轉(zhuǎn)膜儀是用來轉(zhuǎn)印蛋白的儀器。電泳轉(zhuǎn)印為轉(zhuǎn)移蛋白Z常用的方法，該技術(shù)有效、迅速，并且使得蛋白在凝膠中保持高分辨率。在凝膠中向印跡膜載體轉(zhuǎn)印分離的蛋白質(zhì)的過程，即是電泳轉(zhuǎn)印法。因?yàn)榇思夹g(shù)往膜上轉(zhuǎn)印蛋白GX、快速和準(zhǔn)確，并且能夠使得蛋白在凝膠中保持高分辨率。因此在轉(zhuǎn)移印跡技術(shù)中得到廣泛的應(yīng)用。

Western blot的成敗取決于雜交膜的選擇。合適材質(zhì)、孔徑和規(guī)格的雜交膜應(yīng)當(dāng)以雜交方案、被轉(zhuǎn)移蛋白的特性以及分子大小等因素為依據(jù)來選擇適合的。

選擇根據(jù)

1、后續(xù)的顯色檢測不會(huì)受到膜的孔徑以及目的蛋白分子的結(jié)合能力的影響。

2、若后繼實(shí)驗(yàn)有其他要求,轉(zhuǎn)移膜需要按照不同目的來挑選。

PVD膜和酸纖維素膜(NC)為兩種主要的用于 Western blot的膜。

PVD膜

相比于常規(guī)的膜，PVDF膜具有更加高的蛋白親和力、分辨率以及靈敏度，對于檢測低分子量相當(dāng)?shù)倪m合。然而必須使用純甲醇在使用之前將PVDF膜浸泡飽和1-5s。

PVD膜：和蛋白質(zhì)之間有著相當(dāng)高的親和力，必須使用純甲醇在使用之前浸泡PVDF膜，利用活化膜上的正電基團(tuán)，使其與帶負(fù)電荷蛋白結(jié)合更容易。

NC膜

NC膜是蛋白印跡實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)固相支持物,大多數(shù)帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)在低離子轉(zhuǎn)移緩沖液的環(huán)境下會(huì)與膜發(fā)生疏水作用，使得親和力變高而結(jié)合在一起，然而通過非離子型的去污劑作用，能夠洗脫結(jié)合的蛋白。

不同孔徑的NC膜按照被轉(zhuǎn)移的蛋白分子量大小的差異進(jìn)行選擇。膜會(huì)隨著膜孔徑的不斷減小而越牢固地結(jié)合低分子量蛋白。一般的NC膜有0.45um和0.2um兩種規(guī)格。如果蛋白＜20kD，那么膜就使用0.2um的，如果蛋白大于20kD，那么膜就使用0.45um的。

NC膜:依靠疏水作用，:NC膜與蛋白質(zhì)結(jié)合，預(yù)先活化沒有必要，微微影響蛋白質(zhì)的活性，非特異性本底顯色淺，有著低廉的價(jià)格和方便的操作。然而洗滌時(shí)容易丟失結(jié)合在NC上的小分子蛋白質(zhì)，NC膜有著不是太好的韌性，容易受到損毀。