前言

2021年1月國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布關(guān)于《食品中3-乙?；?2,5-二甲基噻吩的測定》等6項(xiàng)食品補(bǔ)充檢驗(yàn)方法，明確規(guī)定了3-乙?；?2,5-二甲基噻吩在食品中的含量限制。 

3-乙酰基-2,5-二甲基噻吩（ADP）具有燒烤，堅(jiān)果的氣味，于2002年開始作為食品用香料使用，但于2013年歐洲食品安全管理局認(rèn)為其在體內(nèi)和體外試驗(yàn)均表現(xiàn)出致突變性，作為食品用香料使用存在安全問題，將其從食品用香料法規(guī)附錄I食品中香料清單中刪除。

Abstract

本應(yīng)用采用了SCION 456- GC-SQ氣質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)建立了食 品中3-乙?；?2,5-二甲基噻吩 含量的測定方法，該方法操作簡單，重復(fù)性良好，均小于1%， 回收率在90%-110%之間，符合 BJS202106《食品中3-乙?；? 2,5-二甲基噻吩的測定》要求。

實(shí)驗(yàn)部分

使用配備了分流/不分流進(jìn)樣口的SCION 456-GC-SQ氣質(zhì)聯(lián)用儀和Autosampler8400自動進(jìn)樣器。

樣品準(zhǔn)備

標(biāo)準(zhǔn)品： 3- 乙?；?2,5-二甲基噻吩標(biāo)準(zhǔn)品 98.5% （CAS2530-10-1 ）

標(biāo)準(zhǔn)溶液配置

標(biāo)準(zhǔn)儲備液配置（1000ug/ml）：稱取0.010g標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，用正庚烷定容至10ml；

標(biāo)準(zhǔn)中間液配置（1ug/ml）：移取1000ug/ml標(biāo)準(zhǔn)儲備液100ul，用正庚烷定容至100ml；

標(biāo)準(zhǔn)曲線配置：分別移取適量的1ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)中間液，使其濃度分別為5ng/ml，10ng/ml ， 20ng/ml ，50ng/ml，100ng/ml，200ng/ml。

樣品制備

稱取3g待測樣品，加入15ml的正庚烷，渦旋1min，離心5min，過濾上機(jī)。

色譜條件

色譜柱： SCION-WAX （ 30m*0.32mm*0.25um ）

進(jìn)樣口： 220℃

載氣： He 1.5ml/min 恒流

進(jìn)樣模式： 分流

分流比： 5

升溫程序： 50℃保持1min；

                  20℃/min升至200℃保持3min；

                  25℃/min升至240℃保持5min。

質(zhì)譜條件

離子源： 惰性EI源

掃描模式： SIM

掃描范圍： 50-350aum

溶劑延遲： 5min

Manifold溫度： 40℃

離子源溫度： 230℃

傳輸線溫度： 280℃

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

使用上述儀器條件對1.0ug/ml的3-乙?；?2,5-二甲基噻吩進(jìn)行分析，如圖1所示，其能得到很好的分離。并對該方法進(jìn)行自動生成SIM采集事件，提高靈敏度。

圖1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的總離子流圖

實(shí)驗(yàn)ZD檢出限

在SIM采集下，對5ng/ml進(jìn)行分析，其信噪比為27， 滿足條件，圖譜見圖2。

圖2 SIM模式下的信噪比

校準(zhǔn)曲線

使用SIM采集方法，采用外標(biāo)法進(jìn)行校準(zhǔn)，依次從低濃度到高濃度進(jìn)行測定?；衔锏谋Ａ魰r間，定量離子，定性離子以及線性回歸系數(shù)（R2）列于表1中，其線性回歸系數(shù)（ R2）為0.999，滿足標(biāo)準(zhǔn)要求。

表1 待測物的采集時間和線性回歸系數(shù)

校準(zhǔn)曲線見圖3。

圖3 待測物校準(zhǔn)曲線

重復(fù)性測定

使用100ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)工作液按照測試條件進(jìn)行重復(fù)性 實(shí)驗(yàn)，得到目標(biāo)化合物的重疊色譜圖如圖4所示。由 此可知，目標(biāo)化合物重現(xiàn)性良好，其結(jié)果平均值為 101.090ng/ml；RSD為0.763%。以上結(jié)果顯示測試的 準(zhǔn)確度和精密度均為優(yōu)良水平。

圖4 待測物重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

空白加標(biāo)回收測試

稱取3g去離子水于反應(yīng)瓶中，加入75ul 20ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液于反應(yīng)瓶中，加入15ml正庚烷于反應(yīng)瓶中，渦旋1min，震蕩 5min；離心取上清液過濾上機(jī)測試。測試結(jié)果見表2。

表2 空白加標(biāo)回收測試結(jié)果

由上表結(jié)果可以看出，空白加標(biāo)回收測試，其回收率在94.5%-96.7%之間，RSD為0.875%，符合BJS202106標(biāo)準(zhǔn)的測試要求。 可見測試條件優(yōu)良，測試過程控制良好。譜圖見圖5。

圖5 空白加標(biāo)回收譜圖

加標(biāo)回收測試

分別取3g液體樣品1和液體樣品2于反應(yīng)瓶中，加入75ul 20ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液于反應(yīng)瓶中，加入15ml正庚烷于反應(yīng)瓶中，渦 旋1min，震蕩5min；離心取上清液過濾上機(jī)測試。測試結(jié)果見表3。

表3 樣品加標(biāo)回收測試結(jié)果

由上表結(jié)果可以看出，標(biāo)準(zhǔn)儲備液經(jīng)過前處理后上機(jī)測試，回收率在107.5%-109.7%之間，RSD分別為0.594%和0.475%，符合 BJS202106標(biāo)準(zhǔn)的測試要求。可見測試條件優(yōu)良，測試過程控制良好。譜圖見圖6。

圖6 樣品加標(biāo)回收譜圖

結(jié)論

使用SCION 456-GC-SQ對食品中3-乙?；?2,5-二甲基噻吩的測試效果優(yōu)良、準(zhǔn)確，符合BJS202106的要求，可以用于待測樣品的準(zhǔn)確測試。

參考文獻(xiàn)

【1】BJS202106食品中3-乙酰基-2,5-二甲基噻吩的測定