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即用型(兔IgG)SABC免疫組化染色試劑盒 (2)
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2018-09-22 10:00 222閱讀次數(shù)
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www.biokanu.com即用型SABC免疫組化染色試劑盒兔IgG使用說(shuō)明書產(chǎn)品編號(hào):QD82102試劑的保存:短期4℃可保存,長(zhǎng)期-20℃。工作原理S-Avidin(鏈霉親和素)是一種從鏈霉菌中提取的蛋白質(zhì),分子量47000。同親和素一樣,對(duì)生物素分子有極高的親和力,是一般抗原抗體親和力的一百萬(wàn)倍。親和素是一個(gè)堿性蛋白質(zhì)(IP=10),經(jīng)改造后可以轉(zhuǎn)變成中性蛋白質(zhì)。鏈霉親和素等電點(diǎn)接近中性,IP=6.0~6.5,對(duì)組織和細(xì)胞的非特異吸附很低,基于鏈霉親和素的免疫組化方法背景很低。SABC即StreptAvidinBiotinComplex,。根據(jù)研究,SABC大約可形成上百個(gè)左右的過(guò)氧化物酶和數(shù)十個(gè)左右的鏈霉親和素所構(gòu)成的復(fù)合物。SABC兼具高敏感性,低背景和操作簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn)。應(yīng)用范圍適用于免疫組織化學(xué)方法以顯示待測(cè)抗原的分布,本試劑盒適用于常規(guī)石蠟包埋切片、冰凍切片,培養(yǎng)固定的細(xì)胞切片以及新鮮制備的血涂片、爬片等。試劑盒中內(nèi)容山羊血清封閉液:1ml(效價(jià)1:10,臨用前用TBS或PBS稀釋10倍)。用于組織切片的封閉。二抗:1ml(效價(jià)1:10,臨用前用抗體稀釋液稀釋10倍)。親和純化抗體,標(biāo)記長(zhǎng)臂生物素,生物素標(biāo)記抗兔IgG。SABC:1ml(效價(jià)1:10,臨用前用SABC稀釋液稀釋10倍)。鏈酶親和素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物。用戶自備試劑:粘片劑APES或Poly-L-Lysine。0.01MPBS,0.01M枸櫞酸鹽緩沖液。DAB顯色試劑盒。免疫組化染色程序的選擇:用戶需根據(jù)抗原/抗體的特點(diǎn)確定程序,多數(shù)情況下要先比較各程序染色結(jié)果。石蠟切片染色程序:載玻片防脫片劑處理:可選擇APES或Poly-Lysine。撈片后置烤箱58-60℃30-60分以使切片緊密粘附。切片常規(guī)脫蠟至水。3%H2O21份+蒸餾水10份混合,室溫5-10分鐘以滅活內(nèi)源性酶。蒸餾水洗3次。酶消化程序:滴加復(fù)合消化液5-10分鐘。蒸餾水洗3次。也可以使用0.1%的胰蛋白酶作消化液。熱修復(fù)抗原:將切片浸入0.01M枸櫞酸鹽緩沖液(PH6.0),電爐或微波爐加熱至沸騰后斷電,間隔5-10分鐘后,反復(fù)1-2次。冷卻后PBS(pH7.2-7.6)洗滌1-2次。滴加封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體,不洗。適當(dāng)稀釋的一抗(兔IgG),37℃2小時(shí)左右或4℃夜。PBS(pH7.2-7.6)洗2分鐘×3次。(一抗的稀釋度、孵育時(shí)間和溫度與染色強(qiáng)度、背景有直接關(guān)系。一般來(lái)說(shuō),陽(yáng)性染色強(qiáng)度不夠時(shí),可提高一抗?jié)舛群脱娱L(zhǎng)孵育時(shí)間;背景過(guò)高時(shí),可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時(shí)間。)加生物素化抗兔IgG,37℃30分鐘。PBS(pH7.2-7.6)洗2分鐘×3次。滴加試劑SABC,37℃30分鐘。PBS(pH7.2-7.6)洗5分鐘×4次。DAB顯色:使用DAB顯色試劑盒。取1ml蒸餾水,加試劑盒中A,B,C試劑各50ul,混勻后加至切片。室溫顯色,顯微鏡下觀察顯色反應(yīng),時(shí)間一般在3-30分鐘之間。達(dá)到合適著色強(qiáng)度時(shí)(陽(yáng)性較強(qiáng),背景較低),即可終止反應(yīng)(用蒸餾水洗滌切片)。蘇木素輕度復(fù)染。脫水,透明,封片。顯微鏡觀察。注意事項(xiàng):如果染色背景過(guò)高,在SABC反應(yīng)之后,DAB顯色之前,用加有0.010.02%TWEEN20的PBS(pH7.2-7.6)洗滌切片4次,單純PBS洗2次,然后DAB顯色。警告:DAB為可疑致癌物,請(qǐng)采取必要的防范措施。熱修復(fù)抗原可選0.01M枸櫞酸鹽緩沖液(PH6.0);也可以使用PBS、TBS等多種緩沖液。脫蠟不徹底,容易出現(xiàn)非特異性背景染色,建議免疫組化切片脫蠟與常規(guī)H.E脫蠟分開。如果將本試劑盒用于肝臟與腎臟等含內(nèi)源性生物素含量豐富的組織切片,需要進(jìn)行封閉的特殊處理。在超過(guò)有效期的試劑盒中一種或多種試劑活性可能降低,因此不得使用過(guò)期的試劑盒,不同批號(hào)間的試劑盒也不能交叉混用。
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即用型(兔IgG)SABC免疫組化染色試劑盒 (2)
- www.biokanu.com即用型SABC免疫組化染色試劑盒兔IgG使用說(shuō)明書產(chǎn)品編號(hào):QD82102試劑的保存:短期4℃可保存,長(zhǎng)期-20℃。工作原理S-Avidin(鏈霉親和素)是一種從鏈霉菌中提取的蛋白質(zhì),分子量47000。同親和素一樣,對(duì)生物素分子有極高的親和力,是一般抗原抗體親和力的一百萬(wàn)倍。親和素是一個(gè)堿性蛋白質(zhì)(IP=10),經(jīng)改造后可以轉(zhuǎn)變成中性蛋白質(zhì)。鏈霉親和素等電點(diǎn)接近中性,IP=6.0~6.5,對(duì)組織和細(xì)胞的非特異吸附很低,基于鏈霉親和素的免疫組化方法背景很低。SABC即StreptAvidinBiotinComplex,。根據(jù)研究,SABC大約可形成上百個(gè)左右的過(guò)氧化物酶和數(shù)十個(gè)左右的鏈霉親和素所構(gòu)成的復(fù)合物。SABC兼具高敏感性,低背景和操作簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn)。應(yīng)用范圍適用于免疫組織化學(xué)方法以顯示待測(cè)抗原的分布,本試劑盒適用于常規(guī)石蠟包埋切片、冰凍切片,培養(yǎng)固定的細(xì)胞切片以及新鮮制備的血涂片、爬片等。試劑盒中內(nèi)容山羊血清封閉液:1ml(效價(jià)1:10,臨用前用TBS或PBS稀釋10倍)。用于組織切片的封閉。二抗:1ml(效價(jià)1:10,臨用前用抗體稀釋液稀釋10倍)。親和純化抗體,標(biāo)記長(zhǎng)臂生物素,生物素標(biāo)記抗兔IgG。SABC:1ml(效價(jià)1:10,臨用前用SABC稀釋液稀釋10倍)。鏈酶親和素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物。用戶自備試劑:粘片劑APES或Poly-L-Lysine。0.01MPBS,0.01M枸櫞酸鹽緩沖液。DAB顯色試劑盒。免疫組化染色程序的選擇:用戶需根據(jù)抗原/抗體的特點(diǎn)確定程序,多數(shù)情況下要先比較各程序染色結(jié)果。石蠟切片染色程序:載玻片防脫片劑處理:可選擇APES或Poly-Lysine。撈片后置烤箱58-60℃30-60分以使切片緊密粘附。切片常規(guī)脫蠟至水。3%H2O21份+蒸餾水10份混合,室溫5-10分鐘以滅活內(nèi)源性酶。蒸餾水洗3次。酶消化程序:滴加復(fù)合消化液5-10分鐘。蒸餾水洗3次。也可以使用0.1%的胰蛋白酶作消化液。熱修復(fù)抗原:將切片浸入0.01M枸櫞酸鹽緩沖液(PH6.0),電爐或微波爐加熱至沸騰后斷電,間隔5-10分鐘后,反復(fù)1-2次。冷卻后PBS(pH7.2-7.6)洗滌1-2次。滴加封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體,不洗。適當(dāng)稀釋的一抗(兔IgG),37℃2小時(shí)左右或4℃夜。PBS(pH7.2-7.6)洗2分鐘×3次。(一抗的稀釋度、孵育時(shí)間和溫度與染色強(qiáng)度、背景有直接關(guān)系。一般來(lái)說(shuō),陽(yáng)性染色強(qiáng)度不夠時(shí),可提高一抗?jié)舛群脱娱L(zhǎng)孵育時(shí)間;背景過(guò)高時(shí),可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時(shí)間。)加生物素化抗兔IgG,37℃30分鐘。PBS(pH7.2-7.6)洗2分鐘×3次。滴加試劑SABC,37℃30分鐘。PBS(pH7.2-7.6)洗5分鐘×4次。DAB顯色:使用DAB顯色試劑盒。取1ml蒸餾水,加試劑盒中A,B,C試劑各50ul,混勻后加至切片。室溫顯色,顯微鏡下觀察顯色反應(yīng),時(shí)間一般在3-30分鐘之間。達(dá)到合適著色強(qiáng)度時(shí)(陽(yáng)性較強(qiáng),背景較低),即可終止反應(yīng)(用蒸餾水洗滌切片)。蘇木素輕度復(fù)染。脫水,透明,封片。顯微鏡觀察。注意事項(xiàng):如果染色背景過(guò)高,在SABC反應(yīng)之后,DAB顯色之前,用加有0.010.02%TWEEN20的PBS(pH7.2-7.6)洗滌切片4次,單純PBS洗2次,然后DAB顯色。警告:DAB為可疑致癌物,請(qǐng)采取必要的防范措施。熱修復(fù)抗原可選0.01M枸櫞酸鹽緩沖液(PH6.0);也可以使用PBS、TBS等多種緩沖液。脫蠟不徹底,容易出現(xiàn)非特異性背景染色,建議免疫組化切片脫蠟與常規(guī)H.E脫蠟分開。如果將本試劑盒用于肝臟與腎臟等含內(nèi)源性生物素含量豐富的組織切片,需要進(jìn)行封閉的特殊處理。在超過(guò)有效期的試劑盒中一種或多種試劑活性可能降低,因此不得使用過(guò)期的試劑盒,不同批號(hào)間的試劑盒也不能交叉混用。[詳細(xì)]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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即用型SABC免疫組化染色試劑盒
- www.biokanu.com即用型SABC免疫組化染色試劑盒大鼠IgG使用說(shuō)明書產(chǎn)品編號(hào):QD82102試劑的保存:短期4℃可保存,長(zhǎng)期-20℃。工作原理S-Avidin(鏈霉親和素)是一種從鏈霉菌中提取的蛋白質(zhì),分子量47000。同親和素一樣,對(duì)生物素分子有極高的親和力,是一般抗原抗體親和力的一百萬(wàn)倍。親和素是一個(gè)堿性蛋白質(zhì)(IP=10),經(jīng)改造后可以轉(zhuǎn)變成中性蛋白質(zhì)。鏈霉親和素等電點(diǎn)接近中性,IP=6.0~6.5,對(duì)組織和細(xì)胞的非特異吸附很低,基于鏈霉親和素的免疫組化方法背景很低。SABC即StreptAvidinBiotinComplex,。根據(jù)研究,SABC大約可形成上百個(gè)左右的過(guò)氧化物酶和數(shù)十個(gè)左右的鏈霉親和素所構(gòu)成的復(fù)合物。SABC兼具高敏感性,低背景和操作簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn)。應(yīng)用范圍適用于免疫組織化學(xué)方法以顯示待測(cè)抗原的分布,本試劑盒適用于常規(guī)石蠟包埋切片、冰凍切片,培養(yǎng)固定的細(xì)胞切片以及新鮮制備的血涂片、爬片等。試劑盒中內(nèi)容山羊血清封閉液:1ml(效價(jià)1:10,臨用前用TBS或PBS稀釋10倍)。用于組織切片的封閉。二抗:1ml(效價(jià)1:10,臨用前用抗體稀釋液稀釋10倍)。親和純化抗體,標(biāo)記長(zhǎng)臂生物素,生物素標(biāo)記抗大鼠IgG。SABC:1ml(效價(jià)1:10,臨用前用SABC稀釋液稀釋10倍)。鏈酶親和素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物。用戶自備試劑:粘片劑APES或Poly-L-Lysine。0.01MPBS,0.01M枸櫞酸鹽緩沖液。DAB顯色試劑盒。免疫組化染色程序的選擇:用戶需根據(jù)抗原/抗體的特點(diǎn)確定程序,多數(shù)情況下要先比較各程序染色結(jié)果。石蠟切片染色程序:載玻片防脫片劑處理:可選擇APES或Poly-Lysine。撈片后置烤箱58-60℃30-60分以使切片緊密粘附。切片常規(guī)脫蠟至水。30%H2O21份+蒸餾水10份混合,室溫5-10分鐘以滅活內(nèi)源性酶。蒸餾水洗3次。酶消化程序:滴加復(fù)合消化液5-10分鐘。蒸餾水洗3次。也可以使用0.1%的胰蛋白酶作消化液。熱修復(fù)抗原:將切片浸入0.01M枸櫞酸鹽緩沖液(PH6.0),電爐或微波爐加熱至沸騰后斷電,間隔5-10分鐘后,反復(fù)1-2次。冷卻后PBS(pH7.2-7.6)洗滌1-2次。滴加封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體,不洗。適當(dāng)稀釋的一抗(大鼠IgG),37℃2小時(shí)左右或4℃夜。PBS(pH7.2-7.6)洗2分鐘×3次。(一抗的稀釋度、孵育時(shí)間和溫度與染色強(qiáng)度、背景有直接關(guān)系。一般來(lái)說(shuō),陽(yáng)性染色強(qiáng)度不夠時(shí),可提高一抗?jié)舛群脱娱L(zhǎng)孵育時(shí)間;背景過(guò)高時(shí),可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時(shí)間。)加生物素化抗大鼠IgG,37℃30分鐘。PBS(pH7.2-7.6)洗2分鐘×3次。滴加試劑SABC,37℃30分鐘。PBS(pH7.2-7.6)洗5分鐘×4次。DAB顯色:使用DAB顯色試劑盒。取1ml蒸餾水,加試劑盒中A,B,C試劑各50ul,混勻后加至切片。室溫顯色,顯微鏡下觀察顯色反應(yīng),時(shí)間一般在3-30分鐘之間。達(dá)到合適著色強(qiáng)度時(shí)(陽(yáng)性較強(qiáng),背景較低),即可終止反應(yīng)(用蒸餾水洗滌切片)。蘇木素輕度復(fù)染。脫水,透明,封片。顯微鏡觀察。注意事項(xiàng):如果染色背景過(guò)高,在SABC反應(yīng)之后,DAB顯色之前,用加有0.010.02%TWEEN20的PBS(pH7.2-7.6)洗滌切片4次,單純PBS洗2次,然后DAB顯色。警告:DAB為可疑致癌物,請(qǐng)采取必要的防范措施。熱修復(fù)抗原可選0.01M枸櫞酸鹽緩沖液(PH6.0);也可以使用PBS、TBS等多種緩沖液。脫蠟不徹底,容易出現(xiàn)非特異性背景染色,建議免疫組化切片脫蠟與常規(guī)H.E脫蠟分開。如果將本試劑盒用于肝臟與腎臟等含內(nèi)源性生物素含量豐富的組織切片,需要進(jìn)行封閉的特殊處理。在超過(guò)有效期的試劑盒中一種或多種試劑活性可能降低,因此不得使用過(guò)期的試劑盒,不同批號(hào)間的試劑盒也不能交叉混用。[詳細(xì)]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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即用型IL-1β免疫組化染色試劑盒
- www.biokanu.com即用型小鼠IL-1β免疫組化染色試劑盒產(chǎn)品編號(hào):QD82108試劑的保存:短期于4℃保存,長(zhǎng)期于-20℃保存。工作原理IL-1β,白介素1β。在免疫調(diào)節(jié)和炎癥反應(yīng)過(guò)程中起ZX作用。類風(fēng)濕、結(jié)腸炎等病癥也和IL-1β的產(chǎn)生過(guò)多有關(guān)。IL-1α和IL-1β有25%的同源性。合成IL-1β的細(xì)胞很廣泛,包括單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、星形細(xì)胞、NK細(xì)胞、角化細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等。兩者合成時(shí)都是31KDa的前體,經(jīng)剪切后成為17.5KDa的成熟蛋白質(zhì)。IL-1β前體在細(xì)胞內(nèi)合成,并無(wú)生物學(xué)活性。被IL-1β轉(zhuǎn)化酶(ICE)剪切為成熟形態(tài)后排出到細(xì)胞外。鏈霉親和素是一種從鏈霉菌中提取的蛋白質(zhì),分子量47000。同親和素一樣,對(duì)生物素分子有極高的親和力,是一般抗原抗體親和力的一百萬(wàn)倍。親和素是一個(gè)堿性蛋白質(zhì)(IP=10),經(jīng)改造后可以轉(zhuǎn)變成中性蛋白質(zhì)。鏈霉親和素等電點(diǎn)接近中性,IP=6.0~6.5,對(duì)組織和細(xì)胞的非特異吸附很低,基于鏈霉親和素的免疫組化方法背景很低。根據(jù)研究,SP(StreptAvidin-BiotinComplex)大約可形成上百個(gè)左右的過(guò)氧化物酶和數(shù)十個(gè)左右的鏈霉親和素所構(gòu)成的復(fù)合物。應(yīng)用范圍適用于免疫組織化學(xué)方法以顯示待測(cè)抗原的分布,本試劑盒適用于常規(guī)石蠟包埋切片、冰凍切片,培養(yǎng)固定的細(xì)胞切片以及新鮮制備的血涂片、爬片等。試劑盒中內(nèi)容山羊血清封閉液:1ml(效價(jià)1:10,臨用前用TBS或PBS稀釋10倍)。用于組織切片的封閉。二抗:1ml(效價(jià)1:10,臨用前用抗體稀釋液稀釋10倍)。親和純化抗體,標(biāo)記長(zhǎng)臂生物素,生物素標(biāo)記抗兔IgG。SP:1ml(效價(jià)1:10,臨用前用SP稀釋液稀釋10倍)。鏈酶親和素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物。用戶自備試劑:粘片劑APES或Poly-L-Lysine。0.01MPBS,0.01M枸櫞酸鹽緩沖液。DAB顯色試劑盒。免疫組化染色程序的選擇:用戶需根據(jù)抗原/抗體的特點(diǎn)確定程序,多數(shù)情況下要先比較各程序染色結(jié)果。石蠟切片染色程序:載玻片防脫片劑處理:可選擇APES或Poly-Lysine。撈片后置烤箱58-60℃30-60分以使切片緊密粘附。切片常規(guī)脫蠟至水。3%H2O21份+蒸餾水10份混合,室溫5-10分鐘以滅活內(nèi)源性酶。蒸餾水洗3次。酶消化程序:滴加復(fù)合消化液5-10分鐘。蒸餾水洗3次。也可以使用0.1%的胰蛋白酶作消化液。熱修復(fù)抗原:將切片浸入0.01M枸櫞酸鹽緩沖液(PH6.0),電爐或微波爐加熱至沸騰后斷電,間隔5-10分鐘后,反復(fù)1-2次。冷卻后PBS(pH7.2-7.6)洗滌1-2次。滴加封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體,不洗。適當(dāng)稀釋的一抗,37℃2小時(shí)左右或4℃夜。PBS(pH7.2-7.6)洗2分鐘×3次。(一抗的稀釋度、孵育時(shí)間和溫度與染色強(qiáng)度、背景有直接關(guān)系。一般來(lái)說(shuō),陽(yáng)性染色強(qiáng)度不夠時(shí),可提高一抗?jié)舛群脱娱L(zhǎng)孵育時(shí)間;背景過(guò)高時(shí),可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時(shí)間。)加生物素化二抗,37℃30分鐘。PBS(pH7.2-7.6)洗2分鐘×3次。滴加試劑SP,37℃30分鐘。PBS(pH7.2-7.6)洗5分鐘×4次。DAB顯色:使用DAB顯色試劑盒。取1ml蒸餾水,加試劑盒中A,B,C試劑各50ul,混勻后加至切片。室溫顯色,顯微鏡下觀察顯色反應(yīng),時(shí)間一般在5-30分鐘之間。達(dá)到合適著色強(qiáng)度時(shí)(陽(yáng)性較強(qiáng),背景較低),即可終止反應(yīng)(用蒸餾水洗滌切片)。蘇木素輕度復(fù)染。脫水,透明,封片。顯微鏡觀察。注意事項(xiàng):如果染色背景過(guò)高,在SP反應(yīng)之后,DAB顯色之前,用加有0.010.02%TWEEN20的PBS(pH7.2-7.6)洗滌切片4次,單純PBS洗2次,然后DAB顯色。警告:DAB為可疑致癌物,請(qǐng)采取必要的防范措施。熱修復(fù)抗原可選0.01M枸櫞酸鹽緩沖液(PH6.0);也可以使用PBS、TBS等多種緩沖液。脫蠟不徹底,容易出現(xiàn)非特異性背景染色,建議免疫組化切片脫蠟與常規(guī)H.E脫蠟分開。如果將本試劑盒用于肝臟與腎臟等含內(nèi)源性生物素含量豐富的組織切片,需要進(jìn)行封閉的特殊處理。在超過(guò)有效期的試劑盒中一種或多種試劑活性可能降低,因此不得使用過(guò)期的試劑盒,不同批號(hào)間的試劑盒也不能交叉混用。[詳細(xì)]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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即用型大鼠SP-A免疫組化染色試劑盒
- www.biokanu.com即用型SP-A免疫組化染色試劑盒大鼠IgG使用說(shuō)明書產(chǎn)品編號(hào):QD82105試劑的保存:短期于4℃保存,長(zhǎng)期于-20℃保存。工作原理肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(pulmonarysurfactant-associatedproteinA,SP-A)是肺表面活性物質(zhì)(pulmonarysur-factant,PS)中含量Z豐富的蛋白成分,主要分布于支氣管表面和肺泡氣液界面上,屬C-型膠凝素家族的重要成員,在維持PS的正常生物學(xué)功能和調(diào)節(jié)局部免疫及炎癥反應(yīng)方面發(fā)揮重要作用。S-Avidin(鏈霉親和素)是一種從鏈霉菌中提取的蛋白質(zhì),分子量47000。同親和素一樣,對(duì)生物素分子有極高的親和力,是一般抗原抗體親和力的一百萬(wàn)倍。親和素是一個(gè)堿性蛋白質(zhì)(IP=10),經(jīng)改造后可以轉(zhuǎn)變成中性蛋白質(zhì)。鏈霉親和素等電點(diǎn)接近中性,IP=6.0~6.5,對(duì)組織和細(xì)胞的非特異吸附很低,基于鏈霉親和素的免疫組化方法背景很低。SABC即StreptAvidinBiotinComplex,。根據(jù)研究,SABC大約可形成上百個(gè)左右的過(guò)氧化物酶和數(shù)十個(gè)左右的鏈霉親和素所構(gòu)成的復(fù)合物。SABC兼具高敏感性,低背景和操作簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn)。應(yīng)用范圍適用于免疫組織化學(xué)方法以顯示待測(cè)抗原的分布,本試劑盒適用于常規(guī)石蠟包埋切片、冰凍切片,培養(yǎng)固定的細(xì)胞切片以及新鮮制備的血涂片、爬片等。試劑盒中內(nèi)容山羊血清封閉液:1ml(效價(jià)1:10,臨用前用TBS或PBS稀釋10倍)。用于組織切片的封閉。二抗:1ml(效價(jià)1:10,臨用前用抗體稀釋液稀釋10倍)。親和純化抗體,標(biāo)記長(zhǎng)臂生物素,生物素標(biāo)記抗大鼠IgG。SABC:1ml(效價(jià)1:10,臨用前用SABC稀釋液稀釋10倍)。鏈酶親和素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物。用戶自備試劑:粘片劑APES或Poly-L-Lysine。0.01MPBS,0.01M枸櫞酸鹽緩沖液。DAB顯色試劑盒。免疫組化染色程序的選擇:用戶需根據(jù)抗原/抗體的特點(diǎn)確定程序,多數(shù)情況下要先比較各程序染色結(jié)果。石蠟切片染色程序:載玻片防脫片劑處理:可選擇APES或Poly-Lysine。撈片后置烤箱58-60℃30-60分以使切片緊密粘附。切片常規(guī)脫蠟至水。3%H2O21份+蒸餾水10份混合,室溫5-10分鐘以滅活內(nèi)源性酶。蒸餾水洗3次。酶消化程序:滴加復(fù)合消化液5-10分鐘。蒸餾水洗3次。也可以使用0.1%的胰蛋白酶作消化液。熱修復(fù)抗原:將切片浸入0.01M枸櫞酸鹽緩沖液(PH6.0),電爐或微波爐加熱至沸騰后斷電,間隔5-10分鐘后,反復(fù)1-2次。冷卻后PBS(pH7.2-7.6)洗滌1-2次。滴加封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體,不洗。適當(dāng)稀釋的一抗(大鼠IgG),37℃2小時(shí)左右或4℃夜。PBS(pH7.2-7.6)洗2分鐘×3次。(一抗的稀釋度、孵育時(shí)間和溫度與染色強(qiáng)度、背景有直接關(guān)系。一般來(lái)說(shuō),陽(yáng)性染色強(qiáng)度不夠時(shí),可提高一抗?jié)舛群脱娱L(zhǎng)孵育時(shí)間;背景過(guò)高時(shí),可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時(shí)間。)加生物素化抗大鼠IgG,37℃30分鐘。PBS(pH7.2-7.6)洗2分鐘×3次。滴加試劑SABC,37℃30分鐘。PBS(pH7.2-7.6)洗5分鐘×4次。DAB顯色:使用DAB顯色試劑盒。取1ml蒸餾水,加試劑盒中A,B,C試劑各50ul,混勻后加至切片。室溫顯色,顯微鏡下觀察顯色反應(yīng),時(shí)間一般在5-30分鐘之間。達(dá)到合適著色強(qiáng)度時(shí)(陽(yáng)性較強(qiáng),背景較低),即可終止反應(yīng)(用蒸餾水洗滌切片)。蘇木素輕度復(fù)染。脫水,透明,封片。顯微鏡觀察。注意事項(xiàng):如果染色背景過(guò)高,在SABC反應(yīng)之后,DAB顯色之前,用加有0.010.02%TWEEN20的PBS(pH7.2-7.6)洗滌切片4次,單純PBS洗2次,然后DAB顯色。警告:DAB為可疑致癌物,請(qǐng)采取必要的防范措施。熱修復(fù)抗原可選0.01M枸櫞酸鹽緩沖液(PH6.0);也可以使用PBS、TBS等多種緩沖液。脫蠟不徹底,容易出現(xiàn)非特異性背景染色,建議免疫組化切片脫蠟與常規(guī)H.E脫蠟分開。如果將本試劑盒用于肝臟與腎臟等含內(nèi)源性生物素含量豐富的組織切片,需要進(jìn)行封閉的特殊處理。在超過(guò)有效期的試劑盒中一種或多種試劑活性可能降低,因此不得使用過(guò)期的試劑盒,不同批號(hào)間的試劑盒也不能交叉混用。[詳細(xì)]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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即用型大鼠VEGF SP免疫組化染色試劑盒
- www.biokanu.com即用型大鼠VEGFSP免疫組化染色試劑盒產(chǎn)品編號(hào):QD82178試劑的保存:短期于4℃保存,長(zhǎng)期于-20℃保存。工作原理血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)是相對(duì)分子質(zhì)量為(34~45)×103的同源二聚體糖蛋白。人體內(nèi)可形成多種異構(gòu)體可以特異性地促進(jìn)血管內(nèi)皮有絲分裂的因子。VEGF是一種選擇性促內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂原,它能增加血管通透能力,促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖,對(duì)腫瘤的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移有重要影響。鏈霉親和素是一種從鏈霉菌中提取的蛋白質(zhì),分子量47000。同親和素一樣,對(duì)生物素分子有極高的親和力,是一般抗原抗體親和力的一百萬(wàn)倍。親和素是一個(gè)堿性蛋白質(zhì)(IP=10),經(jīng)改造后可以轉(zhuǎn)變成中性蛋白質(zhì)。鏈霉親和素等電點(diǎn)接近中性,IP=6.0~6.5,對(duì)組織和細(xì)胞的非特異吸附很低,基于鏈霉親和素的免疫組化方法背景很低。根據(jù)研究,SP(StreptAvidin-BiotinComplex)大約可形成上百個(gè)左右的過(guò)氧化物酶和數(shù)十個(gè)左右的鏈霉親和素所構(gòu)成的復(fù)合物。應(yīng)用范圍適用于免疫組織化學(xué)方法以顯示待測(cè)抗原的分布,本試劑盒適用于常規(guī)石蠟包埋切片、冰凍切片,培養(yǎng)固定的細(xì)胞切片以及新鮮制備的血涂片、爬片等。試劑盒中內(nèi)容1.山羊血清封閉液:1ml(效價(jià)1:10,臨用前用TBS或PBS稀釋10倍)。用于組織切片的封閉。2.二抗:1ml(效價(jià)1:10,臨用前用抗體稀釋液稀釋10倍)。親和純化抗體,標(biāo)記長(zhǎng)臂生物素,生物素標(biāo)記抗兔IgG。3.SP:1ml(效價(jià)1:10,臨用前用SP稀釋液稀釋10倍)。鏈酶親和素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物。用戶自備試劑:1.粘片劑APES或Poly-L-Lysine。2.0.01MPBS,0.01M枸櫞酸鹽緩沖液。3.DAB顯色試劑盒。4.免疫組化染色程序的選擇:用戶需根據(jù)抗原/抗體的特點(diǎn)確定程序,多數(shù)情況下要先比較各程序染色結(jié)果。石蠟切片染色程序:1.載玻片防脫片劑處理:可選擇APES或Poly-Lysine。撈片后置烤箱58-60℃30-60分以使切片緊密粘附。2.切片常規(guī)脫蠟至水。3.30%H2O21份+蒸餾水10份混合,室溫5-10分鐘以滅活內(nèi)源性酶。蒸餾水洗3次。4.酶消化程序:滴加復(fù)合消化液5-10分鐘。蒸餾水洗3次。也可以使用0.1%的胰蛋白酶作消化液。熱修復(fù)抗原:將切片浸入0.01M枸櫞酸鹽緩沖液(PH6.0),電爐或微波爐加熱至沸騰后斷電,間隔5-10分鐘后,反復(fù)1-2次。冷卻后PBS(pH7.2-7.6)洗滌1-2次。5.滴加封閉液,室溫20分鐘。甩去多余液體,不洗。6.適當(dāng)稀釋的一抗,37℃2小時(shí)左右或4℃夜。PBS(pH7.2-7.6)洗2分鐘×3次。(一抗的稀釋度、孵育時(shí)間和溫度與染色強(qiáng)度、背景有直接關(guān)系。一般來(lái)說(shuō),陽(yáng)性染色強(qiáng)度不夠時(shí),可提高一抗?jié)舛群脱娱L(zhǎng)孵育時(shí)間;背景過(guò)高時(shí),可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時(shí)間。)7.加生物素化二抗,37℃30分鐘。PBS(pH7.2-7.6)洗2分鐘×3次。8.滴加試劑SP,37℃30分鐘。PBS(pH7.2-7.6)洗5分鐘×4次。9.DAB顯色:使用DAB顯色試劑盒。取1ml蒸餾水,加試劑盒中A,B,C試劑各50ul,混勻后加至切片。室溫顯色,顯微鏡下觀察顯色反應(yīng),時(shí)間一般在5-30分鐘之間。達(dá)到合適著色強(qiáng)度時(shí)(陽(yáng)性較強(qiáng),背景較低),即可終止反應(yīng)(用蒸餾水洗滌切片)。10.蘇木素輕度復(fù)染。脫水,透明,封片。顯微鏡觀察。注意事項(xiàng):1.如果染色背景過(guò)高,在SP反應(yīng)之后,DAB顯色之前,用加有0.010.02%TWEEN20的PBS(pH7.2-7.6)洗滌切片4次,單純PBS洗2次,然后DAB顯色。警告:DAB為可疑致癌物,請(qǐng)采取必要的防范措施。2.熱修復(fù)抗原可選0.01M枸櫞酸鹽緩沖液(PH6.0);也可以使用PBS、TBS等多種緩沖液。3.脫蠟不徹底,容易出現(xiàn)非特異性背景染色,建議免疫組化切片脫蠟與常規(guī)H.E脫蠟分開。4.如果將本試劑盒用于肝臟與腎臟等含內(nèi)源性生物素含量豐富的組織切片,需要進(jìn)行封閉的特殊處理。5.在超過(guò)有效期的試劑盒中一種或多種試劑活性可能降低,因此不得使用過(guò)期的試劑盒,不同批號(hào)間的試劑盒也不能交叉混用。[詳細(xì)]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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免疫組化染色試劑盒說(shuō)明書
- 免疫組化染色試劑盒說(shuō)明書[詳細(xì)]
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2014-06-23 00:00
課件
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兔鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)ELISA試劑盒
- 兔鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-10-03 11:34
期刊論文
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小鼠/兔IgG|使用說(shuō)明
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介:貨號(hào):SW2040產(chǎn)品名稱:Westernblotting(小鼠/兔IgG)規(guī)格:一盒儲(chǔ)存條件:-20℃避光密閉保存,一年有效。若經(jīng)常使用,可將封閉試劑,抗體稀釋液和ECL顯色液存放于2-8℃以方便使用。產(chǎn)品特點(diǎn):SDS-PAGE電泳后,蛋白質(zhì)按照分子量大小分離,轉(zhuǎn)移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)后,固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì),以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原,與對(duì)應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng),再與酶標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng),加入發(fā)光底物后,能讓膠片感光。經(jīng)顯影和定影后,可以在膠片上顯示出條帶(抗原所在位置)。商品貨號(hào):產(chǎn)地規(guī)格價(jià)格SW2040Solarbio1盒1080.00元相關(guān)產(chǎn)品:P10154×蛋白上樣緩沖液(含DTT)A101030%丙烯酰胺(29:1)P1300-1SDS-PAGE凝膠制備試劑盒T10705×Tris-甘氨酸電泳緩沖液D106010×電泳轉(zhuǎn)移緩沖液PR1920彩虹245廣譜蛋白markerPR1700預(yù)染次高分子量蛋白markerSW3010膜封閉液DA1010DAB顯色試劑盒(20×)PE0010ECLPlus熒光檢測(cè)試劑(ECL超敏發(fā)光液)優(yōu)質(zhì)試劑!質(zhì)量放心!價(jià)格Zdi!為ZG生物產(chǎn)業(yè)做貢獻(xiàn)歡迎新老客戶咨詢[詳細(xì)]
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2018-09-02 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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細(xì)胞爬片的免疫組化染色的操作步驟
- 細(xì)胞爬片的免疫組化染色的操作步驟[詳細(xì)]
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2013-11-11 00:00
操作手冊(cè)
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冰凍切片的免疫組化染色操作步驟
- 冰凍切片的免疫組化染色操作步驟1.新鮮組織立即在恒冷冰凍切片機(jī)內(nèi)切片(也可-80℃保存),厚度為5~6μm。2.載玻片可不打底,裱片后,立即用電吹風(fēng)吹干。3.如不馬上染色,可密封后-20℃保存。4.染色前用冷丙酮在4℃固定10-20分鐘。5.PBS洗2次,每次5分鐘,(必要時(shí)應(yīng)用0.1%檸檬酸鈉+0.1%triton打孔)6.3%H2O2滅活內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,20分鐘,避光;7.用PBS洗2次,每次5分鐘;8.正常血清封閉:從染片缸中取出切片,擦凈切片背面水分及切片正面組織周圍的水分(保持組織呈濕潤(rùn)狀態(tài),)滴加正常山羊或兔血清(與第二抗體同源動(dòng)物血清)處理,37℃,15分鐘。附:正常血清配制(或按試劑盒規(guī)定的濃度配制):按1:20比例,用PBS配制,每張切片需要量按50μ+5μl(10%拋灑量)計(jì)算。9.滴加**抗體:用濾紙吸去血清,不洗,直接滴加**抗體,37℃2小時(shí)(也可置于4℃冰箱過(guò)夜)。10.PBS:5分鐘,2次(置于搖床)。11.滴加生物素化的二抗,37℃,40分鐘。12.PBS:5分鐘,2次(置于搖床)。13.滴加三抗(SAB復(fù)合物),37℃,40分鐘。14.PBS:5分鐘,2次(置于搖床)。15.DAB顯色,鏡下觀察,適時(shí)終止(自來(lái)水沖終止)。附:DAB的配制①儲(chǔ)備液(DAB25mg/ml)的配制:DAB250mg+PBS10ml,待完全溶解后分裝成1ml,100μl,50μl,20μl等,-20℃,凍存。②工作液:DAB儲(chǔ)備液20μl+PBS1000μl+3%H2O25μl16.自來(lái)水(細(xì)水)充分沖洗。17.蘇木素復(fù)染,室溫,30秒,自來(lái)水沖洗。18.自來(lái)水沖洗返藍(lán),15分鐘。19.梯度酒精脫水:80%,2分鐘95%,2分鐘1**%,2次,5分鐘。20.二甲苯透明:I,II(二甲苯)各5分鐘21.封片:加拿大樹膠(或中性樹膠)封片。[詳細(xì)]
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2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊(cè)
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做好免疫組化染色必須注意的問(wèn)題
- 做好免疫組化染色必須注意的問(wèn)題[詳細(xì)]
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2024-09-28 00:04
專利
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兔免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書
- 兔免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書l本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中兔免疫球蛋白G(IgG)的含量。l有效期:6個(gè)月l保存條件:2-8℃l本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷實(shí)驗(yàn)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被兔免疫球蛋白G(IgG)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兔免疫球蛋白G(IgG)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。樣本處理及要求1.血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)一夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8°C1000g離心20分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.組織勻漿:用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶YZ劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。Z后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測(cè)。4.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。注:標(biāo)本溶血會(huì)影響Z后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。標(biāo)本處理1.本公司只對(duì)試劑盒本身負(fù)責(zé),不對(duì)因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé),請(qǐng)使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本。2.實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)標(biāo)本含量,如果標(biāo)本濃度過(guò)高,應(yīng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行稀釋,使稀釋后的標(biāo)本符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。標(biāo)本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。3.若所檢樣本不包含在說(shuō)明書所列樣本之中,建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其有效性,并注意留存樣本。4.使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會(huì)由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。5.若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時(shí)間等,所以可能存在檢測(cè)不出的情況。6.某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因?yàn)榕c本產(chǎn)品所使用的檢測(cè)抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測(cè)出。7.建議使用新鮮樣本,保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。需要而未提供的試劑和器材酶標(biāo)儀(450nm)高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱蒸餾水或去離子水試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標(biāo)板8孔×12條8孔×6條無(wú)標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL*6管0.3mL*6管無(wú)樣本稀釋液6mL3mL無(wú)檢測(cè)抗體-HRP10mL5mL無(wú)20×洗滌緩沖液25mL15mL按說(shuō)明書進(jìn)行稀釋底物A6mL3mL無(wú)底物B6mL3mL無(wú)終止液6mL3mL無(wú)封板膜2張2張無(wú)說(shuō)明書1份1份無(wú)自封袋1個(gè)1個(gè)無(wú)備注:1.標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:24、12、6、3、1.5、0mg/mL2.經(jīng)過(guò)大量正常標(biāo)本檢驗(yàn),標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測(cè)范圍內(nèi),實(shí)驗(yàn)過(guò)程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過(guò)Zda標(biāo)準(zhǔn)品濃度時(shí),可用樣本稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。注意事項(xiàng)嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。不能使用過(guò)期產(chǎn)品。如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。試劑準(zhǔn)備試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。操作步驟1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算以所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計(jì)算出樣品的濃度。試劑盒性能1.檢測(cè)范圍:0.75mg/mL24mg/mL。2.靈敏度:Zdi檢測(cè)濃度小于0.1mg/mL。3.特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。4.重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10%,板間變異系數(shù)小于15%。說(shuō)明1.由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對(duì)所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析,本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)。2.Z終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性、實(shí)驗(yàn)者的相關(guān)操作以及當(dāng)時(shí)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān),請(qǐng)務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。3.不同批次的同一產(chǎn)品可能會(huì)有少許差別,如:檢測(cè)限、靈敏度以及顯色時(shí)間等,請(qǐng)依據(jù)試劑盒內(nèi)說(shuō)明書進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作,網(wǎng)站電子版說(shuō)明書僅作參考。4.只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測(cè)效果,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守本試劑盒的實(shí)驗(yàn)說(shuō)明才會(huì)得到**的檢測(cè)結(jié)果。問(wèn)題解答若實(shí)驗(yàn)效果不好,請(qǐng)及時(shí)對(duì)顯色結(jié)果拍照,保留所用板條及未使用試劑,并妥善保存,然后聯(lián)系我公司技術(shù)支持為您解決問(wèn)題。同時(shí)您也可以參考以下資料:?jiǎn)栴}可能原因解決方案標(biāo)準(zhǔn)曲線差吸取及洗滌不充分充分的吸取及洗滌移液不極ng確檢查和校正移液器精密度低洗滌不充分按說(shuō)明書要求充分洗滌和浸泡混勻不充分和吸取試劑不足充分混勻和吸取試劑重復(fù)利用吸頭、容器和覆膜使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的容器和覆膜加樣不極ng確檢查和校正移液器O.D值低每孔加的試劑量不極ng確校正移液器,極ng確加入試劑溫育時(shí)間不正確保證充足的溫育時(shí)間溫育溫度不正確試劑要平衡至室溫并保證準(zhǔn)確的溫育溫度酶標(biāo)記物或底物失效通過(guò)混合酶標(biāo)記物和底物,顏色應(yīng)迅速顯現(xiàn)來(lái)檢查沒(méi)有加入終止液按照說(shuō)明書實(shí)驗(yàn)操作步驟加入終止液超出讀數(shù)時(shí)間讀數(shù)在說(shuō)明書推薦的讀數(shù)時(shí)間內(nèi)讀數(shù)樣本值不正確的樣本儲(chǔ)存方式正確儲(chǔ)存樣本,使用新鮮樣本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)不正確的樣本收集和處理方法采取正確的樣本收集和處理方法待測(cè)物質(zhì)在樣本中含量低使用新鮮樣本,重復(fù)實(shí)驗(yàn)[詳細(xì)]
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2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊(cè)
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兔(Rabbit)圓環(huán)病毒2型(CV-2)
- 檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被圓環(huán)病毒2型(CV-2)IgG抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中圓環(huán)病毒2型(CV-2)的存在與否。[詳細(xì)]
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2018-12-02 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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CD90免疫組化試劑盒
- CD90免疫組化試劑盒該試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物(HRPStreptavidinConjugate,HRP-SA)為基礎(chǔ),可用于檢測(cè)細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性CD90抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的CD90一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后,用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合,Z后加入HRP-SA,形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物,顯微鏡下觀察成像。試劑盒所含試劑:試劑A通透液:0.1%Triton-X10010mL(選用)試劑B封閉緩沖液(封閉用)20mL試劑C(原裝進(jìn)口分裝)已稀釋的即用型CD90一抗(2.5ml)試劑D(原裝進(jìn)口分裝)生物素化羊抗兔IgG1支(濃度1.5mg/mL,稀釋比為1:300~1:500)50μL+抗體稀釋液20ml試劑EHRP-SA復(fù)合物1支(濃度1μM,稀釋比1:50~1:200)100μL試劑FDAB顯色液5ml用戶自備試劑:1.10mMTBS(pH7.2~7.4)三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL,濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4,Z后定容至1000mLTBS-T:TBS+Tween20(0.05%體積比)2.抗原修復(fù)液(依檢測(cè)抗原不同而選擇不同的修復(fù)液)10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檸檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL,濃鹽酸調(diào)pH值至6.0,Z后定容至1000mL或:0.5MEDTA修復(fù)液(pH8.0)EDTA2H2O186.1g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水700mL,用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0,Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實(shí)驗(yàn)步驟(建議方案):石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片:將待做切片置于切片架上,于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr;2.脫蠟:切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10min;3.水化:切片經(jīng)下行酒精水化,無(wú)水乙醇5min,95%乙醇2次(每次2min),85%乙醇2min;75%乙醇2min,自來(lái)水沖洗,ddH2O洗2×2min;4.抗原修復(fù):根據(jù)抗體說(shuō)明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達(dá)到98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來(lái)水沖洗,ddH2O洗2×2min,TBS洗滌(2×2min)(具體修法見附1)*注:有些抗原勿需修復(fù),直接進(jìn)入第5步封閉。5.封閉:滴加試劑B,37℃濕盒孵育30min;6.加一抗:滴加用試劑C(即用型一抗),37℃濕盒孵育2hr或4℃;7.洗滌:TBS-T洗滌(3×5min);8.封閉:滴加試劑B,37℃濕盒孵育10min;9.加二抗:滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑D),37℃濕盒中孵育30min;10.洗滌:TBS-T洗滌(3×5min);11.封閉:滴加試劑Tween20,37℃濕盒孵育封閉20min;12.加HRP-SA:滴加用抗體稀釋液稀釋的試劑E(1:50~200,終濃度5~20nM),37℃濕盒中孵育30min;13.洗滌:TBS-T洗滌(3×5min),TBS洗滌(2×5min);14.顯色:應(yīng)用DAB溶液(試劑F)顯色;15.復(fù)染:自來(lái)水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;16.封片:待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;17.觀察成像:顯微鏡下觀察成像。注意事項(xiàng):1.修復(fù)后緩沖液須自然冷卻,自來(lái)水沖洗后方能把切片取出,驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到,用過(guò)的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。3.若試劑為微量濃縮液,用前應(yīng)低速離心,將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌,以便洗去組織上殘留的Tween20,否則會(huì)影響結(jié)果觀察。5.如須復(fù)染細(xì)胞核,則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。附1:抗原修法常用抗原修復(fù)液:檸檬酸緩沖液(0.01MpH6.0)、EDTA抗原修復(fù)液(pH8.0或9.0)等等。一、酶消化修復(fù)法切片脫蠟水化處理,TBS沖洗,在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶,37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰,將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上,放入已沸騰的緩沖液中,中檔或繼續(xù)微波10~15min,取出微波盒冷卻至室溫后,自來(lái)水沖洗,取出切片。因不同微波爐微波處理時(shí)間存在差異,須自行調(diào)整。三、直接高壓抗原修復(fù)法取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰,將組織切片置于耐高溫切片架上,修復(fù)液沸騰后放入切片架,蓋上鍋蓋,待噴氣后計(jì)時(shí)1.5~2.5min即可脫離熱源,自然冷卻至室溫后自來(lái)水沖洗,取出切片。此方法適用于較難檢測(cè)或核抗原的修復(fù)。四、隔水式高壓抗原修復(fù)法不銹鋼高壓鍋中加自來(lái)水加熱至沸騰,微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰,將切片放入微波盒中,再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋,待噴氣后計(jì)時(shí)4~8min即可關(guān)閉熱源,自然冷卻至室溫后自來(lái)水沖洗,取出切片。此方法適用于較難檢測(cè)或核抗原的修復(fù)。[詳細(xì)]
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2018-10-31 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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免疫組化試劑盒說(shuō)明書
- 免疫組化試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物(HRPStreptavidinConjugate,HRP-SA)為基礎(chǔ),可用于檢測(cè)血液,細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性Dazl抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的Dazl一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后,用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合,Z后加入HRP-SA,形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物,顯微鏡下觀察成像。用戶自備試劑:1.10mMTBS(pH7.2~7.4)三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL,濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4,Z后定容至1000mLTBS-T:TBS+Tween20(0.05%體積比)2.抗原修復(fù)液(依檢測(cè)抗原不同而選擇不同的修復(fù)液)10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檸檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL,濃鹽酸調(diào)pH值至6.0,Z后定容至1000mL或:0.5MEDTA修復(fù)液(pH8.0)EDTA2H2O186.1g加蒸餾水700mL,用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0,Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實(shí)驗(yàn)步驟(建議方案):石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片:將待做切片置于切片架上,于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr;2.脫蠟:切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10min;3.水化:切片經(jīng)下行酒精水化,無(wú)水乙醇5min,95%乙醇2次(每次2min),85%乙醇2min;75%乙醇2min,自來(lái)水沖洗,ddH2O洗2×2min;4.抗原修復(fù):根據(jù)抗體說(shuō)明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達(dá)到98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來(lái)水沖洗,ddH2O洗2×2min,TBS洗滌(2×2min)(具體修法見附1)*注:有些抗原勿需修復(fù),直接進(jìn)入第5步封閉。5.封閉:滴加試劑B,37℃濕盒孵育30min;6.加一抗:滴加用試劑C(即用型一抗),37℃濕盒孵育2hr或4℃過(guò)一夜;7.洗滌:TBS-T洗滌(3×5min);8.封閉:滴加試劑B,37℃濕盒孵育10min;9.加二抗:滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑D),37℃濕盒中孵育30min;10.洗滌:TBS-T洗滌(3×5min);11.封閉:滴加試劑Tween20,37℃濕盒孵育封閉20min;12.加HRP-SA:滴加用試劑C稀釋的試劑E(1:50~200,終濃度5~20nM),37℃濕盒中孵育30min;13.洗滌:TBS-T洗滌(3×5min),TBS洗滌(2×5min);14.顯色:應(yīng)用DAB溶液(試劑F)顯色;15.復(fù)染:自來(lái)水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;16.封片:待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;17.觀察成像:顯微鏡下觀察成像。注意事項(xiàng):1.修復(fù)后緩沖液須自然冷卻,自來(lái)水沖洗后方能把切片取出,驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到,用過(guò)的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。3.若試劑為微量濃縮液,用前應(yīng)低速離心,將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌,以便洗去組織上殘留的Tween20,否則會(huì)影響結(jié)果觀察。5.如須復(fù)染細(xì)胞核,則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。附1:抗原修法常用抗原修復(fù)液:檸檬酸緩沖液(0.01MpH6.0)、EDTA抗原修復(fù)液(pH8.0或9.0)等等。一、酶消化修復(fù)法切片脫蠟水化處理,TBS沖洗,在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶,37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰,將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上,放入已沸騰的緩沖液中,中檔或繼續(xù)微波10~15min,取出微波盒冷卻至室溫后,自來(lái)水沖洗,取出切片。因不同微波爐微波處理時(shí)間存在差異,須自行調(diào)整。三、直接高壓抗原修復(fù)法取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰,將組織切片置于耐高溫切片架上,修復(fù)液沸騰后放入切片架,蓋上鍋蓋,待噴氣后計(jì)時(shí)1.5~2.5min即可脫離熱源,自然冷卻至室溫后自來(lái)水沖洗,取出切片。此方法適用于較難檢測(cè)或核抗原的修復(fù)。四、隔水式高壓抗原修復(fù)法不銹鋼高壓鍋中加自來(lái)水加熱至沸騰,微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰,將切片放入微波盒中,再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋,待噴氣后計(jì)時(shí)4~8min即可關(guān)閉熱源,自然冷卻至室溫后自來(lái)水沖洗,取出切片。此方法適用于較難檢測(cè)或核抗原的修復(fù)。[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
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兔血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒
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小鼠 Thy1 免疫組化試劑盒
- 小鼠ELISA試劑盒該試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物(HRPStreptavidinConjugate,HRP-SA)為基礎(chǔ),可用于檢測(cè)細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性Thy1抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的Thy1一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后,用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合,Z后加入HRP-SA,形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物,顯微鏡下觀察成像。試劑盒所含試劑:試劑A通透液:0.1%Triton-X10010mL(選用)試劑B封閉緩沖液(封閉用)20mL試劑C(原裝進(jìn)口分裝)已稀釋的即用型Thy1一抗(2.5ml)試劑D(原裝進(jìn)口分裝)生物素化羊抗兔IgG1支(濃度1.5mg/mL,稀釋比為1:300~1:500)50μL+抗體稀釋液20ml試劑EHRP-SA復(fù)合物1支(濃度1μM,稀釋比1:50~1:200)100μL試劑FDAB顯色液5ml用戶自備試劑:1.10mMTBS(pH7.2~7.4)三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL,濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4,Z后定容至1000mLTBS-T:TBS+Tween20(0.05%體積比)2.抗原修復(fù)液(依檢測(cè)抗原不同而選擇不同的修復(fù)液)10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檸檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL,濃鹽酸調(diào)pH值至6.0,Z后定容至1000mL或:0.5MEDTA修復(fù)液(pH8.0)EDTA2H2O186.1g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水700mL,用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0,Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實(shí)驗(yàn)步驟(建議方案):石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片:將待做切片置于切片架上,于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr;2.脫蠟:切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10min;3.水化:切片經(jīng)下行酒精水化,無(wú)水乙醇5min,95%乙醇2次(每次2min),85%乙醇2min;75%乙醇2min,自來(lái)水沖洗,ddH2O洗2×2min;4.抗原修復(fù):根據(jù)抗體說(shuō)明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達(dá)到98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來(lái)水沖洗,ddH2O洗2×2min,TBS洗滌(2×2min)(具體修法見附1)*注:有些抗原勿需修復(fù),直接進(jìn)入第5步封閉。5.封閉:滴加試劑B,37℃濕盒孵育30min;6.加一抗:滴加用試劑C(即用型一抗),37℃濕盒孵育2hr或4℃7.洗滌:TBS-T洗滌(3×5min);8.封閉:滴加試劑B,37℃濕盒孵育10min;9.加二抗:滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑D),37℃濕盒中孵育30min;10.洗滌:TBS-T洗滌(3×5min);11.封閉:滴加試劑Tween20,37℃濕盒孵育封閉20min;12.加HRP-SA:滴加用試劑C稀釋的試劑E(1:50~200,終濃度5~20nM),37℃濕盒中孵育30min;13.洗滌:TBS-T洗滌(3×5min),TBS洗滌(2×5min);14.顯色:應(yīng)用DAB溶液(試劑F)顯色;15.復(fù)染:自來(lái)水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;16.封片:待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;17.觀察成像:顯微鏡下觀察成像。小鼠ELISA試劑盒注意事項(xiàng):1.修復(fù)后緩沖液須自然冷卻,自來(lái)水沖洗后方能把切片取出,驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到,用過(guò)的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。3.若試劑為微量濃縮液,用前應(yīng)低速離心,將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌,以便洗去組織上殘留的Tween20,否則會(huì)影響結(jié)果觀察。5.如須復(fù)染細(xì)胞核,則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。附11:抗原修法常用抗原修復(fù)液:檸檬酸緩沖液(0.01MpH6.0)、EDTA抗原修復(fù)液(pH8.0或9.0)等等。一、酶消化修復(fù)法切片脫蠟水化處理,TBS沖洗,在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶,37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰,將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上,放入已沸騰的緩沖液中,中檔或繼續(xù)微波10~15min,取出微波盒冷卻至室溫后,自來(lái)水沖洗,取出切片。因不同微波爐微波處理時(shí)間存在差異,須自行調(diào)整。三、直接高壓抗原修復(fù)法取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰,將組織切片置于耐高溫切片架上,修復(fù)液沸騰后放入切片架,蓋上鍋蓋,待噴氣后計(jì)時(shí)1.5~2.5min即可脫離熱源,自然冷卻至室溫后自來(lái)水沖洗,取出切片。此方法適用于較難檢測(cè)或核抗原的修復(fù)。四、隔水式高壓抗原修復(fù)法不銹鋼高壓鍋中加自來(lái)水加熱至沸騰,微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰,將切片放入微波盒中,再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋,待噴氣后計(jì)時(shí)4~8min即可關(guān)閉熱源,自然冷卻至室溫后自來(lái)水沖洗,取出切片。此方法適用于較難檢測(cè)或核抗原的修復(fù)。[詳細(xì)]
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2018-09-27 10:00
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