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血液葡萄糖-6-磷酸脫氫酶酶動力比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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本文由 上海哈靈生物科技有限公司 整理匯編
2014-12-25 00:00 228閱讀次數(shù)
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血液葡萄糖-6-磷酸脫氫酶酶動力比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
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血液葡萄糖-6-磷酸脫氫酶酶動力比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 血液葡萄糖-6-磷酸脫氫酶酶動力比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2014-12-25 00:00
期刊論文
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血液葡萄糖-6-磷酸脫氫酶酶動力比色法定量檢測試劑盒
- 血液葡萄糖-6-磷酸脫氫酶酶動力比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途血液葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)活性酶動力比色法定量檢測試劑是一種旨在通過特異反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)還原后峰值的,即采用比色法來測定血液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種(動物、人體、昆蟲等)血液樣品中包括白細胞、紅細胞、血漿和血清等葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的總活性檢測。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(Glucose-6-phosphatedehydrogenase;G6PD)是一種細胞漿中的酶,參與磷酸戊糖代謝通路,通過維持還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)水平,提供細胞還原性能量,進而保持谷胱甘肽水平,幫助細胞,例如紅細胞,防止氧化損傷。同時NADPH的產(chǎn)生,促進組織細胞(例如肝臟、乳腺、脂肪組織、腎上腺等)生物合成脂肪酸、類異戊二烯等。在植物中,存在葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的多種異構(gòu)體,位于細胞漿、質(zhì)體基質(zhì)(plastidicstroma)、和過氧化體。葡萄糖-6-磷酸脫氫酶缺陷將導致急性溶血性貧血,即蠶豆病?;谄咸烟?6-磷酸(D-glucose-6-phosphate)在葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的作用下,轉(zhuǎn)化為6-磷酸葡萄糖酸內(nèi)脂(6-phosphoglucono-δ-lactone)產(chǎn)物后,同時其輔酶因子氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(oxidizednicotinamideadeninedinucleotidephosphate;β-NADP)轉(zhuǎn)化為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotidephosphate;β-NADPH),通過測定吸光值的變化(340nm波長),來定量分析葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的總活性。葡萄糖-6-磷酸脫氫酶反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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小鼠葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)ELISA試劑盒說明書
- 小鼠葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠G6PD單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的G6PD與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗小鼠G6PD,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,G6PD濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中G6PD濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):5U/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成10U/ml的溶液。設(shè)標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入10U/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標準品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0U/L為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)G6PD含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的G6PD檢測濃度小于8U/L。2.特異性:可同時檢測重組或天然的小鼠G6PD。不與小鼠其它細胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應(yīng)同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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6-磷酸葡萄糖脫氫酶[大腸桿菌] 使用說明
- 活動:消費積分可換充值卡!中文:6-磷酸葡萄糖脫氫酶[大腸桿菌]英文:Glucose6-phosphatedehydrogenase(E.coli)貨號:E-GPDHEC規(guī)格:5,000Units價格:2256元類別:碳水化合物活性酶簡介:碳水化合物活性酶,活躍在復雜的碳水化合物和糖復合物,酶的活性::GlycosideHydrolases(GHs);Glycosyl-Transferases(GTs);PolysaccharideLyases(PLs);CarbohydrateEsterases(CEs)andCarbohydrate-BindingModules(CBMs)說明書:點擊上面“”[詳細]
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2018-09-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細菌異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細菌異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-04-08 00:00
期刊論文
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細菌琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書 (中文版)
- 細菌琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書 (中文版)[詳細]
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2015-01-05 00:00
期刊論文
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純化線粒體琥珀酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 純化線粒體琥珀酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途純化線粒體琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在使用合成電子受體染料,通過反應(yīng)系統(tǒng)測定染料還原后峰值的降低,即采用比色法測算樣品中單位酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種純化線粒體裂解懸液樣品琥珀酸脫氫酶的特異性活性檢測。用于衰老、能量代謝、蛋白組學、病理生理學、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測敏感。技術(shù)背景琥珀酸脫氫酶(succinatedehydrogenase;SDH;EC1.3.99.1)是三羧酸循環(huán)(tricarboxylicacidcycle;TCA)或Krebs循環(huán)中與細胞線粒體膜相關(guān)的重要元素,位于線粒體內(nèi)膜,參與細胞呼吸鏈。琥珀酸脫氫酶由27kd和70kd兩個單體組成。其功能在于催化琥珀酸(succinate)的氧化反應(yīng),產(chǎn)生延胡索酸(furmarate),通過黃素腺嘌呤二核苷酸(FlavinAdenineDinucleotide;FAD)傳遞電子。基于琥珀酸脫氫酶的反應(yīng)原理,使用人工電子受體染料二氯靛酚鈉(2,6-Dichloroindophenolsodium;DCIP),接受來自還原型黃素腺嘌呤二核苷酸(ReducedflavinAdenineDinucleotide;FADH2)的電子,而被還原,在分光光度儀下,其吸光值(600nm波長)的變化,來測算琥珀酸脫氫酶的活性。其反應(yīng)方式為:產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)XX毫升裂解液(ReagentB)XX毫升緩沖液(ReagentC)XX毫升反應(yīng)液(ReagentD)XX毫升底物液(ReagentE)XX毫升陰性液(ReagentF)XX微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里;其余的保存在-20℃冰箱里,避免反復凍融;反應(yīng)液(ReagentD)含有毒性物質(zhì),避免直接用手接觸;底物液(ReagentE),避免光照;有效保證3月用戶自備15毫升錐形離心管:用于樣品制備的容器1.5毫升離心管:用于樣品制備和保存的容器4℃(微型)臺式離心機:用于樣品處理DOUNCE勻漿器:用于裂解組織恒溫培養(yǎng)箱或恒溫水槽:用于反應(yīng)物孵育比色皿:用于比色測定的容器分光光度儀:用于比色分析實驗步驟實驗開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液置入冰槽里融化;底物液(ReagentE)注意避光。然后進行下列操作。一、樣品準備手術(shù)取出動物組織,并秤重以確定200毫克組織重量(選擇步驟)放進預冷的15毫升錐形離心管(選擇步驟)加入XX毫升清理液(ReagentA)清洗(選擇步驟)抽去清洗液移入到一個液氮凍存管即刻放進液氮罐過夜次日從液氮罐里取出,即刻(Z快速度)用研磨棒碾碎組織成粉末狀(注意:切莫使組織凍融)放進一個15毫升錐形離心管加入置于冰槽里的XX毫升裂解液(ReagentB)渦旋震蕩5秒,充分混勻即刻放入預冷的DOUNCE勻漿器在冰槽里用勻漿棒勻化組織(約20至40下)(注意:參見注意事項8)將所有組織勻漿物移入1.5毫升離心管放進4℃微型臺式離心機離心10分鐘,速度為1500g小心移出上清液到另一個新的預冷的1.5毫升離心管放進4℃微型臺式離心機離心10分鐘,速度為10000g小心抽去上清液加入XX微升裂解液(ReagentB),混勻顆粒群移取10微升進行蛋白定量檢測(注意:建議使用Bradford蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒-GMS30030.1)放進-70℃的冰箱里保存或置于冰槽里備用二、測定準備準備好待測樣品,置于冰槽里設(shè)定好分光光度儀(溫度為25℃):波長600nm,間隔60秒,讀數(shù)6次(共5分鐘),并置零緩沖液(ReagentC)在室溫下均衡溫度背景對照測定移取XX微升緩沖液(ReagentC)到新的比色皿加入XX微升反應(yīng)液(ReagentD)加入XX微升底物液(ReagentE)放進25℃培養(yǎng)箱里靜置3分鐘[詳細]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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血液總脂肪酶(lipase)活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 血液總脂肪酶(lipase)活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-03-30 00:00
實驗操作
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乳酸脫氫酶(LDH)總活性終點比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 乳酸脫氫酶(LDH)總活性終點比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-05-22 00:00
安裝說明
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己糖激酶/6-磷酸葡萄糖脫氫酶 使用說明
- 活動:消費積分可換充值卡!中文:己糖激酶/6-磷酸葡萄糖脫氫酶英文:Hexokinase/Glucose-6-phosphatedehydrogenase貨號:E-HKGDH規(guī)格:10mLHexokinase(420U/ml)+G6P-DH(210U/ml)價格:2160元類別:碳水化合物活性酶簡介:碳水化合物活性酶,活躍在復雜的碳水化合物和糖復合物,酶的活性::GlycosideHydrolases(GHs);Glycosyl-Transferases(GTs);PolysaccharideLyases(PLs);CarbohydrateEsterases(CEs)andCarbohydrate-BindingModules(CBMs)說明書:點擊上面“”[詳細]
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2018-09-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)檢測原理及測定意義
- 葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)檢測原理及測定意義測定原理:正常血紅蛋白是亞鐵血紅蛋白,可被氧化成為高鐵血紅蛋白,當紅細胞內(nèi)G-6-PD含量正常時,通過戊糖代謝旁路形成的NADPH可作為血液中高鐵血紅蛋白還原酶的輔酶,并在遞氫體的參與下,高鐵血紅蛋白還原為亞鐵血紅蛋白。當紅細胞內(nèi)缺少G-6-PD時,高鐵血紅蛋白不能被還原,通過測定高鐵血紅蛋白的吸光度,可算出G-6-PD的活力高低。測定意義:紅細胞中G-6-PD催化反應(yīng)生成的NADPH是谷胱甘肽還原酶的輔助酶。還原型谷胱甘肽(GSH)是保持血紅蛋白穩(wěn)定性及紅細胞膜完整性的必要條件,代謝產(chǎn)生的自由基,或與氧合血紅蛋白作用形成的H2O2,使GSH氧化成GSSG,由于GSH低,血紅蛋白的巰基失去GSH的保護,被氧化變性形成Heinz小體,紅細胞膜失去巰基保護而功能受損,終致溶血。公司提供葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)檢測試劑盒,同時提供代測歡迎,質(zhì)量保證,技術(shù)**,歡迎廣大客戶咨詢訂購[詳細]
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2018-09-19 10:00
產(chǎn)品樣冊
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Ca-ATP酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- Ca-ATP酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書主要用途ATP酶存在于組織細胞及細胞器的膜上,是生物膜上的一種蛋白酶,機體在缺氧及等狀態(tài)下,ATP酶受到損傷,活力下降。ATP酶活力的大小是各種細胞能量代謝及功能有無損傷的重要指標。本測試盒可測鈉鉀ATP酶、鈣鎂ATP酶的活性。樣品為各種組織及紅細胞等,本法的Zda特點是樣品前處理不需要高速離心機,方法簡便、快速。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)6毫升反應(yīng)液(ReagentB)6毫升底物液(ReagentC)6毫升陰性液(ReagentD)6毫升標準品(reagentE)6微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentC)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里;底物液(ReagentC)避免光照,有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管:用于反應(yīng)液配制的容器微型臺式離心機:用于樣品制備比色皿或酶標板:用于比色的容器分光光度儀:用于比色分析酶標儀:用于微量樣品比色分析實驗步驟實驗開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的反應(yīng)液(ReagentB)和底物液(ReagentC)置入冰槽里融化。底物液(ReagentC)避免光照。然后進行下列操作。樣品準備選擇一:血漿樣品1.準備好ACD抗凝管(注意:避免使用肝素或EDTA抗凝管)2.抽取2毫升血液,置于抗凝管里3.放進4℃微型臺式離心機離心10分鐘,速度為5000g4.小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血漿成分(注意:避免觸碰白色液體層)5.即刻置于冰槽里備用或放進-70℃冰箱里保存6.(選擇步驟)移取50微升進行蛋白定量測定選擇二:血清樣品1.準備好不含抗凝劑的儲存管2.抽取2毫升血液,置于儲存管里3.室溫下,靜置30分鐘,直至血液凝結(jié)4.放進4℃微型臺式離心機離心15分鐘,速度為5000g5.小心移取上層黃色液體到新的1.5毫升離心管――此為血清成分(注意:避免觸碰白色液體層)6.即刻置于冰槽里備用或放進-70℃冰箱里保存7.(選擇步驟)移取50微升進行蛋白定量測定選擇三:組織樣本準確稱取組織重量,按照重量(g):體積(ml)=1:9的比例,加入9倍的是PBS或者生理鹽水,冰水浴條件下機械勻漿,2500轉(zhuǎn)/分,離心10分鐘,去上清液待測。二、測定準備1.準備好上述待測樣品,置于冰槽里2.設(shè)定好分光光度儀(溫度為37℃):波長440nm三、樣本測定1.在96孔酶標板上做好相應(yīng)標記:背景對照,標準品孔和樣品孔2.分別移取50微升緩沖液(ReagentA)到相應(yīng)孔中3.設(shè)定標準品孔(加入50微升標準品),樣本孔(加入50微升樣本)陰性液孔(加入50微升陰性液(ReagentD)4.分別加入50微升反應(yīng)液(ReagentB)5.輕輕搖動96孔酶標板6.在37℃溫度下孵育2分鐘7.放進酶標儀,置零8.取出酶標板,分別加入50微升底物液(ReagentC)9.輕輕搖動酶標板10.即刻放進酶標儀檢測,包括(0分鐘初始讀數(shù)和5分鐘讀數(shù))四,樣本計算樣本活性=樣本OD值/標準OD值*標品濃度[詳細]
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2024-09-29 05:34
產(chǎn)品樣冊
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6-磷酸葡萄糖脫氫酶[腸系膜明串珠菌] 使用說明
- 活動:消費積分可換充值卡!中文:6-磷酸葡萄糖脫氫酶[腸系膜明串珠菌]英文:Glucose6-phosphatedehydrogenase(Leuconostocmesenteroides)貨號:E-GPDH5規(guī)格:5,000Units價格:2384元類別:碳水化合物活性酶簡介:碳水化合物活性酶,活躍在復雜的碳水化合物和糖復合物,酶的活性::GlycosideHydrolases(GHs);Glycosyl-Transferases(GTs);PolysaccharideLyases(PLs);CarbohydrateEsterases(CEs)andCarbohydrate-BindingModules(CBMs)說明書:點擊上面“”[詳細]
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2018-09-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細胞脂質(zhì)比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)
- 細胞脂質(zhì)比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)[詳細]
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2015-05-12 00:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠 (Rat) 葡萄糖6磷酸脫氫酶 檢測試劑盒
- 大鼠(Rat)葡萄糖6磷酸脫氫酶(G-6-PD)檢測試劑盒本試劑僅供研究使用試驗原理:G-6-PD試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知G-6-PD濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將G-6-PD和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中G-6-PD的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品:80IU/gHb1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標準品稀釋緩沖液1瓶(4.0ml)1瓶(2.0ml)即用型生物素標記的抗G-6-PD抗體1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備標準品:標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:80IU/gHb(6號標準品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。40IU/gHb(5號標準品)100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液20IU/gHb(4號標準品)100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液10IU/gHb(3號標準品)100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液5.0IU/gHb(2號標準品)100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液2.5IU/gHb(1號標準品)100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0IU/gHb(空白對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標準品濃度(IU/gHb)A8080樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B4040樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C2020樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D1010樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5.05.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F2.52.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。3.重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的G-6-PD標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的G-6-PD含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-80IU/gHb4、敏感度:0.1IU/gHb[詳細]
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2018-10-31 10:00
產(chǎn)品樣冊
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組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書...
- 組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書(中文版)主要用途組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測試劑盒是一種旨在使用乙醛脫氫酶2敏感性YZ劑,通過檢測反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)還原后峰值的,即采用比色法來測定組織裂解萃取液樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種組織裂解懸液樣品(動物、人體等)乙醛脫氫酶2的特異活性檢測。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景乙醛脫氫酶(aldehydedehydrogenase;ALDH;EC1.2.1.3),又稱為乙醛NAD氧化還原酶(aldehydeNAD-oxidoreductase)是一類NAD(P)依賴性酶,催化廣譜的外源性或內(nèi)源性脂肪族和芳香族乙醛類底物氧化,包括乙醇、氨基酸、生物胺(biogenicamine)、維生素、固醇類、脂質(zhì)、藥物和環(huán)境分子等代謝產(chǎn)物。乙醛脫氫酶是乙醇在體內(nèi)分解代謝過程中兩種主要酶之一。乙醛脫氫酶把乙醛中的兩個氫原子脫掉,使乙醛轉(zhuǎn)化為乙酸,生成的乙酸進入脂肪酸氧化途徑,Z終被氧化成二氧化碳和水。乙醛脫氫酶主要有兩種同工酶:ALDH1和ALDH2。ALDH1存在于胞液中,ALDH2存在于線粒體中,ALDH2比ALDH1的活性高。乙醛脫氫酶的缺少,使酒精不能被完全分解為水和二氧化碳,而是以乙醛繼續(xù)留在體內(nèi),使人喝酒后產(chǎn)生惡心欲吐、昏迷不適等醉酒癥狀?;趤碜杂谝掖即x產(chǎn)生的乙醛(acetaldehyde),在7-羥基-3-(4-羥苯基)-異黃酮-7-糖苷(Daidzein-7-O-β-D-glucopyranoside;Daidzin)存在與否的情況下,由乙醛脫氫酶2的催化作用,轉(zhuǎn)化為乙酸(aceticacid)產(chǎn)物后,通過測定反應(yīng)體系中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizedreducednicotinamideadeninedinucleotide;NAD)轉(zhuǎn)化為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)的變化(340nm波長),來定量分析乙醛脫氫酶2的特異活性。乙醛脫氫酶2反應(yīng)系統(tǒng)為:產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升緩沖液(ReagentC)毫升反應(yīng)液(ReagentD)毫升底物液(ReagentE)毫升陰性液(ReagentF)毫升專性液(ReagentG)微升產(chǎn)品說明書1份保存方式保存緩沖液(ReagentC)、反應(yīng)液(ReagentD)、底物液(ReagentE)和專性液(ReagentG)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里;反應(yīng)液(ReagentD)和底物液(ReagentE)避免光照;有效保證6月[詳細]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊
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細菌異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
- 主要用途細菌異檸檬酸脫氫酶(ISOCITRATEDEHYDROGENASE)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過反應(yīng)系統(tǒng)中氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酸(NADP)還原后峰值的變化,即采用比色法來測定細菌裂解樣品中酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種細菌細胞裂解懸液樣品異檸檬酸脫氫酶的活性檢測。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。技術(shù)背景異檸檬酸脫氫酶(isocitratedehydrogenase;IDH;EC1.1.1.42)是三羧酸循環(huán)(citricacidcycle)或克雷布斯循環(huán)(Krehescycle)中的酶之一,存在于所有生物體內(nèi)。細菌異檸檬酸脫氫酶有2種同工酶:同源雙體,40至45Kd分子量;單體,80至100Kd分子量。在細菌體內(nèi),氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(oxidizedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate;NADP)依賴性異檸檬酸脫氫酶獲得輔酶NADP和輔助因子錳或鎂離子(Mn)的推動,脫去底物異檸檬酸的氫和二氧化碳(氧化性脫羧基作用),轉(zhuǎn)化為α-酮戊二酸(α-ketoglutarate),同時生成還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(reducedβ-Nicotinamideadeninedinucleotidephosphate;NADPH)。一旦磷酸化或在乙酸環(huán)境中,以及有限的葡萄糖條件下,異檸檬酸脫氫酶則失活,從而控制三羧酸循環(huán)和乙醛酸旁路(glyoxylatebypass)之間碳的流動?;诋悪幟仕崦摎涿傅腘ADP依賴性,和作用后所產(chǎn)生的NADPH,通過分光光度儀的峰值變化(340nm波長),來定量分析異檸檬酸脫氫酶的活性。異檸檬酸脫氫酶反應(yīng)系統(tǒng)為:[詳細]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人葡萄糖6磷酸脫氫酶酶elisa試劑盒實驗原理
- 使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中葡萄糖6磷酸脫氫酶(G6PD)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人葡萄糖6磷酸脫氫酶(G6PD)水平。用純化的人葡萄糖6磷酸脫氫酶(G6PD)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入葡萄糖6磷酸脫氫酶(G6PD),再與HRP標記的葡萄糖6磷酸脫氫酶(G6PD)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的葡萄糖6磷酸脫氫酶(G6PD)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人葡萄糖6磷酸脫氫酶(G6PD)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(40mIU/mL)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個[詳細]
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2018-10-08 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人葡萄糖6磷酸脫氫酶酶elisa試劑盒使用目的
- 人葡萄糖6磷酸脫氫酶酶elisa試劑盒使用目的[詳細]
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2024-09-29 10:46
實驗操作
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6-磷酸葡萄糖二鈉鹽
- 產(chǎn)品名稱:6-磷酸葡萄糖二鈉鹽別名:D-葡萄糖-6-磷酸二鈉鹽,6-磷酸葡萄糖酸二鈉鹽,G-6-P-Na2RobisonesterD-glucose6-phosphatedisodiumsalthydrateCAS:3671-99-6http://www.shhyswsj.com/products/分子式:C6H11Na2O9PxH2O分子量:304.10[詳細]
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2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊
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