖尿病患者、肥胖患者、胰島素瘤患者和一些內(nèi)分泌功能紊亂(如庫(kù)欣綜合癥和支端肥大癥)患者的體內(nèi),其胰島素的水平會(huì)上升。2、實(shí)驗(yàn)原理DRG公司的胰島素酶免實(shí)驗(yàn)是一種基于夾心法原理的固相酶聯(lián)免吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA),反應(yīng)板上的微檢測(cè)孔包被有能結(jié)合胰島素分子上獨(dú)特抗原位點(diǎn)的單克隆抗體。一份含有內(nèi)源性胰島素的病人樣本在包被孔中與酶聯(lián)物進(jìn)行孵育,該酶聯(lián)物是一種生物素標(biāo)記的抗胰島素抗體。孵育后,用洗滌液洗去未結(jié)合的酶聯(lián)物。在第二次溫育時(shí),鏈親和素過(guò)氧酶復(fù)合物結(jié)合到生物素化抗胰島素抗體上,過(guò)氧酶復(fù)合物的結(jié)合量與樣品中胰島素的濃度成正比。加入底物液后,所顯示的顏色強(qiáng)度與病人樣品中胰島素的濃度成正比。3、試劑盒成分1)微孔板:12×8,96孔,包被抗胰島素的單克隆抗體。2)零標(biāo)準(zhǔn)品:1支,3ml,即用,0μIU/ml。3)標(biāo)準(zhǔn)品1-5:5支,1ml,即用,6.25;12.5;25;50;100μlU/ml。4)酶聯(lián)物:1支,5ml,即用,生物素化的鼠單克隆抗體。5)酶復(fù)合物:1支,7ml,即用,辣根過(guò)氧化物-鏈親和素復(fù)合物。6)TMB底物液:1支14ml即用。7)終止液:1支14ml即用包含0.5M硫酸,請(qǐng)勿接觸終止液,以免刺激或著燒皮膚。8)洗滌液:1瓶,30ml,40倍濃縮,見(jiàn)試劑準(zhǔn)備。注意:用樣品稀釋的零標(biāo)準(zhǔn)品視需要而定。4、實(shí)驗(yàn)所需材料(但試劑盒不提供)1)酶標(biāo)儀2)標(biāo)準(zhǔn)移液器3)吸水紙4)蒸餾水5、試劑的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性所有的未開(kāi)啟的試劑在2-8℃下儲(chǔ)存至保質(zhì)期,不要使用過(guò)期的試劑。所有開(kāi)啟的試劑應(yīng)在2-8℃下儲(chǔ)存。一旦打開(kāi)微孔板的包裝,需將其重新密封。6、樣品的準(zhǔn)備將所有的試劑和所需要的板條在使用前平衡至室溫。洗滌液:用1170ml的蒸餾水稀釋30ml濃縮的洗滌液,Z終得到的容積為1200ml,稀釋好的洗滌液在室溫下可穩(wěn)定存放兩個(gè)星期。7、樣品的收集此ELISA試劑盒可使用血清也可使用(只有肝素或檸檬酸鹽抗凝的血漿)血漿作為樣品。不能使用明顯溶血黃疸和脂血的樣品。血清:靜脈穿刺采集全血,待其凝血,在室溫下離心分離血清。血漿:將全血采集到含有抗凝劑的離心管,采集后立即離心分離。8、樣品的儲(chǔ)存:樣品蓋好蓋子后,可在實(shí)驗(yàn)前2-8℃下儲(chǔ)存5天,要更長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存,應(yīng)在-20℃下凍存。在開(kāi)始實(shí)驗(yàn)前應(yīng)避免反復(fù)凍融樣品。9、樣品的稀釋?zhuān)涸?*次實(shí)驗(yàn)中,要是樣品的濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品,則樣品應(yīng)用按實(shí)驗(yàn)步驟所描述的10倍或100倍稀釋。在計(jì)算濃度時(shí)需乘以此稀釋度。例子:a)按1:10稀釋?zhuān)?0μL的血清+90μL的零標(biāo)準(zhǔn)品(充分搖勻)。b)按1:100釋稀:10μL按a)稀釋的血清+90μL的零標(biāo)準(zhǔn)品(充分搖勻)10、實(shí)驗(yàn)步驟所有的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品都必須做雙份檢測(cè)以確保所有微孔的檢測(cè)條件都一樣。1)將所需數(shù)目的板條置于板架上。。2)用一次性吸嘴將標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)控品和樣品分別25μL加入相應(yīng)的檢測(cè)孔中。3)每孔加入25μL的酶聯(lián)物。4)充分混合10秒,在此步驟中充分混合非常重要。5)室溫下溫育30分鐘。6)快速棄去檢測(cè)孔中的內(nèi)含物,每孔加入400μL的洗滌液洗板三次,在吸水紙上拍干以除去殘余液體。注意:洗板步驟是否正確操作會(huì)明顯影響實(shí)驗(yàn)的靈敏度和極ng確度。7)每孔加入50μL的酶復(fù)合物。8)在室溫下溫育30分鐘。9)快速棄去檢測(cè)孔中的內(nèi)含物,每孔加入400μL的洗滌液洗板三次,在吸水紙上拍干以除去殘余液體。10)每孔加入50μL的底物液。11)在室溫下溫育15分鐘。12)每孔加入50μL的終止液終止反應(yīng)。13)在加終止液后10分鐘內(nèi)于450±10nm處讀取OD值。11、計(jì)算結(jié)果:1)計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)控品和病人樣品的平均吸光度。2)以吸光率為Y軸,濃度為X軸,按照從標(biāo)準(zhǔn)品中獲得的平均吸光率和其相對(duì)應(yīng)的濃度值,繪制一條標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。3)利用樣品的平均吸光率,在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上得出其相應(yīng)的濃度值,4)自動(dòng)方法:使用計(jì)算機(jī)三次方模式四參數(shù)模式或雙對(duì)數(shù)函數(shù)的計(jì)算機(jī)程序可得到結(jié)果。5)樣品的濃度可從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上直接獲取。樣品的濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的濃度則需進(jìn)一步稀釋。在計(jì)算濃度的時(shí)候,要乘以樣品的稀釋倍數(shù)。下面是胰島素ELISA的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的典型例子。標(biāo)準(zhǔn)品吸光率(450nm)零標(biāo)準(zhǔn)品(0μIU/ml)0.03標(biāo)準(zhǔn)品1(6.25μIU/ml)0.07標(biāo)準(zhǔn)品2(12.5μIU/ml)0.14標(biāo)準(zhǔn)品3(25μIU/ml)0.35標(biāo)準(zhǔn)品4(50μIU/ml)0.88標(biāo)準(zhǔn)品5(100μIU/ml)2.05參考值:建議各實(shí)驗(yàn)室建立自己的正常值與非正常值。在一明顯正常成年人的研究中,用DRG公司的胰島素ELISA試劑盒進(jìn)行檢測(cè)得到如下數(shù)值:2-25μIU/ml本譯文僅供參考,詳情請(qǐng)以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理:深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司公司地址:深圳市蛇口沿山路10號(hào)6層電話(huà):0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費(fèi)電話(huà):800-8306296傳真:0755-26814431[詳細(xì)]
-
2018-11-14 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
Copyright 2004-2026 yiqi.com All Rights Reserved , 未經(jīng)書(shū)面授權(quán) , 頁(yè)面內(nèi)容不得以任何形式進(jìn)行復(fù)制
參與評(píng)論
登錄后參與評(píng)論