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全血基因組DNA提取試劑盒說明書

本文由 上海索寶生物科技有限公司 整理匯編

2018-09-02 10:00 10147閱讀次數(shù)

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全血基因組DNA提取試劑盒說明書貨號:D1800規(guī)格:50T/100T保存:室溫(15℃-25℃)干燥保存,復(fù)檢期12個(gè)月,2℃-8℃保存時(shí)間更長。試劑盒內(nèi)容:50T100TRNaseA1ml1ml×2蛋白酶K1ml1ml×2紅細(xì)胞裂解液120ml120ml×2溶液A15ml25ml溶液B15ml30ml漂洗液15ml30ml洗脫液10ml20ml吸附柱50個(gè)100個(gè)收集管50個(gè)100個(gè)說明書1份1份產(chǎn)品簡介:本試劑盒采用可以特異性結(jié)合DNA的離心吸附柱和獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng),提取全血基因組DNA。離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司特有新型材料,能夠GX、專一吸附DNA,可Zda限度去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。提取的基因組DNA片段大,純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建、Southern雜交等實(shí)驗(yàn)。操作步驟:使用前請先在漂洗液和溶液B中加入無水乙醇,加入休積請參照瓶體上的標(biāo)簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機(jī)在室溫下離心。1、樣品的處理(本產(chǎn)品適用于處理新鮮的或已經(jīng)添加抗凝劑的0.lml-1ml血液樣品):a、在血液樣品中加入2-3倍體積的紅細(xì)胞裂解液,充分顛倒混勻,12000rpm離心1min,小心吸去上清,沉淀應(yīng)為白色或淡紅色,如果裂解不徹底,可重復(fù)以上述步驟一次。向沉淀中加200ul溶液A,振蕩至徹底混勻。b、如果處理的血樣為禽類、鳥類、兩棲類或更低級生物的血液,其紅細(xì)胞為有核細(xì)胞,因此處理量為5-20u1,不需要再用紅細(xì)胞裂解液處理,直接加200ul溶液A,振蕩至徹底混勻。2、向懸浮液中加入20ul(10mg/ml)的RNaseA,充分顛倒混勻,室溫放置10min。3、加入20ul(10mg/ml)的蛋白酶K,充分顛倒混勻,65℃水浴消化30-60min,消化期間可顛倒離心管混勻數(shù)次,直至樣品消化完全為止。4、加入2倍體積溶液B(使用前請先檢查是否己加入無水乙醇),充分顛倒混勻,此時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀沉淀,不影響DNA的提取,可將溶液和絮狀沉淀都加入股附柱中,室溫放置2min,5、12000rpm離心2min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。6、向吸附柱中加入700ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm離心1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。7、向吸附柱中加入500ul漂洗液,12000rpm離心1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。8、12000rpm離心2min,將吸附柱敞口置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,否則漂洗液中的乙醇會影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)如酶切、PCR等。9、將吸附柱放入一個(gè)干凈的離心管中,向吸附膜ZY懸空滴加50-200ul經(jīng)65℃水浴預(yù)熱的洗脫液,室溫放置5min,12000rpm離心1min。10、離心所得洗脫液再加入吸附柱中,12000rpm離心2min,即可得到高質(zhì)量的基因組DNA。注意事項(xiàng):1、本試劑盒置于室溫(15-25℃)干燥條件下可保存12個(gè)月,更長時(shí)間的保存可置于2-8℃。2、常用的血液抗凝劑有EDTA、ACD和肝素等,需注意的是,如欲制各大分子量血液基因組DNA,可優(yōu)先考慮使用ACD抗凝。一般不使用肝素抗凝,因?yàn)橛酶嗡乜鼓难禾崛〉幕蚪MDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí),有PCR擴(kuò)增YZ現(xiàn)象。3、樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則會導(dǎo)致提取的DNA片段較小且提取量也下降。4、如果試劑盒中的溶液出現(xiàn)沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影響效果。5、絕大多數(shù)哺乳動物的全血如入全血中的紅細(xì)胞無核,故在提取基因組DNA時(shí)需去除不含DNA的無核紅細(xì)胞,以免影響紅細(xì)胞裂解和DNA釋放。如果處理的血樣為禽類、鳥類、兩棲類或更低級生物的血液,其紅細(xì)胞為有核細(xì)胞,因此處理量減少為5-20ul,不需要再用紅細(xì)胞裂解液來裂解紅細(xì)胞。6、洗脫緩沖液的體積**不少于50ul,體積過小會影響回收效率:洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響,若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)至此范圍),pH值低于7.0會降低洗脫效率。相關(guān)產(chǎn)品:D1850全血基因組DNA提取試劑系統(tǒng)E1020EB染色液D10106×DNALoadingBufferT106050×TAE緩沖液T10505×TBE緩沖液M1060D2000DNALadderM14001kbDNALadderG8142GoldViewII型核酸染色劑(5000×)全血基因組DNA提取試劑盒說明書現(xiàn)貨促銷全血基因組DNA提取試劑盒說明書現(xiàn)貨促銷ShanghaisolarbioBioscience&TechnologyCo.,LTD上海索萊寶生物科技有限公司是一家集銷售生化試劑、實(shí)驗(yàn)耗材、自產(chǎn)分子生物學(xué)產(chǎn)品為一體,并能提供技術(shù)支持的專業(yè)性生物科技公司。公司秉承“以客戶為ZX,以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念,在依靠客戶的大力支持和員工的不懈努力下獲得了快速的成長。公司組織結(jié)構(gòu)清晰,內(nèi)部管理科學(xué),擁有一支既分工細(xì)致又高度合作的年輕化隊(duì)伍,保持了各個(gè)部門之間的GX合作運(yùn)轉(zhuǎn),充分保障了公司在充滿競爭的市場中處于領(lǐng)xian地位。公司注重與業(yè)界精英合作,目前公司已經(jīng)和Amersham、Amresco、Axygen、BD、Corning、Dragon、Eppendorf、Fluka、Hyclone、Merck、Millipore、Omega、Oxoid、Pall、Peprotech、Pharmacia、Pierce、Roche、Sigma、Serva、TBD、Whatman、GBD、ADL、R&D、RB等企業(yè)結(jié)成緊密的合作伙伴關(guān)系,代理其領(lǐng)xian世界的產(chǎn)品,并在全國各地設(shè)有分銷機(jī)構(gòu)。我們將以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和實(shí)驗(yàn)技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗(yàn)、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫存、準(zhǔn)確的交貨時(shí)間、極具競爭力的價(jià)格,所有這些都保證了我們向您提供的是Z專業(yè)Zyou質(zhì)的服務(wù)!立足北京,上海,輻射全國,隨著產(chǎn)品營銷戰(zhàn)略的不斷延伸,我們將逐步發(fā)展成為yi流的專業(yè)性生物科技公司。我們希望能夠和尊敬的客戶一起,利用各自的資源優(yōu)勢和勇于進(jìn)取的敬業(yè)精神,為ZG生命科學(xué)研究的發(fā)展作出更多的貢獻(xiàn)。為了更好、更全面的發(fā)展,現(xiàn)公司正在誠招各地dai理商和招聘若干銷售、研發(fā)人員,歡迎垂詢并期待您的加入!全血基因組DNA提取試劑盒說明書現(xiàn)貨促銷全血基因組DNA提取試劑盒說明書現(xiàn)貨促銷聯(lián)系方式上海索萊寶生物科技有限公司電話:021-6485566518018609966傳真:021-54261506郵編:200233地址:上海市欽江路15號14層郵箱:solarbio@126.com網(wǎng)址:www.shsolarbio.com全血基因組DNA提取試劑盒說明書現(xiàn)貨促銷上海索萊寶021-54100800

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