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大鼠多巴胺ELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟
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本文由 上海信然實(shí)業(yè)有限公司 整理匯編
2015-04-21 00:00 225閱讀次數(shù)
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大鼠多巴胺ELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟
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大鼠多巴胺ELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟
- 大鼠多巴胺ELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟[詳細(xì)]
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2015-04-21 00:00
操作手冊(cè)
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大鼠 (Rat) 多巴胺ELISA 檢測(cè)試劑盒
- 試驗(yàn)原理:Dopamine試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知Dopamine濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將Dopamine和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Dopamine的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品:1600ng/L1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀稀空白對(duì)照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標(biāo)記的抗Dopamine抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標(biāo)本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。[詳細(xì)]
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2018-09-19 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠多巴胺(DA)ELISA試劑盒
- 大鼠多巴胺(DA)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-10 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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大鼠多巴胺(DA)檢測(cè)試劑盒
- 大鼠多巴胺(DA)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-22 22:25
期刊論文
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大鼠多巴胺(DA)檢測(cè)試劑盒
- 大鼠多巴胺(DA)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-22 18:39
實(shí)驗(yàn)操作
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大鼠多巴胺(Dopamine)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 電話(huà):021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠多巴胺(Dopamine)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠Dopamine單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的Dopamine與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠Dopamine,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,Dopamine濃度與OD值成正比,可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)求出標(biāo)本中Dopamine濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):10ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清至少10倍稀釋,血漿可以不在稀釋。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋?zhuān)瑥牡谄吖苤形?00ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋?zhuān)ㄊ纠?ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋?zhuān)ㄊ纠?ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線(xiàn)圖上查出相應(yīng)Dopamine含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的Dopamine檢測(cè)濃度小于15pg/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的大鼠Dopamine。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠多巴胺ELISA試劑盒中文說(shuō)明書(shū)
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4 大鼠多巴胺ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) 本試劑僅供研究使用標(biāo)本:組織勻漿試驗(yàn)原理:Dopamine試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知Dopamine濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將Dopamine和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Dopamine的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品:1600ng/L1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀稀空白對(duì)照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標(biāo)記的抗Dopamine抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標(biāo)本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。大鼠多巴胺ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。9.按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液5、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備1.標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:1600ng/L(6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。800ng/L(5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液400ng/L(4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200ng/L(3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100ng/L(2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ng/L(1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0ng/L(空白對(duì)照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋?zhuān)赫麴s水50倍稀釋。大鼠多巴胺ELISA試劑盒操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。9.在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。建議使用的實(shí)驗(yàn)方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ng/L)A16001600樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線(xiàn)性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)無(wú)法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線(xiàn)性。樣品線(xiàn)性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的Dopamine標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線(xiàn),樣品的Dopamine含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍:0-1600ng/L4、敏感度:1.0ng/L[詳細(xì)]
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2024-09-11 18:02
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒
- 大鼠多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-09 00:00
期刊論文
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大鼠多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)ELISA試劑盒
- 大鼠多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-09 00:00
應(yīng)用文章
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大鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒
- 大鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-10 00:00
其它
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大鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒
- 大鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-10 00:00
其它
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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理與操作步驟
- 上海勁馬生物科技有限公司ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理與操作步驟實(shí)驗(yàn)方法:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)檢測(cè)原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法操作步驟:具體請(qǐng)參照說(shuō)明書(shū)(詳細(xì)說(shuō)明書(shū)請(qǐng)聯(lián)系我司業(yè)務(wù)人員:021-60517348,13817140470。)注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2024-09-11 18:03
產(chǎn)品樣冊(cè)
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加A試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟
- 利用具有3’-5’外切酶活性的高保真DNa聚合酶,如Pfu等進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí),其PCR產(chǎn)物為不帶A尾的平末端DNa片段,如想將該片段克隆到T載體上,需要先利用A-Tai領(lǐng)Enzyme在平末端片段后加上A尾后才能與T載體上3’末端的T堿基互補(bǔ)連接。本產(chǎn)品是在平末端DNa片段的3’末端添加一個(gè)A尾,使平末端的DNa片段進(jìn)行TA克隆成為可能。本試劑盒提供了加A尾需要的所有成分,可以在30分鐘完成整個(gè)過(guò)程。與平末端DNa片段克隆相比,TA克隆具有較高的克隆效率,可大大提高實(shí)驗(yàn)成功率。[詳細(xì)]
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2018-09-04 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠雌二醇ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作方法
- 大鼠雌二醇ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作方法[詳細(xì)]
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2015-04-24 00:00
課件
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大鼠鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CaN)Elisa試劑盒操作步驟
- 使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CaN)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CaN)水平。用純化的大鼠鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CaN)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CaN),再與HRP標(biāo)記的鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CaN)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CaN)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中大鼠鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CaN)濃度。標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人 (Human) 多巴胺 (Dopamine) ELISA 檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 人(Human)多巴胺(Dopamine)ELISA檢測(cè)試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿試驗(yàn)原理:Dopamine試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知Dopamine濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將Dopamine和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Dopamine的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品:800nmol/L1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀稀空白對(duì)照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標(biāo)記的抗Dopamine抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標(biāo)本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。9.按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液5、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備1.標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:800nmol/L(6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。400nmol/L(5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200nmol/L(4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100nmol/L(3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50nmol/L(2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25nmol/L(1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0nmol/L(空白對(duì)照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋?zhuān)赫麴s水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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萊克多巴胺(Rac)定量檢測(cè)試劑盒(ELISA)
- www.biokanu.com萊克多巴胺(Rac)定量檢測(cè)試劑盒(ELISA)使用說(shuō)明書(shū)一、概要β興奮劑是一種人和獸醫(yī)作為ZL哮喘的藥物。在牲畜中超劑量使用可以脂肪組織轉(zhuǎn)化為肌肉組織,由于能夠顯著改善脂肪率和生產(chǎn)效率,β興奮劑往往被濫用于畜牧養(yǎng)殖生產(chǎn)中。已經(jīng)有克倫特羅或其他β興奮劑中毒的病例報(bào)道,近來(lái)又有一些非法使用萊克多巴胺(Rac)來(lái)替代克倫特羅作為飼料添加,并存在濫用現(xiàn)象。通常情況下,HPLC或GC-MS是克倫特羅殘留檢測(cè)的確證方法,但是其前處理步驟繁瑣、費(fèi)用昂貴。酶聯(lián)免疫快速檢測(cè)試劑盒具有成本低廉、操作簡(jiǎn)便、一次處理樣本量大等優(yōu)點(diǎn),已成為常規(guī)的初步篩查方法。本試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)的新一代藥物殘留檢測(cè)產(chǎn)品,與儀器分析技術(shù)相比具有快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確和靈敏度高等特點(diǎn),能Zda限度地減少操作誤差和工作強(qiáng)度。二、用途定量檢測(cè)動(dòng)物尿液中萊克多巴胺(Rac)的殘留。三、檢測(cè)原理本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫試驗(yàn)。檢測(cè)的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng),微孔板預(yù)包被羊抗鼠IgG捕獲抗體,加入鼠抗萊克多巴胺抗體后,會(huì)與捕獲抗體連接。經(jīng)過(guò)孵育及洗板后,加入標(biāo)準(zhǔn)品、樣品及萊克多巴胺酶標(biāo)記物(Rac-HRP),游離的萊克多巴胺(Rac)與萊克多巴胺酶標(biāo)記物(Rac-HRP)競(jìng)爭(zhēng)萊克多巴胺抗體結(jié)合位點(diǎn)。經(jīng)過(guò)孵育及洗板后,加入底物并孵育。結(jié)合的酶連接物將底物轉(zhuǎn)化為藍(lán)色的產(chǎn)物。加入反應(yīng)終止液后使顏色由藍(lán)轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。在450nm處測(cè)量,吸光度值與樣品中的萊克多巴胺濃度成反比,與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)比較再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即可得出樣品中萊克多巴胺的含量。四、檢測(cè)限檢測(cè)限:0.05ng/ml(0.05ppb)五、特異叉物交叉率(%)Dobutamine……………………………………5.3Ritodrine………………………………………3.6RactopamineGluc.A…………………………1.0RactopamineGlucB……………………………384(1S,3S)Ractopamine…………………………2.1(1R,3S)-Ractopamine……………………………0.9Isoxsuprine………………………………………0.3Salmeterol…………………………………………0.3Fenoterol…………………………………………0.1Clenbuterol……………………………………<0.01Salbutamol………………………………………<0.01六、試劑盒組成每一個(gè)盒中的試劑足夠進(jìn)行96個(gè)試驗(yàn)(包括標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定),試劑盒中的組份如下:1、96孔酶標(biāo)板1塊(12孔×8條):預(yù)包被羊抗鼠IgG2、標(biāo)準(zhǔn)液×6瓶(1ml/瓶):0ng/mL、0.1ng/mL、0.3ng/mL、0.9ng/mL、2.7ng/mL、8.1ng/mL3、酶連接物(6mL):辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的萊克多巴胺工作液4、萊克多巴胺抗體(6mL):鼠抗萊克多巴胺單克隆抗體工作液5、底物液A(6mL):過(guò)氧化脲6、底物液B(6mL):四甲基聯(lián)苯胺(TMB)7、終止液(6mL):2NH2SO48、濃縮洗滌液(25×)(25mL):含Tween-20的磷酸鹽緩沖液(PBST)9、其他:封板膜3張,自封袋1個(gè),說(shuō)明書(shū)1份七、樣本處理處理任何樣本,必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時(shí)要更換吸頭。取50μL清亮尿樣直接測(cè)定,如尿樣渾濁3000轉(zhuǎn)離心10min,取上層清亮尿液測(cè)定,暫不使用的樣本應(yīng)于-20℃冷凍保存。八、檢測(cè)步驟仔細(xì)的洗滌非常重要。避免在操作過(guò)程中微孔出現(xiàn)干燥。1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,置于室溫(20-25℃)平衡30min以上。2、準(zhǔn)備:取出需要數(shù)量的微孔板,將用剩的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。將微孔板條插入微孔架,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品做兩個(gè)平行實(shí)驗(yàn),記錄下標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位置。3、加抗體:每孔加入100μL稀釋后的抗體溶液,37℃恒溫箱孵育30分鐘。4、洗板:倒出孔中的液體,將微孔架倒置在干凈吸水紙上拍打,以保證完全除去孔中的液體。每孔加滿(mǎn)稀釋后的洗滌工作液,靜置20秒鐘,甩去液體,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次。5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品:加入50μL標(biāo)準(zhǔn)品或處理好的樣品到各自的微孔中,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品做兩個(gè)平行實(shí)驗(yàn),然后加入50μL稀釋后的酶連接物到微孔,小心地充分混合,37℃恒溫箱孵育30分鐘。6、重復(fù)3的操作。7、顯色:每孔先加入底物液A50μL,再加入底物液B50μL,37℃避光孵育15min(如果顯色過(guò)淺,可適當(dāng)延長(zhǎng)孵育時(shí)間,反之亦然)。8、測(cè)定:每孔加入終止液50μL,設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處,測(cè)定每孔OD值。九、結(jié)果判定(1)百分吸光率的計(jì)算,標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光度值的平均值(雙孔)除以**個(gè)標(biāo)準(zhǔn)(0標(biāo)準(zhǔn))的吸光度值,再乘以1**%,即百分吸光度值(%)=B×1**%B0B標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值B00ppb標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制與計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo),以萊克多巴胺標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ppb)的半對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)中,從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上讀出樣本所對(duì)應(yīng)的濃度,乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中萊克多巴胺的實(shí)際濃度。若利用試劑盒專(zhuān)業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算,更便于大量樣本的準(zhǔn)確、快速分析。(歡迎來(lái)電索?。┦⒆⒁馐马?xiàng)1、嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作時(shí)間,每加一種試劑前需要將其搖勻,各操作步驟緊湊進(jìn)行。2、室溫低于20℃或試劑及樣本沒(méi)有回到室溫(20-25℃)會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。3、在洗板過(guò)程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)不成線(xiàn)性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。4、試劑變質(zhì)的跡象底物有任何顏色表明變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。5、不要使用過(guò)了有效日期的試劑盒;也不要使用過(guò)了有效期的試劑盒中的任何試劑,摻雜使用過(guò)了有效期的試劑盒會(huì)引起靈敏度的降低;不要交換使用不同批號(hào)試劑盒中的試劑。6、在加入底物液A液和底物液B液后,一般顯色20min即可。若顏色較淺,可延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間到25min(或更長(zhǎng)),但不得超過(guò)30min。反之,則減短反應(yīng)時(shí)間。7、反應(yīng)終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。十一、貯存條件及有效期貯存條件:2-8℃、干燥避光防潮。有效期:在正確貯存條件下,有效期為12個(gè)月。[詳細(xì)]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠前列腺素分析檢測(cè)試劑盒操作步驟
- 大鼠前列腺素分析檢測(cè)試劑盒操作步驟[詳細(xì)]
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2016-04-05 00:00
專(zhuān)利
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人多巴胺(DA)ELISA試劑盒
- 人多巴胺(DA)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-28 00:31
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小鼠多巴胺(DA)ELISA試劑盒
- 小鼠多巴胺(DA)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-30 06:15
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