【概述】本文簡(jiǎn)單介紹Celetrix細(xì)菌酵母電轉(zhuǎn)儀電轉(zhuǎn)細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)步驟

【實(shí)驗(yàn)/設(shè)備條件】

【樣品提取】盡量選擇處于指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)菌

【實(shí)驗(yàn)/操作方法】

細(xì)菌電轉(zhuǎn)流程（以20ul電擊管電轉(zhuǎn)大腸桿菌為例）：

1）  收集處于指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)菌，冰浴；

2）  4℃離心收集細(xì)菌；

3）  輕柔重懸細(xì)菌于4℃預(yù)冷的無(wú)菌水中，再次4℃離心收集；

4）  輕柔重懸細(xì)菌于4℃預(yù)冷的10%甘油中，再次4℃離心收集；

5）  重懸細(xì)菌于10%甘油中，配成細(xì)菌懸浮液；

6）  加入DNA，加入20ul電擊管蓋好，冰中冷卻；

7）  電擊管從冰中取出，放入Celetrix電轉(zhuǎn)儀馬上進(jìn)行電轉(zhuǎn)；

8）  取出電轉(zhuǎn)完成的細(xì)菌，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)液進(jìn)行細(xì)菌復(fù)蘇。

9）  恒溫?fù)u床恢復(fù)。

10） 根據(jù)需要稀釋到一定比例涂板。

【儀器/耗材清單】Celetrix細(xì)菌酵母電轉(zhuǎn)儀、Celetrix細(xì)菌試劑盒