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【概述】懸浮細(xì)胞(K562,Jurkat等)電轉(zhuǎn)流程
【實(shí)驗(yàn)/設(shè)備條件】準(zhǔn)備好:電轉(zhuǎn)需要選擇活性好的細(xì)胞、DNA、培養(yǎng)液
【實(shí)驗(yàn)/操作方法】1,離心收集細(xì)胞;
2,重懸細(xì)胞再離心收集(可選步驟);
3,重懸細(xì)胞于Celetrix電轉(zhuǎn)液中,配成懸浮液;
4,加入DNA后加樣到Celetrix電擊管;
5,放入Celetrix電轉(zhuǎn)儀中電轉(zhuǎn);
6,取出細(xì)胞培養(yǎng)。
【實(shí)驗(yàn)結(jié)果/結(jié)論】即使是同一個(gè)細(xì)胞,電轉(zhuǎn)實(shí)際上也沒有單一的參數(shù)。用戶需要根據(jù)自己需要的細(xì)胞數(shù)量和轉(zhuǎn)染要求,從推薦的參數(shù)出發(fā)做一個(gè)簡單的測試,找到合適的參數(shù)。
【儀器/耗材清單】Celetrix細(xì)胞電轉(zhuǎn)儀、Celetrix細(xì)胞電轉(zhuǎn)液、Celetrix電擊管
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