在肽化學(xué)中，TheodorCurtius早在1902年就已經(jīng)引入了?；B氮物法，所以，酰基疊氮物法為Z古老的縮合方法之一。在堿性水溶液中，氨基酸酯能夠在有機(jī)溶劑中使用，與酰基疊氨縮合的游離氨基酸和肽除外。不同于其他許多縮合方法，它不需要對(duì)另一等當(dāng)量的氨基組分和輔助堿進(jìn)行增加來對(duì)腙酸進(jìn)行捕獲。

很長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)，人們一直認(rèn)為，疊氮物法是唯yi不發(fā)生消旋的縮合方法，隨著引入了可選擇性裂解的氨基酸保護(hù)基，該方法得到了大規(guī)模的復(fù)興。晶體狀的氨基酸酰肼或肽酰肼64為該方法的起始原料。在－10℃的鹽酸中，疊氮化物65是利用等當(dāng)量的亞硝酸鈉亞硝化酰肼而成，洗滌、干燥，之后和相應(yīng)的氨基組分反應(yīng)。能夠使用冰水稀釋從而沉淀出某些疊氮化物。合成酰基疊氮化物亦能夠使用二苯磷?；B氮化物（DPPA）。亞硝化試劑詞用亞硝酸叔丁，并且在有機(jī)溶劑中進(jìn)行疊氮縮合反應(yīng)是指Honzl-Rudinger方法。由于?；B氮化物的熱不穩(wěn)定，應(yīng)當(dāng)在低溫下進(jìn)行疊氮縮合反應(yīng)。若溫度較高，會(huì)產(chǎn)生副反應(yīng)，Z終導(dǎo)致副產(chǎn)物脲生成。

如果N端保護(hù)的肽鏈比較長(zhǎng)，那么肼解酯基通常不會(huì)簡(jiǎn)單。所以可以選擇使用正交的N保護(hù)肼衍生物。在完成選擇性脫除肼基以后，疊氮縮合可以使用根據(jù)倒接（backing-off）策略組合的肽片段。

綜上所述，盡管人們一直認(rèn)為消旋化傾向Z小的縮合方法是疊氮法。然而，在反應(yīng)中，如果堿的量偏多的話，則會(huì)有相當(dāng)大的消旋被誘發(fā)出來。所以，在縮合反應(yīng)期間，和堿的接觸應(yīng)當(dāng)盡量避免。比如三乙胺由N，N－二異丙胺或N－烷基嗎啉來代替中和。盡管有一定的局限性，然而該方法依然是非常重要的方法，特別對(duì)于片段縮合來說。此方法異構(gòu)化傾向比較低，對(duì)于羥基未保護(hù)絲氨酸或蘇氨酸組分非常適用，同時(shí)Nˊ保護(hù)的本行酰肼的用途也多種多樣。