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大鼠胰島素(INS)定量檢測試劑盒(ELISA)
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本文由 北京冬歌博業(yè)生物科技有限公司 整理匯編
2018-09-03 10:00 1209閱讀次數(shù)
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本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫(yī)學診斷。大鼠胰島素(INS)定量檢測試劑盒(ELISA)使用說明書【試劑盒名稱】大鼠胰島素(INS)定量檢測試劑盒(ELISA)【試劑盒用途】定量檢測大鼠血清、血漿及相關液體樣本中胰島素(INS)的含量?!緳z測原理】本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標準品、待測樣本加入到預先包被大鼠胰島素(INS)單克隆抗體透明酶標包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分,再加入酶標工作液,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉化為藍色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中大鼠胰島素(INS)濃度呈正相關,450nm波長下測定OD值,根據(jù)標準品和樣品的OD值,計算樣本中大鼠胰島素(INS)含量?!驹噭┖薪M成】1酶標包被板12孔×8條7顯色劑A液6mL2標準品0.3mL×6管8顯色劑B液6mL320倍濃縮洗滌液25mL9終止液6mL4樣本稀釋液6mL10說明書1份5特殊稀釋液6mL11封板膜2張6酶標試劑6mL12密封袋1個備注:標準品(1號→6號)濃度依次為:16、8、4、2、1、0.5mU/L?!拘枰刺峁┑脑噭┖推鞑摹?、37℃恒溫箱2、標準規(guī)格酶標儀3、精密移液器及一次性吸頭4、蒸餾水5、一次性試管6、吸水紙【操作步驟】1、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復溫平衡30分鐘。2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。3、加標準品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標包被板,固定于框架上,分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準品50μL;待測樣本孔中先2加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。6、加酶標工作液:每孔加入酶標工作液50μL,空白對照孔不加。7、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。8、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。9、顯色:每孔先加入顯色劑A液50μL,再加入顯色劑B液50μL,平板混勻器混勻30s(或用手輕輕震蕩混勻30s),37℃避光顯色15min。10、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μL,終止反應(顏色由藍色立轉黃色)。11、測定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。12、計算:根據(jù)標準品的濃度及對應的OD值,計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應的樣品濃度,也可以使用各種應用軟件來計算。Z終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。【樣本要求】1、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的YZ劑。2、標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能立即試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。3、樣本應充分離心,不得有溶血及顆粒?!咀⒁馐马棥?、實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。2、酶標包被板開封后如未用完,應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。3、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計算結果乘以5才是樣本實際濃度。5、本試劑盒定量范圍為0.5-16mU/L,超過此范圍,為標準曲線延伸計算所得,不做為準確定量結果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結果(0.5-16mU/L范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本Z終濃度。6、若顯色過淺,可適當延長底物溫育時間。7、為避免交叉污染,標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復使用封板膜。8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號的試劑不得混用。9、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。3【操作程序總結】準備試劑,樣品和標準品加入準備好的樣品和標準品,37℃反應30分鐘洗板4次,加入酶標試劑,37℃反應30分鐘洗板4次,加入顯色液A、B,37℃顯色15分鐘加入終止液15分鐘之內(nèi)讀OD值計算【檢測范圍】0.5mU/L-16mU/L【規(guī)格】96人份/盒【貯藏】2-8℃,避光防潮保存。【有效期】6個月
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大鼠胰島素(INS)定量檢測試劑盒(ELISA)
- 本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫(yī)學診斷。大鼠胰島素(INS)定量檢測試劑盒(ELISA)使用說明書【試劑盒名稱】大鼠胰島素(INS)定量檢測試劑盒(ELISA)【試劑盒用途】定量檢測大鼠血清、血漿及相關液體樣本中胰島素(INS)的含量?!緳z測原理】本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標準品、待測樣本加入到預先包被大鼠胰島素(INS)單克隆抗體透明酶標包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分,再加入酶標工作液,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉化為藍色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中大鼠胰島素(INS)濃度呈正相關,450nm波長下測定OD值,根據(jù)標準品和樣品的OD值,計算樣本中大鼠胰島素(INS)含量?!驹噭┖薪M成】1酶標包被板12孔×8條7顯色劑A液6mL2標準品0.3mL×6管8顯色劑B液6mL320倍濃縮洗滌液25mL9終止液6mL4樣本稀釋液6mL10說明書1份5特殊稀釋液6mL11封板膜2張6酶標試劑6mL12密封袋1個備注:標準品(1號→6號)濃度依次為:16、8、4、2、1、0.5mU/L?!拘枰刺峁┑脑噭┖推鞑摹?、37℃恒溫箱2、標準規(guī)格酶標儀3、精密移液器及一次性吸頭4、蒸餾水5、一次性試管6、吸水紙【操作步驟】1、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復溫平衡30分鐘。2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。3、加標準品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標包被板,固定于框架上,分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準品50μL;待測樣本孔中先2加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。6、加酶標工作液:每孔加入酶標工作液50μL,空白對照孔不加。7、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。8、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。9、顯色:每孔先加入顯色劑A液50μL,再加入顯色劑B液50μL,平板混勻器混勻30s(或用手輕輕震蕩混勻30s),37℃避光顯色15min。10、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μL,終止反應(顏色由藍色立轉黃色)。11、測定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。12、計算:根據(jù)標準品的濃度及對應的OD值,計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應的樣品濃度,也可以使用各種應用軟件來計算。Z終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)?!緲颖疽蟆?、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的YZ劑。2、標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能立即試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。3、樣本應充分離心,不得有溶血及顆粒?!咀⒁馐马棥?、實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。2、酶標包被板開封后如未用完,應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。3、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計算結果乘以5才是樣本實際濃度。5、本試劑盒定量范圍為0.5-16mU/L,超過此范圍,為標準曲線延伸計算所得,不做為準確定量結果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結果(0.5-16mU/L范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本Z終濃度。6、若顯色過淺,可適當延長底物溫育時間。7、為避免交叉污染,標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復使用封板膜。8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號的試劑不得混用。9、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。3【操作程序總結】準備試劑,樣品和標準品加入準備好的樣品和標準品,37℃反應30分鐘洗板4次,加入酶標試劑,37℃反應30分鐘洗板4次,加入顯色液A、B,37℃顯色15分鐘加入終止液15分鐘之內(nèi)讀OD值計算【檢測范圍】0.5mU/L-16mU/L【規(guī)格】96人份/盒【貯藏】2-8℃,避光防潮保存?!居行凇?個月[詳細]
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2018-09-03 10:00
產(chǎn)品樣冊
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豬胰島素(INS)定量檢測試劑盒(ELISA)
- 上海金穗生物科技有限公司是一家專門從事生物技術相關產(chǎn)品研發(fā)和銷售的綜合性生命科學公司,公司以超前的市場觀念、良好的產(chǎn)品形象以及雄厚的技術實力取得了多家國內(nèi)外知名公司的代理權,目前擁有國內(nèi)外各產(chǎn)品,坐擁上海,輻射全ZG。面向各地科研院所、高等院校、衛(wèi)生檢驗檢疫部門、工農(nóng)業(yè)部門、環(huán)境保護部門相關實驗室和制藥、食品、飲料、化工、畜牧、水產(chǎn)等企業(yè)提供服務。市場業(yè)務遍布全國各地,公司始終堅持不懈地跟蹤Zxin科研方向,掌控Zxin國際前沿科學新技術,不斷進取,為廣大客戶提供**、Z快的服務和優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品而不懈努力。400-021-1237[詳細]
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2024-09-29 14:41
產(chǎn)品樣冊
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大鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒
- 大鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-28 01:11
安裝說明
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大鼠胰島素(INS)檢測試劑盒
- 大鼠胰島素(INS)檢測試劑盒[詳細]
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2014-09-29 00:00
標準
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大鼠(Rat)胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒
- 檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被胰島素(INS)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰島素(INS)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。[詳細]
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2018-12-02 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒說明書
- 人胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中胰島素(INS)的活性。上海喬羽生物科技有限公司ELISA試劑盒說明書關鍵詞:ELISA試劑盒說明書、酶聯(lián)免疫試劑盒、分析檢測試劑盒實驗原理:人胰島素(INS)ELISA試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人胰島素(INS)水平。用純化的人胰島素(INS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰島素(INS),再與HRP標記的羊抗人抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰島素(INS)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人胰島素(INS)濃度。[詳細]
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2018-11-09 10:00
產(chǎn)品樣冊
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豬胰島素(INS)ELISA試劑盒
- 豬胰島素(INS)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-12 00:00
報價單
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豬胰島素(INS)ELISA試劑盒
- 豬胰島素(INS)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-28 18:27
其它
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小鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒
- 小鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-28 00:27
操作手冊
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人胰島素(INS)ELISA試劑盒
- 人胰島素(INS)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-28 00:30
報價單
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人胰島素(INS)檢測試劑盒
- 人胰島素(INS)檢測試劑盒[詳細]
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2015-03-16 00:00
期刊論文
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人胰島素(Ins)ELISA試劑盒說明
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T1mIU/L-40mIU/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中胰島素(Ins)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人胰島素(Ins)水平。用純化的人胰島素(Ins)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰島素(Ins),再與HRP標記的人胰島素(Ins)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人胰島素(Ins)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人胰島素(Ins)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(80mIU/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。40mIU/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液20mIU/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液10mIU/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液5mIU/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液2.5mIU/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。8.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊
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小鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒說明書
- l本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中小鼠胰島素(INS)的含量。l有效期:6個月l保存條件:2-8℃實驗原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被小鼠胰島素(INS)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素(INS)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。[詳細]
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2024-09-28 00:00
產(chǎn)品樣冊
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人胰島素(Ins)ELISA試劑盒使用說明書
- 使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中胰島素(Ins)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人胰島素(Ins)水平。用純化的人胰島素(Ins)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰島素(Ins),再與HRP標記的人胰島素(Ins)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人胰島素(Ins)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人胰島素(Ins)濃度。[詳細]
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2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊
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免費代測人(Human)胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒
- 人(Human)胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標本:血清或血漿試驗原理:INS試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知INS濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將INS和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中INS的濃度呈比例關系。試劑盒內(nèi)容及其配制:試劑盒成份96孔配置48孔配置96/48人份酶標板1塊板(96T)半塊板(48T)塑料膜板蓋1塊半塊標準品:200ng/ml1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)標準品稀釋緩沖液1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)生物素標記的抗INS抗體1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)親和鏈酶素-HRP1瓶(12ml)1瓶(5ml)洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)自備材料:1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。4.樣品收集、處理及保存方法:1、血清……操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。2、血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。5、保存……如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人(Human)胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒操作注意事項:●試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存?!駥嶒炛胁挥玫陌鍡l應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)?!癫挥玫钠渌噭b好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用?!袷褂靡淮涡缘奈^以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器?!袷褂酶蓛舻乃芰先萜髋渲孟礈煲?。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品?!竦孜顰應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值?!窦尤朐噭┑捻樞驊恢?,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣?!癜凑照f明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。安全性:1.避免直接接觸終止液和底物A、B,一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。試劑的準備:1.標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:200ng/ml(6號標準品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul100ng/ml(5號標準品)100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液50ng/ml(4號標準品)100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液25ng/ml(3號標準品)100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液12.5ng/ml(2號標準品)100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液6.25ng/ml(1號標準品)100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0ng/ml(空白對照)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。試劑盒性能:1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應。3.重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。操作步驟:1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育5分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。人(Human)胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒結果判斷與分析:1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的INS標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的INS含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度,再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。3、檢測值范圍:0-200ng/ml4、敏感度:0.1ng/ml[詳細]
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2018-09-14 10:01
產(chǎn)品樣冊
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大鼠胰島素(Insulin)ELISA試劑盒
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠胰島素(Insulin)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠Insulin單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的Insulin與單抗結合,加入生物素化的抗大鼠Insulin,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,Insulin濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中Insulin濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。正常標本測定前用標本稀釋液至少作1:10稀釋(取20ul,加標本稀釋液180ul,稀釋10倍)。2.標準品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成40ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應Insulin含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的Insulin檢測濃度小于30pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠Insulin。不與大鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)定量檢測試劑盒(ELISA)
- www.biokanu.com本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫(yī)學診斷。大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)定量檢測試劑盒(ELISA)使用說明書【試劑盒名稱】大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)試劑盒(ELISA)【試劑盒用途】定量檢測大鼠血清、血漿及相關液體樣本中巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)的含量?!緳z測原理】本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標準品、待測樣本加入到預先包被大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)抗體透明酶標包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分,再加入酶標工作液,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉化為藍色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)濃度呈正相關,450nm波長下測定OD值,根據(jù)標準品和樣品的OD值,計算樣本中大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)含量?!驹噭┖薪M成】1酶標包被板12孔×8條7顯色劑A液6mL2標準品:80pg/mL0.6mL8顯色劑B液6mL320倍濃縮洗滌液25mL9終止液6mL4標準品稀釋液6mL10說明書1份5樣本稀釋液6mL11封板膜2張6酶標試劑6mL12密封袋1個備注:標準品用標準品稀釋液依次稀釋為:80、40、20、10、5、2.5pg/mL【需要而未提供的試劑和器材】1、37℃恒溫箱標準規(guī)格酶標儀精密移液器及一次性吸頭蒸餾水一次性試管吸水紙【操作步驟】1、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復溫平衡30分鐘。2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。3、加標準品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標包被板,固定于框架上,分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。6、加酶標工作液:每孔加入酶標工作液50μL,空白對照孔不加。7、溫育:重復4的操作。8、洗板:重復5的操作。9、顯色:每孔先加入顯色劑A液50μL,再加入顯色劑B液50μL,37℃避光顯色15min。10、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μL,終止反應(顏色由藍色立轉黃色)。11、測定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。12、計算:根據(jù)標準品的濃度及對應的OD值,計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應的樣品濃度,也可以使用各種應用軟件來計算。Z終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)?!緲颖疽蟆?、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的YZ劑。2、標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能立即試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。3、樣本應充分離心,不得有溶血及顆粒。【注意事項】1、實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。2、酶標包被板開封后如未用完,應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。3、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計算結果乘以5才是樣本實際濃度。5、本試劑盒定量范圍為2.5-80pg/mL,超過此范圍,為標準曲線延伸計算所得,不做為準確定量結果,請用標準品稀釋液稀釋后測定準確結果(2.5-80pg/mL范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本Z終濃度。6、若顯色過淺,可適當延長底物溫育時間。7、為避免交叉污染,標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復使用封板膜。8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號的試劑不得混用。9、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下?!静僮鞒绦蚩偨Y】準備試劑,樣品和標準品加入準備好的樣品和標準品,37℃反應30分鐘洗板4次,加入酶標試劑,37℃反應30分鐘洗板4次,加入顯色液A、B,37℃顯色15分鐘加入終止液15分鐘之內(nèi)讀OD值計算【檢測范圍】2.5-80pg/mL【規(guī)格】96人份/盒【貯藏】2-8℃,避光防潮保存。【有效期】6個月[詳細]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠c-fos(c-fos)定量檢測試劑盒(ELISA)
- www.biokanu.com本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫(yī)學診斷。大鼠c-fos(c-fos)定量檢測試劑盒(ELISA)使用說明書【試劑盒名稱】大鼠c-fos(c-fos)定量檢測試劑盒(ELISA)【試劑盒用途】定量檢測大鼠血清、血漿、組織及其它相關液體樣本中c-fos(c-fos)的含量?!緳z測原理】本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標準品、待測樣本加入到預先包被大鼠c-fos(c-fos)抗體透明酶標包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分,再加入酶標工作液,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉化為藍色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中大鼠c-fos(c-fos)濃度呈正相關,450nm波長下測定OD值,根據(jù)標準品和樣品的OD值,計算樣本中大鼠c-fos(c-fos)含量?!驹噭┖薪M成】1酶標包被板12孔×8條7顯色劑A液6mL2標準品(160pg/mL)0.6mL8顯色劑B液6mL320倍濃縮洗滌液25mL9終止液6mL4樣本稀釋液6mL10說明書1份5標準品稀釋液6mL11封板膜2張6酶標試劑6mL12密封袋1個備注:標準品用標準品稀釋液倍比稀釋為:160、80、40、20、10、5pg/mL.【需要而未提供的試劑和器材】1、37℃恒溫箱標準規(guī)格酶標儀精密移液器及一次性吸頭蒸餾水一次性試管吸水紙【操作步驟】1、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復溫平衡30分鐘。2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。3、加標準品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標包被板,固定于框架上,分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。6、加酶標工作液:每孔加入酶標工作液50μL,空白對照孔不加。7、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。8、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。9、顯色:每孔先加入顯色劑A液50μL,再加入顯色劑B液50μL,平板混勻器混勻30s(或用手輕輕震蕩混勻30s),37℃避光顯色15min。10、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μL,終止反應(顏色由藍色立轉黃色)。11、測定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。12、計算:根據(jù)標準品的濃度及對應的OD值,計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應的樣品濃度,也可以使用各種應用軟件來計算。Z終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)?!緲颖疽蟆?、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的YZ劑。2、標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能立即試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。3、樣本應充分離心,不得有溶血及顆粒?!咀⒁馐马棥?、實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。2、酶標包被板開封后如未用完,應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。3、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計算結果乘以5才是樣本實際濃度。5、若顯色過淺,可適當延長底物溫育時間。6、為避免交叉污染,標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復使用封板膜。7、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號的試劑不得混用。8、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下?!静僮鞒绦蚩偨Y】準備試劑,樣品和標準品加入準備好的樣品和標準品,37℃反應30分鐘洗板4次,加入酶標試劑,37℃反應30分鐘洗板4次,加入顯色液A、B,37℃顯色15分鐘加入終止液15分鐘之內(nèi)讀OD值計算【檢測范圍】5pg/mL160pg/mL【規(guī)格】96T/盒【貯藏】2-8℃,避光防潮保存?!居行凇?個月[詳細]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠胰島素受體(ISR-)ELISA試劑盒
- 大鼠胰島素受體(ISR-)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-10 00:00
安裝說明
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大鼠胰島素原(PI)ELISA試劑盒
- 大鼠胰島素原(PI)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-10 00:00
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