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轉(zhuǎn)膜儀

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濕電轉(zhuǎn)膜儀操作規(guī)程

更新時間:2025-10-19 00:13:37 類型:轉(zhuǎn)膜儀操作規(guī)程 閱讀量:2164
導讀:濕電轉(zhuǎn)膜儀是用來轉(zhuǎn)印蛋白的儀器。電泳轉(zhuǎn)印為轉(zhuǎn)移蛋白zui常用的方法,該技術(shù)有效、迅速,并且使得蛋白在凝膠中保持高分辨率。

轉(zhuǎn)膜儀是用來轉(zhuǎn)印蛋白的儀器。電泳轉(zhuǎn)印為轉(zhuǎn)移蛋白Z常用的方法,該技術(shù)有效、迅速,并且使得蛋白在凝膠中保持高分辨率。在凝膠中向印跡膜載體轉(zhuǎn)印分離的蛋白質(zhì)的過程,即是電泳轉(zhuǎn)印法。因為此技術(shù)往膜上轉(zhuǎn)印蛋白GX、快速和準確,并且能夠使得蛋白在凝膠中保持高分辨率。,因此在轉(zhuǎn)移印跡技術(shù)中得到廣泛的應用。


操作步驟:

1、轉(zhuǎn)膜時,1張5.5×8.5cm的PVDF膜以及2張6.5×10cm的濾紙需要被準備,由于膜會受到手上的蛋白的污染,必須要戴手套切濾紙和膜。在甲醇中浸沒切好的PVDF膜超過15秒即可。


1.jpg


2、將浸過的PVDF膜、兩張濾紙、兩塊海綿墊以及轉(zhuǎn)膜用的夾子放置于加有轉(zhuǎn)移液的搪瓷盤里。


3、將夾子打開,在轉(zhuǎn)膜液中放入黑的一面,海綿、濾紙、分離膠、PVDF膜、濾紙、海綿由下往上依次放入。


4、合好夾子,放入轉(zhuǎn)移槽中,使夾的白面對著槽的紅面,夾的黑面對槽的黑面,將電接通,電轉(zhuǎn)移時會有熱產(chǎn)生。有較大空隙在槽的一邊,降溫將事先準備好的冰盒放入。在一個大的盛滿冰的容器中放入整個電泳槽(建議使用大的塑料泡沫盒子)。


注意:

1、在轉(zhuǎn)膜液中進行整個過程,在鋪每一層時,氣泡要用刮子趕掉,一定不能有氣泡留在膠與膜之間。


2、要輕輕地撬玻璃板剝膠,用刮子輕輕刮去濃縮膠,將分離膠小心剝下,往濾紙上蓋,用手調(diào)整使其與濾紙對齊。


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