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豬活性氧(ROS)ELISA檢測(cè)試劑盒
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本文由 上海研生生化試劑有限公司 整理匯編
2015-09-21 00:00 249閱讀次數(shù)
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豬活性氧(ROS)ELISA檢測(cè)試劑盒
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豬活性氧(ROS)ELISA檢測(cè)試劑盒
- 豬活性氧(ROS)ELISA檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2015-09-21 00:00
期刊論文
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人活性氧簇(ROS)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
- 人活性氧簇(ROS)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書本試劑盒僅供研究使用。實(shí)驗(yàn)原理人活性氧簇(ROS)ELISA檢測(cè)試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人活性氧簇(ROS)水平。用純化的人活性氧簇(ROS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入活性氧簇(ROS),再與HRP標(biāo)記的活性氧簇(ROS)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的活性氧簇(ROS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人活性氧簇(ROS)濃度。人活性氧簇(ROS)ELISA檢測(cè)試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(16ng/mL)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。人活性氧簇(ROS)ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。8ng/mL5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液4ng/mL4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2ng/mL3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1ng/mL2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0.5ng/mL1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。人活性氧簇(ROS)ELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。人活性氧簇(ROS)ELISA檢測(cè)試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2024-09-30 13:06
產(chǎn)品樣冊(cè)
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小鼠活性氧(ROS)ELISA試劑盒說(shuō)明書
- 小鼠活性氧(ROS)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定小鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中小鼠活性氧(ROS)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠活性氧(ROS)水平。用純化的小鼠活性氧(ROS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入活性氧(ROS),再與HRP標(biāo)記的活性氧(ROS)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的活性氧(ROS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠活性氧(ROS)含量。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說(shuō)明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:540U/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為360U/ml,240U/ml,120U/ml,60U/ml,30U/ml)。加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng):試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請(qǐng)避光保存。嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書有異,以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批間應(yīng)分別小于9%和11%檢測(cè)范圍:20U/ml-400U/ml保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-11-07 14:16
產(chǎn)品樣冊(cè)
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兔活性氧(ROS)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書
- 兔活性氧(ROS)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書[詳細(xì)]
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2015-03-23 00:00
期刊論文
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雞活性氧簇(ROS)ELISA試劑盒說(shuō)明書
- l本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中雞活性氧簇(ROS)的含量。l有效期:6個(gè)月l保存條件:2-8℃l本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷實(shí)驗(yàn)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被雞活性氧簇(ROS)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的雞活性氧簇(ROS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。樣本處理及要求1.血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)一夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8°C1000g離心20分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.組織勻漿:用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶YZ劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。Z后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測(cè)。4.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。注:標(biāo)本溶血會(huì)影響Z后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。標(biāo)本處理1.本公司只對(duì)試劑盒本身負(fù)責(zé),不對(duì)因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé),請(qǐng)使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本。2.實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)標(biāo)本含量,如果標(biāo)本濃度過(guò)高,應(yīng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行稀釋,使稀釋后的標(biāo)本符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。標(biāo)本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。3.若所檢樣本不包含在說(shuō)明書所列樣本之中,建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其有效性,并注意留存樣本。4.使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會(huì)由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。5.若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時(shí)間等,所以可能存在檢測(cè)不出的情況。6.某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因?yàn)榕c本產(chǎn)品所使用的檢測(cè)抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測(cè)出。7.建議使用新鮮樣本,保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。需要而未提供的試劑和器材酶標(biāo)儀(450nm)高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱蒸餾水或去離子水備注:1.標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:800、400、200、100、50、0IU/mL2.經(jīng)過(guò)大量正常標(biāo)本檢驗(yàn),標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測(cè)范圍內(nèi),實(shí)驗(yàn)過(guò)程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過(guò)Zda標(biāo)準(zhǔn)品濃度時(shí),可用樣本稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。注意事項(xiàng)嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。不能使用過(guò)期產(chǎn)品。如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。試劑準(zhǔn)備試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。操作步驟1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算以所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計(jì)算出樣品的濃度。試劑盒性能1.檢測(cè)范圍:25IU/mL800IU/mL。2.靈敏度:Zdi檢測(cè)濃度小于1.0IU/mL。3.特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。4.重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10%,板間變異系數(shù)小于15%。說(shuō)明1.由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對(duì)所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析,本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)。2.Z終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性、實(shí)驗(yàn)者的相關(guān)操作以及當(dāng)時(shí)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān),請(qǐng)務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。3.不同批次的同一產(chǎn)品可能會(huì)有少許差別,如:檢測(cè)限、靈敏度以及顯色時(shí)間等,請(qǐng)依據(jù)試劑盒內(nèi)說(shuō)明書進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作,網(wǎng)站電子版說(shuō)明書僅作參考。4.只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測(cè)效果,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實(shí)驗(yàn)說(shuō)明才會(huì)得到**的檢測(cè)結(jié)果。[詳細(xì)]
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2018-11-16 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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魚活性氧(ROS)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書
- 魚活性氧(ROS)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書本試劑盒僅供研究使用。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中魚活性氧(ROS)水平。用純化的魚活性氧(ROS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入活性氧(ROS),再與HRP標(biāo)記的活性氧(ROS)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的活性氧(ROS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中魚活性氧(ROS)濃度。魚活性氧(ROS)ELISA試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(720IU/ml)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。魚活性氧(ROS)ELISA試劑盒操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。360IU/ml5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液180IU/ml4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液90IU/ml3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液45IU/ml2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液22.5IU/ml1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。魚活性氧(ROS)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。魚活性氧(ROS)ELISA試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2024-09-30 18:44
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠活性氧簇(ROS)ELISA試劑盒操作步驟
- 大鼠活性氧簇(ROS)ELISA試劑盒操作步驟使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中活性氧簇(ROS)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠活性氧簇(ROS)水平。用純化的大鼠活性氧簇(ROS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入活性氧簇(ROS),再與HRP標(biāo)記的活性氧簇(ROS)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的活性氧簇(ROS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠活性氧簇(ROS)濃度。標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。360IU/ml5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液180IU/ml4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液90IU/ml3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液45IU/ml2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液22.5IU/ml1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人活性氧(ROS)ELISA Kit說(shuō)明書
- 人活性氧(ROS)ELISA Kit說(shuō)明書[詳細(xì)]
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2014-08-21 00:00
安裝說(shuō)明
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精子細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧(ROS)細(xì)胞流式儀檢測(cè)試劑盒
- 精子細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧(ROS)細(xì)胞流式儀檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(中文版)主要用途精子細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧(ROS)細(xì)胞流式儀檢測(cè)試劑是一種旨在使用透膜熒光染色劑二氯熒光乙酰乙酸鹽,在細(xì)胞氧化條件下,產(chǎn)生熒光,來(lái)定量檢測(cè)精子細(xì)胞內(nèi)活性氧族的生成和增加的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適用于動(dòng)物和人體精子細(xì)胞的活性氧族的檢測(cè)??梢员挥糜诩?xì)胞凋亡、衰老、代謝和營(yíng)養(yǎng)學(xué),以及發(fā)育生物學(xué)(男性不育)等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)便,性能穩(wěn)定,熒光清晰。技術(shù)背景超氧自由基陰離子(superoxideradical;O2-)、過(guò)氧化氫(hydrogenperoxide;H2O2)、羥自由基或氫氧基(hydroxylradical;OH-)、過(guò)氧化基(peroxylradical;ROO-)、氫過(guò)氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxylradical)、氮氧基(nitricOxide;NO-)、過(guò)氧亞硝基陰離子(peroxynitriteanion;ONOO-)次氯酸(hypochlorousacid;HOCl)、半醌自由基(semiquinoneradical)、單線態(tài)氧氣(singletoxygen)等細(xì)胞內(nèi)活性氧族(ReactiveOxygenSpecies;ROS)的產(chǎn)生和增多,甚而導(dǎo)致諸如男性不育、冠心病、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腫瘤、退行性病變等各種病理狀況。2',7'-二氯熒光乙酰乙酸鹽(2',7'-dichlorofluoresceindiacetate,DCFH-DA)一種完全自由通過(guò)細(xì)胞膜的染色劑。一旦被過(guò)氧化氫、過(guò)氧化基、過(guò)氧亞硝基陰離子等氧化,便產(chǎn)生熒光。據(jù)此測(cè)定精子細(xì)胞內(nèi)活性氧族的濃度。[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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精子細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光檢測(cè)試劑盒
- 精子細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2015-05-07 00:00
選購(gòu)指南
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紅藻活性氧(ROS)酶聯(lián)免疫分析 試劑盒使用說(shuō)明書
- 紅藻活性氧(ROS)酶聯(lián)免疫分析 試劑盒使用說(shuō)明書[詳細(xì)]
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2015-04-03 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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細(xì)菌氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光測(cè)定試劑盒
- 細(xì)菌氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光測(cè)定試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(中文版)主要用途細(xì)菌氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光測(cè)定試劑盒是一種旨在通過(guò)透膜熒光染色劑氯甲基二氯二氫熒光素二乙酯,在細(xì)菌氧化條件下,產(chǎn)生熒光,來(lái)定量檢測(cè)細(xì)菌活性氧族的生成和增加的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種實(shí)驗(yàn)用細(xì)菌菌株氧化應(yīng)激活性氧的分析。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)易,活體檢測(cè),性能穩(wěn)定,滯留持久,熒光清晰。技術(shù)背景細(xì)菌作為模式生物,是環(huán)境化學(xué)毒性研究的常用工具。活性氧的檢測(cè)可以用于諸如多環(huán)芳烴化合物或重金屬的毒性作用以及修復(fù)(remediation)的評(píng)價(jià)指標(biāo)。超氧自由基陰離子(superoxideradical;O2-)、過(guò)氧化氫(hydrogenperoxide;H2O2)、羥自由基或氫氧基(hydroxylradical;OH-)、過(guò)氧化基(peroxylradical;ROO-)、氫過(guò)氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxylradical)、氮氧基(nitricOxide;NO-)、過(guò)氧亞硝基陰離子(peroxynitriteanion;ONOO-)次氯酸(hypochlorousacid;HOCl)、半醌自由基(semiquinoneradical)、單線態(tài)氧氣(singletoxygen)等細(xì)胞內(nèi)活性氧族(ReactiveOxygenSpecies;ROS)的產(chǎn)生和增多,將導(dǎo)致細(xì)胞衰老或凋亡。氯甲基二氯二氫熒光素二乙酯(6-chloromethyl-2',7'-dichlorodihydrofluoresceindiacetate,acetylester;CM-H2DCFDA)是取代二氯二氫熒光素二乙酯(2,7-dichlorodihydrofluorescindiacetate;DCFH-DA)的升級(jí)產(chǎn)品,一種完全自由通過(guò)細(xì)胞膜,并在細(xì)胞內(nèi)長(zhǎng)期滯留而不易外漏的染色劑。一旦被過(guò)氧化氫、羥自由基或氫氧基、過(guò)氧化基、次氯酸等氧化,便產(chǎn)生熒光。據(jù)此測(cè)定細(xì)菌活性氧族的濃度。[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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活體組織氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級(jí)熒光測(cè)定試劑盒
- 活體組織氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級(jí)熒光測(cè)定試劑盒[詳細(xì)]
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2015-08-26 00:00
安裝說(shuō)明
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冰凍切片氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光測(cè)定試劑盒
- 冰凍切片氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光測(cè)定試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(中文版)主要用途冰凍切片氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光測(cè)定試劑是一種旨在通過(guò)透膜熒光染色劑氯甲基二氯二氫熒光素二乙酯,在組織氧化損傷條件下,產(chǎn)生熒光,來(lái)定量檢測(cè)冰凍組織內(nèi)活性氧族的存在狀況的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適宜于冰凍動(dòng)物組織的分析??梢员挥糜诩?xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、衰老、代謝和營(yíng)養(yǎng)學(xué)等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)易,定性檢測(cè),性能穩(wěn)定。技術(shù)背景超氧自由基陰離子(superoxideradical;O2-)、過(guò)氧化氫(hydrogenperoxide;H2O2)、羥自由基或氫氧基(hydroxylradical;OH-)、過(guò)氧化基(peroxylradical;ROO-)、氫過(guò)氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxylradical)、氮氧基(nitricOxide;NO-)、過(guò)氧亞硝基陰離子(peroxynitriteanion;ONOO-)次氯酸(hypochlorousacid;HOCl)、半醌自由基(semiquinoneradical)、單線態(tài)氧氣(singletoxygen)等細(xì)胞內(nèi)活性氧族(ReactiveOxygenSpecies;ROS)的產(chǎn)生和增多,將導(dǎo)致細(xì)胞衰老或凋亡。氯甲基二氯二氫熒光素二乙酯(6-chloromethyl-2',7'-dichlorodihydrofluoresceindiacetate,acetylester;CM-H2DCFDA)是取代二氯二氫熒光素二乙酯(2,7-dichlorodihydrofluorescindiacetate;DCFH-DA)的升級(jí)產(chǎn)品,一種完全自由通過(guò)細(xì)胞膜,并在細(xì)胞內(nèi)長(zhǎng)期滯留而不易外漏的染色劑。一旦被過(guò)氧化氫、羥自由基或氫氧基、過(guò)氧化基、次氯酸等氧化,便產(chǎn)生熒光。據(jù)此測(cè)定組織細(xì)胞內(nèi)活性氧族的濃度。[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光測(cè)定試劑盒
- 主要用途純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光測(cè)定試劑是一種旨在通過(guò)透膜熒光染色劑氯甲基二氯二氫熒光素二乙酯,在線粒體氧化條件下,產(chǎn)生熒光,來(lái)定量檢測(cè)線粒體內(nèi)活性氧族的生成和增加的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的??梢员挥糜诩?xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、衰老、代謝和營(yíng)養(yǎng)學(xué)等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)易,活體檢測(cè),性能穩(wěn)定。技術(shù)背景超氧自由基陰離子(superoxideradical;O2-)、過(guò)氧化氫(hydrogenperoxide;H2O2)、羥自由基或氫氧基(hydroxylradical;OH-)、過(guò)氧化基(peroxylradical;ROO-)、氫過(guò)氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxylradical)、氮氧基(nitricOxide;NO-)、過(guò)氧亞硝基陰離子(peroxynitriteanion;ONOO-)次氯酸(hypochlorousacid;HOCl)、半醌自由基(semiquinoneradical)、單線態(tài)氧氣(singletoxygen)等細(xì)胞內(nèi)活性氧族(ReactiveOxygenSpecies;ROS)的產(chǎn)生和增多,將導(dǎo)致細(xì)胞衰老或凋亡。氯甲基二氯二氫熒光素二乙酯(6-chloromethyl-2',7'-dichlorodihydrofluoresceindiacetate,acetylester;CM-H2DCFDA)是取代二氯二氫熒光素二乙酯(2,7-dichlorodihydrofluorescindiacetate;DCFH-DA)的升級(jí)產(chǎn)品,一種完全自由通過(guò)細(xì)胞膜,并在細(xì)胞內(nèi)長(zhǎng)期滯留而不易外漏的染色劑。一旦被過(guò)氧化氫、羥自由基或氫氧基、過(guò)氧化基、次氯酸等氧化,便產(chǎn)生熒光。據(jù)此測(cè)定線粒體活性氧族的濃度。產(chǎn)品內(nèi)容緩沖液(ReagentA)毫升補(bǔ)充液(ReagentB)毫升染色液(ReagentC)微升產(chǎn)品說(shuō)明書1份保存方式保存在-20℃冰箱里,染色液(ReagentC),嚴(yán)格避免光照;有效保證12月用戶自備培養(yǎng)箱:用于染色孵育(共聚焦)熒光顯微鏡:用于觀察熒光線粒體熒光酶標(biāo)儀:用于測(cè)定線粒體熒光強(qiáng)度實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,將-20℃冰箱里的試劑放進(jìn)冰槽里融化,避免光照;同時(shí)從-80℃冰箱里取出待測(cè)的線粒體,[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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精子細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧(ROS)魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量試劑盒
- 主要用途精子細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧(ROS)魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)自由基探針魯米諾和強(qiáng)化劑的參與下,精子細(xì)胞中的活性氧族使發(fā)光物氧化降解并發(fā)光,在化學(xué)發(fā)光儀(Luminometer)的幫助下定量檢測(cè)精子細(xì)胞活性氧族(過(guò)氧化氫)的生成和數(shù)量的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適用于動(dòng)物和人體精子細(xì)胞的活性氧族的檢測(cè)??梢员挥糜诩?xì)胞凋亡、衰老、代謝和營(yíng)養(yǎng)學(xué),以及發(fā)育生物學(xué)(男性不育)等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)易,性能穩(wěn)定,檢測(cè)敏感。技術(shù)背景超氧自由基陰離子(superoxideradical;O2-)、過(guò)氧化氫(hydrogenperoxide;H2O2)、羥自由基或氫氧基(hydroxylradical;OH-)、過(guò)氧化基(peroxylradical;ROO-)、氫過(guò)氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxylradical)、氮氧基(nitricOxide;NO-)、過(guò)氧亞硝基陰離子(peroxynitriteanion;ONOO-)次氯酸(hypochlorousacid;HOCl)、半醌自由基(semiquinoneradical)、單線態(tài)氧氣(singletoxygen)等細(xì)胞內(nèi)活性氧族(ReactiveOxygenSpecies;ROS)的產(chǎn)生和增多,甚而導(dǎo)致諸如男性不育、冠心病、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腫瘤、退行性病變等各種病理狀況。魯米諾(luminol),又稱氨基鄰苯二甲酰肼(luminol;3-aminophthalichydrazide5-amino-2,3-dihvdro-1,4-phthalazinedione),是一種脂溶性的發(fā)光劑,氧化后生成魯米諾自由基而化學(xué)發(fā)光,具有460nm左右峰值的帶狀光譜,肉眼可觀察到鮮明的紫藍(lán)色。魯米諾以單價(jià)氧化形式與超氧自由基陰離子反應(yīng),產(chǎn)生不穩(wěn)定性內(nèi)過(guò)氧化物或二氧環(huán)丁烷(Dioxetane),由此分解成電激發(fā)狀態(tài),通過(guò)釋放光子,回復(fù)到基態(tài)。魯米諾作為探針,可以檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)外過(guò)氧化氫、超氧自由基陰離子和羥自由基,其中過(guò)氧化氫Z強(qiáng),其發(fā)光強(qiáng)度與過(guò)氧化氫水平成正相關(guān)。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)毫升強(qiáng)化液(ReagentB)毫升發(fā)光液(ReagentC)毫升產(chǎn)品說(shuō)明書1份保存方式保存強(qiáng)化液(ReagentB)和GENMED發(fā)光液(ReagentC)在-20℃冰箱里,嚴(yán)格避免光照;其余的保存在4℃冰箱里,有效保證6月用戶自備15毫升錐形離心管:用于精子細(xì)胞操作的容器培養(yǎng)箱:用于精子細(xì)胞孵育1血細(xì)胞計(jì)數(shù)器:用于精子細(xì)胞計(jì)數(shù)臺(tái)式離心機(jī):用于沉淀精子細(xì)胞測(cè)試管:用于發(fā)光檢測(cè)用的專用試管化學(xué)發(fā)光儀:用于檢測(cè)化學(xué)發(fā)光實(shí)驗(yàn)步驟一、樣品預(yù)處理1.移取2毫升新鮮收集(1小時(shí)內(nèi))的精液到15毫升錐形離心管2.放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱孵育20分鐘3.放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心7分鐘,速度為300g4.小心抽去上清液5.加入xx毫升清理液(ReagentA),混勻精子細(xì)胞顆粒群6.放進(jìn)臺(tái)式離心機(jī)離心7分鐘,速度為300g7.小心抽去上清液8.重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟5至7一次9.加入適量的清理液(ReagentA)10.充分混勻后,在血細(xì)胞計(jì)數(shù)器上進(jìn)行精子細(xì)胞計(jì)數(shù)11.調(diào)整精子細(xì)胞數(shù)為20X106/毫升12.放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱里備用(1小時(shí)內(nèi))二、測(cè)讀測(cè)讀開(kāi)始前,打開(kāi)化學(xué)發(fā)光儀,設(shè)定儀器內(nèi)溫度為37℃預(yù)熱和整合測(cè)讀10秒或15分鐘;然后關(guān)掉實(shí)驗(yàn)室的燈光。將-20℃冰箱里的試劑置入冰槽里融化,嚴(yán)格置于暗室里。然后進(jìn)行下列操作。1.準(zhǔn)備好測(cè)試管,做好標(biāo)記:陰性對(duì)照、樣品本底和樣品活性2.移取xx微升清理液(ReagentA)到陰性對(duì)照測(cè)試管3.移取xx微升上述預(yù)處理的精子細(xì)胞到樣品本底測(cè)試管4.移取xx微升上述預(yù)處理的精子細(xì)胞到樣品活性測(cè)試管5.分別加入xx微升強(qiáng)化液(ReagentB)到上述測(cè)試管,除樣品本底測(cè)試管外6.分別加入xx微升發(fā)光液(ReagentC)到上述測(cè)試管,除樣品本底測(cè)試管外7.輕輕渦旋混勻8.即刻放進(jìn)37℃化學(xué)發(fā)光儀里測(cè)讀9.整合測(cè)讀10秒,獲得相對(duì)發(fā)光單位(relativelightunit;RLU)10.或者整合測(cè)讀15分鐘,獲得光電子讀數(shù):X106CPM(countedphotonperminute)(注意:可以使用液體閃爍儀替代)11.計(jì)算ROS水平:(樣品活性-樣品本底)÷6精子細(xì)胞=X106CPM/毫升=X106CPM/20X106精子細(xì)胞注意事項(xiàng)21.本產(chǎn)品為50次操作2.如果測(cè)定體系變化,則試劑用量相應(yīng)變化3.操作時(shí),須戴手套4.測(cè)試前,精子細(xì)胞須新鮮收集,1小時(shí)內(nèi)為**5.精子細(xì)胞懸液制備后即刻測(cè)讀,不宜過(guò)*保存6.精子細(xì)胞懸液須清澈7.如果需要排除白細(xì)胞的干擾,建議純化精子細(xì)胞:精子細(xì)胞高純分離試劑盒(14003)8.如果需要區(qū)分精液各種成分的活性氧生成情況,建議使用精液組分氧化應(yīng)激活性氧(ROS)魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒(10112.3.2)9.本產(chǎn)品適合凍存的精子細(xì)胞檢測(cè)10.測(cè)讀的所有步驟均須在暗室里進(jìn)行11.如果是注射式化學(xué)發(fā)光儀,建議測(cè)試前后使用無(wú)離子水沖洗化學(xué)發(fā)光儀注射(injector)管道12.正常精子細(xì)胞ROS水平是0.1至1.0X106CPM/2X106精子細(xì)胞13.本公司提供系列精子細(xì)胞分析試劑產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定2.本產(chǎn)品經(jīng)鑒定檢測(cè)敏感[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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精子細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書
- 主要用途精子細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光檢測(cè)試劑是一種旨在使用透膜熒光染色劑氯甲基二氯二氫熒光素二乙酯,在細(xì)胞氧化條件下,產(chǎn)生熒光,來(lái)定量檢測(cè)精子細(xì)胞內(nèi)活性氧族的生成和增加的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適用于動(dòng)物和人體精子細(xì)胞的活性氧族的檢測(cè)??梢员挥糜诩?xì)胞凋亡、衰老、代謝和營(yíng)養(yǎng)學(xué),以及發(fā)育生物學(xué)(男性不育)等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)便,性能穩(wěn)定,熒光清晰。技術(shù)背景超氧自由基陰離子(superoxideradical;O2-)、過(guò)氧化氫(hydrogenperoxide;H2O2)、羥自由基或氫氧基(hydroxylradical;OH-)、過(guò)氧化基(peroxylradical;ROO-)、氫過(guò)氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxylradical)、氮氧基(nitricOxide;NO-)、過(guò)氧亞硝基陰離子(peroxynitriteanion;ONOO-)次氯酸(hypochlorousacid;HOCl)、半醌自由基(semiquinoneradical)、單線態(tài)氧氣(singletoxygen)等細(xì)胞內(nèi)活性氧族(ReactiveOxygenSpecies;ROS)的產(chǎn)生和增多,甚而導(dǎo)致諸如男性不育、冠心病、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腫瘤、退行性病變等各種病理狀況。其中精子細(xì)胞(spermatozoa)對(duì)于活性氧較為敏感:低濃度活性氧可以調(diào)節(jié)正常精子功能、精子獲能、頂體反應(yīng)、精卵融合等;高濃度活性氧則影響精子細(xì)胞的質(zhì)量和功能,因?yàn)榫蛹?xì)胞質(zhì)膜含有大量不飽和脂肪酸,胞漿含有少量的祛除活性氧的相關(guān)酶蛋白,由此活性氧容易造成精子質(zhì)膜的流動(dòng)性和DNA完整性受到損害,精子運(yùn)動(dòng)能力降低,不能參與授精活動(dòng),Z終導(dǎo)致特發(fā)性不育癥(idiopathicinfertility)。氯甲基二氯二氫熒光素二乙酯(6-chloromethyl-2',7'-dichlorodihydrofluoresceindiacetate,acetylester;CM-H2DCFDA)是取代二氯二氫熒光素二乙酯(2′,7′-dichlorodihydrofluorescindiacetate;DCFH-DA)的升級(jí)產(chǎn)品,一種完全自由通過(guò)細(xì)胞膜,并在細(xì)胞內(nèi)長(zhǎng)期滯留而不易外漏的染色劑。一旦被過(guò)氧化氫、過(guò)氧化基、過(guò)氧亞硝基陰離子等氧化,便產(chǎn)生熒光。據(jù)此測(cè)定精子細(xì)胞內(nèi)活性氧族的濃度。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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精子細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧(ROS)魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書
- 精子細(xì)胞氧化應(yīng)激活性氧(ROS)魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書[詳細(xì)]
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2015-05-07 00:00
安裝說(shuō)明
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細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧(ROS)MitoSOX紅色熒光
- 細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧超氧陰離子MitoSOX紅色熒光測(cè)定試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(中文版)主要用途細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧超氧陰離子MitoSOX紅色熒光測(cè)定試劑是一種旨在通過(guò)透膜熒光染色劑MitoSOX,在線粒體氧化損傷條件下,產(chǎn)生紅色熒光,來(lái)檢測(cè)冰凍組織細(xì)胞線粒體內(nèi)超氧陰離子活性氧族的存在狀況的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適宜于冰凍動(dòng)物組織細(xì)胞線粒體內(nèi)的超氧陰離子分析??梢员挥糜诩?xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、衰老、代謝和營(yíng)養(yǎng)學(xué)等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)易,定性檢測(cè),性能穩(wěn)定。技術(shù)背景超氧自由基陰離子(superoxideradical;O2-)、過(guò)氧化氫(hydrogenperoxide;H2O2)、羥自由基或氫氧基(hydroxylradical;OH-)、過(guò)氧化基(peroxylradical;ROO-)、氫過(guò)氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxylradical)、氮氧基(nitricOxide;NO-)、過(guò)氧亞硝基陰離子(peroxynitriteanion;ONOO-)次氯酸(hypochlorousacid;HOCl)、半醌自由基(semiquinoneradical)、單線態(tài)氧氣(singletoxygen)等細(xì)胞內(nèi)活性氧族(ReactiveOxygenSpecies;ROS)的產(chǎn)生和增多,將導(dǎo)致細(xì)胞衰老或凋亡。其中線粒體氧化磷酸化副產(chǎn)物之一是超氧陰離子,為線粒體內(nèi)Z主要的活性氧族,與心血管疾病,包括高血壓、冠狀動(dòng)脈硬化、糖尿病相關(guān)的血管疾病、神經(jīng)退行性疾?。ò徒鹕习Y、阿茨罕默癥、肌萎縮硬化癥)相關(guān)。MitoSOX是一種完全自由通過(guò)細(xì)胞膜,并選擇性在活體細(xì)胞線粒體內(nèi)長(zhǎng)期滯留而不外漏的染色劑。一旦被超氧自由基陰離子氧化,便產(chǎn)生熒光。據(jù)此證明細(xì)胞線粒體內(nèi)超氧陰離子活性氧族的存在。產(chǎn)品內(nèi)容清理液(ReagentA)20毫升染色液(ReagentB)40微升稀釋液(ReagentC)20毫升產(chǎn)品說(shuō)明書1份[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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真菌/酵母細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧(ROS)MitoSOX
- 真菌/酵母細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧(ROS)MitoSOX紅色熒光測(cè)定試劑盒主要用途真菌/酵母細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧(ROS)MitoSOX紅色熒光測(cè)定試劑盒是一種旨在通過(guò)透膜熒光染色劑MitoSOX,在線粒體氧化損傷條件下,產(chǎn)生紅色熒光,來(lái)檢測(cè)冰凍組織細(xì)胞線粒體內(nèi)超氧陰離子活性氧族的存在狀況的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適宜于冰凍動(dòng)物組織細(xì)胞線粒體內(nèi)的超氧陰離子分析。可以被用于細(xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、衰老、代謝和營(yíng)養(yǎng)學(xué)等的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)易,定性檢測(cè),性能穩(wěn)定。技術(shù)背景超氧自由基陰離子(superoxideradical;O2-)、過(guò)氧化氫(hydrogenperoxide;H2O2)、羥自由基或氫氧基(hydroxylradical;OH-)、過(guò)氧化基(peroxylradical;ROO-)、氫過(guò)氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxylradical)、氮氧基(nitricOxide;NO-)、過(guò)氧亞硝基陰離子(peroxynitriteanion;ONOO-)次氯酸(hypochlorousacid;HOCl)、半醌自由基(semiquinoneradical)、單線態(tài)氧氣(singletoxygen)等細(xì)胞內(nèi)活性氧族(ReactiveOxygenSpecies;ROS)的產(chǎn)生和增多,將導(dǎo)致細(xì)胞衰老或凋亡。其中線粒體氧化磷酸化副產(chǎn)物之一是超氧陰離子,為線粒體內(nèi)Z主要的活性氧族,與心血管疾病,包括高血壓、冠狀動(dòng)脈硬化、糖尿病相關(guān)的血管疾病、神經(jīng)退行性疾?。ò徒鹕习Y、阿茨罕默癥、肌*硬化癥)相關(guān)。MitoSOX是一種完全自由通過(guò)細(xì)胞膜,并選擇性在活體細(xì)胞線粒體內(nèi)長(zhǎng)期滯留而不外漏的染色劑。一旦被超氧自由基陰離子氧化,便產(chǎn)生熒光。據(jù)此證明細(xì)胞線粒體內(nèi)超氧陰離子活性氧族的存在。[詳細(xì)]
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2018-11-08 10:00
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