食品添加劑TBHQ、BHT的HPLC檢測方案

TBHQ和BHT屬于食品添加劑中的抗氧化劑，能防止或延緩油脂或食品成分氧化分解、變質(zhì)，提高食品穩(wěn)定性的物質(zhì)。但抗氧化劑的添加必須符合我國食品衛(wèi)生法的規(guī)定，過量添加會損害人體健康。例如BIA對大鼠前肖有致癌作用，BHT有YZ人體呼吸酶活性等嫌疑并且可在人體內(nèi)蓄積。而根據(jù)國家標準GB2760相關規(guī)定，特丁基對苯二酚(簡稱“TBHQ”)和二丁基羥基甲苯(簡稱“BHT”)兩種食品添加劑不能添加到糕點或糖果類食品中。

　億鑫儀器推出梯度GX液相色譜儀對油脂食品中常用的抗氧化劑BHA(丁基羥基茴香醚)、BHT(二丁基羥基甲苯)、PG(沒食子酸丙酯)和TBHQ (叔丁基對苯二酚)的檢測方法，詳細方法如下。

1、儀器與試劑

1.1  儀器
　　梯度液相色譜儀
　　Vertex色譜柱 4.6 mm×250 mm×5 μm
    旋轉(zhuǎn)真空蒸發(fā)儀
　　Millipore Express 反滲透純水系統(tǒng)
　　25 ml具塞玻璃離心管

1.2  試劑
　 正己烷：分析純

乙腈：色譜純
異丙醇：分析純

甲醇：色譜純

乙酸：分析純

2、色譜條件
　　色譜柱：VertexC18（4.6 mm×250 mm×5 μm）
　　柱溫：40℃
　　流動相：1.5%（體積分數(shù)）乙酸-甲醇溶液（A），1.5%（體積分數(shù)）乙酸-水溶液（B），

洗脫梯度：0m in-5m in，流動相A為30%,5m in-20m in，流動相A從30%線性增至80%, 20 min-30 min，流動相A為80%;
　　流速為：1.0mL/min
　　進樣量：25μL
　　檢測波長為：280 nm

3、實驗原理
　　油脂樣品用正己烷溶解，用乙睛提取其中的抗氧化劑。提取液經(jīng)濃縮后，用異丙醇定容，用帶紫外檢測器的GX液相色譜儀測定，外標法定量。

4、試樣溶液的制備
　　量取樣品1g于離心管中，加入5ml乙腈飽和的正己烷蓋上蓋后于旋渦混合器上充分混勻，再加入10m正己烷飽和的乙腈于旋渦混合器上充分混勻，靜置分層，用膠頭吸管將乙睛層轉(zhuǎn)人濃縮瓶內(nèi)，如上操作再用正己烷飽和的乙腈提取兩次，合并提取液。

乙腈提取液在40℃下，用旋轉(zhuǎn)真空蒸發(fā)器濃縮至約1m L，將濃縮液轉(zhuǎn)至5m L刻度管中，用異丙醇定容至2 mL，用0. 45 um微孔濾膜過濾后進樣25 ul測定。

5、抗氧化劑標準溶液譜圖