本文由 通蔚試劑（上海）有限公司 整理匯編

2018-11-04 10:00 401閱讀次數(shù)

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• 小鼠IL-10 免疫組化試劑盒說明書

  小鼠IL-10免疫組化試劑盒說明書該試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物（HRPStreptavidinConjugate，HRP-SA）為基礎(chǔ)，可用于檢測細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性IL-10抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的IL-10一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后，用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合，Z后加入HRP-SA，形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物，顯微鏡下觀察成像。小鼠IL-10免疫組化試劑盒所含試劑：試劑A通透液：0.1%Triton-X10010mL（選用）試劑B封閉緩沖液（封閉用）20mL試劑C（原裝進(jìn)口分裝）已稀釋的即用型IL-10一抗（2.5ml）試劑D（原裝進(jìn)口分裝）生物素化羊抗兔IgG1支（濃度1.5mg/mL，稀釋比為1:300~1:500）50μL+抗體稀釋液20ml試劑EHRP-SA復(fù)合物1支（濃度1μM，稀釋比1:50~1:200）100μL試劑FDAB顯色液5ml用戶自備試劑：1．10mMTBS（pH7.2~7.4）三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL，濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4，Z后定容至1000mLTBS-T：TBS+Tween20（0.05%體積比）2．抗原修復(fù)液（依檢測抗原不同而選擇不同的修復(fù)液）10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檸檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL，濃鹽酸調(diào)pH值至6.0，Z后定容至1000mL或：0.5MEDTA修復(fù)液（pH8.0）EDTA2H2O186.1g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水700mL，用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0，Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實(shí)驗(yàn)步驟（建議方案）：小鼠IL-10免疫組化試劑盒石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片：將待做切片置于切片架上，于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr；2.脫蠟：切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10min；3.水化：切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇5min，95%乙醇2次（每次2min），85%乙醇2min；75%乙醇2min，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min；4.抗原修復(fù)：根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min，TBS洗滌（2×2min）（具體修法見附1）*注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第5步封閉。5.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育30min；6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗），37℃濕盒孵育2hr或4℃7.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；8.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育10min；9.加二抗：滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑D），37℃濕盒中孵育30min；10.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；11.封閉：滴加試劑Tween20，37℃濕盒孵育封閉20min；12.加HRP-SA：滴加用試劑C稀釋的試劑E（1：50~200，終濃度5~20nM），37℃濕盒中孵育30min；13.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min），TBS洗滌（2×5min）；14.顯色：應(yīng)用DAB溶液（試劑F）顯色；15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；16.封片：待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；17.觀察成像：顯微鏡下觀察成像。注意事項(xiàng)：1.修復(fù)后緩沖液須自然冷卻，自來水沖洗后方能把切片取出，驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到，用過的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。3.若試劑為微量濃縮液，用前應(yīng)低速離心，將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌，以便洗去組織上殘留的Tween20，否則會(huì)影響結(jié)果觀察。5.如須復(fù)染細(xì)胞核，則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。附1：抗原修法常用抗原修復(fù)液：檸檬酸緩沖液（0.01MpH6.0）、EDTA抗原修復(fù)液（pH8.0或9.0）等等。一、酶消化修復(fù)法切片脫蠟水化處理，TBS沖洗，在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶，37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或繼續(xù)微波10~15min，取出微波盒冷卻至室溫后，自來水沖洗，取出切片。因不同微波爐微波處理時(shí)間存在差異，須自行調(diào)整。三、小鼠IL-10免疫組化試劑盒直接高壓抗原修復(fù)法取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰，將組織切片置于耐高溫切片架上，修復(fù)液沸騰后放入切片架，蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)1.5~2.5min即可脫離熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。四、隔水式高壓抗原修復(fù)法不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰，微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰，將切片放入微波盒中，再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)4~8min即可關(guān)閉熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。[詳細(xì)]

  2018-11-04 10:00

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• 小鼠 Thy1 免疫組化試劑盒

  小鼠ELISA試劑盒該試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物（HRPStreptavidinConjugate，HRP-SA）為基礎(chǔ)，可用于檢測細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性Thy1抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的Thy1一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后，用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合，Z后加入HRP-SA，形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物，顯微鏡下觀察成像。試劑盒所含試劑：試劑A通透液：0.1%Triton-X10010mL（選用）試劑B封閉緩沖液（封閉用）20mL試劑C（原裝進(jìn)口分裝）已稀釋的即用型Thy1一抗（2.5ml）試劑D（原裝進(jìn)口分裝）生物素化羊抗兔IgG1支（濃度1.5mg/mL，稀釋比為1:300~1:500）50μL+抗體稀釋液20ml試劑EHRP-SA復(fù)合物1支（濃度1μM，稀釋比1:50~1:200）100μL試劑FDAB顯色液5ml用戶自備試劑：1．10mMTBS（pH7.2~7.4）三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL，濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4，Z后定容至1000mLTBS-T：TBS+Tween20（0.05%體積比）2．抗原修復(fù)液（依檢測抗原不同而選擇不同的修復(fù)液）10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檸檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL，濃鹽酸調(diào)pH值至6.0，Z后定容至1000mL或：0.5MEDTA修復(fù)液（pH8.0）EDTA2H2O186.1g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水700mL，用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0，Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實(shí)驗(yàn)步驟（建議方案）：石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片：將待做切片置于切片架上，于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr；2.脫蠟：切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10min；3.水化：切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇5min，95%乙醇2次（每次2min），85%乙醇2min；75%乙醇2min，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min；4.抗原修復(fù)：根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min，TBS洗滌（2×2min）（具體修法見附1）*注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第5步封閉。5.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育30min；6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗），37℃濕盒孵育2hr或4℃7.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；8.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育10min；9.加二抗：滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑D），37℃濕盒中孵育30min；10.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；11.封閉：滴加試劑Tween20，37℃濕盒孵育封閉20min；12.加HRP-SA：滴加用試劑C稀釋的試劑E（1：50~200，終濃度5~20nM），37℃濕盒中孵育30min；13.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min），TBS洗滌（2×5min）；14.顯色：應(yīng)用DAB溶液（試劑F）顯色；15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；16.封片：待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；17.觀察成像：顯微鏡下觀察成像。小鼠ELISA試劑盒注意事項(xiàng)：1.修復(fù)后緩沖液須自然冷卻，自來水沖洗后方能把切片取出，驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到，用過的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。3.若試劑為微量濃縮液，用前應(yīng)低速離心，將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌，以便洗去組織上殘留的Tween20，否則會(huì)影響結(jié)果觀察。5.如須復(fù)染細(xì)胞核，則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。附11：抗原修法常用抗原修復(fù)液：檸檬酸緩沖液（0.01MpH6.0）、EDTA抗原修復(fù)液（pH8.0或9.0）等等。一、酶消化修復(fù)法切片脫蠟水化處理，TBS沖洗，在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶，37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或繼續(xù)微波10~15min，取出微波盒冷卻至室溫后，自來水沖洗，取出切片。因不同微波爐微波處理時(shí)間存在差異，須自行調(diào)整。三、直接高壓抗原修復(fù)法取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰，將組織切片置于耐高溫切片架上，修復(fù)液沸騰后放入切片架，蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)1.5~2.5min即可脫離熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。四、隔水式高壓抗原修復(fù)法不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰，微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰，將切片放入微波盒中，再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)4~8min即可關(guān)閉熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。[詳細(xì)]

  2018-09-27 10:00

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• 免疫組化試劑盒說明書

  免疫組化試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物（HRPStreptavidinConjugate，HRP-SA）為基礎(chǔ)，可用于檢測血液,細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性Dazl抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的Dazl一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后，用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合，Z后加入HRP-SA，形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物，顯微鏡下觀察成像。用戶自備試劑：1．10mMTBS（pH7.2~7.4）三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL，濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4，Z后定容至1000mLTBS-T：TBS+Tween20（0.05%體積比）2．抗原修復(fù)液（依檢測抗原不同而選擇不同的修復(fù)液）10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檸檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL，濃鹽酸調(diào)pH值至6.0，Z后定容至1000mL或：0.5MEDTA修復(fù)液（pH8.0）EDTA2H2O186.1g加蒸餾水700mL，用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0，Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實(shí)驗(yàn)步驟（建議方案）：石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片：將待做切片置于切片架上，于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr；2.脫蠟：切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10min；3.水化：切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇5min，95%乙醇2次（每次2min），85%乙醇2min；75%乙醇2min，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min；4.抗原修復(fù)：根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min，TBS洗滌（2×2min）（具體修法見附1）*注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第5步封閉。5.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育30min；6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗），37℃濕盒孵育2hr或4℃過一夜；7.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；8.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育10min；9.加二抗：滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑D），37℃濕盒中孵育30min；10.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；11.封閉：滴加試劑Tween20，37℃濕盒孵育封閉20min；12.加HRP-SA：滴加用試劑C稀釋的試劑E（1：50~200，終濃度5~20nM），37℃濕盒中孵育30min；13.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min），TBS洗滌（2×5min）；14.顯色：應(yīng)用DAB溶液（試劑F）顯色；15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；16.封片：待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；17.觀察成像：顯微鏡下觀察成像。注意事項(xiàng)：1.修復(fù)后緩沖液須自然冷卻，自來水沖洗后方能把切片取出，驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到，用過的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。3.若試劑為微量濃縮液，用前應(yīng)低速離心，將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌，以便洗去組織上殘留的Tween20，否則會(huì)影響結(jié)果觀察。5.如須復(fù)染細(xì)胞核，則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。附1：抗原修法常用抗原修復(fù)液：檸檬酸緩沖液（0.01MpH6.0）、EDTA抗原修復(fù)液（pH8.0或9.0）等等。一、酶消化修復(fù)法切片脫蠟水化處理，TBS沖洗，在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶，37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或繼續(xù)微波10~15min，取出微波盒冷卻至室溫后，自來水沖洗，取出切片。因不同微波爐微波處理時(shí)間存在差異，須自行調(diào)整。三、直接高壓抗原修復(fù)法取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰，將組織切片置于耐高溫切片架上，修復(fù)液沸騰后放入切片架，蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)1.5~2.5min即可脫離熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。四、隔水式高壓抗原修復(fù)法不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰，微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰，將切片放入微波盒中，再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)4~8min即可關(guān)閉熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。[詳細(xì)]

  2018-11-18 10:00

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• 小鼠白介素10（IL-10）ELISA試劑盒使用說明書

  小鼠白介素10（IL-10）ELISA試劑盒使用說明書國內(nèi)權(quán)威的科研試劑供應(yīng)商，喬羽生物專業(yè)經(jīng)營進(jìn)口分裝和原裝、國產(chǎn)的Elisa試劑盒，品質(zhì)保證，技術(shù)嚴(yán)格，無效果退款退貨。Elisakit規(guī)格：48孔配置/96孔配置酶標(biāo)試劑：3ml×1瓶（48）/6ml×1瓶（96）本試劑僅供研究使用標(biāo)本：血清或血漿上海喬羽生物專業(yè)供應(yīng)使用目的：本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本白介素10（IL-10）含量。試驗(yàn)原理：IL-10試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知IL-10濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將IL-10和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中IL-10的濃度呈比例關(guān)系。[詳細(xì)]

  2018-11-09 10:00

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• 免疫組化染色試劑盒說明書

  免疫組化染色試劑盒說明書[詳細(xì)]

  2014-06-23 00:00

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• 免疫組化試劑盒使用說明書

  上海哈靈生物科技有限公司免疫組化試劑盒使用說明書保存方法：2-8℃保存。有效期：一年。生產(chǎn)日期：見封口。工作原理：辣根過氧化物酶（HRP）的分子量（40000），它不會(huì)遮蓋抗原的結(jié)合部位，具有較高活性及特異性，可溶性佳，生成的產(chǎn)物不擴(kuò)散，可作用于多種底物，產(chǎn)生不同顏色且HRP穿透力強(qiáng)，易進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。DAB在H2O2存在的情況下，可以作為HRP的電子供體，產(chǎn)生褐色的不溶顆粒，可作為顯色的試劑。試劑盒內(nèi)容：名稱規(guī)格10.01mol/LpH6.0枸櫞酸鹽緩沖液0.5L2PBS緩沖液1L3廣譜二抗1.5mL430%H2O25mL5DAB顯色液I0.3mL6DAB顯色液II0.3mL自備試劑：無水乙醇、蘇木素。操作步驟：1.60℃常規(guī)脫蠟至水后，將石蠟切片先后浸入二甲苯Ⅰ，二甲苯Ⅱ各10min。然后逐級降濃度酒精入水，每次3-5min。①無水酒精3－5min②90%酒精3－5min③85%酒精3－5min④75%酒精3－5min⑤PBS洗滌3次每次5min2.熱修復(fù)抗原：將切片置于0.01mol/LpH6.0枸櫞鈉緩沖液，微波爐加熱至沸騰后斷電，間隔5-10min后，反復(fù)1-2次，置于室溫自然冷卻。0.01mol/LpH7.0左右的PBS洗滌3次，每次5min3.消除內(nèi)源性過氧化物酶：用3%H2O2室溫孵育5-10min，以消除內(nèi)源性過氧化物酶的活性。PBS洗滌2-3次，每次5min；4.滴加一抗：滴加適當(dāng)稀釋的一抗到切片上，37℃孵育一定時(shí)間或者4℃隔天，pH7.4的PBS洗滌3次，每次5min。（一抗的稀釋度、孵育時(shí)間和溫度與染色強(qiáng)度、背景有直接關(guān)系。一般來說，陽性染色強(qiáng)度不夠時(shí)，可提高一抗?jié)舛群脱娱L孵育時(shí)間；背景過高時(shí)，可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時(shí)間。）5.加入廣譜二抗，37℃孵育一段時(shí)間，取出后PBS洗滌3次，每次5min。6.DAB顯色：取DAB顯色液I及II各50微升加至入1mL的水中，配成DAB工作液，滴加到切片上，室溫顯色，鏡下控制反應(yīng)時(shí)間。若無背景出現(xiàn)則可繼續(xù)顯色。蒸餾水充分洗滌以終止反應(yīng)。7..觀察顯色后自來水沖，蘇木精復(fù)染1-2min，，自來水沖10min，梯度酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片，干燥，分析拍照[詳細(xì)]

  2024-10-08 14:03

  產(chǎn)品樣冊

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• 小鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒

  小鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-15 02:27

  報(bào)價(jià)單

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• 小鼠白細(xì)胞介素-10（IL-10）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書

  小鼠白細(xì)胞介素-10（IL-10）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書[詳細(xì)]

  2016-05-17 00:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 兔子說明書CD134 免疫組化試劑盒說明書

  兔子說明書CD134 免疫組化試劑盒說明書[詳細(xì)]

  2016-07-06 00:00

  安裝說明

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• 人PR免疫組化試劑盒實(shí)驗(yàn)說明書

  人PR免疫組化試劑盒該試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物（HRPStreptavidinConjugate，HRP-SA）為基礎(chǔ)，可用于檢測細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性PR抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的PR一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后，用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合，Z后加入HRP-SA，形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物，顯微鏡下觀察成像。試劑盒所含試劑：試劑A通透液：0.1%Triton-X10010mL（選用）試劑B封閉緩沖液（封閉用）20mL試劑C（原裝進(jìn)口分裝）已稀釋的即用型PR一抗（2.5ml）試劑D（原裝進(jìn)口分裝）生物素化羊抗兔IgG1支（濃度1.5mg/mL，稀釋比為1:300~1:500）50μL+抗體稀釋液20ml試劑EHRP-SA復(fù)合物1支（濃度1μM，稀釋比1:50~1:200）100μL試劑FDAB顯色液5ml用戶自備試劑：1．10mMTBS（pH7.2~7.4）三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL，濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4，Z后定容至1000mLTBS-T：TBS+Tween20（0.05%體積比）2．抗原修復(fù)液（依檢測抗原不同而選擇不同的修復(fù)液）10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檸檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL，濃鹽酸調(diào)pH值至6.0，Z后定容至1000mL或：0.5MEDTA修復(fù)液（pH8.0）EDTA2H2O186.1g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水700mL，用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0，Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實(shí)驗(yàn)步驟（建議方案）：石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片：將待做切片置于切片架上，于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr；2.脫蠟：切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10min；3.水化：切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇5min，95%乙醇2次（每次2min），85%乙醇2min；75%乙醇2min，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min；4.抗原修復(fù)：根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min，TBS洗滌（2×2min）（具體修法見附1）*注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第5步封閉。5.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育30min；6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗），37℃濕盒孵育2hr或4℃過一夜；7.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；8.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育10min；9.加二抗：滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑D），37℃濕盒中孵育30min；10.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；11.封閉：滴加試劑Tween20，37℃濕盒孵育封閉20min；12.加HRP-SA：滴加用抗體稀釋液稀釋的試劑E（1：50~200，終濃度5~20nM），37℃濕盒中孵育30min；13.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min），TBS洗滌（2×5min）；14.顯色：應(yīng)用DAB溶液（試劑F）顯色；15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；16.封片：待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；17.觀察成像：顯微鏡下觀察成像。注意事項(xiàng)：1.修復(fù)后緩沖液須自然冷卻，自來水沖洗后方能把切片取出，驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到，用過的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。3.若試劑為微量濃縮液，用前應(yīng)低速離心，將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌，以便洗去組織上殘留的Tween20，否則會(huì)影響結(jié)果觀察。5.如須復(fù)染細(xì)胞核，則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。附1：抗原修法常用抗原修復(fù)液：檸檬酸緩沖液（0.01MpH6.0）、EDTA抗原修復(fù)液（pH8.0或9.0）等等。一、酶消化修復(fù)法切片脫蠟水化處理，TBS沖洗，在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶，37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或繼續(xù)微波10~15min，取出微波盒冷卻至室溫后，自來水沖洗，取出切片。因不同微波爐微波處理時(shí)間存在差異，須自行調(diào)整。三、直接高壓抗原修復(fù)法取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰，將組織切片置于耐高溫切片架上，修復(fù)液沸騰后放入切片架，蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)1.5~2.5min即可脫離熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。四、隔水式高壓抗原修復(fù)法不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰，微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰，將切片放入微波盒中，再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)4~8min即可關(guān)閉熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。[詳細(xì)]

  2018-11-16 10:02

  產(chǎn)品樣冊

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• 小鼠白細(xì)胞介素10（IL-10）試劑盒使用檢測范圍

  小鼠白細(xì)胞介素10（IL-10）試劑盒使用檢測范圍檢測范圍：3ng/L-100ng/L實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠白細(xì)胞介素10（IL-10）水平。用純化的小鼠白細(xì)胞介素10（IL-10）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加白細(xì)胞介素10（IL-10），再與HRP標(biāo)記的白細(xì)胞介素10（IL-10）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞介素10（IL-10）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠白細(xì)胞介素10（IL-10）濃度。小鼠白細(xì)胞介素10（IL-10）試劑盒使用檢測范圍試劑盒組成120倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液3ml×1瓶2酶標(biāo)試劑3ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品（200ng/L）0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×4條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液3ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液3ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液3ml×1/瓶12密封袋1個(gè)小鼠白細(xì)胞介素10（IL-10）試劑盒使用檢測范圍注意事項(xiàng)1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時(shí)請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。小鼠白細(xì)胞介素10（IL-10）試劑盒使用檢測范圍使用說明書保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個(gè)月[詳細(xì)]

  2018-09-27 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• CD90免疫組化試劑盒

  CD90免疫組化試劑盒該試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物（HRPStreptavidinConjugate，HRP-SA）為基礎(chǔ)，可用于檢測細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性CD90抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的CD90一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后，用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合，Z后加入HRP-SA，形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物，顯微鏡下觀察成像。試劑盒所含試劑：試劑A通透液：0.1%Triton-X10010mL（選用）試劑B封閉緩沖液（封閉用）20mL試劑C（原裝進(jìn)口分裝）已稀釋的即用型CD90一抗（2.5ml）試劑D（原裝進(jìn)口分裝）生物素化羊抗兔IgG1支（濃度1.5mg/mL，稀釋比為1:300~1:500）50μL+抗體稀釋液20ml試劑EHRP-SA復(fù)合物1支（濃度1μM，稀釋比1:50~1:200）100μL試劑FDAB顯色液5ml用戶自備試劑：1．10mMTBS（pH7.2~7.4）三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL，濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4，Z后定容至1000mLTBS-T：TBS+Tween20（0.05%體積比）2．抗原修復(fù)液（依檢測抗原不同而選擇不同的修復(fù)液）10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檸檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL，濃鹽酸調(diào)pH值至6.0，Z后定容至1000mL或：0.5MEDTA修復(fù)液（pH8.0）EDTA2H2O186.1g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水700mL，用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0，Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實(shí)驗(yàn)步驟（建議方案）：石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片：將待做切片置于切片架上，于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr；2.脫蠟：切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10min；3.水化：切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇5min，95%乙醇2次（每次2min），85%乙醇2min；75%乙醇2min，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min；4.抗原修復(fù)：根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O洗2×2min，TBS洗滌（2×2min）（具體修法見附1）*注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進(jìn)入第5步封閉。5.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育30min；6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗），37℃濕盒孵育2hr或4℃；7.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；8.封閉：滴加試劑B，37℃濕盒孵育10min；9.加二抗：滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑D），37℃濕盒中孵育30min；10.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min）；11.封閉：滴加試劑Tween20，37℃濕盒孵育封閉20min；12.加HRP-SA：滴加用抗體稀釋液稀釋的試劑E（1：50~200，終濃度5~20nM），37℃濕盒中孵育30min；13.洗滌：TBS-T洗滌（3×5min），TBS洗滌（2×5min）；14.顯色：應(yīng)用DAB溶液（試劑F）顯色；15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；16.封片：待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；17.觀察成像：顯微鏡下觀察成像。注意事項(xiàng)：1.修復(fù)后緩沖液須自然冷卻，自來水沖洗后方能把切片取出，驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到，用過的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。3.若試劑為微量濃縮液，用前應(yīng)低速離心，將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌，以便洗去組織上殘留的Tween20，否則會(huì)影響結(jié)果觀察。5.如須復(fù)染細(xì)胞核，則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。附1：抗原修法常用抗原修復(fù)液：檸檬酸緩沖液（0.01MpH6.0）、EDTA抗原修復(fù)液（pH8.0或9.0）等等。一、酶消化修復(fù)法切片脫蠟水化處理，TBS沖洗，在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶，37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔或繼續(xù)微波10~15min，取出微波盒冷卻至室溫后，自來水沖洗，取出切片。因不同微波爐微波處理時(shí)間存在差異，須自行調(diào)整。三、直接高壓抗原修復(fù)法取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰，將組織切片置于耐高溫切片架上，修復(fù)液沸騰后放入切片架，蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)1.5~2.5min即可脫離熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。四、隔水式高壓抗原修復(fù)法不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰，微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰，將切片放入微波盒中，再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋，待噴氣后計(jì)時(shí)4~8min即可關(guān)閉熱源，自然冷卻至室溫后自來水沖洗，取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。[詳細(xì)]

  2018-10-31 10:00

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• IL-10,豚鼠白細(xì)胞介素10ELISA試劑盒說明書

  IL-10,豚鼠白細(xì)胞介素10ELISA試劑盒說明書l本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中豚鼠白細(xì)胞介素10（IL-10）的含量。l有效期：6個(gè)月l保存條件：2-8℃l本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷實(shí)驗(yàn)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被豚鼠白細(xì)胞介素10（IL-10）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豚鼠白細(xì)胞介素10（IL-10）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。樣本處理及要求1.血清：全血標(biāo)本請于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8°C1000g離心20分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.組織勻漿：用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶YZ劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。Z后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。4.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。注：標(biāo)本溶血會(huì)影響Z后檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。標(biāo)本處理1.本公司只對試劑盒本身負(fù)責(zé)，不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé)，請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預(yù)留充足的樣本。2.實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測標(biāo)本含量，如果標(biāo)本濃度過高，應(yīng)對標(biāo)本進(jìn)行稀釋，使稀釋后的標(biāo)本符合試劑盒的檢測范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。標(biāo)本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。3.若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中，建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其有效性，并注意留存樣本。4.使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會(huì)由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。5.若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清，因該類樣本干擾因素較多，如：細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時(shí)間等，所以可能存在檢測不出的情況。6.某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因?yàn)榕c本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測出。7.建議使用新鮮樣本，保存時(shí)間過長可能會(huì)存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。需要而未提供的試劑和器材酶標(biāo)儀（450nm）高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱蒸餾水或去離子水試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標(biāo)板8孔×12條8孔×6條無標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL*6管0.3mL*6管無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進(jìn)行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個(gè)1個(gè)無備注：1.標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為：80、40、20、10、5、0pg/mL2.經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗(yàn)，標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi)，實(shí)驗(yàn)過程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過Zda標(biāo)準(zhǔn)品濃度時(shí)，可用樣本稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。注意事項(xiàng)嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。不能使用過期產(chǎn)品。如果可能傳播疾病，所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。試劑準(zhǔn)備試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。操作步驟1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并得到直線回歸方程，將樣品的OD值代入方程，計(jì)算出樣品的濃度。試劑盒性能1.檢測范圍：2.5pg/mL80pg/mL。2.靈敏度：Zdi檢測濃度小于0.1pg/mL。3.特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。4.重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)小于10%，板間變異系數(shù)小于15%。說明1.由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析，本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)。2.Z終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性、實(shí)驗(yàn)者的相關(guān)操作以及當(dāng)時(shí)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān)，請務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。3.不同批次的同一產(chǎn)品可能會(huì)有少許差別，如：檢測限、靈敏度以及顯色時(shí)間等，請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，網(wǎng)站電子版說明書僅作參考。4.只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果，不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實(shí)驗(yàn)說明才會(huì)得到**的檢測結(jié)果。問題解答若實(shí)驗(yàn)效果不好，請及時(shí)對顯色結(jié)果拍照，保留所用板條及未使用試劑，并妥善保存，然后聯(lián)系我公司技術(shù)支持為您解決問題。同時(shí)您也可以參考以下資料：問題可能原因解決方案標(biāo)準(zhǔn)曲線差吸取及洗滌不充分充分的吸取及洗滌移液不極ng確檢查和校正移液器精密度低洗滌不充分按說明書要求充分洗滌和浸泡混勻不充分和吸取試劑不足充分混勻和吸取試劑重復(fù)利用吸頭、容器和覆膜使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的容器和覆膜加樣不極ng確檢查和校正移液器O.D值低每孔加的試劑量不極ng確校正移液器，極ng確加入試劑溫育時(shí)間不正確保證充足的溫育時(shí)間溫育溫度不正確試劑要平衡至室溫并保證準(zhǔn)確的溫育溫度酶標(biāo)記物或底物失效通過混合酶標(biāo)記物和底物，顏色應(yīng)迅速顯現(xiàn)來檢查沒有加入終止液按照說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟加入終止液超出讀數(shù)時(shí)間讀數(shù)在說明書推薦的讀數(shù)時(shí)間內(nèi)讀數(shù)樣本值不正確的樣本儲(chǔ)存方式正確儲(chǔ)存樣本，使用新鮮樣本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)不正確的樣本收集和處理方法采取正確的樣本收集和處理方法待測物質(zhì)在樣本中含量低使用新鮮樣本，重復(fù)實(shí)驗(yàn)[詳細(xì)]

  2018-11-16 10:02

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• 人白介素-10（IL-10）ELISA試劑盒說明書

  人白介素-10（IL-10）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人IL-10單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的IL-10與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人IL-10，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液，在450nm處測OD值，IL-10濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中IL-10濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：4ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時(shí)；更長時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成4000pg/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，每管加入標(biāo)本稀釋液200ul。在**管中加入4000pg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液200ul混勻后用加樣器吸出200ul，移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋，從第七管中吸出200ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)IL-10含量。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的IL-10檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測重組或天然的人IL-10。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔，每次測定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:01

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• 人IL-29 免疫組化試劑盒

  該試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物（HRPStreptavidinConjugate，HRP-SA）為基礎(chǔ)，可用于檢測細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性IL-29抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的IL-29一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后，用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合，Z后加入HRP-SA，形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物，顯微鏡下觀察成像。注：本產(chǎn)品僅供實(shí)驗(yàn)室科學(xué)研究。本步驟是根據(jù)我們長期實(shí)驗(yàn)得出的有效步驟，不一定是Zyou方法，請客戶根據(jù)具體科研實(shí)驗(yàn)情況進(jìn)行調(diào)整和優(yōu)化，并歡迎客戶和我們探討。[詳細(xì)]

  2018-10-01 10:00

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• 上海恒遠(yuǎn)通用性免疫組化試劑盒使用說明書

  Histostain-PlusKits免疫組化染色試劑盒簡介上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司提供的美國ZYMED公司SP系列試劑盒，全稱為過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉卵白素（Streptavidin/Peroxidase）染色試劑盒。該方法由美國ZYMED公司于1986年首建。由于鏈霉卵白素的分子量是60kDa，有四個(gè)亞基可和生物素結(jié)合，等電點(diǎn)為6.5，所以該方法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、背景清晰、成本低廉的優(yōu)點(diǎn)，是理想的免疫組化染色方法。試劑盒內(nèi)容試劑（無色液體）：3%HO去離子水3ml、6ml或18ml22試劑A（藍(lán)色液體）：封閉用正常山羊血清工作液3ml、6ml或18ml試劑B（黃色液體）：生物素化二抗工作液（IgG/Bio）3ml、6ml或18mlSP-9000：生物素標(biāo)記山羊抗兔、大鼠、小鼠和豚鼠IgGSP-9001：生物素標(biāo)記山羊抗兔IgGSP-9002：生物素標(biāo)記山羊抗小鼠IgG試劑C（橙色液體）：辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素工作液（S-A/HRP）3ml、6ml或18ml標(biāo)本染色1、石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水。7、滴加試劑B（黃色液體），室溫或37℃2、3%HO去離子水（無色液體）孵育5~10孵育10~15分鐘。22分鐘，以消除內(nèi)源性過氧化物酶活性。8、PBS沖洗，3分鐘×3次。3、蒸餾水沖洗，PBS浸泡5分鐘（如需采9、滴加試劑C（橙色液體），室溫或37℃用抗原修復(fù)，在此步驟后進(jìn)行）。孵育10~15分鐘。4、滴加試劑A（藍(lán)色液體）室溫孵育10~1510、PBS沖洗，3分鐘×3次。分鐘，傾去，勿洗。11、顯色劑顯色（DAB或AEC）。5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗，37℃孵育2~312、自來水充分沖洗。小時(shí)或4℃過夜。13、如果需要，可進(jìn)行復(fù)染，脫水，透明。6、PBS沖洗，3分鐘×3次。14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?。保存方?~8℃暗處保存。[詳細(xì)]

  2018-11-16 10:02

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• 上海小鼠白細(xì)胞介素10（IL-10）Elisa檢測試劑盒注意事項(xiàng)說明

  上海小鼠白細(xì)胞介素10（IL-10）Elisa檢測試劑盒注意事項(xiàng)1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時(shí)請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。上海小鼠白細(xì)胞介素10（IL-10）Elisa檢測試劑盒標(biāo)本要求1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。[詳細(xì)]

  2024-09-29 05:50

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• 犬白細(xì)胞介素-10（IL-10）ELISA試劑盒使用說明書

  犬白細(xì)胞介素-10（IL-10）ELISA試劑盒使用說明書[詳細(xì)]

  2014-06-19 00:00

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• 大鼠白細(xì)胞介素10（IL-10）ELISA試劑盒使用說明書

  南京森貝伽現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量保證，價(jià)格優(yōu)惠，試劑盒森貝伽。本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清，血漿及相關(guān)液體樣本中大鼠白細(xì)胞介素10（IL-10）的含量。實(shí)驗(yàn)原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠白細(xì)胞介素10（IL-10）水平。用純化的大鼠白細(xì)胞介素10（IL-10）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白細(xì)胞介素10（IL-10），再與HRP標(biāo)記的白細(xì)胞介素10（IL-10）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞介素10（IL-10）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠白細(xì)胞介素10（IL-10）濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品：72ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟：標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為48ng/L，32ng/L，16ng/L，8ng/L，4ng/L）。加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng)：試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時(shí)請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。計(jì)算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。（此圖僅供參考）試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%檢測范圍：2.5ng/L-50ng/L保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個(gè)月[詳細(xì)]

  2018-11-07 14:16

  產(chǎn)品樣冊

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• 兔白細(xì)胞介素10 （IL-10 ）ELISA試劑盒使用說明書

  兔白細(xì)胞介素10（IL-10）ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T1.5ng/L-40ng/L使用目的：本試劑盒用于測定兔血清、血漿及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞介素10（IL-10）含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中兔白細(xì)胞介素10（IL-10）水平。用純化的兔白細(xì)胞介素10（IL-10）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加白細(xì)胞介素10（IL-10），再與HRP標(biāo)記的白細(xì)胞介素10（IL-10）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞介素10（IL-10）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中兔白細(xì)胞介素10（IL-10）濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品（80ng/L）0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。40ng/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150l的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20ng/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150l的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10ng/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150l的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5ng/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150l的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.5ng/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150l的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50l，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l，然后再加待測樣品10l（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50l，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50l，再加入顯色劑B50l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50l，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié)：計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時(shí)請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個(gè)月[詳細(xì)]

  2018-11-15 10:03

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