樣品準(zhǔn)備

(1) 取1 g樣品 與10 mL提取液 *、2 mL正己烷混合，渦旋2 min，超聲提取5 min，6000 rpm下離心3 min，取出下層清液；

(2)向上層正己烷殘留液中加入10 mL提取液 *渦旋2 min，超聲提取5 min，6000 rpm下離心3 min，取出下層清液，合并兩次下層清液；

(3) 在40 ℃下用減壓蒸餾將提取液蒸干，然后用6 mL 1%磷酸水溶液超聲溶解，待凈化。

*提取液：三氟乙酸/乙腈=2/98 SPE柱凈化——ProElut PXC 200 mg/6 mL（Cat.#：68212）

(1)活 化：5 mL甲醇，5 mL水活化；

(2)上 樣：加入待凈化液，棄去流出液；

(3)淋 洗：依次加入3 mL水、3 mL甲醇，棄去流出液；

(4)洗 脫：加入8 mL5 %氨水甲醇溶液，收集流出液；

(5)重新溶解：將洗脫液在45 ℃減壓蒸餾下蒸干，再用50%甲醇水定容至1 mL，微孔濾膜過濾后供HPLC分析。

色譜柱：Diamonsil C18（2），250 mm×4.6 mm，5μm（Cat#：99603）

流 速：1.0mL/min

檢測器：*激發(fā)波長：550 nm 發(fā)射波長：580 nm

柱 溫：35℃

進(jìn)樣量：10 μL

流動相：甲醇：水 = 75：25

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