方法優(yōu)勢：

GB 5009.35-2023與2016版相比，著色劑檢測種類由7種增加至11種，同時基質(zhì)種類也進(jìn)行了擴(kuò)充，前處理小柱由聚酰胺粉變更為PWAX或同等類型小柱。

納鷗科技依據(jù)GB 5009.35-2023食品中合成著色劑的測定，采用Anavo PWAX-II固相萃取柱凈化,提取方法簡單、回收率高、凈化效果優(yōu)異、方法穩(wěn)定性好。

1、標(biāo)準(zhǔn)品配制

(1) 單標(biāo)儲備液1000 ug/mL，稱取適量色素單標(biāo)，用水配制成1000 ug/mL的單標(biāo)儲備液。

(2) 混標(biāo)中間液50 ug/mL，分別吸取0.5 mL單標(biāo)儲備液1000 ug/mL于10 mL容量瓶中，用水定容至刻度，配制成50 ug/mL的混標(biāo)中間液。

2、試樣提取

2.1 液體類試樣(飲料、調(diào)制乳等)、冷凍飲品(風(fēng)味冰、冰棍類)

取 2g樣品，置于50mL 具塞離心管中，加入25mL乙醇氨水溶液，渦旋1min，5000r/min離心5min，并用乙醇氨水溶液定容至50mL，即得提取液；準(zhǔn)確吸取上清液10mL，50℃下氮?dú)鉂饪s至3mL左右，分2次~3次共加入10mL 5%甲醇水溶液溶解，作為待凈化液。

2.2 固體類試樣(加工水果、醬及醬制品、香辛料等)

取2g樣品，置于50mL 具塞離心管中，先加入適量水(2 mL~5 mL)，50 ℃水浴加熱混勻樣品，加入25 mL 乙醇氨水溶液，渦旋1 min，50 ℃超聲或振搖提取20min，8000r/min離心5min，取上清液置于50mL容量瓶中，每次加入約5mL~10mL乙醇氨水溶液重復(fù)提取操作至上清液無明顯顏色，離心后合并上清液，用乙醇氨水溶液定容至50mL，即得提取液。準(zhǔn)確吸取提取液10mL，50 ℃氮?dú)鉂饪s至3mL 左右，分2次~3次共加入10mL5%甲醇水溶液溶解，作為待凈化液。

2.3含油量較大的試樣(可可制品、巧克力和巧克力制品等)

取2g樣品，置于50mL具塞離心管中，加入20mL石油醚，渦旋1min，超聲或振搖提取10min，8000r/min離心5min，棄去上清液，油脂含量較高的可重復(fù)提取一次，棄去上清液，加入 25 mL 乙醇氨水溶液，渦旋 1 min，50 ℃ 超 聲提取20min，8000r/min離心5min，收集上清液置于50mL容量瓶中,按照2.2中“每次加入約5mL~10mL乙醇氨水溶液……作為待凈化液”操作

3、凈化

Anavo PWAX-ll 150 mg/6 mL（PN：AN60A051）

4、分析條件

色譜柱：Origsil C18 250x4.6 mm，5um（PN：AN80B001）

流 速：1.0 mL/min

進(jìn)樣量：10 μL 柱溫：30 ℃

檢測器：二極管陣列檢測器波長范圍:400nm~800nm,檢測波長:415nm(檸檬黃、喹啉黃),520nm(新紅、莧菜紅、胭脂紅、日落黃、誘惑紅、酸性紅和赤蘚紅),610nm(靛藍(lán)、亮藍(lán))。

流動相： A為20 mmol/L 乙酸銨溶液， B為甲醇，梯度設(shè)置如下

5、添加回收結(jié)果

食品中人工合成著色劑的HPLC檢測的添加回收結(jié)果。

添加濃度30 mg/kg（加標(biāo)量：50 ug/mL，1.2 mL）

添加濃度3.0 mg/kg（加標(biāo)量：50 ug/mL，0.12 mL）

6、譜圖（略）

配套關(guān)鍵耗材