轉(zhuǎn)膜儀是用來(lái)轉(zhuǎn)印蛋白的儀器。電泳轉(zhuǎn)印為轉(zhuǎn)移蛋白Z常用的方法，該技術(shù)有效、迅速，并且使得蛋白在凝膠中保持高分辨率。在凝膠中向印跡膜載體轉(zhuǎn)印分離的蛋白質(zhì)的過(guò)程，即是電泳轉(zhuǎn)印法。因?yàn)榇思夹g(shù)往膜上轉(zhuǎn)印蛋白GX、快速和準(zhǔn)確，并且能夠使得蛋白在凝膠中保持高分辨率。因此在轉(zhuǎn)移印跡技術(shù)中得到廣泛的應(yīng)用。

轉(zhuǎn)膜步驟(以槽式濕轉(zhuǎn)為例)

1、在轉(zhuǎn)移緩沖液中浸沒(méi)膠平衡10分鐘，留心，若是對(duì)小分子蛋白進(jìn)行檢測(cè)，那么就可將此步省略，因?yàn)樾》肿拥鞍兹菀讛U(kuò)散出膠。

2、膜和濾紙6片以膠的大小為根據(jù)剪取，在轉(zhuǎn)移緩沖液中放入，平衡10分鐘。若使用PVDF膜，應(yīng)當(dāng)將其浸泡于純甲醇中飽和3-5s（首先在甲醇中浸泡PVDF膜大約15秒，低于1分鐘，之后在1×轉(zhuǎn)膜緩沖液中浸泡膜，之后將2層濾紙鋪在上面浸泡。

3、對(duì)轉(zhuǎn)移三明治進(jìn)行裝配，分別為海綿、3層濾紙、膠、膜、3層濾紙以及海綿,放好每層后,氣泡使用試管趕走。

4、在冰浴中放置轉(zhuǎn)移槽（夾的白面對(duì)槽的紅面，夾的黑面對(duì)槽的黑面）（由于電轉(zhuǎn)移時(shí)會(huì)有熱產(chǎn)生，放一塊冰在槽的一邊來(lái)使得溫度降低），將轉(zhuǎn)移緩沖液加入，將電極插上。值得留心的是是否接通電源，應(yīng)當(dāng)對(duì)是否正確裝配三明治和電極進(jìn)行檢查。

5、完成轉(zhuǎn)膜后，將電源切斷，將雜交膜取出。

注意事項(xiàng)

1、由于手上的蛋白和油脂會(huì)弄張膜和對(duì)轉(zhuǎn)膜效率產(chǎn)生影響，因此雜交膜防止直接用手碰

2、為了避免轉(zhuǎn)膜不完全，應(yīng)當(dāng)且薄沒(méi)有氣泡存在于凝膠，膜和濾紙之間

3、由于膜過(guò)大和過(guò)小都會(huì)對(duì)轉(zhuǎn)膜效率產(chǎn)生影響，因此需要使膜和濾紙的大小和凝膠完全一樣得到保證。

4、泡膜:使用預(yù)冷的轉(zhuǎn)移緩沖液在轉(zhuǎn)膜之前浸泡海綿、膠、膜20分鐘。

a、如果想要在轉(zhuǎn)膜過(guò)程中不會(huì)有凝膠皺縮從而導(dǎo)致轉(zhuǎn)移條帶變形的的情況發(fā)生，那么應(yīng)當(dāng)將凝膠浸泡于預(yù)冷的轉(zhuǎn)膜緩沖液中。

b、需用甲醇將PVDF膜浸泡，是由于PVDF膜具有疏水性。

5、轉(zhuǎn)膜順序分別為陰極碳板，海綿，三張濾紙，膠，膜，三張濾紙以及陽(yáng)極碳板。

6、轉(zhuǎn)膜條件：0.3/250V，轉(zhuǎn)膜過(guò)程中會(huì)有大量的熱產(chǎn)生，因此冷卻尤其值得注意）（目的蛋白的大小決定了轉(zhuǎn)膜時(shí)間，蛋白的分子量與轉(zhuǎn)膜時(shí)間成反比）。