一、樣品提取 

準(zhǔn)確稱取 2.0 g 經(jīng)粉碎的綠茶于 50 mL 離心管中，加 10 mL 水 渦旋混勻 30s，靜置 30 min，加入 15 mL 1% 乙酸乙腈，2500  rpm 渦旋 2 min，然后加入 6 g 無(wú)水硫酸鎂，1.5 g 醋酸鈉鹽包 （Cat.No.COQ050020H），手動(dòng)混勻后 2500 rpm 渦旋 5 min， 5000 r/min 離心 5 min，上層乙腈層待凈化。 

二、樣品凈化 

取 8 mL 待 凈 化 液 加 入 至 15 mL QuEChERS 凈 化 管（Cat. No.COQ015047H），渦旋 5 min，5000 r/min 離心 5 min，準(zhǔn)確 吸取 2 mL 上清液于另一干凈 15 mL 離心管中，40℃水浴氮?dú)?nbsp;吹至近干，用 1 mL 60% 乙腈水溶液重新溶解，過(guò) 0.22 μm 尼 龍濾膜供上機(jī)測(cè)試。 

三、標(biāo)曲配制

稱取空白茶葉樣品 2.0 g按照上述一、二步驟進(jìn)行至氮吹近干， 作為空白基質(zhì)提取液； 分別精密量取一定量的混合標(biāo)準(zhǔn)液加入到空白基質(zhì)提取液中， 用 60% 乙腈水溶液定容至 1 mL，配制成適當(dāng)濃度的基質(zhì)混合 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。 

四、儀器條件 

色譜條件 儀器：UPLC-MS/MS（Thermo Fisher TQS Endura） 色譜柱：CommaSil? ODS (2.1 mm×100 mm，3.0 μm) 流動(dòng)相：A：水（0.1% 甲酸）   B：甲醇（0.1% 甲酸） 洗脫方式：梯度洗脫，見表 1

表 1 梯度洗脫程序

流速：0.4 mL/min  柱溫：35℃  進(jìn)樣量：5 μL 

質(zhì)譜條件 

離子源：HESI  電噴霧電壓：3500 V 鞘氣壓力：30 arb  輔氣壓力：2 arb 離子傳輸管：380℃  輔氣溫度：350℃

表 2 組分名稱、保留時(shí)間及特征離子一覽表（* 為定量離子）

五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果 

表 3 綠茶中 40 種農(nóng)藥殘留加標(biāo)回收結(jié)果

六、注意事項(xiàng) 

（1）該實(shí)驗(yàn)采用 UPLC-MS/MS 進(jìn)行茶葉中多種農(nóng)藥殘留的測(cè)定， QuEChER 方法凈化，外標(biāo)法定量，建議配制基質(zhì)標(biāo)曲進(jìn)行定量，否 則會(huì)存在基質(zhì)效應(yīng)，影響儀器準(zhǔn)確定量； 

（2）從表 3 綠茶中多農(nóng)殘?zhí)砑踊厥战Y(jié)果可知：大部分農(nóng)藥回收率 都在 70%-110% 之間，RSD 小于 10%，可以滿足絕大多數(shù)客戶測(cè)試 需求。但該法不適合做丁硫克百威，回收率 20% 以下，是因?yàn)槎?nbsp;硫克百威在酸性條件下會(huì)分解為克百威，因此在酸性條件下檢測(cè) 出克百威，還需調(diào)整方法重新驗(yàn)證。 

（3）茶葉樣本需先加水靜置 30 min，因?yàn)楦稍锏牟枞~是蜷縮的， 如采用此法直接用乙腈提取一次會(huì)造成提取不充分，結(jié)果假陰性。 因此需先加水使茶葉舒展，提高乙腈的提取效率，EN15662-2018 中對(duì)此也有詳細(xì)的描述。