樣品準(zhǔn)備

(1) 取1 g樣品于50 mL離心管中，加入10 mL提取液 *，均質(zhì)1 min， 6000 rpm下離心2 min，收集上清液；

(2) 殘?jiān)儆?0 mL 提取液 *渦旋混合提取2 min，6000 rpm下離心2 min；合并兩次提取液；

(3) 在40 ℃下用減壓蒸餾將提取液蒸干，然后用6 mL 1%磷酸水溶液超聲溶解，待凈化。

*提取液：三氟乙酸/乙腈=2/98

SPE柱凈化——ProElut PXC 200 mg/6 mL（Cat.#：68212）

(1)活 化：依次加入5 mL甲醇、5 mL水，流出液棄去；

(2)上 樣：將待凈化液加入小柱，流出液棄去；

(3)淋 洗：依次加入5 mL水、5 mL甲醇，流出液棄去；

(4)洗 脫：加入6 mL 5%氨水甲醇溶液，收集流出液；

(5)重新溶解：在40 ℃下用減壓蒸餾將收集的流出液蒸干，然后用50%甲醇水溶液定容至1 mL后供HPLC分析。

色譜柱：Diamonsil C18(2) 250×4.6 mm，5 μm（Cat.#：99603）

流 速：1.0 mL/min

檢測(cè)器：激發(fā)波長(zhǎng)：550 nm

發(fā)射波長(zhǎng)：580 nm

柱 溫：30 ℃

進(jìn)樣量：10 μL

流動(dòng)相：甲醇:水 = 75:25

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