1 前言

20 世紀(jì) 50 年代初發(fā)現(xiàn)了滅草隆的除草作用后，此類(lèi)除草劑的許多品種相繼出現(xiàn)，特別是在 60～70 年代期間，開(kāi)發(fā)出一系列的鹵代苯基脲和含氟脲類(lèi)除草劑，提高了選擇性，擴(kuò)大了殺草譜，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中被廣泛地應(yīng)用。本文用 SPE400 全自動(dòng)機(jī)械臂固相萃取儀對(duì)大豆中取代脲類(lèi)除草劑的整個(gè)檢測(cè)過(guò)程中的凈化環(huán)節(jié)進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。

2 儀器與試劑

2.1 儀器

SPE400 全自動(dòng)機(jī)械臂固相萃取儀、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀、粉碎機(jī)、離心機(jī)、勻漿機(jī)、氮吹儀、425um 網(wǎng)篩

2.2 試劑及耗材

乙腈、氯化鈉、0.22um 的微孔濾膜，HLB 固相萃取小柱（6ml，填充物 500mg）

3 實(shí)驗(yàn)方法

3.1 實(shí)驗(yàn)步驟

3.1.1 取樣

取代表性大豆樣品 500g 用粉粹機(jī)粉粹后，全部過(guò) 425um 的標(biāo)準(zhǔn)網(wǎng)篩，混勻備用。

3.1.2 提取

稱(chēng)取 5g 試樣（精確至 0.01g）于 50mL 具塞離心管中，加入 10mL 水，混勻后放置 1h。加入過(guò)量氯化鈉，使水溶液達(dá)到飽和，再加入 15mL 乙腈高速均質(zhì)提取 3min，5000r/min 離心5min，將乙腈層轉(zhuǎn)移至 25mL 容量瓶中。殘?jiān)儆?10mL 乙腈重復(fù)提取一次，合并提取液， 并用乙腈定容至 25mL。取 5mL 提取液于 15mL 離心管中，45℃下氮?dú)獯抵?2mL 待凈化。

3.1.3 固相萃取小柱凈化

將收集的洗脫液置于 45℃下氮?dú)饬鞔抵两伞Ｓ靡宜?甲醇（7+3）溶液定容于 1mL，旋渦混勻后過(guò) 0.22um 的微孔濾膜，供液相色譜-質(zhì)譜分析備用。

3.1.4 液相色譜測(cè)定條件

色譜柱：ACQUITY BEH C18色譜柱，50m*2.1mm（內(nèi)徑），膜厚 1.7um，或相當(dāng)者；

柱溫：40℃；

進(jìn)樣量：10uL；

流動(dòng)相及梯度洗脫條件見(jiàn)下表：

流動(dòng)相及梯度洗脫條件

3.1.5 質(zhì)譜測(cè)定條件

離子化模式：電噴霧電離正離子模式（ESI+）；

掃描方式：正離子掃描；

檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）；

分辨率：?jiǎn)挝环直媛剩?/p>

3.1.6 色譜測(cè)定與確證

每種被測(cè)組分選擇 1 個(gè)母離子，2 個(gè)以上子離子，在相同實(shí)驗(yàn)條件下，樣品中待測(cè)物質(zhì)的保留時(shí)間，與基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液的保留時(shí)間偏差在±2.5%之內(nèi)；且樣品中各組分定性離子的相對(duì)豐度與濃度接近的基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中對(duì)應(yīng)的定性離子的相對(duì)豐度進(jìn)行比較，偏差不超過(guò)表 2 規(guī)定的范圍，則可判定為樣品中存在對(duì)應(yīng)的待測(cè)物。

在儀器ZJ工作條件下，對(duì)基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)樣，以峰面積為縱坐標(biāo)，基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，用標(biāo)準(zhǔn)工作曲線對(duì)樣品進(jìn)行定量，樣品溶液中待測(cè)物的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器測(cè)定的線性范圍內(nèi)。

定性確證時(shí)相對(duì)離子豐度的ZD允許偏差

3.1.7 空白實(shí)驗(yàn)

除不加試樣外，均按上述測(cè)定步驟進(jìn)行。

4 結(jié)果與討論

用固相萃取法凈化大豆中取代脲類(lèi)農(nóng)藥殘留量的過(guò)程實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化處理，減少人力的消耗，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中使用的有機(jī)溶劑采用密封處理，降低了對(duì)人體的傷害且儀器能JZ的控制活化、上樣、洗脫等溶劑流速，使樣品凈化的更為充分。

參考文獻(xiàn)

[1] GB 23200.35-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中取代脲類(lèi)農(nóng)藥殘留量的測(cè)定 液相色譜-質(zhì)譜法

注意事項(xiàng)

1、將 5mL 上層乙腈層直接放入樣品管內(nèi)濃縮，避免了樣品轉(zhuǎn)移過(guò)程中樣品的損失。

2、上樣后應(yīng)當(dāng)對(duì)樣品管進(jìn)行 2 次潤(rùn)洗。

3、目標(biāo)物洗脫時(shí)將儀器空氣助推增加至 5mL，使殘留在柱內(nèi)的洗脫液完全流出。

4、實(shí)驗(yàn)中用到有毒有害試劑，應(yīng)當(dāng)于通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行，同時(shí)實(shí)驗(yàn)人員需做好防護(hù)措施。

標(biāo)簽：全自動(dòng)固相萃取儀固相萃取法