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人胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒說明書
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本文由 上海喬羽生物科技有限公司 整理匯編
2018-11-09 10:00 215閱讀次數(shù)
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人胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中胰島素(INS)的活性。上海喬羽生物科技有限公司ELISA試劑盒說明書關(guān)鍵詞:ELISA試劑盒說明書、酶聯(lián)免疫試劑盒、分析檢測試劑盒實驗原理:人胰島素(INS)ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人胰島素(INS)水平。用純化的人胰島素(INS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰島素(INS),再與HRP標(biāo)記的羊抗人抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰島素(INS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人胰島素(INS)濃度。
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人胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒說明書
- 人胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中胰島素(INS)的活性。上海喬羽生物科技有限公司ELISA試劑盒說明書關(guān)鍵詞:ELISA試劑盒說明書、酶聯(lián)免疫試劑盒、分析檢測試劑盒實驗原理:人胰島素(INS)ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人胰島素(INS)水平。用純化的人胰島素(INS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰島素(INS),再與HRP標(biāo)記的羊抗人抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰島素(INS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人胰島素(INS)濃度。[詳細(xì)]
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2018-11-09 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人胰島素(INS)ELISA試劑盒
- 人胰島素(INS)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-28 00:30
報價單
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人胰島素(INS)檢測試劑盒
- 人胰島素(INS)檢測試劑盒[詳細(xì)]
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2015-03-16 00:00
期刊論文
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人胰島素(Ins)ELISA試劑盒使用說明書
- 使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中胰島素(Ins)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人胰島素(Ins)水平。用純化的人胰島素(Ins)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰島素(Ins),再與HRP標(biāo)記的人胰島素(Ins)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人胰島素(Ins)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人胰島素(Ins)濃度。[詳細(xì)]
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2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊
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人胰島素(Ins)ELISA試劑盒說明
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T1mIU/L-40mIU/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中胰島素(Ins)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人胰島素(Ins)水平。用純化的人胰島素(Ins)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰島素(Ins),再與HRP標(biāo)記的人胰島素(Ins)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人胰島素(Ins)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人胰島素(Ins)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(80mIU/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。40mIU/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20mIU/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10mIU/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5mIU/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.5mIU/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。8.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。計算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細(xì)]
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2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊
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小鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒說明書
- l本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中小鼠胰島素(INS)的含量。l有效期:6個月l保存條件:2-8℃實驗原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被小鼠胰島素(INS)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素(INS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。[詳細(xì)]
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2024-09-28 00:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠胰島素(INS)定量檢測試劑盒(ELISA)
- 本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。大鼠胰島素(INS)定量檢測試劑盒(ELISA)使用說明書【試劑盒名稱】大鼠胰島素(INS)定量檢測試劑盒(ELISA)【試劑盒用途】定量檢測大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中胰島素(INS)的含量?!緳z測原理】本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本加入到預(yù)先包被大鼠胰島素(INS)單克隆抗體透明酶標(biāo)包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分,再加入酶標(biāo)工作液,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中大鼠胰島素(INS)濃度呈正相關(guān),450nm波長下測定OD值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的OD值,計算樣本中大鼠胰島素(INS)含量?!驹噭┖薪M成】1酶標(biāo)包被板12孔×8條7顯色劑A液6mL2標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL×6管8顯色劑B液6mL320倍濃縮洗滌液25mL9終止液6mL4樣本稀釋液6mL10說明書1份5特殊稀釋液6mL11封板膜2張6酶標(biāo)試劑6mL12密封袋1個備注:標(biāo)準(zhǔn)品(1號→6號)濃度依次為:16、8、4、2、1、0.5mU/L。【需要而未提供的試劑和器材】1、37℃恒溫箱2、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀3、精密移液器及一次性吸頭4、蒸餾水5、一次性試管6、吸水紙【操作步驟】1、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL;待測樣本孔中先2加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板)。6、加酶標(biāo)工作液:每孔加入酶標(biāo)工作液50μL,空白對照孔不加。7、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。8、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板)。9、顯色:每孔先加入顯色劑A液50μL,再加入顯色劑B液50μL,平板混勻器混勻30s(或用手輕輕震蕩混勻30s),37℃避光顯色15min。10、終止:取出酶標(biāo)板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11、測定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。12、計算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值,計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。Z終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)?!緲颖疽蟆?、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的YZ劑。2、標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能立即試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3、樣本應(yīng)充分離心,不得有溶血及顆粒?!咀⒁馐马棥?、實驗嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,實驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。2、酶標(biāo)包被板開封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計算結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。5、本試劑盒定量范圍為0.5-16mU/L,超過此范圍,為標(biāo)準(zhǔn)曲線延伸計算所得,不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準(zhǔn)確結(jié)果(0.5-16mU/L范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本Z終濃度。6、若顯色過淺,可適當(dāng)延長底物溫育時間。7、為避免交叉污染,標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復(fù)使用封板膜。8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號的試劑不得混用。9、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。3【操作程序總結(jié)】準(zhǔn)備試劑,樣品和標(biāo)準(zhǔn)品加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,37℃反應(yīng)30分鐘洗板4次,加入酶標(biāo)試劑,37℃反應(yīng)30分鐘洗板4次,加入顯色液A、B,37℃顯色15分鐘加入終止液15分鐘之內(nèi)讀OD值計算【檢測范圍】0.5mU/L-16mU/L【規(guī)格】96人份/盒【貯藏】2-8℃,避光防潮保存。【有效期】6個月[詳細(xì)]
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2018-09-03 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠(Rat)胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒
- 檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被胰島素(INS)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰島素(INS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。[詳細(xì)]
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2018-12-02 10:00
產(chǎn)品樣冊
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豬胰島素(INS)定量檢測試劑盒(ELISA)
- 上海金穗生物科技有限公司是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品研發(fā)和銷售的綜合性生命科學(xué)公司,公司以超前的市場觀念、良好的產(chǎn)品形象以及雄厚的技術(shù)實力取得了多家國內(nèi)外知名公司的代理權(quán),目前擁有國內(nèi)外各產(chǎn)品,坐擁上海,輻射全ZG。面向各地科研院所、高等院校、衛(wèi)生檢驗檢疫部門、工農(nóng)業(yè)部門、環(huán)境保護(hù)部門相關(guān)實驗室和制藥、食品、飲料、化工、畜牧、水產(chǎn)等企業(yè)提供服務(wù)。市場業(yè)務(wù)遍布全國各地,公司始終堅持不懈地跟蹤Zxin科研方向,掌控Zxin國際前沿科學(xué)新技術(shù),不斷進(jìn)取,為廣大客戶提供**、Z快的服務(wù)和優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品而不懈努力。400-021-1237[詳細(xì)]
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2024-09-29 14:41
產(chǎn)品樣冊
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豬胰島素(INS)ELISA試劑盒
- 豬胰島素(INS)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-12 00:00
報價單
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豬胰島素(INS)ELISA試劑盒
- 豬胰島素(INS)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-28 18:27
其它
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小鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒
- 小鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-28 00:27
操作手冊
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大鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒
- 大鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-28 01:11
安裝說明
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大鼠胰島素(INS)檢測試劑盒
- 大鼠胰島素(INS)檢測試劑盒[詳細(xì)]
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2014-09-29 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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免費代測人(Human)胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒
- 人(Human)胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿試驗原理:INS試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知INS濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將INS和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中INS的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制:試劑盒成份96孔配置48孔配置96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)塑料膜板蓋1塊半塊標(biāo)準(zhǔn)品:200ng/ml1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)生物素標(biāo)記的抗INS抗體1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)親和鏈酶素-HRP1瓶(12ml)1瓶(5ml)洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)自備材料:1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。4.樣品收集、處理及保存方法:1、血清……操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。5、保存……如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人(Human)胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒操作注意事項:●試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存?!駥嶒炛胁挥玫陌鍡l應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)?!癫挥玫钠渌噭?yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。●使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器?!袷褂酶蓛舻乃芰先萜髋渲孟礈煲骸J褂们俺浞只靹蛟噭┖欣锏母鞣N成份及樣品?!竦孜顰應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值?!窦尤朐噭┑捻樞驊?yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣?!癜凑照f明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。安全性:1.避免直接接觸終止液和底物A、B,一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。試劑的準(zhǔn)備:1.標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備,不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:200ng/ml(6號標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul100ng/ml(5號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ng/ml(4號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25ng/ml(3號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液12.5ng/ml(2號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液6.25ng/ml(1號標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0ng/ml(空白對照)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。試劑盒性能:1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。操作步驟:1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育5分鐘。避免光照。8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。人(Human)胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒結(jié)果判斷與分析:1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的INS標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的INS含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。3、檢測值范圍:0-200ng/ml4、敏感度:0.1ng/ml[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人胰島素原(Proinsulin)ELISA試劑盒說明書
- 人胰島素原(Proinsulin)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人Proinsulin單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的Proinsulin與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人Proinsulin,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,Proinsulin濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中Proinsulin濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清可能需要稀釋,請先做預(yù)實驗,以確定稀釋倍數(shù)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)Proinsulin含量,再乘上稀釋倍數(shù)。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的Proinsulin檢測濃度小于14pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人Proinsulin。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于9.7%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒說明書
- 人胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中人胰島素自身抗體(IAA)含量。實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中人胰島素自身抗體(IAA)水平。用純化的人胰島素自身抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入胰島素自身抗體,再與HRP標(biāo)記的胰島素自身抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰島素自身抗體(IAA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人胰島素自身抗體(IAA)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:180pmol/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為120pmol/L,80pmol/L,40pmol/L,20pmol/L,10pmol/L)。加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項:試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。計算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%檢測范圍:5pmol/L-160pmol/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細(xì)]
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2024-09-29 08:28
產(chǎn)品樣冊
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人胰島素自身抗體(IAA)elisa試劑盒說明書
- 人胰島素自身抗體(IAA)elisa試劑盒說明書[詳細(xì)]
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2024-10-08 05:21
產(chǎn)品樣冊
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人胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA檢測試劑盒使用 說明書
- 人胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA檢測試劑盒使用 說明書[詳細(xì)]
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2014-08-25 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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人胰島素原(PI)ELISA試劑盒
- 人胰島素原(PI)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2015-03-18 00:00
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