在高效液相色譜分析中，使用反相色譜柱可解決80%以上問題。而反相色譜柱中，使用Z多的是C18柱。

然而，色譜分析檢測的時(shí)，總是會(huì)碰到極性大的樣品，實(shí)在讓人很頭疼，一直是分析檢測領(lǐng)域面臨的挑戰(zhàn)和難題，經(jīng)常遇到檢測靈敏度低、保留弱、分離度不理想、峰形不佳等問題。

如何解決極性化合物分離問題？常見的解決辦法有哪些？

一般極性化合物

       對于一般極性的化合物使用C18即可解決，C18色譜柱我們平時(shí)使用Z廣泛，操作簡便，可提供的廠家、品牌Z多，選擇范圍也很大，同時(shí)色譜柱平衡迅速，也可兼容MS。對于一般極性化合物，檢測工作者可輕松解決。關(guān)鍵選擇一款分離度好，壽命長，性價(jià)比高的色譜柱即可。

Chromegabond WR C18（滿足您Z具挑戰(zhàn)分析需求）

品牌：PerkinElmer色譜柱（原ES Industries，2021年收購）

• Chromegabond（簡稱：CMB） WR C18是一種通過多步法生產(chǎn)的高堿性去活性固定相；

• 特殊鍵合處理，具有高度疏水性和極高惰性，可用于酸類和堿類化合物的分析；

• 可用于分離含有極性基團(tuán)和疏水基團(tuán)的分子，也特別適合分離胺類和酸類化合物。

       此外，氨基柱色譜柱家族中Z靈活的色譜柱，雖然分類上是正相固定相，卻可在正相、反相、離子交換或 HILIC 模式下使用。可用于極性化合物的正相分析，弱陰離子交換以及含水的反相液相分析。氨基柱被廣泛應(yīng)用于木糖、乳糖、葡萄糖等糖類的反相分析模式中。

Chromegabond Amine（NH2）（卓越、經(jīng)久耐用的氨基色譜柱）

品牌：PerkinElmer色譜柱（原ES Industries，2021年收購）

• Chromegabond Amine是一種與硅膠鍵合的聚合物氨基相；
  

• 應(yīng)用包括 HILIC、弱酸和糖；

• Chromegabond 鍵合技術(shù)可生產(chǎn)出性能卓越、經(jīng)久耐用的色譜柱。

CMB WR C18應(yīng)用案例：西洋參中人參皂苷的測定

人參葉中兩種人參皂苷（人參皂苷Rg1、人參皂苷Re）的分離檢測的波長較低(203nm)，且兩種皂苷保留性差異不大，對色譜柱的分離性能是較大挑戰(zhàn)。本實(shí)驗(yàn)按照中國藥典2020版方法，使用CMB WR C18色譜柱對人參供試品中3種人參皂苷進(jìn)行檢測，主要難點(diǎn)在于Rg1和Re滿足分離度要求，同時(shí)Rb1需要與相鄰雜質(zhì)有效分離。

結(jié)果表明在上述實(shí)驗(yàn)條件下，供試品中理論塔板數(shù)以人參皂苷Rg1計(jì)，理論塔板數(shù)66,468，遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于藥典要求(N＞6000)，與Re的分離度可達(dá)2以上，Rb1與基質(zhì)中的相鄰雜質(zhì)也可以達(dá)到有效分離。

中強(qiáng)極性化合物

       對于中強(qiáng)極性化合物，如果能在反相上保留，可選擇親水反相色譜柱，親水反相色譜柱是在C18柱上鍵合或嵌合的極性基團(tuán)，從而能夠與極性化合物進(jìn)行相互作用，從而增強(qiáng)對極性化合物的保留，另外，這類C18柱通常都能耐純水相，減少流動(dòng)相中有機(jī)相的比例，也能在另一方面增加極性化合物的保留。

Epic Polar （專為極性分析物保留而設(shè)計(jì)的高密度填料）

品牌：PerkinElmer色譜柱（原ES Industries，2021年收購）

• 專為極性化合物特別設(shè)計(jì)的高密度填充的色譜柱，即使在 100% 水性流動(dòng)相中，也能與鍵合的碳?xì)浠衔锵喟l(fā)生充分相互作用；

• 在這些高度水性條件下，我們的獨(dú)有的新型鍵合化學(xué)技術(shù)允許鍵合鏈在流動(dòng)相中保持完全伸展；

• Epic Polar 可以保留高水溶性化合物，如小分子有機(jī)酸、水溶性維生素、嘌呤和嘧啶、兒茶酚胺等極性化合物。

應(yīng)用案例：

使用Epic Polar (100 x 4.6 mm, 3 μm) 對兒茶酚胺及相關(guān)化合物進(jìn)HPLC 分析。兒茶酚胺及相關(guān)化合物由于極性大，在極短時(shí)間（3 min）內(nèi)出峰，容易出現(xiàn)分離度差，峰形不佳等問題。Epic Polar能實(shí)現(xiàn)兒茶酚胺及相關(guān)化合物的較好分離。

強(qiáng)極性化合物

       對于強(qiáng)極性化合物在反相上無保留，正相上不溶解。這時(shí)可使用HILIC色譜柱，PerkinElmer色譜柱（原ES Industries，2021年收購）擁有各種HILIC模式的色譜柱，滿足您各種HILIC分離的需求。

      許多市售 HILIC 固定相都是轉(zhuǎn)化的正相色譜柱，導(dǎo)致方法不理想、分離能力較低且缺乏耐久性。我們的HILIC 色譜柱系列包括新款 Epic HILIC POH，專為 HILIC 色譜分析而設(shè)計(jì)，可以實(shí)現(xiàn)高性能分離，獲得可靠方法， 并提供較長的色譜柱壽命。

Epic HILIC POH（新型HILIC固定相）

• 其由多羥基聚合物涂層覆蓋并鍵合到硅膠；

• 該聚合物涂層可以增強(qiáng)固定相在 HILIC 操作條件下的行為；

• 可提供遠(yuǎn)高于常規(guī)羥基和二醇型固定相的羥基含量。

Epic HILIC RP（新型HILIC固定相）

• 采用經(jīng)過嚴(yán)格尺寸控制的超純硅膠；

• 可用于極性堿化合物的分離，其可與硅烷醇發(fā)生離子交換，從而能夠保留這些極性堿。

Epic HILIC RP（HILIC 和反相色譜的新型固定相）

• 它是含有極性和疏水性分析物的樣品的極佳選擇；

• 可以實(shí)現(xiàn)高性能分離，獲得可靠方法，色譜柱壽命也較長。

Epic HILIC PI（新型HILIC固定相）

• 與硅膠鍵合的芳香胺基固定相組成。
  

• 為極性胺化合物提供了優(yōu)異的保留能力和峰形，也可以為酸類化合物提供優(yōu)異的保留能力。

Epic HILIC FL（新型HILIC固定相）

• 其由與硅膠鍵合的氟化基固定相組成；

• 該組合物為極性鹵代物、極性胺和極性芳香族化合物提供出色的保留能力和峰形。

應(yīng)用案例：

使用Epic HILIC RP (250 x 4.6 mm, 5 μm) 對苯二氮?類進(jìn)行HPLC分析