資料庫
免疫組化的方法和優(yōu)點(diǎn)
-
本文由 上海恒遠(yuǎn)ELISA試劑盒供應(yīng)商 整理匯編
2018-11-16 10:02 1837閱讀次數(shù)
文檔僅可預(yù)覽首頁內(nèi)容,請下載后查看全文信息!
-
立即下載
上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司專業(yè)供應(yīng)各種屬elisa試劑盒,提供免費(fèi)代測服務(wù),保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果客觀真實(shí)性。我公司對試劑盒質(zhì)量1**%保證,若存在質(zhì)量問題,我們無條件包退換。若需要了解試劑盒的詳細(xì)信息,請來的咨詢:電話:021-60520498業(yè)務(wù)QQ:1005074258何經(jīng)理免疫組化的方法和優(yōu)點(diǎn)一、免疫組化技術(shù)的基本原理應(yīng)用免疫學(xué)及組織化學(xué)原理,對組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中的某些化學(xué)成分進(jìn)行原位的定性、定位或定量研究,這種技術(shù)稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)或免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)。眾所周知,抗體與抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性,即先將組織或細(xì)胞中的某些化學(xué)物質(zhì)提取出來,以其作為抗原或半抗原去免疫小鼠等實(shí)驗(yàn)動物,制備特異性抗體,再用這種抗體(**抗體)作為抗原去免疫動物制備第二抗體,并用某種酶(常用辣根過氧化物酶)或生物素等處理后再與前述抗原成分結(jié)合,將抗原放大,由于抗體與抗原結(jié)合后形成的免疫復(fù)合物是無色的,因此,還必須借助于組織化學(xué)方法將抗原抗體反應(yīng)部位顯示出來(常用顯色劑DAB顯示為棕黃色顆粒)。通過抗原抗體反應(yīng)及呈色反應(yīng),顯示細(xì)胞或組織中的化學(xué)成分,在顯微鏡下可清晰看見細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物,從而能夠在細(xì)胞或組織原位確定某些化學(xué)成分的分布、含量。組織或細(xì)胞中凡是能作抗原或半抗原的物質(zhì),如蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受體、酶、激素、核酸及病原體等都可用相應(yīng)的特異性抗體進(jìn)行檢測。二、免疫組織化學(xué)染色方法1、按標(biāo)記物質(zhì)的種類,如熒光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶)、鐵蛋白、膠體金等,可分為免疫熒光法、放射免疫法、酶標(biāo)法和免疫金銀法等。2、按染色步驟可分為直接法(又稱一步法)和間接法(二步、三步或多步法);與直接法相比,間接法的靈敏度提高了許多。3、按結(jié)合方式可分為抗原抗體結(jié)合,如過氧化物酶-抗過氧化物酶(PAP)法和親和連接,如卵白素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物(ABC)法、鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(jié)(SP)法等,其中SP法是Z常用的方法。三、幾種常用免疫組織化學(xué)方法的原理1、免疫熒光方法是Z早建立的免疫組織化學(xué)技術(shù)。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理,先將已知抗體標(biāo)上熒光素,以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,在熒光顯微鏡下觀察。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會發(fā)出一定波長的熒光,從而可確定組織中某種抗原的定位,進(jìn)而還可進(jìn)行定量分析。由于免疫熒光技術(shù)特異性強(qiáng)、靈敏度高、快速簡便,所以在臨床病理診斷、檢驗(yàn)中應(yīng)用比較廣。2、免疫酶標(biāo)方法免疫酶標(biāo)方法是繼免疫熒光后,于60年代發(fā)展起來的技術(shù)?;驹硎窍纫悦笜?biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)的各種抗原成分進(jìn)行定位研究。免疫酶標(biāo)技術(shù)是目前Z常用的技術(shù)。本方法與免疫熒光技術(shù)相比的主要優(yōu)點(diǎn)是:定位準(zhǔn)確,對比度好,染色標(biāo)本可長期保存,適合于光、電鏡研究等。免疫酶標(biāo)方法的發(fā)展非常迅速,已經(jīng)衍生出了多種標(biāo)記方法,且隨著方法的不斷改進(jìn)和創(chuàng)新,其特異性和靈敏度都在不斷提高,使用也越來越方便。目前在病理診斷中廣為使用的當(dāng)屬PAP法、ABC法、SP法等。3、免疫膠體金技術(shù)免疫膠體金技術(shù)是以膠體金這樣一種特殊的金屬顆粒作為標(biāo)記物。膠體金是指金的水溶膠,它能迅速而穩(wěn)定地吸附蛋白,對蛋白的生物學(xué)活性則沒有明顯的影響。因此,用膠體金標(biāo)記一抗、二抗或其他能特異性結(jié)合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作為探針,就能對組織或細(xì)胞內(nèi)的抗原進(jìn)行定性、定位,甚至定量研究。由于膠體金有不同大小的顆粒,且膠體金的電子密度高,所以免疫膠體金技術(shù)特別適合于免疫電鏡的單標(biāo)記或多標(biāo)記定位研究。由于膠體金本身呈淡至深紅色,因此也適合進(jìn)行光鏡觀察。如應(yīng)用銀加強(qiáng)的免疫金銀法則更便于光鏡觀察。四、免疫組化技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)1、特異性強(qiáng)免疫學(xué)的基本原理決定了抗原與抗體之間的結(jié)合具有高度特異性,因此,免疫組化從理論上講也是組織細(xì)胞中抗原的特定顯示,如角蛋白(keratin)顯示上皮成分,LCA顯示淋巴細(xì)胞成分。只有當(dāng)組織細(xì)胞中存在交叉抗原時才會出現(xiàn)交叉反應(yīng)。2、敏感性高在應(yīng)用免疫組化的起始階段,由于技術(shù)上的限制,只有直接法、間接法等敏感性不高的技術(shù),那時的抗體只能稀釋幾倍、幾十倍;現(xiàn)在由于ABC法或SP法的出現(xiàn),使抗體稀釋上千倍、上萬倍甚至上億倍仍可在組織細(xì)胞中與抗原結(jié)合,這樣高敏感性的抗體抗原反應(yīng),使免疫組化方法越來越方便地應(yīng)用于常規(guī)病理診斷工作。3、定位準(zhǔn)確、形態(tài)與功能相結(jié)合該技術(shù)通過抗原抗體反應(yīng)及呈色反應(yīng),可在組織和細(xì)胞中進(jìn)行抗原的準(zhǔn)確定位,因而可同時對不同抗原在同一組織或細(xì)胞中進(jìn)行定位觀察,這樣就可以進(jìn)行形態(tài)與功能相結(jié)合的研究,對病理學(xué)研究的深入是十分有意義的。人集落刺激因子(CSF)ELISAKitHumancolony-stimulatingfactor,CSFELISAKit人激動異構(gòu)酶/細(xì)胞分裂素MB(CKMB)ELISAKitHumancytokininMB,CKMBELISAKit人肌細(xì)胞生成素(MYOG)ELISAKitHumanmyogenin,MYOGELISAKit人γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子(MIGF/CXCL9)ELISAKitHumanmonocyteinterferongammainducingfactor,MIGFELISAKit人干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISAKitHumanInterferoninducibleT-cellChemoattractant,I-TACELISAKit人白細(xì)胞分化抗原14(CDl4)ELISAKitHumanclusterOfdifferentiation,CDl4ELISAKit人肥大細(xì)胞類胰蛋白酶(MCT)ELISAKitHumanmastcelltryptase,MCTELISAKit人凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISAKitHumanapoptosisinducingfactor,AIFELISAKit人凋亡蛋白酶激活因子1(ICAD)ELISAKitHumanapoptosisproteaseactivatingfactor-1,ICADELISAKit人白細(xì)胞共同抗原(LCA/CD45)ELISAKitHumanleukocytecommonantigen,LCA/CD45ELISAKit人白細(xì)胞分化抗原4(CD4)ELISAKitHumanclusterOfdifferentiation,CD4ELISAKit小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISAKitMouseregulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RANTESELISAkit人信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子(Smad1)ELISAKitHumansignaltransduction-Smad1ELISAKit人信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)ELISAKitHumansignaltransduction-Smad7ELISAKit
登錄或新用戶注冊
請用手機(jī)微信掃描下方二維碼
快速登錄或注冊新賬號
微信掃碼,手機(jī)電腦聯(lián)動
更多資料
-
免疫組化的方法和優(yōu)點(diǎn)
- 上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司專業(yè)供應(yīng)各種屬elisa試劑盒,提供免費(fèi)代測服務(wù),保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果客觀真實(shí)性。我公司對試劑盒質(zhì)量1**%保證,若存在質(zhì)量問題,我們無條件包退換。若需要了解試劑盒的詳細(xì)信息,請來的咨詢:電話:021-60520498業(yè)務(wù)QQ:1005074258何經(jīng)理免疫組化的方法和優(yōu)點(diǎn)一、免疫組化技術(shù)的基本原理應(yīng)用免疫學(xué)及組織化學(xué)原理,對組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中的某些化學(xué)成分進(jìn)行原位的定性、定位或定量研究,這種技術(shù)稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)或免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)。眾所周知,抗體與抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性,即先將組織或細(xì)胞中的某些化學(xué)物質(zhì)提取出來,以其作為抗原或半抗原去免疫小鼠等實(shí)驗(yàn)動物,制備特異性抗體,再用這種抗體(**抗體)作為抗原去免疫動物制備第二抗體,并用某種酶(常用辣根過氧化物酶)或生物素等處理后再與前述抗原成分結(jié)合,將抗原放大,由于抗體與抗原結(jié)合后形成的免疫復(fù)合物是無色的,因此,還必須借助于組織化學(xué)方法將抗原抗體反應(yīng)部位顯示出來(常用顯色劑DAB顯示為棕黃色顆粒)。通過抗原抗體反應(yīng)及呈色反應(yīng),顯示細(xì)胞或組織中的化學(xué)成分,在顯微鏡下可清晰看見細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物,從而能夠在細(xì)胞或組織原位確定某些化學(xué)成分的分布、含量。組織或細(xì)胞中凡是能作抗原或半抗原的物質(zhì),如蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受體、酶、激素、核酸及病原體等都可用相應(yīng)的特異性抗體進(jìn)行檢測。二、免疫組織化學(xué)染色方法1、按標(biāo)記物質(zhì)的種類,如熒光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根過氧化物酶和堿性磷酸酶)、鐵蛋白、膠體金等,可分為免疫熒光法、放射免疫法、酶標(biāo)法和免疫金銀法等。2、按染色步驟可分為直接法(又稱一步法)和間接法(二步、三步或多步法);與直接法相比,間接法的靈敏度提高了許多。3、按結(jié)合方式可分為抗原抗體結(jié)合,如過氧化物酶-抗過氧化物酶(PAP)法和親和連接,如卵白素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物(ABC)法、鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(jié)(SP)法等,其中SP法是Z常用的方法。三、幾種常用免疫組織化學(xué)方法的原理1、免疫熒光方法是Z早建立的免疫組織化學(xué)技術(shù)。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理,先將已知抗體標(biāo)上熒光素,以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,在熒光顯微鏡下觀察。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會發(fā)出一定波長的熒光,從而可確定組織中某種抗原的定位,進(jìn)而還可進(jìn)行定量分析。由于免疫熒光技術(shù)特異性強(qiáng)、靈敏度高、快速簡便,所以在臨床病理診斷、檢驗(yàn)中應(yīng)用比較廣。2、免疫酶標(biāo)方法免疫酶標(biāo)方法是繼免疫熒光后,于60年代發(fā)展起來的技術(shù)?;驹硎窍纫悦笜?biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)的各種抗原成分進(jìn)行定位研究。免疫酶標(biāo)技術(shù)是目前Z常用的技術(shù)。本方法與免疫熒光技術(shù)相比的主要優(yōu)點(diǎn)是:定位準(zhǔn)確,對比度好,染色標(biāo)本可長期保存,適合于光、電鏡研究等。免疫酶標(biāo)方法的發(fā)展非常迅速,已經(jīng)衍生出了多種標(biāo)記方法,且隨著方法的不斷改進(jìn)和創(chuàng)新,其特異性和靈敏度都在不斷提高,使用也越來越方便。目前在病理診斷中廣為使用的當(dāng)屬PAP法、ABC法、SP法等。3、免疫膠體金技術(shù)免疫膠體金技術(shù)是以膠體金這樣一種特殊的金屬顆粒作為標(biāo)記物。膠體金是指金的水溶膠,它能迅速而穩(wěn)定地吸附蛋白,對蛋白的生物學(xué)活性則沒有明顯的影響。因此,用膠體金標(biāo)記一抗、二抗或其他能特異性結(jié)合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作為探針,就能對組織或細(xì)胞內(nèi)的抗原進(jìn)行定性、定位,甚至定量研究。由于膠體金有不同大小的顆粒,且膠體金的電子密度高,所以免疫膠體金技術(shù)特別適合于免疫電鏡的單標(biāo)記或多標(biāo)記定位研究。由于膠體金本身呈淡至深紅色,因此也適合進(jìn)行光鏡觀察。如應(yīng)用銀加強(qiáng)的免疫金銀法則更便于光鏡觀察。四、免疫組化技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)1、特異性強(qiáng)免疫學(xué)的基本原理決定了抗原與抗體之間的結(jié)合具有高度特異性,因此,免疫組化從理論上講也是組織細(xì)胞中抗原的特定顯示,如角蛋白(keratin)顯示上皮成分,LCA顯示淋巴細(xì)胞成分。只有當(dāng)組織細(xì)胞中存在交叉抗原時才會出現(xiàn)交叉反應(yīng)。2、敏感性高在應(yīng)用免疫組化的起始階段,由于技術(shù)上的限制,只有直接法、間接法等敏感性不高的技術(shù),那時的抗體只能稀釋幾倍、幾十倍;現(xiàn)在由于ABC法或SP法的出現(xiàn),使抗體稀釋上千倍、上萬倍甚至上億倍仍可在組織細(xì)胞中與抗原結(jié)合,這樣高敏感性的抗體抗原反應(yīng),使免疫組化方法越來越方便地應(yīng)用于常規(guī)病理診斷工作。3、定位準(zhǔn)確、形態(tài)與功能相結(jié)合該技術(shù)通過抗原抗體反應(yīng)及呈色反應(yīng),可在組織和細(xì)胞中進(jìn)行抗原的準(zhǔn)確定位,因而可同時對不同抗原在同一組織或細(xì)胞中進(jìn)行定位觀察,這樣就可以進(jìn)行形態(tài)與功能相結(jié)合的研究,對病理學(xué)研究的深入是十分有意義的。人集落刺激因子(CSF)ELISAKitHumancolony-stimulatingfactor,CSFELISAKit人激動異構(gòu)酶/細(xì)胞分裂素MB(CKMB)ELISAKitHumancytokininMB,CKMBELISAKit人肌細(xì)胞生成素(MYOG)ELISAKitHumanmyogenin,MYOGELISAKit人γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子(MIGF/CXCL9)ELISAKitHumanmonocyteinterferongammainducingfactor,MIGFELISAKit人干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISAKitHumanInterferoninducibleT-cellChemoattractant,I-TACELISAKit人白細(xì)胞分化抗原14(CDl4)ELISAKitHumanclusterOfdifferentiation,CDl4ELISAKit人肥大細(xì)胞類胰蛋白酶(MCT)ELISAKitHumanmastcelltryptase,MCTELISAKit人凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISAKitHumanapoptosisinducingfactor,AIFELISAKit人凋亡蛋白酶激活因子1(ICAD)ELISAKitHumanapoptosisproteaseactivatingfactor-1,ICADELISAKit人白細(xì)胞共同抗原(LCA/CD45)ELISAKitHumanleukocytecommonantigen,LCA/CD45ELISAKit人白細(xì)胞分化抗原4(CD4)ELISAKitHumanclusterOfdifferentiation,CD4ELISAKit小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISAKitMouseregulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RANTESELISAkit人信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子(Smad1)ELISAKitHumansignaltransduction-Smad1ELISAKit人信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)ELISAKitHumansignaltransduction-Smad7ELISAKit[詳細(xì)]
-
2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊
-
水熱反應(yīng)釜的參數(shù)和優(yōu)點(diǎn)
- 水熱反應(yīng)釜的參數(shù)和優(yōu)點(diǎn)[詳細(xì)]
-
2016-06-28 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
-
人PR免疫組化試劑盒實(shí)驗(yàn)方法
- 人PR免疫組化試劑盒實(shí)驗(yàn)方法[詳細(xì)]
-
2015-06-15 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
-
免疫組化問題解答
- 免疫組化問題解答[詳細(xì)]
-
2013-12-21 00:00
安裝說明
-
免疫組化基礎(chǔ)知識
- 免疫組織化學(xué)的概念:免疫組化是利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對其進(jìn)行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學(xué)。免疫組化實(shí)驗(yàn)所用的抗體有哪些?免疫組化實(shí)驗(yàn)中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。單克隆抗體是一個B淋巴細(xì)胞克隆分泌的抗體,應(yīng)用細(xì)胞融合雜交瘤技術(shù)免疫動物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動物后,從動物血中所獲得的免疫血清,是多個B淋巴細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的抗體混合物。免疫組化實(shí)驗(yàn)所用的組織和細(xì)胞標(biāo)本有哪些?實(shí)驗(yàn)所用主要為組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本兩大類,前者包括石蠟切片(病理大片和組織芯片)和冰凍切片,后者包括組織印片、細(xì)胞爬片和細(xì)胞涂片。其中石蠟切片是制作組織標(biāo)本Z常用、Z基本的方法,對于組織形態(tài)保存好,且能作連續(xù)切片,有利于各種染色對照觀察;還能長期存檔,供回顧性研究;石蠟切片制作過程對組織內(nèi)抗原暴露有一定的影響,但可進(jìn)行抗原修復(fù),是免疫組化中的組織標(biāo)本制作方法。石蠟切片為什么要做抗原修復(fù)?有哪些方法?石蠟切片標(biāo)本均用甲醛固定,使得細(xì)胞內(nèi)抗原形成醛鍵、羧甲鍵而被封閉了部分抗原決定簇,同時蛋白之間發(fā)生交聯(lián)而使抗原決定簇隱蔽。所以要求在進(jìn)行IHC染色時,需要先進(jìn)行抗原修復(fù)或暴露,即將固定時分子之間所形成的交聯(lián)破壞,而恢復(fù)抗原的原有空間形態(tài)。常用的抗原修法有微波修復(fù)法,高壓加熱法,酶消化法,水煮加熱法等,常用的修復(fù)液是pH6.0的0.01mol/L的檸檬酸鹽緩沖液。免疫組化常用的染色方法有哪些?根據(jù)標(biāo)記物的不同分為免疫熒光法,免疫酶標(biāo)法,親和組織化學(xué)法,后者是以一種物質(zhì)對某種組織成分具有高度親合力為基礎(chǔ)的檢測方法。這種方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗體)在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平的定位,其中生物素抗生物素染色法Z常用??贵w交叉反應(yīng)的原因:指抗體除與其相應(yīng)的抗原發(fā)生特異性反應(yīng)外還與其它抗原發(fā)生反應(yīng)。產(chǎn)生的原因有以下幾個方面:1.抗原特異性指用于免疫動物的抗原性物質(zhì)中含有多種抗原分子,它引起動物產(chǎn)生針對多種抗原分子特異性的相應(yīng)抗體。任何其它物質(zhì)只要含有一種或多種與上述物質(zhì)相同的抗原分子,必將與上述多特異性的抗血清發(fā)生交叉反應(yīng)。2.共同決定簇即兩種抗原分子中都含有相同的抗原決定簇。3.決定簇相似,兩種不同的抗原決定簇,如果結(jié)構(gòu)大致相同,由于空間構(gòu)象關(guān)系,某一決定簇的相應(yīng)抗體可以與大致相同的決定簇發(fā)生交叉反應(yīng)。當(dāng)然抗原一抗體之間構(gòu)象相似時的結(jié)合力小于吻合時的結(jié)合力。多抗和單抗特性比較:1.均一性。一種單抗中,每個抗體的化學(xué)結(jié)構(gòu)和氨基酸順序都相同,只有一種Ig亞類。即單抗是一種純度很高的均一抗體。而從不同動物,不同時期所得到的多抗,各有不同的化學(xué)組成。多抗是多種種類和亞類Ig的混合物。2.穩(wěn)定性。單抗的穩(wěn)定較差,對PH變化敏感,對熱不穩(wěn)定,提純過程中易變性,而多抗的穩(wěn)定性則較好。3.特異性。單抗是單一地針對抗原的某一決定簇,所以用它進(jìn)行血清學(xué)反應(yīng)時,特異性強(qiáng),敏感性高,一般不發(fā)生交叉反應(yīng)。而多抗能與抗原上的多種抗原決定簇結(jié)合,所以特異性較差,較易引起交叉反應(yīng)。4.重復(fù)性。單抗的重復(fù)性好,而多抗每批都不一樣。5.沉淀反應(yīng)。多抗由于與抗原多價結(jié)合容易形成網(wǎng)絡(luò)樣沉淀,而單抗只與抗原結(jié)合產(chǎn)生二聚體,不能直接形成抗原抗體沉淀物。抗體的保存:抗體儲存容器應(yīng)由不吸附蛋白質(zhì)的材料制成,常用的有聚丙烯,聚碳酸酯和硼硅酸玻璃。如儲存的抗體中蛋白濃度很低(10-100mg/L),就應(yīng)另加隔離蛋白以減少容器對抗體蛋白的吸附,隔離蛋白常用0.1%-1.0%的牛血清白蛋白。絕大多數(shù)已稀釋的抗體應(yīng)存在4℃-8℃條件下,以免凍融對抗體蛋白產(chǎn)生有害效應(yīng)??贵w原液和已分離的免疫球蛋白組分應(yīng)保存于-20℃條件下,并避免反復(fù)凍融。冷凍的抗體溶液應(yīng)置于室溫中緩慢地解凍,應(yīng)避免用高溫快速解凍。被細(xì)菌污染的抗體常會出現(xiàn)假陽性結(jié)果,應(yīng)將污染的抗體溶液及其他試劑棄之。為防止細(xì)菌污染,可于抗體溶液中加入0.01%疊氮鈉??贵w經(jīng)真空冷凍干燥后置-20℃以下可保存3-5年。保存稀釋后的單抗應(yīng)加入0.1%疊氮鈉濃度。大多數(shù)稀釋抗體可進(jìn)行冷凍保存,少數(shù)抗體可能會丟失抗原活性。大多數(shù)單抗,只要蛋白濃度適當(dāng),可在4℃下保存數(shù)月。[詳細(xì)]
-
2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
簡述各種流量計(jì)的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)
- 各種流量計(jì)優(yōu)缺點(diǎn)常州市凱悅熱工儀表有限公司 1.渦輪流量計(jì) 渦輪流量計(jì),是速度式流量計(jì)中的主要種類,它采用多葉片的轉(zhuǎn)子(渦輪)感受流體平均流速,從而且推導(dǎo)出流量或總量的儀表。一般它由傳感器和顯示儀兩部分組成,也可做成整體式。 渦輪流量計(jì)和容積式流量計(jì)、科里奧利質(zhì)量流量計(jì)稱為流量計(jì)中三類重復(fù)性、精度**的產(chǎn)品,作為十大類型流量計(jì)之一,其產(chǎn)品已發(fā)展為多品種、多系列批量生產(chǎn)的規(guī)模?! ?yōu)點(diǎn):(1)高精度,在所有流量計(jì)中,屬于Z極ng確的流量計(jì);(2)重復(fù)性好;(3)無零點(diǎn)擾能力好;(4)范圍度寬;(5)結(jié)構(gòu)緊湊。 缺點(diǎn):(1)不能長期保持校準(zhǔn)特性;(2)流體物性對流量特性有較大影響?! ?yīng)用概況:渦輪流量計(jì)在以下一些測量對象獲得廣泛應(yīng)用:石油、有機(jī)液體、無機(jī)液、液化氣、天然氣和低溫流體統(tǒng)在歐洲和美國,渦輪流量計(jì)在用量上是僅次于孔板流量計(jì)的天然計(jì)量儀表,僅荷蘭在天然氣管線上就采用了2600多臺各種尺寸,壓力從0.8~6.5MPa的氣體渦輪流量計(jì),它們已成為優(yōu)良的天然氣計(jì)量儀表?! ?.2渦街流量計(jì) 渦街流量計(jì)是在流體中安放一根非流線型游渦發(fā)生體,流體在發(fā)生體兩側(cè)交替地分離釋放出兩串規(guī)則地交錯排列的游渦的儀表?! u街流量計(jì)按頻率檢出方式可分為:應(yīng)力式、應(yīng)變式、電容式、熱敏式、振動體式、光電式及超聲式等?! u街流量計(jì)是屬于Z年輕的一類流量計(jì),但其發(fā)展迅速,目前已成為通用的一類流量計(jì)?! ?yōu)點(diǎn):(1)結(jié)構(gòu)簡單牢固;(2)適用流體種類多;(3)精度較高;(4)范圍度寬;(5)壓損小?! ∪秉c(diǎn):(1)不適用于低雷諾數(shù)測量;(2)需較長直管段;(3)儀表系數(shù)較低(與渦輪流量計(jì)相比);(4)儀表在脈動流、多相流中尚缺乏應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)?! ?.3電磁流量計(jì) 電磁流量計(jì)是根據(jù)法拉弟電磁感應(yīng)定律制成的一種測量導(dǎo)電性液體的儀表?! ‰姶帕髁坑?jì)有一系列優(yōu)良特性,可以解決其它流量計(jì)不易應(yīng)用的問題,如臟污流、腐蝕流的測量。70、80年代電磁流量在技術(shù)上有重大突破,使它成為應(yīng)用廣泛的一類流量計(jì),在流量儀表中其使用量百分?jǐn)?shù)不斷上升?! ?yōu)點(diǎn):(1)測量通道是段光滑直管,不會阻塞,適用于測量含固體顆粒的液固二相流體,如紙漿、泥漿、污水等;(2)不產(chǎn)生流量檢測所造成的壓力損失,節(jié)能效果好;(3)所測得體積流量實(shí)際上不受流體密度、粘度、溫度、壓力和電導(dǎo)率變化的明顯影響;(4)流量范圍大,口徑范圍寬;(5)可應(yīng)用腐蝕性流體?! ∪秉c(diǎn):(1)不能測量電導(dǎo)率很低的液體,如石油制品;(2)不能測量氣體、蒸汽和含有較大氣泡的液體;(3)不能用于較高溫度?! ?yīng)用概況:電磁流量計(jì)應(yīng)用領(lǐng)域廣泛,大口徑儀表較多應(yīng)用于給排水工程;中小口徑常用于高要求或難測場合,如鋼鐵工業(yè)高爐風(fēng)口冷卻水控制,造紙工業(yè)測量紙漿液和黑液,化學(xué)工業(yè)的強(qiáng)腐蝕液,有色冶金工業(yè)的礦漿;小口徑、微小口徑常用于醫(yī)藥工業(yè)、食品工業(yè)、生物化學(xué)等有衛(wèi)生要求的場所。 1.4差壓式流量計(jì) 差壓式流量計(jì)是根據(jù)安裝于管道中流量檢測件產(chǎn)生的差壓,已知的流體條件和檢測件與管道的幾何尺寸來計(jì)算流量的儀表。 差壓式流量計(jì)由一次裝置(檢測件)和二次裝置(差壓轉(zhuǎn)換和流量顯示儀表)組成。通常以檢測件形式對差壓式流量計(jì)分類,如孔板流量計(jì)、文丘里流量計(jì)、均速管流量計(jì)等。二次裝置為各種機(jī)械、電子、機(jī)電一體式差壓計(jì),差壓變送器及流量顯示儀表。它已發(fā)展為三化(系列化、通用化及標(biāo)準(zhǔn)化)程度很高的、種類規(guī)格龐雜的一大類儀表,它既可測量流量參數(shù),也可測量其它參數(shù)(如壓力、物位、密度等)。差壓式流量計(jì)的檢測件按其作用原理可分為:節(jié)流裝置、水力阻力式、離心式、動壓頭式、動壓頭增益式及射流式幾大類。檢測件又可按其標(biāo)準(zhǔn)化程度分為二大類:標(biāo)準(zhǔn)的和非標(biāo)準(zhǔn)的。所謂標(biāo)準(zhǔn)檢測件是只要按照標(biāo)準(zhǔn)文件設(shè)計(jì)、制造、安裝和使用,無須經(jīng)實(shí)流標(biāo)定即可確定其流量值和估算測量誤差。非標(biāo)準(zhǔn)檢測件是成熟程度較差的,尚未列入國際標(biāo)準(zhǔn)中的檢測件?! 〔顗菏搅髁坑?jì)是一類應(yīng)用Z廣泛的流量計(jì),在各類流量儀表中其使用量占居首位。近年來,由于各種新型流量計(jì)的問世,它的使用量百分?jǐn)?shù)逐漸下降,但目前仍是Z重要的一類流量計(jì)?! ?yōu)點(diǎn):(1)應(yīng)用Z多的孔板式流量,計(jì)結(jié)構(gòu)牢固,性能穩(wěn)定可靠,使用壽命長;(2)應(yīng)用范圍廣泛,至今尚無任何一類流量計(jì)可與之相比擬;(3)檢測件與變送器、顯示儀表分別由不同廠家生產(chǎn),便于規(guī)模經(jīng)濟(jì)生產(chǎn)?! ∪秉c(diǎn):(1)測量精度普遍偏低;(2)范圍度窄,一般僅3:1~4:1;(3)現(xiàn)場安裝條件要求高;(4)壓損大(指孔板、噴嘴等)。 應(yīng)用概況:差壓式流量計(jì)應(yīng)用范圍特別廣泛,在封閉管道的流量測量中各種對象都有應(yīng)用,如流體方面:單相、混相、潔凈、臟污、粘性流等;工作狀態(tài)方面:常壓、高壓、真空、常溫、高溫、低溫等;管徑方面:從幾mm到幾m;流動條件方面:亞音速、音速、脈動流等。它在各工業(yè)部門的用量約占流量計(jì)全部用量的1/4~1/3。 1.5浮子流量計(jì) 浮子流量計(jì),又稱轉(zhuǎn)子流量計(jì),是變面積式流量計(jì)的一種,在一根由下向上擴(kuò)大的垂直錐管中,圓形橫截面的浮子的重力是由液體動力承受的,從而使浮子可以在錐管內(nèi)自由地上升和下降?! 「∽恿髁坑?jì)是僅次于差壓式流量計(jì)應(yīng)用范圍Z寬廣的一類流量計(jì),特別在小、微流量方面有舉足輕重的作用。80年代中期,日本、西歐、美國的銷售金額占流量儀表的15%~20%。我國產(chǎn)量1990年估計(jì)在12~14萬臺,其中95%以上為玻璃錐管浮子流量計(jì)。 特點(diǎn):(1)玻璃錐管浮子流量計(jì)結(jié)構(gòu)簡單,使用方便,缺點(diǎn)是耐壓力低,有玻璃管易碎的較大風(fēng)險;(2)適用于小管徑和低流速;(3)壓力損失較低。 1.6容積式流量計(jì) 容積式流量計(jì),又稱定排量流量計(jì),簡稱PD流量計(jì),在流量儀表中是精度Z高的一類。它利用機(jī)械測量元件把流體連續(xù)不斷地分割成單個已知的體積部分,根據(jù)測量室逐次重復(fù)地充滿和排放該體積部分流體的次數(shù)來測量流體體積總量。容積式流量計(jì)按其測量元件分類,可分為橢圓齒輪流量計(jì)、刮板流量計(jì)、雙轉(zhuǎn)子流量計(jì)、旋轉(zhuǎn)活塞流量計(jì)、往復(fù)活塞流量計(jì)、圓盤流量計(jì)、液封轉(zhuǎn)筒式流量計(jì)、濕式氣量計(jì)及膜式氣量計(jì)等。 優(yōu)點(diǎn):(1)計(jì)量精度高;(2)安裝管道條件對計(jì)量精度沒有影響;(3)可用于高粘度液體的測量;(4)范圍度寬;(5)直讀式儀表無需外部能源可直接獲得累計(jì),總量,清晰明了,操作簡便?! ∪秉c(diǎn):(1)結(jié)果復(fù)雜,體積龐大;(2)被測介質(zhì)種類、口徑、介質(zhì)工作狀態(tài)局限性較大;(3)不適用于高、低溫場合;(4)大部分儀表只適用于潔凈單相流體;(5)產(chǎn)生噪聲及振動?! ?yīng)用概況:容積式流量計(jì)與差壓式流量計(jì)、浮子流量計(jì)并列為三類使用量Zda的流量計(jì),常應(yīng)用于昂貴介質(zhì)(油品、天然氣等)的總量測量。工業(yè)發(fā)達(dá)國家近年P(guān)D流量計(jì)(不包括家用煤氣表和家用水表)的銷售金額占流量儀表的13%~23%;我國約占20%,1990年產(chǎn)量(不包括家用煤氣表)估計(jì)為34萬臺,其中橢圓齒輪式和腰輪式分別約占70%和20%?! ?.7超聲流量計(jì) 超聲流量計(jì)是通過檢測流體流動對超聲束(或超聲脈沖)的作用以測量流量的儀表。根據(jù)對信號檢測的原理超聲流量計(jì)可分為傳播速度差法(直接時差法、時差法、相位差法和頻差法)、波束偏移法、多普勒法、互相關(guān)法、空間濾法及噪聲法等。超聲流量計(jì)和電磁流量計(jì)一樣,因儀表流通通道未設(shè)置任何阻礙件,均屬無阻礙流量計(jì),是適于解決流量測量困難問題的一類流量計(jì),特別在大口徑流量測量方面有較突出的優(yōu)點(diǎn),近年來它是發(fā)展迅速的一類流量計(jì)之一?! ?yōu)點(diǎn):(1)可做非接觸式測量;(2)為無流動阻撓測量,無壓力損失;(3)可測量非導(dǎo)電性液體,對無阻撓測量的電磁流量計(jì)是一種補(bǔ)充?! ∪秉c(diǎn):1)傳播時間法只能用于清潔液體和氣體;而多普勒法只能用于測量含有一定量懸浮顆粒和氣泡的液體;(2)多普勒法測量精度不高?! ?yīng)用概況:(1)傳播時間法應(yīng)用于清潔、單相液體和氣體。典型應(yīng)用有工廠排放液、:怪液、液化天然氣等;(2)氣體應(yīng)用方面在高壓天然氣領(lǐng)域已有使用良好的經(jīng)驗(yàn);(3)多普勒法適用于異相含量不太高的雙相流體,例如:未處理污水、工廠排放液、臟流程液;通常不適用于非常清潔的液體?! ?.8科里奧利質(zhì)量流量計(jì) 科里奧利質(zhì)量流量計(jì)(以下簡稱CMF)是利用流體在振動管中流動時,產(chǎn)生與質(zhì)量流量成正比的科里奧利力原理制成的一種直接式質(zhì)量流量儀表。我國CMF的應(yīng)用起步較晚,近年已有幾家制造廠(如太行儀表廠)自行開發(fā)供應(yīng)市場;還有幾家制造廠組建合資企業(yè)或引用國外技術(shù)生產(chǎn)系列儀表。 1.9明渠流量計(jì) 與前述幾種不同,它是在非滿管狀敞開渠道測量自由表面自然流的流量儀表。非滿管態(tài)流動的水路稱作明渠,測量明渠中水流流量的稱作明渠流量計(jì)(openchannelflowmeter)。明渠流量計(jì)除圓形外,還有U字形、梯形、矩形等多種形狀。明渠流量計(jì)應(yīng)用場所有城市供水引水渠;火電廠引水和排水渠、污水治理流入和排放渠;工礦企業(yè)水排放以及水利工程和農(nóng)業(yè)灌溉用渠道。有人估計(jì)1995臺,約占流量儀表整體的1.6%,但是國內(nèi)應(yīng)用尚無估計(jì)數(shù)據(jù)。[詳細(xì)]
-
2018-10-03 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
超聲波探傷儀原理和優(yōu)點(diǎn)
- 超聲波探傷儀工作原理 1、超聲檢測 超聲波檢測是無損檢測方法之一,無損檢測是在不破壞前提下,檢查工件宏觀缺陷或測量工件特征的各種技術(shù)方法的統(tǒng)稱。常規(guī)無損檢測方法有:超聲檢測UltrasonicTesting(縮寫UT);射線檢測RadiographicTesting(縮寫RT);磁粉檢測MagneticparticleTesting(縮寫MT);滲透檢驗(yàn)PenetrantTesting(縮寫PT);渦流檢測EddycurrentTesting(縮寫ET); 2、運(yùn)用超聲檢測的方法來檢測的儀器它的原理是:超聲波在被檢測材料中傳播時,材料的聲學(xué)特性和內(nèi)部組織的變化對超聲波的傳播產(chǎn)生一定的影響,通過對超聲波受影響程度和狀況的探測了解材料性能和結(jié)構(gòu)變化的技術(shù)稱為超聲檢測。超聲檢測方法通常有穿透法、脈沖反射法、串列法等?! ?shù)字化超聲探傷儀的工作原理:與A型脈沖式探傷儀不同,數(shù)字化探傷儀在電路上有重大改變數(shù)字信號處理是在計(jì)算機(jī)中用程序來實(shí)現(xiàn)的。通常,首先要進(jìn)行的處理是去除信號中的噪聲,其次是將已經(jīng)去除噪聲的信號進(jìn)行UT檢測所需的處理,包括增益控制、衰減補(bǔ)償、求信號包路線等。超聲信號經(jīng)接收部分放大后,由模數(shù)轉(zhuǎn)換器變?yōu)閿?shù)字信號傳給電腦,換能器的位置可受電腦控制或由人工操作,由轉(zhuǎn)換器將位置變?yōu)閿?shù)字傳給電腦。電腦再把隨時間和位置變化的超聲波形進(jìn)行適當(dāng)處理,得出進(jìn)一步控制探傷系統(tǒng)的結(jié)論,進(jìn)而設(shè)置有關(guān)參數(shù)或?qū)⑻幚斫Y(jié)果波形、圖形等在屏幕上顯示、打印出來或給出光、聲識別及報(bào)警信號?! ∨c傳統(tǒng)探傷儀相比,有以下優(yōu)點(diǎn): ?。?)檢測速度快數(shù)字化超聲探傷儀一般都可自動檢測、計(jì)算、記錄,有些還能自動進(jìn)行深度補(bǔ)償和自動設(shè)置靈敏度,因此檢測速度快、效率高?! 。?)檢測精度高數(shù)字化超聲探傷儀對模擬信號進(jìn)行高速數(shù)據(jù)采集、量化、計(jì)算和判別,其檢測精度可高于傳統(tǒng)儀器檢測結(jié)果?! 。?)記錄和檔案檢測數(shù)字化超聲探傷儀可以提供檢測記錄直至缺陷圖像。 ?。?)可靠性高,穩(wěn)定性好數(shù)字化超聲探傷儀可全面、客觀地采集和存儲數(shù)據(jù),并對采集到的數(shù)據(jù)進(jìn)行實(shí)時處理或后處理,對信號進(jìn)行時域、頻域或圖像分析,還可通過模式識別對工件質(zhì)量進(jìn)行分級,減少了人為因素的影響,提高了檢索的可靠性和穩(wěn)定性。[詳細(xì)]
-
2018-10-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
免疫組化技術(shù)總結(jié)
- 資料轉(zhuǎn)自丁香園:文檔為免疫組化全園資料整理、經(jīng)驗(yàn)和教訓(xùn)總結(jié)、親身案例講述、難題集錦等等,多是原創(chuàng)經(jīng)驗(yàn)和心得體會,難得的免疫組化技術(shù)文檔。[詳細(xì)]
-
2018-10-20 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
CD90免疫組化試劑盒
- CD90免疫組化試劑盒該試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物(HRPStreptavidinConjugate,HRP-SA)為基礎(chǔ),可用于檢測細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性CD90抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的CD90一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后,用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合,Z后加入HRP-SA,形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物,顯微鏡下觀察成像。試劑盒所含試劑:試劑A通透液:0.1%Triton-X10010mL(選用)試劑B封閉緩沖液(封閉用)20mL試劑C(原裝進(jìn)口分裝)已稀釋的即用型CD90一抗(2.5ml)試劑D(原裝進(jìn)口分裝)生物素化羊抗兔IgG1支(濃度1.5mg/mL,稀釋比為1:300~1:500)50μL+抗體稀釋液20ml試劑EHRP-SA復(fù)合物1支(濃度1μM,稀釋比1:50~1:200)100μL試劑FDAB顯色液5ml用戶自備試劑:1.10mMTBS(pH7.2~7.4)三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL,濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4,Z后定容至1000mLTBS-T:TBS+Tween20(0.05%體積比)2.抗原修復(fù)液(依檢測抗原不同而選擇不同的修復(fù)液)10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檸檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL,濃鹽酸調(diào)pH值至6.0,Z后定容至1000mL或:0.5MEDTA修復(fù)液(pH8.0)EDTA2H2O186.1g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水700mL,用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0,Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實(shí)驗(yàn)步驟(建議方案):石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片:將待做切片置于切片架上,于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr;2.脫蠟:切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10min;3.水化:切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇5min,95%乙醇2次(每次2min),85%乙醇2min;75%乙醇2min,自來水沖洗,ddH2O洗2×2min;4.抗原修復(fù):根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達(dá)到98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O洗2×2min,TBS洗滌(2×2min)(具體修法見附1)*注:有些抗原勿需修復(fù),直接進(jìn)入第5步封閉。5.封閉:滴加試劑B,37℃濕盒孵育30min;6.加一抗:滴加用試劑C(即用型一抗),37℃濕盒孵育2hr或4℃;7.洗滌:TBS-T洗滌(3×5min);8.封閉:滴加試劑B,37℃濕盒孵育10min;9.加二抗:滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑D),37℃濕盒中孵育30min;10.洗滌:TBS-T洗滌(3×5min);11.封閉:滴加試劑Tween20,37℃濕盒孵育封閉20min;12.加HRP-SA:滴加用抗體稀釋液稀釋的試劑E(1:50~200,終濃度5~20nM),37℃濕盒中孵育30min;13.洗滌:TBS-T洗滌(3×5min),TBS洗滌(2×5min);14.顯色:應(yīng)用DAB溶液(試劑F)顯色;15.復(fù)染:自來水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;16.封片:待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;17.觀察成像:顯微鏡下觀察成像。注意事項(xiàng):1.修復(fù)后緩沖液須自然冷卻,自來水沖洗后方能把切片取出,驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到,用過的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。3.若試劑為微量濃縮液,用前應(yīng)低速離心,將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌,以便洗去組織上殘留的Tween20,否則會影響結(jié)果觀察。5.如須復(fù)染細(xì)胞核,則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。附1:抗原修法常用抗原修復(fù)液:檸檬酸緩沖液(0.01MpH6.0)、EDTA抗原修復(fù)液(pH8.0或9.0)等等。一、酶消化修復(fù)法切片脫蠟水化處理,TBS沖洗,在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶,37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰,將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上,放入已沸騰的緩沖液中,中檔或繼續(xù)微波10~15min,取出微波盒冷卻至室溫后,自來水沖洗,取出切片。因不同微波爐微波處理時間存在差異,須自行調(diào)整。三、直接高壓抗原修復(fù)法取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰,將組織切片置于耐高溫切片架上,修復(fù)液沸騰后放入切片架,蓋上鍋蓋,待噴氣后計(jì)時1.5~2.5min即可脫離熱源,自然冷卻至室溫后自來水沖洗,取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。四、隔水式高壓抗原修復(fù)法不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰,微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰,將切片放入微波盒中,再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋,待噴氣后計(jì)時4~8min即可關(guān)閉熱源,自然冷卻至室溫后自來水沖洗,取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。[詳細(xì)]
-
2018-10-31 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
免疫組化試劑盒說明書
- 免疫組化試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物(HRPStreptavidinConjugate,HRP-SA)為基礎(chǔ),可用于檢測血液,細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性Dazl抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的Dazl一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后,用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合,Z后加入HRP-SA,形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物,顯微鏡下觀察成像。用戶自備試劑:1.10mMTBS(pH7.2~7.4)三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL,濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4,Z后定容至1000mLTBS-T:TBS+Tween20(0.05%體積比)2.抗原修復(fù)液(依檢測抗原不同而選擇不同的修復(fù)液)10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檸檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL,濃鹽酸調(diào)pH值至6.0,Z后定容至1000mL或:0.5MEDTA修復(fù)液(pH8.0)EDTA2H2O186.1g加蒸餾水700mL,用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0,Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實(shí)驗(yàn)步驟(建議方案):石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片:將待做切片置于切片架上,于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr;2.脫蠟:切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10min;3.水化:切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇5min,95%乙醇2次(每次2min),85%乙醇2min;75%乙醇2min,自來水沖洗,ddH2O洗2×2min;4.抗原修復(fù):根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達(dá)到98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O洗2×2min,TBS洗滌(2×2min)(具體修法見附1)*注:有些抗原勿需修復(fù),直接進(jìn)入第5步封閉。5.封閉:滴加試劑B,37℃濕盒孵育30min;6.加一抗:滴加用試劑C(即用型一抗),37℃濕盒孵育2hr或4℃過一夜;7.洗滌:TBS-T洗滌(3×5min);8.封閉:滴加試劑B,37℃濕盒孵育10min;9.加二抗:滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑D),37℃濕盒中孵育30min;10.洗滌:TBS-T洗滌(3×5min);11.封閉:滴加試劑Tween20,37℃濕盒孵育封閉20min;12.加HRP-SA:滴加用試劑C稀釋的試劑E(1:50~200,終濃度5~20nM),37℃濕盒中孵育30min;13.洗滌:TBS-T洗滌(3×5min),TBS洗滌(2×5min);14.顯色:應(yīng)用DAB溶液(試劑F)顯色;15.復(fù)染:自來水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;16.封片:待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;17.觀察成像:顯微鏡下觀察成像。注意事項(xiàng):1.修復(fù)后緩沖液須自然冷卻,自來水沖洗后方能把切片取出,驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到,用過的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。3.若試劑為微量濃縮液,用前應(yīng)低速離心,將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌,以便洗去組織上殘留的Tween20,否則會影響結(jié)果觀察。5.如須復(fù)染細(xì)胞核,則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。附1:抗原修法常用抗原修復(fù)液:檸檬酸緩沖液(0.01MpH6.0)、EDTA抗原修復(fù)液(pH8.0或9.0)等等。一、酶消化修復(fù)法切片脫蠟水化處理,TBS沖洗,在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶,37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰,將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上,放入已沸騰的緩沖液中,中檔或繼續(xù)微波10~15min,取出微波盒冷卻至室溫后,自來水沖洗,取出切片。因不同微波爐微波處理時間存在差異,須自行調(diào)整。三、直接高壓抗原修復(fù)法取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰,將組織切片置于耐高溫切片架上,修復(fù)液沸騰后放入切片架,蓋上鍋蓋,待噴氣后計(jì)時1.5~2.5min即可脫離熱源,自然冷卻至室溫后自來水沖洗,取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。四、隔水式高壓抗原修復(fù)法不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰,微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰,將切片放入微波盒中,再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋,待噴氣后計(jì)時4~8min即可關(guān)閉熱源,自然冷卻至室溫后自來水沖洗,取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。[詳細(xì)]
-
2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
ICP的優(yōu)點(diǎn)
- ICP的優(yōu)點(diǎn)[詳細(xì)]
-
2010-03-30 00:00
期刊論文
-
蠕動泵的優(yōu)點(diǎn)
- 蠕動泵的優(yōu)點(diǎn)[詳細(xì)]
-
2013-10-18 00:00
課件
-
氮吹儀的優(yōu)點(diǎn)
- 氮吹儀的優(yōu)點(diǎn)[詳細(xì)]
-
2016-08-31 00:00
報(bào)價單
-
噴霧干燥的優(yōu)點(diǎn)
- 噴霧干燥的優(yōu)點(diǎn)[詳細(xì)]
-
2016-06-27 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
-
冷凍干燥機(jī)的優(yōu)點(diǎn)
- 冷凍干燥機(jī)的優(yōu)點(diǎn)[詳細(xì)]
-
2015-07-31 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
-
ELSD2000的優(yōu)點(diǎn)
- ELSD的獨(dú)特原理帶來的一些便利[詳細(xì)]
-
2024-10-06 07:11
產(chǎn)品樣冊
-
自動真空履帶干燥機(jī)的優(yōu)點(diǎn)和應(yīng)用
- 自動真空履帶干燥機(jī)的優(yōu)點(diǎn)和應(yīng)用[詳細(xì)]
-
2024-09-29 09:13
其它
-
細(xì)胞爬片的免疫組化染色的操作步驟
- 細(xì)胞爬片的免疫組化染色的操作步驟[詳細(xì)]
-
2013-11-11 00:00
操作手冊
-
免疫組化染色試劑盒說明書
- 免疫組化染色試劑盒說明書[詳細(xì)]
-
2014-06-23 00:00
課件
-
小鼠 Thy1 免疫組化試劑盒
- 小鼠ELISA試劑盒該試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物(HRPStreptavidinConjugate,HRP-SA)為基礎(chǔ),可用于檢測細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性Thy1抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的Thy1一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后,用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合,Z后加入HRP-SA,形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物,顯微鏡下觀察成像。試劑盒所含試劑:試劑A通透液:0.1%Triton-X10010mL(選用)試劑B封閉緩沖液(封閉用)20mL試劑C(原裝進(jìn)口分裝)已稀釋的即用型Thy1一抗(2.5ml)試劑D(原裝進(jìn)口分裝)生物素化羊抗兔IgG1支(濃度1.5mg/mL,稀釋比為1:300~1:500)50μL+抗體稀釋液20ml試劑EHRP-SA復(fù)合物1支(濃度1μM,稀釋比1:50~1:200)100μL試劑FDAB顯色液5ml用戶自備試劑:1.10mMTBS(pH7.2~7.4)三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL,濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4,Z后定容至1000mLTBS-T:TBS+Tween20(0.05%體積比)2.抗原修復(fù)液(依檢測抗原不同而選擇不同的修復(fù)液)10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檸檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL,濃鹽酸調(diào)pH值至6.0,Z后定容至1000mL或:0.5MEDTA修復(fù)液(pH8.0)EDTA2H2O186.1g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水700mL,用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0,Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實(shí)驗(yàn)步驟(建議方案):石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片:將待做切片置于切片架上,于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr;2.脫蠟:切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10min;3.水化:切片經(jīng)下行酒精水化,無水乙醇5min,95%乙醇2次(每次2min),85%乙醇2min;75%乙醇2min,自來水沖洗,ddH2O洗2×2min;4.抗原修復(fù):根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達(dá)到98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O洗2×2min,TBS洗滌(2×2min)(具體修法見附1)*注:有些抗原勿需修復(fù),直接進(jìn)入第5步封閉。5.封閉:滴加試劑B,37℃濕盒孵育30min;6.加一抗:滴加用試劑C(即用型一抗),37℃濕盒孵育2hr或4℃7.洗滌:TBS-T洗滌(3×5min);8.封閉:滴加試劑B,37℃濕盒孵育10min;9.加二抗:滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑D),37℃濕盒中孵育30min;10.洗滌:TBS-T洗滌(3×5min);11.封閉:滴加試劑Tween20,37℃濕盒孵育封閉20min;12.加HRP-SA:滴加用試劑C稀釋的試劑E(1:50~200,終濃度5~20nM),37℃濕盒中孵育30min;13.洗滌:TBS-T洗滌(3×5min),TBS洗滌(2×5min);14.顯色:應(yīng)用DAB溶液(試劑F)顯色;15.復(fù)染:自來水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;16.封片:待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;17.觀察成像:顯微鏡下觀察成像。小鼠ELISA試劑盒注意事項(xiàng):1.修復(fù)后緩沖液須自然冷卻,自來水沖洗后方能把切片取出,驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到,用過的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。3.若試劑為微量濃縮液,用前應(yīng)低速離心,將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌,以便洗去組織上殘留的Tween20,否則會影響結(jié)果觀察。5.如須復(fù)染細(xì)胞核,則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。附11:抗原修法常用抗原修復(fù)液:檸檬酸緩沖液(0.01MpH6.0)、EDTA抗原修復(fù)液(pH8.0或9.0)等等。一、酶消化修復(fù)法切片脫蠟水化處理,TBS沖洗,在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶,37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰,將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上,放入已沸騰的緩沖液中,中檔或繼續(xù)微波10~15min,取出微波盒冷卻至室溫后,自來水沖洗,取出切片。因不同微波爐微波處理時間存在差異,須自行調(diào)整。三、直接高壓抗原修復(fù)法取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰,將組織切片置于耐高溫切片架上,修復(fù)液沸騰后放入切片架,蓋上鍋蓋,待噴氣后計(jì)時1.5~2.5min即可脫離熱源,自然冷卻至室溫后自來水沖洗,取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。四、隔水式高壓抗原修復(fù)法不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰,微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰,將切片放入微波盒中,再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋,待噴氣后計(jì)時4~8min即可關(guān)閉熱源,自然冷卻至室溫后自來水沖洗,取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復(fù)。[詳細(xì)]
-
2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊
Copyright 2004-2026 yiqi.com All Rights Reserved , 未經(jīng)書面授權(quán) , 頁面內(nèi)容不得以任何形式進(jìn)行復(fù)制
參與評論
登錄后參與評論