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全血基因組DNA提取試劑盒說明書
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全血基因組DNA提取試劑盒說明書貨號:D1800規(guī)格:50T/100T保存:室溫(15℃-25℃)干燥保存,復(fù)檢期12個(gè)月,2℃-8℃保存時(shí)間更長。試劑盒內(nèi)容:50T100TRNaseA1ml1ml×2蛋白酶K1ml1ml×2紅細(xì)胞裂解液120ml120ml×2溶液A15ml25ml溶液B15ml30ml漂洗液15ml30ml洗脫液10ml20ml吸附柱50個(gè)100個(gè)收集管50個(gè)100個(gè)說明書1份1份產(chǎn)品簡介:本試劑盒采用可以特異性結(jié)合DNA的離心吸附柱和獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng),提取全血基因組DNA。離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司特有新型材料,能夠GX、專一吸附DNA,可Zda限度去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。提取的基因組DNA片段大,純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建、Southern雜交等實(shí)驗(yàn)。操作步驟:使用前請先在漂洗液和溶液B中加入無水乙醇,加入休積請參照瓶體上的標(biāo)簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機(jī)在室溫下離心。1、樣品的處理(本產(chǎn)品適用于處理新鮮的或已經(jīng)添加抗凝劑的0.lml-1ml血液樣品):a、在血液樣品中加入2-3倍體積的紅細(xì)胞裂解液,充分顛倒混勻,12000rpm離心1min,小心吸去上清,沉淀應(yīng)為白色或淡紅色,如果裂解不徹底,可重復(fù)以上述步驟一次。向沉淀中加200ul溶液A,振蕩至徹底混勻。b、如果處理的血樣為禽類、鳥類、兩棲類或更低級生物的血液,其紅細(xì)胞為有核細(xì)胞,因此處理量為5-20u1,不需要再用紅細(xì)胞裂解液處理,直接加200ul溶液A,振蕩至徹底混勻。2、向懸浮液中加入20ul(10mg/ml)的RNaseA,充分顛倒混勻,室溫放置10min。3、加入20ul(10mg/ml)的蛋白酶K,充分顛倒混勻,65℃水浴消化30-60min,消化期間可顛倒離心管混勻數(shù)次,直至樣品消化完全為止。4、加入2倍體積溶液B(使用前請先檢查是否己加入無水乙醇),充分顛倒混勻,此時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀沉淀,不影響DNA的提取,可將溶液和絮狀沉淀都加入股附柱中,室溫放置2min,5、12000rpm離心2min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。6、向吸附柱中加入700ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm離心1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。7、向吸附柱中加入500ul漂洗液,12000rpm離心1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。8、12000rpm離心2min,將吸附柱敞口置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,否則漂洗液中的乙醇會影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)如酶切、PCR等。9、將吸附柱放入一個(gè)干凈的離心管中,向吸附膜ZY懸空滴加50-200ul經(jīng)65℃水浴預(yù)熱的洗脫液,室溫放置5min,12000rpm離心1min。10、離心所得洗脫液再加入吸附柱中,12000rpm離心2min,即可得到高質(zhì)量的基因組DNA。注意事項(xiàng):1、本試劑盒置于室溫(15-25℃)干燥條件下可保存12個(gè)月,更長時(shí)間的保存可置于2-8℃。2、常用的血液抗凝劑有EDTA、ACD和肝素等,需注意的是,如欲制各大分子量血液基因組DNA,可優(yōu)先考慮使用ACD抗凝。一般不使用肝素抗凝,因?yàn)橛酶嗡乜鼓难禾崛〉幕蚪MDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí),有PCR擴(kuò)增YZ現(xiàn)象。3、樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則會導(dǎo)致提取的DNA片段較小且提取量也下降。4、如果試劑盒中的溶液出現(xiàn)沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影響效果。5、絕大多數(shù)哺乳動物的全血如入全血中的紅細(xì)胞無核,故在提取基因組DNA時(shí)需去除不含DNA的無核紅細(xì)胞,以免影響紅細(xì)胞裂解和DNA釋放。如果處理的血樣為禽類、鳥類、兩棲類或更低級生物的血液,其紅細(xì)胞為有核細(xì)胞,因此處理量減少為5-20ul,不需要再用紅細(xì)胞裂解液來裂解紅細(xì)胞。6、洗脫緩沖液的體積**不少于50ul,體積過小會影響回收效率:洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響,若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)至此范圍),pH值低于7.0會降低洗脫效率。相關(guān)產(chǎn)品:D1850全血基因組DNA提取試劑系統(tǒng)E1020EB染色液D10106×DNALoadingBufferT106050×TAE緩沖液T10505×TBE緩沖液M1060D2000DNALadderM14001kbDNALadderG8142GoldViewII型核酸染色劑(5000×)全血基因組DNA提取試劑盒說明書現(xiàn)貨促銷全血基因組DNA提取試劑盒說明書現(xiàn)貨促銷ShanghaisolarbioBioscience&TechnologyCo.,LTD上海索萊寶生物科技有限公司是一家集銷售生化試劑、實(shí)驗(yàn)耗材、自產(chǎn)分子生物學(xué)產(chǎn)品為一體,并能提供技術(shù)支持的專業(yè)性生物科技公司。公司秉承“以客戶為ZX,以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念,在依靠客戶的大力支持和員工的不懈努力下獲得了快速的成長。公司組織結(jié)構(gòu)清晰,內(nèi)部管理科學(xué),擁有一支既分工細(xì)致又高度合作的年輕化隊(duì)伍,保持了各個(gè)部門之間的GX合作運(yùn)轉(zhuǎn),充分保障了公司在充滿競爭的市場中處于領(lǐng)xian地位。公司注重與業(yè)界精英合作,目前公司已經(jīng)和Amersham、Amresco、Axygen、BD、Corning、Dragon、Eppendorf、Fluka、Hyclone、Merck、Millipore、Omega、Oxoid、Pall、Peprotech、Pharmacia、Pierce、Roche、Sigma、Serva、TBD、Whatman、GBD、ADL、R&D、RB等企業(yè)結(jié)成緊密的合作伙伴關(guān)系,代理其領(lǐng)xian世界的產(chǎn)品,并在全國各地設(shè)有分銷機(jī)構(gòu)。我們將以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和實(shí)驗(yàn)技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗(yàn)、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫存、準(zhǔn)確的交貨時(shí)間、極具競爭力的價(jià)格,所有這些都保證了我們向您提供的是Z專業(yè)Zyou質(zhì)的服務(wù)!立足北京,上海,輻射全國,隨著產(chǎn)品營銷戰(zhàn)略的不斷延伸,我們將逐步發(fā)展成為yi流的專業(yè)性生物科技公司。我們希望能夠和尊敬的客戶一起,利用各自的資源優(yōu)勢和勇于進(jìn)取的敬業(yè)精神,為ZG生命科學(xué)研究的發(fā)展作出更多的貢獻(xiàn)。為了更好、更全面的發(fā)展,現(xiàn)公司正在誠招各地dai理商和招聘若干銷售、研發(fā)人員,歡迎垂詢并期待您的加入!全血基因組DNA提取試劑盒說明書現(xiàn)貨促銷全血基因組DNA提取試劑盒說明書現(xiàn)貨促銷聯(lián)系方式上海索萊寶生物科技有限公司電話:021-6485566518018609966傳真:021-54261506郵編:200233地址:上海市欽江路15號14層郵箱:solarbio@126.com網(wǎng)址:www.shsolarbio.com全血基因組DNA提取試劑盒說明書現(xiàn)貨促銷上海索萊寶021-54100800
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2018-09-02 10:00
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全血基因組DNA提取試劑盒簡介及說明書
全血基因組DNA提取試劑盒說明書貨號:D1800規(guī)格:50T/100T保存:室溫(15℃-25℃)干燥保存,復(fù)檢期12個(gè)月,2℃-8℃保存時(shí)間更長。試劑盒內(nèi)容:50T100TRNaseA1ml1ml×2蛋白酶K1ml1ml×2紅細(xì)胞裂解液120ml120ml×2溶液A15ml25ml溶液B15ml30ml漂洗液15ml30ml洗脫液10ml20ml吸附柱50個(gè)100個(gè)收集管50個(gè)100個(gè)說明書1份1份產(chǎn)品簡介:本試劑盒采用可以特異性結(jié)合DNA的離心吸附柱和獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng),提取全血基因組DNA。離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司特有新型材料,能夠GX、專一吸附DNA,可Zda限度去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。提取的基因組DNA片段大,純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建、Southern雜交等實(shí)驗(yàn)。操作步驟:使用前請先在漂洗液和溶液B中加入無水乙醇,加入休積請參照瓶體上的標(biāo)簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機(jī)在室溫下離心。1、樣品的處理(本產(chǎn)品適用于處理新鮮的或已經(jīng)添加抗凝劑的0.lml-1ml血液樣品):a、在血液樣品中加入2-3倍體積的紅細(xì)胞裂解液,充分顛倒混勻,12000rpm離心1min,小心吸去上清,沉淀應(yīng)為白色或淡紅色,如果裂解不徹底,可重復(fù)以上述步驟一次。向沉淀中加200ul溶液A,振蕩至徹底混勻。b、如果處理的血樣為禽類、鳥類、兩棲類或更低級生物的血液,其紅細(xì)胞為有核細(xì)胞,因此處理量為5-20u1,不需要再用紅細(xì)胞裂解液處理,直接加200ul溶液A,振蕩至徹底混勻。2、向懸浮液中加入20ul(10mg/ml)的RNaseA,充分顛倒混勻,室溫放置10min。3、加入20ul(10mg/ml)的蛋白酶K,充分顛倒混勻,65℃水浴消化30-60min,消化期間可顛倒離心管混勻數(shù)次,直至樣品消化完全為止。4、加入2倍體積溶液B(使用前請先檢查是否己加入無水乙醇),充分顛倒混勻,此時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀沉淀,不影響DNA的提取,可將溶液和絮狀沉淀都加入股附柱中,室溫放置2min,5、12000rpm離心2min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。6、向吸附柱中加入700ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm離心1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。7、向吸附柱中加入500ul漂洗液,12000rpm離心1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。8、12000rpm離心2min,將吸附柱敞口置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,否則漂洗液中的乙醇會影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)如酶切、PCR等。9、將吸附柱放入一個(gè)干凈的離心管中,向吸附膜ZY懸空滴加50-200ul經(jīng)65℃水浴預(yù)熱的洗脫液,室溫放置5min,12000rpm離心1min。10、離心所得洗脫液再加入吸附柱中,12000rpm離心2min,即可得到高質(zhì)量的基因組DNA。注意事項(xiàng):1、本試劑盒置于室溫(15-25℃)干燥條件下可保存12個(gè)月,更長時(shí)間的保存可置于2-8℃。2、常用的血液抗凝劑有EDTA、ACD和肝素等,需注意的是,如欲制各大分子量血液基因組DNA,可優(yōu)先考慮使用ACD抗凝。一般不使用肝素抗凝,因?yàn)橛酶嗡乜鼓难禾崛〉幕蚪MDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí),有PCR擴(kuò)增YZ現(xiàn)象。3、樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則會導(dǎo)致提取的DNA片段較小且提取量也下降。4、如果試劑盒中的溶液出現(xiàn)沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影響效果。5、絕大多數(shù)哺乳動物的全血如入全血中的紅細(xì)胞無核,故在提取基因組DNA時(shí)需去除不含DNA的無核紅細(xì)胞,以免影響紅細(xì)胞裂解和DNA釋放。如果處理的血樣為禽類、鳥類、兩棲類或更低級生物的血液,其紅細(xì)胞為有核細(xì)胞,因此處理量減少為5-20ul,不需要再用紅細(xì)胞裂解液來裂解紅細(xì)胞。6、洗脫緩沖液的體積**不少于50ul,體積過小會影響回收效率:洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響,若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)至此范圍),pH值低于7.0會降低洗脫效率。相關(guān)產(chǎn)品:D1850全血基因組DNA提取試劑系統(tǒng)E1020EB染色液D10106×DNALoadingBufferT106050×TAE緩沖液T10505×TBE緩沖液M1060D2000DNALadderM14001kbDNALadderG8142GoldViewII型核酸染色劑(5000×)[詳細(xì)]
2018-09-02 10:00
產(chǎn)品樣冊
血液基因組DNA提取試劑盒
資料名稱:血液基因組DNA提取試劑盒
適用產(chǎn)品:使用本試劑盒回收的D N A 可適用于各種常規(guī)操作, 包括酶切、P C R 、文庫構(gòu)建、Southern雜交等實(shí)驗(yàn)。
正文語言:中文
文件編號:BP024-1
文件版本:1.0
文件格式:PDF
文件大?。?.9MB
內(nèi)容簡介:本試劑盒采用酶裂解法裂解血液樣本,適用于從新鮮、加抗凝血劑或冷凍的血液樣本中提取基因組DNA。離心吸附柱采用的硅基質(zhì)材料為本公司特有新型材料,可特異性、GX、專一吸附DNA,可Zda限度去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。提取的基因組DNA片段大,純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠。[詳細(xì)]
2018-05-23 09:43
其它
土壤基因組DNA提取試劑盒
資料名稱:土壤基因組DNA提取試劑盒
適用產(chǎn)品:適用于新鮮的土壤樣本(如花盆土、農(nóng)田土、花壇土、濕泥、河流沉積物等)中提取基因組DNA。
正文語言:中文
文件編號:BP028-1
文件版本:1.0
文件格式:PDF
文件大?。?.8MB
內(nèi)容簡介:本試劑盒采用獨(dú)特的硅膠膜吸附技術(shù),能夠快速提取和純化土壤基因組DNA,適用于新采取的土壤樣本,如農(nóng)田土、花壇土、濕泥等。本試劑盒采用獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng),可將土壤樣本中的腐殖酸等雜質(zhì)盡量去除,經(jīng)裂解后的DNA可GX結(jié)合到吸附柱上,殘留的少量雜質(zhì)可使用漂洗液進(jìn)行去除,Z后使用洗脫液進(jìn)行洗脫收集,獲得高純度的基因組DNA。用本試劑盒提取的土壤基因組DNA可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建等分子生物學(xué)下游實(shí)驗(yàn)。[詳細(xì)]
2018-05-23 16:29
其它
植物基因組DNA提取試劑盒
資料名稱:植物基因組DNA提取試劑盒
適用產(chǎn)品:本試劑盒采用獨(dú)特的硅膠膜吸附技術(shù),能夠快速提取植物基因組DNA,適用于從植物組織細(xì)胞中提取總基因組DNA,提取的基因組DNAZda長度可達(dá)到50 kb。
正文語言:中文
文件編號:BP029-1
文件版本:1.0
文件格式:PDF
文件大小:0.9MB
內(nèi)容簡介:本試劑盒采用獨(dú)特的硅膠膜吸附技術(shù),能夠快速提取植物基因組DNA,適用于從植物組織細(xì)胞中提取總基因組DNA,提取的基因組DNAZda長度可達(dá)到50 kb。本試劑盒采用獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng),可Zda限度的去除雜蛋白及其他有機(jī)物等雜質(zhì),經(jīng)裂解后的DNA可GX結(jié)合到吸附柱上,殘留的少量雜質(zhì)可使用漂洗液進(jìn)行去除,Z后使用洗脫液進(jìn)行洗脫收集,獲得高純度的基因組DNA。用本試劑盒提取的植物基因組DNA可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建等分子生物學(xué)下游實(shí)驗(yàn)。[詳細(xì)]
2018-05-23 16:30
其它
土壤基因組DNA提取試劑盒
資料名稱:土壤基因組DNA提取試劑盒
適用產(chǎn)品:適用于新鮮的土壤樣本(如花盆土、農(nóng)田土、花壇土、濕泥、河流沉積物等)中提取基因組DNA。
正文語言:中文
文件編號:BP028-1
文件版本:1.0
文件格式:PDF
文件大?。?.8MB
內(nèi)容簡介:本試劑盒采用獨(dú)特的硅膠膜吸附技術(shù),能夠快速提取和純化土壤基因組DNA,適用于新采取的土壤樣本,如農(nóng)田土、花壇土、濕泥等。本試劑盒采用獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng),可將土壤樣本中的腐殖酸等雜質(zhì)盡量去除,經(jīng)裂解后的DNA可GX結(jié)合到吸附柱上,殘留的少量雜質(zhì)可使用漂洗液進(jìn)行去除,Z后使用洗脫液進(jìn)行洗脫收集,獲得高純度的基因組DNA。用本試劑盒提取的土壤基因組DNA可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建等分子生物學(xué)下游實(shí)驗(yàn)。[詳細(xì)]
2018-05-24 10:22
其它
植物基因組DNA提取試劑盒
資料名稱:植物基因組DNA提取試劑盒
適用產(chǎn)品:本試劑盒采用獨(dú)特的硅膠膜吸附技術(shù),能夠快速提取植物基因組DNA,適用于從植物組織細(xì)胞中提取總基因組DNA,提取的基因組DNAZda長度可達(dá)到50 kb。
正文語言:中文
文件編號:BP029-1
文件版本:1.0
文件格式:PDF
文件大?。?.9MB
內(nèi)容簡介:本試劑盒采用獨(dú)特的硅膠膜吸附技術(shù),能夠快速提取植物基因組DNA,適用于從植物組織細(xì)胞中提取總基因組DNA,提取的基因組DNAZda長度可達(dá)到50 kb。本試劑盒采用獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng),可Zda限度的去除雜蛋白及其他有機(jī)物等雜質(zhì),經(jīng)裂解后的DNA可GX結(jié)合到吸附柱上,殘留的少量雜質(zhì)可使用漂洗液進(jìn)行去除,Z后使用洗脫液進(jìn)行洗脫收集,獲得高純度的基因組DNA。用本試劑盒提取的植物基因組DNA可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建等分子生物學(xué)下游實(shí)驗(yàn)。[詳細(xì)]
2018-05-24 10:37
其它
細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒
資料名稱:細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒
適用產(chǎn)品:本試劑盒采用獨(dú)特的硅膠膜吸附技術(shù),能夠快速提取細(xì)菌的基因組DNA,提取的基因組DNA片段大,純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠。
正文語言:中文
文件編號:BP035-1
文件版本:1.0
文件格式:PDF
文件大?。?.8MB
內(nèi)容簡介:本試劑盒采用獨(dú)特的硅膠膜吸附技術(shù),能夠快速提取細(xì)菌的基因組DNA,提取的基因組DNA片段大,純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠。本試劑盒采用獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng),可Zda限度的去除雜蛋白及其他有機(jī)物,經(jīng)裂解后的DNA可GX結(jié)合到吸附柱上,殘留的少量雜質(zhì)可使用漂洗液進(jìn)行去除,Z后使用洗脫液進(jìn)行洗脫收集,獲得高純度的基因組DNA。用本試劑盒提取的細(xì)菌基因組DNA可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建等分子生物學(xué)下游實(shí)驗(yàn)。[詳細(xì)]
2018-05-24 11:15
其它
基因組DNA提取相關(guān)
基因組DNA相關(guān)基因組DNA提取試劑盒簡介:DNA是遺傳信息的載體,是Z重要的生物信息分子,是分子生物學(xué)研究的主要對象,為了進(jìn)行測序、雜交、基因表達(dá)、文庫構(gòu)建等試驗(yàn),獲得高分子量和高純度的基因組DNA是非常重要的前提,因此基因組DNA的提取也是分子生物學(xué)試驗(yàn)技術(shù)中Z重要、Z基本的操作之一。Solarbio公司提供各種不同樣品基因組DNA提取試劑盒,如植物、動物、細(xì)菌、細(xì)胞、血液、酵母等基因組DNA提取試劑盒。所提取的基因組純度高,片段大小在50kb左右。用戶可根據(jù)需要選用不同的試劑盒來進(jìn)行不同樣品的抽提?;蚪MDNA提取的原則:1、保證核酸一級結(jié)構(gòu)的完整性(因?yàn)檫z傳信息全部儲存在核酸一級結(jié)構(gòu)中,故完整的一級結(jié)構(gòu)是保證核酸結(jié)構(gòu)與功能研究的基礎(chǔ))。2、排除其它分子(如蛋白質(zhì)、多糖、脂類、有機(jī)溶劑等)的污染,使下游試驗(yàn)順利進(jìn)行?;蚪MDNA提取的原理和方法:DNA與組蛋白構(gòu)成核小體,核小體纏繞成中空的螺旋管狀結(jié)構(gòu),即染色絲,染色絲再與許多非組蛋白形成染色體。染色體存在于細(xì)胞核中,外有核膜及胞膜。從組織中提取DNA必須先將組織分散成單個(gè)細(xì)胞,然后破碎胞膜及核膜,使染色體釋放出來,同時(shí)去除與DNA結(jié)合的組蛋白及非組蛋白。1、樣品預(yù)處理從各種不同來源的樣品(如細(xì)菌、酵母、血液、動植物組織細(xì)胞等)中提取高純度的基因組DNA,因細(xì)胞結(jié)構(gòu)及其成分不同,樣品預(yù)處理方式也不同,以下簡單介紹常用提取材料的預(yù)處理方式,若需詳細(xì)了解,請參考本公司各基因組DNA提取試劑盒說明書。部分樣品預(yù)處理方式:植物材料液氮研磨動物材料勻漿、液氮研磨培養(yǎng)細(xì)胞蛋白酶K處理細(xì)菌溶菌酶破壁酵母破壁酶破壁、玻璃珠研磨血液紅細(xì)胞裂解液去紅細(xì)胞2、細(xì)胞裂解CTAB法:適用于植物組織、真菌等。CTAB是一種陽離子去污劑,可溶解細(xì)胞膜,并與核酸形成復(fù)合物。該復(fù)合物在高鹽溶液中(>0.7MNaCl)是可溶的,通過有機(jī)溶劑抽提,去除蛋白、多糖、多酚等雜質(zhì)后加入乙醇沉淀即可使核酸分離出來。SDS法:適用于細(xì)菌、血液、酵母、動物組織、細(xì)胞等。SDS是一種陰離子去污劑,可溶解細(xì)胞膜,裂解細(xì)胞,使蛋白質(zhì)變性、染色體解體。其它裂解方法:物理方式:機(jī)械剪切、超聲波破碎、研磨勻漿等化學(xué)方式:異硫氰酸胍、堿裂解等酶法:蛋白酶K3、DNA分離純化純化要求:核酸樣品中不應(yīng)存在對酶(如核酸內(nèi)切酶、DNA聚合酶等)有YZ作用的成分。其它生物大分子如蛋白質(zhì)、多糖、多酚和脂類分子等污染應(yīng)降低到Zdi程度。排除其它核酸分子的污染,如提DNA時(shí)應(yīng)去除RNA,反之亦然。純化方法:細(xì)胞破碎后,常使用吸附材料結(jié)合方法去除雜質(zhì)和純化DNA,主要有硅基質(zhì)材料、陰離子交換樹脂和磁珠等。因硅基質(zhì)材料可特異吸附核酸DNA,使用方便、快捷,不需要使用有毒溶劑如酚、氯仿等,使得提取基因組像過濾一樣簡單,因此硅基質(zhì)材料成為大規(guī)模分離純化DNA的通用方法。硅基質(zhì)材料吸附核酸的原理:主要利用DNA在高鹽低pH值環(huán)境下與硅基質(zhì)材料相結(jié)合,在低鹽高pH值環(huán)境下與硅基質(zhì)材料脫離的特征。其機(jī)理可能是高濃度鹽離子破壞了硅基質(zhì)水分子結(jié)構(gòu),形成陽離子橋,當(dāng)鹽被清除后,再水化的硅石破壞了基質(zhì)和DNA之間的吸引力,因而DNA從硅基質(zhì)上被洗脫下來。注意事項(xiàng):盡量簡化操作步驟,縮短提取過程,以減少各種有害因素對核酸的破壞。減少化學(xué)物質(zhì)對DNA的降解,為避免過酸、過堿對DNA雙鏈中磷酸二酯鍵的破壞,操作多在pH值4.0-10.0的條件下進(jìn)行。防止基因組DNA的生物降解,主要是DNase降解基因組DNA,DNase需二價(jià)金屬陽離子如Mg2+等的激活,可用EDTA等金屬離子螯合劑螯合Mg2+以YZDNase的活性。減少物理因素對DNA的降解,物理降解因素主要包括機(jī)械剪切力(如劇烈振蕩、攪拌等),細(xì)胞突然置于低滲液中導(dǎo)致的細(xì)胞爆炸式破裂,DNase大量釋放,樣品反復(fù)凍融和高溫等。4、DNA洗脫收集DNA的洗脫效率取決于以下重要因素:洗脫液成分:采用硅基質(zhì)膜吸附的DNA,可將DNA在低鹽高pH值條件下洗脫下來。pH值在7.0-8.5之間洗脫效率較高,pH值低于7.0則洗脫效率很低。一般基因組提取試劑盒中的洗脫緩沖液就是TE(pH8.0),既為DNA從硅基質(zhì)膜上洗脫下來提供良好的pH環(huán)境,其中的EDTA又能保證DNA不被DNase降解,同時(shí)由于EDTA濃度非常低,對核酸內(nèi)切酶、DNA聚合酶的影響非常微弱,不影響后續(xù)實(shí)驗(yàn),可放心使用。洗脫液體積:當(dāng)洗脫液體積小于30ul時(shí),洗脫效率很低且不穩(wěn)定;當(dāng)洗脫液體積在50-200ul時(shí),洗脫效率穩(wěn)定在80-90,并可保證得到Zda產(chǎn)量,因此洗脫液體積不能小于30ul。加洗脫液部位:100-200ul洗脫液能完全覆蓋硅基質(zhì)膜,DNA的洗脫量可得到保證,但當(dāng)洗脫液體積較少如30-50ul時(shí),須在硅基質(zhì)膜中間部分懸空滴加洗脫液,以確保少量的洗脫液能完全覆蓋硅膠膜。洗脫液的溫度:在加洗脫液之前,先將洗脫液在60-75℃水浴中預(yù)熱10分鐘,可有效提高DNA的洗脫效率。洗脫時(shí)間和次數(shù):加入預(yù)熱的洗脫液后,可在室溫放置2-5分鐘使DNA完全溶解在洗脫液里通過離心而洗脫下來。同時(shí)可進(jìn)行二次或三次洗脫,即將前次洗脫下來的洗脫液再上柱、離心,使前次沒有洗脫下來的DNA再次溶解在洗脫液里,從而提高DNA的產(chǎn)量。5、DNA的定量及檢測提取得到的DNA*片段需從分子質(zhì)量、濃度、純度等方面進(jìn)行檢測,從而判斷DNA質(zhì)量。用瓊脂糖凝膠電泳分析DNA分子質(zhì)量:得到的基因組DNA*片段的大小與樣品保存時(shí)間、操作過程中的剪切力等因素有關(guān)。Solarbio公司的基因組DNA提取試劑盒提取的不同材料基因組DNA*片段大小一般在50kb左右,能很好地滿足后續(xù)試驗(yàn)的要求。通常用瓊脂糖凝膠電泳分析DNA分子質(zhì)量時(shí),以溴酚藍(lán)為示蹤染料,EB染色,紫外觀察,并與DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)對照即可判斷所提DNA的平均分子量。高質(zhì)量的基因組DNA應(yīng)顯示為單一條帶,如DNA降解則表現(xiàn)為彌散條帶。用紫外分光光度計(jì)檢測DNA濃度和純度:濃度測定:DNA在OD260處有顯著吸收峰,OD260值為1相當(dāng)于大約50ug/ml雙鏈DNA。以下簡單介紹OD260的測定方法:所提基因組DNA樣品=100ul進(jìn)行OD260值測定的待測樣品=20ul所提基因組DNA樣品+180ulTE=200ulDNA稀釋倍數(shù)=200ul/20ul=10倍如200ul待測樣品OD260值=0.2待測樣品濃度(即100ul基因組DNA樣品濃度)=50ug/ml×OD260值×稀釋倍數(shù)=100ug/ml所提100ul基因組DNA樣品總量=100ug/ml×100ul=10ugDNA純度測定:一般用OD260/OD280值檢測DNA樣品的純度。正常OD260/OD280值約為1.7-1.9,說明DNA純度較好;若OD260/OD280值小于1.7,說明可能有蛋白污染;若OD260/OD280值大于2.0,說明可能有RNA污染或DNA已經(jīng)降解。注:因?yàn)閜H值和離子會影響光吸收值,因此洗脫時(shí)如不使用洗脫緩沖液,而使用去離子水,OD260/OD280值會偏低,但并不表示純度低。6、DNA的儲存儲存溶液:DNA為兩性解離分子,在堿性條件下較穩(wěn)定,因此一般用TE(pH8.0)保存。TE的成分為:10mMTris-HCl(Tris與鹽酸形成強(qiáng)的緩沖對);1mMEDTA(乙二胺四乙酸,能螯合二價(jià)金屬陽離子,YZDNase的活性);pH8.0(堿性條件可減少DNA的脫氨作用,防止降解)。ddH2O的正常pH值為7.0,可作為DNA的儲存液,但有些實(shí)驗(yàn)室制備的ddH2O呈酸性(pH值小于7.0),這不僅影響DNA的洗脫效率,而且導(dǎo)致長時(shí)間保存的DNA容易發(fā)生降解。因此建議用TE作為DNA的長期儲存液。儲存條件:為避免DNA降解,提取的DNA應(yīng)先進(jìn)行分裝,然后置于-20℃或-70℃保存,同時(shí)注意避免反復(fù)凍融造成DNA降解。[詳細(xì)]
2024-09-29 11:52
產(chǎn)品樣冊
快捷型植物基因組DNA提取試劑盒
資料名稱:快捷型植物基因組DNA提取試劑盒
適用產(chǎn)品:用本試劑盒快速提取的植物基因組DNA可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建等分子生物學(xué)下游實(shí)驗(yàn)。
正文語言:中文
文件編號:BP032-1
文件版本:1.0
文件格式:PDF
文件大?。?.9MB
內(nèi)容簡介:本試劑盒采用獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng),無需酚/氯仿抽提,操作安全,可Zda限度的去除雜蛋白及其他有機(jī)物等雜質(zhì);采用獨(dú)特的硅膠膜吸附技術(shù)能夠快速提取植物基因組DNA,適用于從新鮮植物或凍存植物組織中快速提取總基因組DNA,經(jīng)裂解后的DNA可GX結(jié)合到吸附柱上,殘留的少量雜質(zhì)可使用漂洗液進(jìn)行去除,Z后使用洗脫液進(jìn)行洗脫收集,獲得高純度的基因組DNA。[詳細(xì)]
2018-05-24 10:48
其它
快捷型土壤基因組DNA提取試劑盒
資料名稱:快捷型土壤基因組DNA提取試劑盒
適用產(chǎn)品:適用于從新鮮的土壤樣本(如花盆土、農(nóng)田土、花壇土、濕泥、河流沉積物等)中提取基因組DNA。
正文語言:中文
文件編號:BP038-1
文件版本:1.0
文件格式:PDF
文件大?。?.9MB
內(nèi)容簡介:本試劑盒采用獨(dú)特的硅膠膜吸附技術(shù)和緩沖液系統(tǒng),能夠40 min內(nèi)快速提取和純化土壤基因組DNA,可將土壤樣本中的腐殖酸等雜質(zhì)盡量去除,經(jīng)裂解后的DNA可GX結(jié)合到吸附柱上,殘留的少量雜質(zhì)可使用漂洗液進(jìn)行去除,Z后使用洗脫液進(jìn)行洗脫收集,獲得高純度的基因組DNA。用本試劑盒提取的土壤基因組DNA可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建等分子生物學(xué)下游實(shí)驗(yàn)。[詳細(xì)]
2018-05-24 11:16
其它
全血線粒體DNA萃取試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
全血線粒體DNA萃取試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細(xì)]
2015-06-11 00:00
選購指南
糞便基因組提取試劑盒說明書
糞便基因組提取試劑盒說明書[詳細(xì)]
2016-05-25 00:00
報(bào)價(jià)單
細(xì)菌基因組提取試劑盒說明書
細(xì)菌基因組提取試劑盒說明書[詳細(xì)]
2016-05-25 00:00
期刊論文
鼠尾基因組提取試劑盒說明書
鼠尾基因組提取試劑盒說明書[詳細(xì)]
2016-05-25 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
病毒基因組提取試劑盒(DNA)說明書
病毒基因組提取試劑盒(DNA)說明書[詳細(xì)]
2016-05-25 00:00
操作手冊
血液基因組提取試劑盒(master)說明書
血液基因組提取試劑盒(master)說明書[詳細(xì)]
2016-05-25 00:00
報(bào)價(jià)單
血液基因組提取試劑盒(midi)說明書
血液基因組提取試劑盒(midi)說明書[詳細(xì)]
2016-05-25 00:00
安裝說明
血液基因組提取試劑盒(mini)說明書
血液基因組提取試劑盒(mini)說明書[詳細(xì)]
2016-05-25 00:00
其它
總基因組提取試劑盒(mini)說明書
總基因組提取試劑盒(mini)說明書[詳細(xì)]
2016-05-25 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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