方法優(yōu)勢：

現(xiàn)行國標(biāo)GB 5009.26-2016僅針對N-二甲基亞硝胺檢測，且操作過程中存在樣品前處理復(fù)雜、耗時(shí)較長、標(biāo)準(zhǔn)方法回收率低、再現(xiàn)性差等問題。

納鷗科技依據(jù)全新發(fā)布的《GB 5009.26-2023食品中N-亞硝胺類化合物的測定》，采用Anavo HLB-P或 HMR-Lipid可較好地吸附樣品中磷脂、蛋白、有機(jī)酸、脂肪酸等干擾物質(zhì)，9種亞硝胺類的回收率在71.93%~117.88%之間。

建立的方法操作簡單、方便，不需要對樣品進(jìn)行長時(shí)間的蒸餾提取，簡化了前處理的步驟且縮短了時(shí)間，而且樣品和試劑的消耗量大大減少，對環(huán)境的污染更小且更加節(jié)省實(shí)驗(yàn)成本，可快速的對食品中的9種亞硝胺類進(jìn)行定性和定量分析。

1. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

亞硝胺混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液：準(zhǔn)確移取9種N-亞硝胺標(biāo)準(zhǔn)溶液1 mL至100 mL容量瓶中，用乙腈配置成10 mg/L的N-亞硝胺混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液；準(zhǔn)確移取兩種同位素內(nèi)標(biāo)（NDMA-d6和NDPA-d14）溶液1 mL至100 mL容量瓶中，用乙腈配置成10 mg/L的N-亞硝胺混合內(nèi)標(biāo)儲備液。置于棕色瓶中，保存于-20 ℃下。

亞硝胺混合標(biāo)準(zhǔn)中間儲備液：準(zhǔn)確移取混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液和混合標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)標(biāo)儲備液各1 mL 至兩個(gè)10 mL 容量瓶 中，用乙腈分別稀釋成 1 mg /L 的混合中間儲備液。置于棕色瓶中，保存于-20 ℃下。

混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液: 使用前將混合標(biāo)準(zhǔn)中間儲備液放至室溫，吸取一定量的混合標(biāo)準(zhǔn)中間儲備液和20 μL 混合內(nèi)標(biāo)中間儲備液，用乙腈稀釋至1 mL，溶液中NDMA-d6和NDPA-d14的質(zhì)量濃度均為20 μg /L。

二、樣品前處理

提?。悍Q取10g（精確至0.01g）樣品加入50mL離心管，加入20μL混合內(nèi)標(biāo)中間儲備液后加入10mL乙腈，渦旋1min混勻后置于冰箱-20℃冷凍30min，加入陶瓷均質(zhì)子2粒以及4gMgSO4和1gNaCl（AN50B011：Anavo Que萃取鹽包）進(jìn)行脫水，渦旋1min，9000r/m 0℃離心5min。

凈化：將5 mL水加入 15 mL HLB-P凈化管（150 mg HLB-P，PN：AN50D026）或 15 mL HMR-Lipid凈化管（1 g HMR-lipid，PN：AN50E024）中，渦旋振蕩，立即加入5 mL乙腈提取液，渦旋振蕩1 min；置于冷凍離心機(jī)，9000 rpm/min，10 ℃離心5 min

除水：取上述凈化全部上清液加入到1.6 g硫酸鎂和0.4 g氯化鈉的15 mL離心管中(PN：AN50B021），渦旋振蕩2 min，置于冷凍離心機(jī)中，轉(zhuǎn)速9000 rpm/min，10 ℃離心5 min。取上層有機(jī)相經(jīng)0.22 μm微孔濾膜（Anavo-U Syringe Filter, RC, 0.22μm, 13 mm，PN：AN40A025）過濾后，上機(jī)檢測。

三、儀器參考條件

（1）色譜柱：毛細(xì)管氣相色譜柱Innowax，30m× 0.25 mm×0.25 μm

（2）載氣：60mL/min，進(jìn)樣量5L，溶劑放空模式。

（3）進(jìn)樣口溫度：220℃.采用程序升溫模式，初始溫度50℃，保持0.16min，再以900℃/min升溫至220℃保持5min。

（4）傳輸線溫度250℃；溶劑延遲6 min；

（5）離子源溫度250℃；

（6）電子轟擊離子（EI）源；電子能量：70eV；

9種亞硝胺及2種內(nèi)標(biāo)的質(zhì)譜/質(zhì)譜參數(shù)

1. 回收率數(shù)據(jù)

9種N-亞硝胺在動(dòng)物源性食品中的添加回收率

五、譜圖

9種亞硝胺標(biāo)準(zhǔn)品混合溶液（10μg/L）總離子流圖（TIC）色譜圖

9種亞硝胺標(biāo)準(zhǔn)品混合溶液（10μg/L）的MRM色譜圖

配套關(guān)鍵耗材