奶牛養(yǎng)殖中,用阿維菌素類驅(qū)蟲藥治體內(nèi)外寄生蟲時,如果未嚴格執(zhí)行休藥期,藥物可能殘留于乳汁中,后制成奶粉帶入。長期攝入殘留超標的奶或乳粉,可能損害人體健康。
根據(jù)GB 31659.4-2025,測定奶及乳粉中阿維菌素類藥物殘留量的方法有兩種:一是高效液相色譜法,原理是:試樣中殘留的阿維菌素類藥物用乙醇-乙腈溶液提取,C18固相萃取柱凈化,三氟乙酸酐和N-甲基咪唑衍生化,高效液相色譜-熒光檢測法測定,外標法定量;二是液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法,原理是:試料中殘留的阿維菌素類藥物,用乙腈提取,C18固相萃取柱凈化,液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定,基質(zhì)匹配標準溶液外標法定量。
以下簡述方法一中標準曲線的制備:
用1mL規(guī)格的Miragen電動移液器單吸多排模式,移取100ng/mL阿維菌素類藥物混合標準工作液0.15、0.5mL分別加入于2個10mL容量瓶中;用10mL規(guī)格的赫施曼opus電子瓶口分配器,設(shè)置stepper模式,設(shè)置4個分液體積:0.5、1、2.5、5.0mL,將4個體積的1μg/mL阿維菌素類藥物混合標準工作液分別加入于4個10mL容量瓶中,以上6個容量瓶均用乙腈稀釋至刻度,配制成濃度分別為1.5、5、50、100、250、500ng/mL的乙酰氨基阿維菌素、阿維菌素、多拉菌素和伊維菌素混合標準溶液。

用Miragen電動移液器分別取上述6個濃度及1g/mL的標準工作液各1.0mL于10mL試管中,于50℃氮氣吹干,按衍生化步驟(向試管中依次加入銜生化試劑A液100μL和衍生化試劑B液150μL,密閉,渦旋10s,依次加冰醋酸、三乙胺各50μL,渦旋10s,65℃避光密閉反應15min,取出后放置至室溫,加650μL甲醇,混勻。經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾)處理后供高效液相色譜測定。以測得峰面積為縱坐標、對應的標準溶液濃度為橫坐標,繪制標準曲線。求回歸方程和相關(guān)系數(shù)。
實驗室吸取小體積(幾微升到10毫升)的液體,一般采用移液器。Miragen電子移液器,可設(shè)定吸液速度,按住吸液,松開即停,數(shù)值可在屏幕上實時顯示,也可設(shè)定最da體積進行吸取。電機控制活塞運動,操作更加穩(wěn)定和輕松。
還有赫施曼opus電子瓶口分配器,采用觸摸屏顯示和操作,簡便易懂。分辨精度可達微升級別,一次裝液可完成相同或不同體積的連續(xù)分液,非常適用于毫升級母液的添加與分液。大體積型號更能替代燒杯、玻璃棒、洗瓶等傳統(tǒng)工具,實現(xiàn)稀釋液的快速、精密添加,尤其適合標準曲線制備以及毫升級試劑的大批量灌裝作業(yè)。
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